Niniejszy protokół opisuje model eksperymentalny oparty na barwieniu tuszem, który może być wykorzystany do dekontaminacji powierzchni implantów in vitro i badań chropowatości, aby przyczynić się do podejmowania decyzji klinicznych.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Niniejszy protokół opisuje model eksperymentalny oparty na barwieniu tuszem, który może być wykorzystany do dekontaminacji powierzchni implantów in vitro i badań chropowatości, aby przyczynić się do podejmowania decyzji klinicznych.
Zaproponowano różne metody mechaniczne odkażania powierzchni implantów dentystycznych z różnym powodzeniem. W tym badaniu in vitro oceniono skuteczność odkażania systemu abrazji powietrznej (AA) z proszkiem erytrytolu, końcówką ultradźwiękową z polieteroeteroketonu (PEEK) i łyżeczkami tytanowymi (TIT) oraz ich wpływ na topografię powierzchni implantu za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM). W sumie 60 implantów zostało wybarwionych trwałym czerwonym tuszem i umieszczonych w wydrukowanych w 3D wadach okołoimplantologicznych klasy 1A i klasy 1B, tworząc sześć grup (n = 10 na grupę) w oparciu o rodzaj wady i protokół leczenia. Dodatkowo zastosowano jeden implant kontroli dodatniej i jeden ujemny. Erytrytol w proszku, końcówki ultradźwiękowe PEEK i kirety tytanowe stosowano przez 2 minuty w przypadku wad klasy 1A i 3 minuty w przypadku wad klasy 1B. Pozostałe obszary czerwonego tuszu określono ilościowo za pomocą oprogramowania cyfrowego, a zmiany powierzchni implantu przeanalizowano za pomocą SEM i EDS. Żadna z metod nie doprowadziła do całkowitej dekontaminacji. Jednak erytrytol w proszku był znacznie najskuteczniejszy, pozostawiając resztkowy wskaźnik atramentu 24% ± 6% (p < 0,001). Końcówki ultradźwiękowe PEEK pozostawiły 41% ± 4% resztkowego tuszu, podczas gdy łyżeczki tytanowe pozostawiły 55% ± 3%. Zaobserwowano istotne różnice pomiędzy wszystkimi metodami. Nie stwierdzono istotnej różnicy w skuteczności dekontaminacji między wadami klasy 1A i klasy 1B. Analiza SEM wykazała minimalne uszkodzenia powierzchni przy użyciu proszku erytrytolu i końcówek PEEK, podczas gdy kirety tytanowe spowodowały umiarkowane lub poważne uszkodzenia. Biorąc pod uwagę zarówno skuteczność odkażania, jak i ochronę powierzchni, erytrytol w proszku i końcówki PEEK są bezpiecznymi i skutecznymi opcjami leczenia peri-implantitis, podczas gdy kirety tytanowe są mniej skuteczne i powodują znaczne uszkodzenia powierzchni. Wyniki te mogą pomóc klinicystom w planowaniu leczenia peri-implantitis.
Leczenie implantologiczne jest najczęstszym i najbardziej preferowanym protokołem uzupełniania braków zębowych na całym świecie. Długoterminowe badania kontrolne wykazały, że stosowanie uzupełnień opartych na implantach w leczeniu całkowitego lub częściowego bezzębia zapewnia przewidywalne wyniki i wysokie wskaźniki sukcesu pod względem przeżycia. Jednak po chirurgicznym wszczepieniu i odbudowie implantów mogą wystąpić różne powikłania dotyczące tkanek twardych i miękkich1. W 2017 roku Światowe Warsztaty Klasyfikacji Chorób i Chorób i Chorób Okołoimplantacyjnych wprowadziły definicje i diagnostykę różnicową chorób wpływających na tkanki okołoimplantacyjne2. Zgodnie z tą definicją, peri-implantitis jest nieodwracalnym stanem patologicznym charakteryzującym się klinicznymi objawami zapalenia, w tym krwawieniem podczas sondowania i/lub ropieniem, zwiększoną głębokością sondowania i/lub recesją brzegu błony śluzowej w błonie śluzowej wokół implantu oraz radiologiczną utratą kości podporowej2. Etiologia chorób okołoimplantacyjnych jest wieloczynnikowa, a niektóre osoby są bardziej podatne na ten