Zmodyfikowany mysi model tętniaka wewnątrzczaszkowego oparty na zmianach hemodynamicznych i nadciśnieniu tętniczym

Podsumowanie

Tętniak wewnątrzczaszkowy (IA) został skonstruowany u myszy przy użyciu czynników ryzyka nadciśnienia i zmian hemodynamicznych. Zmiany hemodynamiczne były indukowane przez podwiązanie gałęzi tętnicy szyjnej, natomiast nadciśnienie tętnicze uzyskiwano przez podwiązanie tylnych gałęzi tętnicy nerkowej. Powstawanie IA wykryto za pomocą angiografii rezonansu magnetycznego, stereomikroskopii i analizy patologicznej.

Streszczenie

Tętniak wewnątrzczaszkowy (IA) stanowi poważne zagrożenie dla zdrowia ze względu na zachorowalność i śmiertelność związaną z pęknięciem tętniaka. Jednak mechanizmy molekularne leżące u podstaw rozwoju IA pozostają niejasne i wymagany jest odpowiedni model myszy. Mysi model IA ustalono poprzez podwiązanie tętnicy skrzydłowo-podniebiennej (PPA) w celu wywołania addytywnych zmian hemodynamicznych w połączeniu z indukcją nadciśnienia. U samców myszy C57BL/6 naczynia, w tym prawa PPA, tętnica szyjna zewnętrzna (ECA), tętnica potyliczna (OcA) i lewa przeciwległa tętnica szyjna wspólna (CCA), podwiązano w celu wywołania zmian hemodynamicznych. Tydzień później obustronne tylne gałęzie tętnicy nerkowej (pRA) zostały podwiązane i wprowadzono dietę 8% solną w celu wywołania nadciśnienia. Angiografię rezonansu magnetycznego (MRA), stereomikroskopię i barwienie immunohistochemiczne (IHC) przeprowadzono w celu oceny zmian morfologicznych i patologicznych w IA trzy miesiące po indukcji. W grupie eksperymentalnej cztery myszy zmarły po początkowej indukcji. IA w różnych lokalizacjach wykryto u pięciu z jedenastu pozostałych myszy. Zarówno badania mikroskopowe, jak i MRA potwierdziły powstanie IA. Analizy patologiczne i IHC wykazały przerwanie wewnętrznej blaszki elastycznej, odłączenie włókien kolagenowych i infiltrację makrofagów M1 CD86-dodatnich, co jest zgodne z wynikami obserwowanymi w ludzkim IA. Ten mysi model IA replikuje zmiany patologiczne obserwowane w próbkach ludzkich i może służyć jako cenne narzędzie do badania molekularnych mechanizmów powstawania i progresji IA.

Wprowadzenie

Częstość występowania tętniaka wewnątrzczaszkowego (IA) szacuje się na 3,2% populacji ogólnej¹. IA stanowi poważne zagrożenie dla zdrowia ze względu na wysoką zachorowalność i śmiertelność. IA jest złożonym i wielowymiarowym stanem patologicznym, na który wpływają zmiany hemodynamiczne, stan zapalny i przebudowa naczyń krwionośnych^2,3. Zmiany hemodynamiczne i nadciśnienie tętnicze są związane z powstawaniem i progresją tętniaków^4,5. IA często występuje w rozwidleniach mózgowia z podwyższonym hemodynamicznym naprężeniem ścinający....

Protokół

Wszystkie procedury operacyjne u myszy były zgodne z kryteriami Komitetu ds. Oceny Etyki i zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt Uniwersytetu Jiaotong w Szanghaju. Samce myszy C57BL/6 (8 tygodni, 20-25 g) trzymano w temperaturze 22 °C z cyklem 12 godzin/12 godzin światła/ciemności. Proces operacyjny jest pokazany w Rysunek 1A. Krótko mówiąc, u znieczulonych zwierząt lewa tętnica szyjna wspólna (CCA), prawa tętnica szyjna zewnętrzna (ECA), tętnica potyliczna (OcA) i tętnica skrzydłowo-podniebienna (PPA) zostały podwiązane w celu wywołania zmian hemodynamicznych. Nadciśnienie zostało następnie ....

Wyniki

Szybkość powstawania IA
W grupie eksperymentalnej (n = 15) 2 myszy padły w ciągu pierwszego tygodnia po początkowym zabiegu z nieznanych przyczyn. Jedna mysz padła w trzeciej dobie po drugim zabiegu z powodu infekcji rany na grzbiecie, a kolejna mysz padła w 38. dobie z nieznanych przyczyn; nie stwierdzono u niej tętniaków. W grupie kontrolnej (n = 5) wszystkie 5 myszy przeżyło do momentu uboju. Wśród myszy, które przeżyły w grupie eksperymentalnej (n = 11), skurczowe ciśnienie krwi trzy miesiące po .......

Dyskusja

W pracy przedstawiono zmodyfikowane podejście do konstruowania mysiego modelu IA poprzez ligację PPA w celu wywołania addytywnych zmian hemodynamicznych w połączeniu z nadciśnieniem tętniczym. Obrazowanie MRA i analiza mikroskopowa wykazały istotne zmiany tętniakowe w okręgu Willisa. Patologiczne zmiany zaobserwowane w tym modelu są zgodne z tymi znalezionymi w próbkach ludzkich. Ten mysi model może służyć jako cenne narzędzie do badania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw powstawania i rozwoju IA.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Angiografia rezonansu magnetycznego 7,0 T	Bruker	BioSpec 70/20
Myszy C57BL/6	Charles River Laboratories		płeć: samiec
przeciwciało CD86	CST	91882
Elastic Van Gieson (EVG) stain	Solarbio	G1597
Masson	Solarbio	G1340
Micro kleszcz	Shanghai Jinzhong Instrument Company
Microfil	Flow Tech Inc.	MV-120
Aparat do znieczulania małych zwierząt	Mikroskop stereoskopowy RWD	R500
	Shanghai Optical Instrument Company	XYH-6B
Szew	Shanghai Jinhuan Medical Company		6-0, 8-0