Prosta metoda podwójnej probówki wirującej do uzyskiwania osocza bogatopłytkowego z krwi koni

Podsumowanie

Osocze bogatopłytkowe (PRP) jest stosowane w leczeniu schorzeń układu mięśniowo-szkieletowego koni. Różne techniki dają PRP o różnych stężeniach płytek krwi i leukocytów. W artykule opisano metodę pozyskiwania PRP z krwi koni.

Streszczenie

Osocze bogatopłytkowe (PRP) jest szeroko stosowane jako rutynowe leczenie przewlekłych schorzeń układu mięśniowo-szkieletowego u koni, takich jak choroba zwyrodnieniowa stawów, tendinopatie i desmopatie. Skuteczność ta wynika z wysokiego stężenia czynników wzrostu i cytokin przeciwzapalnych, które są uwalniane po aktywacji tego środka ortobiologicznego, niezależnie od tego, czy jest aktywowany endogennie, czy egzogennie. Pomimo jego rosnącej popularności, zauważalny jest brak filmów instruktażowych, które demonstrują techniki uzyskiwania PRP u koni.

W niniejszym badaniu przeanalizowano metodę podwójnej probówki wirowej do otrzymywania PRP u koni. Krew pełną od sześciu koni pobrano do probówek z cytrynianem sodu i odwirowano dwukrotnie w ilości 120 × g przez 5 minut i 240 × g przez 5 minut. Średnie stężenie płytek krwi dla PRP wynosiło 360,95 ± 56,31 płytek krwi (PLT) × 10³/μL, podczas gdy średnie stężenie leukocytów wynosiło 3,05 ± 1,53 komórek × 10³/μL. Liczba płytek krwi w PRP była 2,41 razy wyższa niż we krwi pełnej, podczas gdy stężenie leukocytów w PRP było 0,44 razy niższe. Skuteczność pobierania PLT w PRP wyniosła 17%, podczas gdy skuteczność pobierania leukocytów w PRP wyniosła 3,1%. Średnie stężenia transformującego czynnika wzrostu beta 1 i płytkowego czynnika wzrostu BB w PRP wynosiły odpowiednio 2601,82 (95% przedział ufności (CI): 2358,88-2844,76) pg/ml i 1208,05 (95% CI: 1051,09-1365,02) pg/ml. Wyniki te wskazują, że PRP można skutecznie i powtarzalnie uzyskać za pomocą prostej, opłacalnej metody odpowiedniej do stosowania przez lekarzy zajmujących się końmi.

Wprowadzenie

Osocze bogatopłytkowe (PRP) jest produktem ortobiologicznym powszechnie stosowanym w leczeniu przewlekłych schorzeń układu mięśniowo-szkieletowego koni, takich jak tendinopacie, desmopatie, choroba zwyrodnieniowa stawów i ochwat ^1,2,3. Jest również skuteczny w leczeniu ran kończyn i chorób powierzchni oka ^4,5. Uzasadnienie jego stosowania opiera się na wysokich stężeniach czynników wzrostu (GF) uwalnianych głównie przez płytki krwi⁶. Leukocyty przyczyniają się również do uwalniania cytokin regu....

Protokół

Badanie to przeprowadzono zgodnie z wewnętrznymi protokołami dotyczącymi przygotowania i stosowania PRP u koni w Klinice Weterynaryjnej Universidad de Caldas w Manizales w Kolumbii. Badanie nie wymagało zatwierdzenia przez Wewnętrzną Komisję ds. Opieki nad Zwierzętami, ponieważ dane uzyskano od koni kulawych leczonych klinicznie w naszej instytucji. Do opracowania niniejszego protokołu wykorzystano dane od sześciu kolumbijskich koni kryolskich, trzech klaczy i trzech wałachów, w średnim wieku 7,4 (± 2,6) lat. Właściciele koni zostali poinformowani o charakterze badania i podpisali formularz świadomej zgody. Wszystkie konie włączone do badania były zdrowe klinicznie, z....

Wyniki

Średnia liczba płytek krwi (płytki krwi × 10³/µL) była znacznie wyższa w PRP niż w krwi pełnej (p < 0,001). Z kolei średnie stężenie leukocytów (leukocyty × 10³/µL) w PRP było znacznie niższe niż w krwi pełnej (p < 0,001) (Tabela 1). Konkretnie, liczba płytek krwi w PRP była 2,41x wyższa niż w krwi pełnej, podczas gdy stężenie leukocytów w PRP było 0,44x niższe. Wydajność pozyskiwania PLT w PRP wyniosła 17%, natomiast wydajność pozyskiwania leukocytów w PRP wyniosła 3,1%.

Dyskusja

Wzrasta zastosowanie PRP w medycynie ludzkiej i weterynaryjnej w leczeniu przewlekłych schorzeń układu mięśniowo-szkieletowego 1,8,26,27. Jednak głównym zarzutem wobec zastosowań PRP w warunkach eksperymentalnych i klinicznych jest brak podstawowych danych na temat technik i protokołów stosowanych do przygotowania tych hemoskładników²⁸. Ponadto nie ma wystarczających inf.......

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
10 ml probówek do pobierania zwykłej krwi żylnej	BD Vacutainer, Franklin Lakes, NJ, Stany Zjednoczone	Nr kat. 366430	To tylko przykład, można zastosować tuby innych marek.
4,5 ml probówki z cytrynianem sodu (105 M/3,2%)	BD Vacutainer, Franklin Lakes, NJ, Stany Zjednoczone	107451	To tylko przykład, można zastosować tuby innych marek.
Wirówka stołowa	Rotofix 32A, Hettich GmbH, Tuttlingen, Niemcy		Można stosować inne wirówki stołowe.
Igła motylkowa (21 G i razy 0,75 cala) z 12 calami. Rurka i wstępnie dołączony uchwyt	Zestaw do pobierania krwi Safety-Lok, BD Vacutainer, Franklin Lakes, NJ, USA	Nr kat. 367296	To tylko przykład, można użyć igieł motylkowych innych marek.
Roztwór piany chlorheksydynowej w stężeniu 2,3-4%			Marka lub nazwy handlowe tych produktów mogą się różnić w zależności od kraju.
Okap z przepływem laminarnym klasy II	Thermo Fischer Scientific, Waltham, MA, Stany Zjednoczone		Można stosować inne okapy z przepływem laminarnym klasy II
Czytnik ELISA	Thermo Fischer Scientific, Waltham, MA, Stany Zjednoczone
Alkohol etylowy o stężeniu 95%			Marka lub nazwy handlowe tych produktów mogą się różnić w zależności od kraju.
Ludzki PDGF-BB DuoSet ELISA	R& D Systems, Inc., McKinley Place, MN, Stany Zjednoczone	DY220 powiedział:
Ludzki TGF-beta 1 DouSet ELISA	R& D Systems, Inc., McKinley Place, MN, Stany Zjednoczone	DY240 powiedział:
Roztwór piany jodonowej powidonu o stężeniu 4-10%			Marka lub nazwy handlowe tych produktów mogą się różnić w zależności od kraju.
Oprogramowanie SPSS 25.0	IBM Corp, SPSS, NOWY JORK, STANY ZJEDNOCZONE
Sterylne strzykawki typu luer o różnych pojemnościach	Strzykawka Discardit, BD Vacutainer, Franklin Lakes, NJ, Stany Zjednoczone		To tylko przykład, można używać strzykawek innych marek.
Sterylna igła rdzeniowa (18 G & razy 90 mm)	Igła do spinelu BD Quincke, Franklin Lakes, NJ, Stany Zjednoczone		To tylko przykład, można użyć igieł rdzeniowych innych marek.