stan niż inne. Specyficzne predyspozycje poszczególnych osób mogą zwiększać ryzyko rozwoju choroby okołoimplantowej, co może prowadzić do utraty implantu. Inne czynniki, które odgrywają rolę w etiologii chorób okołoimplantologicznych to czynniki związane z pacjentem (palenie tytoniu, choroby ogólnoustrojowe, historia chorób przyzębia, higiena jamy ustnej); stan zrogowaciałej błony śluzowej, ilość i jakość kości oraz tkanek miękkich w miejscu implantacji; siły działające na implant i otaczające tkanki; powikłania napotkane podczas wszczepiania implantu; oraz doświadczenie i umiejętności lekarza wykonującego zabiegi chirurgiczne i protetyczne2. Ponadto niedawno wprowadzono nową koncepcję oceny ryzyka i leczenia – narzędzie do oceny ryzyka choroby implantów (Implant Disease Risk Tool – IDRA)3. Narzędzie to zostało opracowane jako diagram funkcjonalny składający się z ośmiu parametrów, z których każdy ma udokumentowany związek z peri-implantitis. Wektorami ośmiokąta są: historia zapalenia przyzębia, odsetek miejsc na implantach i zębach z krwawieniem po sondowaniu (BoP), liczba zębów/implantów z głębokością kieszonek sondujących ≥ 5 mm, tempo zaniku kości przyzębia (zdjęcia rentgenowskie w stosunku do wieku pacjenta), podatność na paradontozę, częstość wspomagającej terapii periodontologicznej (SPT) oraz konstrukcja protezy.
Ostatnie przeglądy systematyczne wykazały, że częstość występowania peri-implantitis wynosi 19,53% na poziomie pacjenta i 12,53% na poziomie implantu3. Biorąc pod uwagę około 5 milionów implantów umieszczanych każdego roku na całym świecie, przy wielkości rynku przekraczającej 4 miliardy USD, peri-implantitis stanowi poważny problem zdrowotny dla populacji. Nieleczone peri-implantitis powoduje utratę uszkodzonego implantu i protezy opartej na implantach, powodując duży stres zarówno dla dentysty, jak i pacjenta.
Leczenie chorób okołoimplantologicznych można podzielić na niechirurgiczne i chirurgiczne. Chociaż istnieją uzasadnione oczekiwania co do powodzenia punktów końcowych w leczeniu zapalenia przyzębiatypu 4, porównywalne dowody dotyczące leczenia peri-implantitis są nadal nieliczne. Dlatego uzasadnieniem dla podejścia etapowego i niechirurgicznej terapii peri-implantitis jest próba kontroli biofilmu i stanu zapalnego za pomocą stosunkowo prostych metod przed zwiększeniem inwazyjności leczenia i wykonanie kroku chirurgicznego, gdy osiągnięta zostanie lepsza kontrola biofilmu i czynników ryzyka. Obejmuje to instrukcje i motywację OH, kontrolę czynników ryzyka, kontrolę czynników zatrzymujących biofilm oraz czyszczenie/zdejmowanie/modyfikację protezy, w tym ocenę elementów protezy, oprzyrządowanie nadbrzeżne i submarginalne oraz jednoczesne leczenie periodontologiczne w razie potrzeby. Dlatego terapia niechirurgiczna powinna być zawsze pierwszym krokiem5. W przypadku wczesnego zapalenia okołoimplantologicznego może wystarczyć zmniejszenie czynników ryzyka i leczenie niechirurgiczne, ale całkowite usunięcie biofilmu w głębokich kieszeniach po utracie kości jest często trudne. W fazie ponownej oceny po leczeniu niechirurgicznym utrzymująca się głębokość kieszonek (≥ 6 mm) i krwawienie podczas sondowania (BoP) wskazują na potencjalną progresję zapalenia okołoimplantowego. Jeśli te objawy są obecne, zaleca się interwencje chirurgiczne6. Leczenie chirurgiczne peri-implantitis obejmuje (i) oczyszczenie płata otwartego, (ii) chirurgię płata resekcyjnego, (iii) leczenie ubytków kostnych wokół implantu przy użyciu metod rekonstrukcyjnych, (iv) dodatkowe metody dekontaminacji powierzchni implantu oraz (v) wspomagające stosowanie antybiotyków miejscowych/ogólnoustrojowych7.
Głównym czynnikiem etiologicznym peri-implantitis jest patogenny biofilm skolonizowany na powierzchni implantu6. Usunięcie tego biofilmu jest główną zasadą i celem wszystkich protokołów leczenia, które obejmują metody odkażania mechanicznego, chemicznego i laserowego7.
Oczyszczanie mechaniczne wykorzystuje kirety plastikowe, węglowe i tytanowe, urządzenia ultradźwiękowe z plastikowymi i metalowymi końcówkami, szczotki tytanowe oraz systemy ścierne powietrzem (AA) z różnymi proszkami. Chociaż całkowita eliminacja biofilmu jest trudna do osiągnięcia, terapie te zapewniają korzyści kliniczne. Różne interwencje kliniczne, w tym protokoły mechanicznego oczyszczania z lub bez środków antyseptycznych8, antybiotyków9, a także chirurgii resekcyjnej i regeneracyjnej10, były stosowane z różnym stopniem sukcesu klinicznego. Wywołują one jednak również zmiany we właściwościach chemicznych i fizycznych powierzchni implantu, co może komplikować tworzenie nowej kości i ponowną osteointegrację.
Spośród metod mechanicznych najlepszą skuteczność czyszczenia wykazały zabiegi AA wykorzystujące różne kompozycje proszkowe 11,12,13. Jednak obecność szczątkowych cząstek może zmienić topografię powierzchni i zmniejszyć biokompatybilność14. Glicyna, a następnie wodorowęglan sodu, jest najczęściej używanym proszkiem w systemach AA8. Ostatnio mniejsze cząstki ścierne powietrzem, takie jak erytrytol (14 μm), zyskały zainteresowanie w celu skutecznego odkażania przy zmniejszonych uszkodzeniach powierzchni9. Kirety tytanowe i plastikowe, które powodują mniejsze uszkodzenia powierzchni niż końcówki stalowe, są skuteczne w odkażaniu biofilmu15. Końcówki skalera ultradźwiękowego wykonane z polieteroeteroketonu (PEEK) również zmniejszają obciążenie bakteryjne przy minimalnym uszkodzeniu powierzchni10. Metody dekontaminacji muszą uwzględniać wysoką chropowatość powierzchni implantów i mieć na celu usunięcie biofilmu bakteryjnego bez powodowania znacznych uszkodzeń powierzchni. Chociaż przeprowadzono szeroko zakrojone badania in vitro, in vivo i kliniczne, do tej pory nadal nie ma konsensusu i złotego standardu w leczeniu peri-implantitis. Rosnące rozpowszechnienie chorób okołoimplantologicznych spowodowanych licznymi implantami dentystycznymi wymaga opartego na dowodach, przewidywalnego podejścia do leczenia zanieczyszczonych powierzchni. Badanie to ma na celu ocenę skuteczności różnych metod dekontaminacji - systemów ścierniwa powietrznego (AA), końcówek ultradźwiękowych PEEK i kiret tytanowych - na powierzchni implantu oraz ocenę ich wpływu na chropowatość powierzchni implantu za pomocą analizy SEM.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół badania został zatwierdzony przez komisję etyczną (TBAEK-363) Uniwersytetu Akdeniz w Antalyi w Turcji. Badanie było wspierane przez Fundusz Badawczy Uniwersytetu Akdeniz (numer projektu: TDH-2024-6676). W badaniu wykorzystano implant stomatologiczny w kształcie śruby (PrimeTaper EV Implant) o wymiarach 4,2 mm x 11 mm, z mikrogwintem o długości 1,7 mm na szyjce. Przygotowanie powierzchni polegało na piaskowaniu i trawieniu rozcieńczonym kwasem fluorowodorowym w celu uzyskania wyraźnie zdefiniowanej powierzchni OsseoSpeed.
1. Przygotowanie eksperymentalnych modeli peri-implantitis
UWAGA: Przeanalizowano trzy metody mechanicznego opracowania w celu dekontaminacji (ścierniwo powietrzne (AA), ultradźwięki z końcówką z polieteroeteroketonu (PEEK) oraz kurety tytanowe; Tabela Materiałów) w dwóch różnych typach ubytków przyimplantowych11 (klasa 1A i klasa 1B). W ten sposób utworzono sześć grup eksperymentalnych (Rycina 1). Wykorzystano łącznie 62 implanty, w tym jeden implant kontrolny dodatni i jeden kontrolny ujemny. Ten projekt badania in vitro, opracowany pierwotnie przez Sharhmanna i wsp.16, był modyfikowany przez różnych badaczy w literaturze12,13,14,15,16,17,18 (Rycina 2). Zakładając 10% różnicy w skuteczności usuwania biofilmu między grupami, wielkość próby określono jako 60 (10 dla każdej grupy) dla sześciu grup za pomocą programu G*power, przy wielkości efektu 0,50, błędzie typu I wynoszącym 5% i mocy 80%.

Rycina 1: Schemat blokowy grup eksperymentalnych.Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.
2. Barwienie implantów
3. Umieszczenie barwionych implantów
4. Dekontaminacja implantów
5. Obrazowanie fotograficzne
6. Analiza obrazu
7. Analiza SEM

Rysunek 2: Schemat badania. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.
8. Analiza statystyczna
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Opisany tutaj protokół eksperymentalny służący do analizy dekontaminacji powierzchni implantów wykazał znaczące różnice między poszczególnymi procedurami zabiegowymi. Ponadto protokół SEM po zabiegu wykazał również istotne zmiany na powierzchniach implantów o różnym stopniu nasilenia w grupach badawczych.
Porównania na poziomie implantu (całkowite średnie dla implantów) po dekontaminacji
Porównania na poziomie implantu przeprowadzono poprzez zestawienie średnich ogólnych d...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Metodologia analizy powierzchni in vitro implantów dentystycznych dotkniętych chorobą okołoimplantacyjną zawsze stanowiła wyzwanie ze względu na zapalny i bakteryjny charakter mechanizmów patogennych występujących na szorstkich powierzchniach implantu. Kilka obaw obejmuje wybór materiału próbki, naśladowanie biofilmu na powierzchni, wybór typu defektu peri-implantitis, przedstawienie warunków klinicznych podczas procedur in vitro, różnice w procedurach dekontaminacji oraz metody określania stopnia dekontaminacji...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.
Implanty użyte w badaniu były wspierane przez Dentsply Sirona.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Drukarka 3D | DentaFab, Stambuł, Turcja | Wytwarzanie eksperymentalnych defektów periimplantitis | |
| Żywica do druku 3D | Alias, Stambuł, Turcja | Produkcja eksperymentalnych modeli periimplantitis | |
| Skaner 3D | DOF Inc. EDGE, Seul, Korea Południowa | Służy do skanowania modelu fantomowego zęba | |
| System ścierniwa powietrznego | AIRFLOW Plus PowderE.M.S., Electro Medical Systems S.A., Nyon, Szwajcaria | Służy do odkażania powierzchni implantu | |
| Oprogramowanie CAD/CAM | Exocad 3.2 Elefsina | Wytwarzanie eksperymentalnych defektów periimplantitis | |
| Kamera | Canon EOS 70D, Japonia | W celu uzyskania dokumentacji fotograficznej implantów | |
| Implant zębowy | DS PrimeTaper, Dentsply Sirona, Hanau, Niemcy | ||
| Jednostka utwardzania światłem | Solidilite V, Japonia | Służy do utwardzania modeli eksperymentalnych w laboratorium | |
| Tusz permanentny | Edding, Niemcy | Służy do barwienia powierzchni implantu w celu naśladowania biofilmu | |
| Fizjodozownik | Dentsply Sirona, Hanau, Niemcy | Umieszczanie implantów w modelach eksperymentalnych | |
| Urządzenie SEM | FEI QUANTA FEG 250 FEI Technologies Inc. (Oregon, Stany Zjednoczone | Służy do analizy zmian topobralicznych na powierzchni implantu | |
| Zestaw implantów chirurgicznych | Dentsply Sirona, Hanau, Niemcy | Umieszczanie implantów w modelach eksperymentalnych | |
| Tytanowa currette | Langer ½ Titanium Currette, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA | Służy do odkażania powierzchni implantu | |
| Ultradźwiękowa końcówka PEEK | PI-MAX Implant Scaler, E.M.S., Electro Medical Systems S.A., Nyon, Szwajcaria | Służy do odkażania powierzchni implantu |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.