Tutaj prezentujemy protokół, który może przekształcić autologiczną tkankę tłuszczową w różne substancje składowe tkanki tłuszczowej o różnych właściwościach i funkcjach fizykochemicznych.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Tutaj prezentujemy protokół, który może przekształcić autologiczną tkankę tłuszczową w różne substancje składowe tkanki tłuszczowej o różnych właściwościach i funkcjach fizykochemicznych.
Tradycyjne autologiczne przeszczepianie tkanki tłuszczowej jest powszechnie stosowane do zwiększania objętości i regeneracji tkanek. Jednak jednolite właściwości fizyczne i biologiczne przeszczepów tłuszczu często prowadzą do nieoptymalnej wydajności w różnych scenariuszach pacjentów i wieloaspektowych wymaganiach. Rozwijając podstawy autologicznego przeszczepu tłuszczu, wprowadzamy pionierskie podejście określane jako autologiczny przeszczep składnika tłuszczowego. Ta innowacyjna koncepcja łączy w sobie skrupulatnie opracowany protokół mający na celu przekształcenie autologicznej tkanki tłuszczowej w różnorodny zestaw składników tłuszczowych, z których każdy charakteryzuje się unikalnymi właściwościami fizykochemicznymi dostosowanymi do konkretnych zastosowań w różnych kontekstach klinicznych. Za pomocą szeregu metod fizycznych tkanka tłuszczowa może zostać przekształcona w Kompleks Matrycy Tłuszczowej (AMC) zapewniający wystarczające sztywne podparcie, Tłuszcz o wysokiej gęstości (HDF) do dalszego wypełniania, żel Stromal Vascular Fraction (SVF) do małych i/lub precyzyjnych iniekcji oraz Adipose Collagen Fragment (ACF) do drobnych zmarszczek i/lub potrzeb odmładzania twarzy. Te odrębne składniki tkanki tłuszczowej posiadają nieodłączne cechy, które nadają się do precyzyjnych i ukierunkowanych strategii przeszczepów, zaspokajając zniuansowane wymagania indywidualnych potrzeb pacjentów. Nowatorski protokół frakcjonowania tkanki tłuszczowej wykazuje ogromny potencjał w rewolucjonizowaniu przeszczepu tkanki tłuszczowej. Oferuje nową perspektywę i metodologię dla bardziej wyrafinowanego i dostosowanego do potrzeb przeszczepu.
Autologiczny przeszczep tkanki tłuszczowej jest szeroko stosowaną techniką zwiększania objętości i regeneracji tkanek, napędzaną postępem w przygotowaniu miejsca dawczego, ekstrakcji tłuszczu, przetwarzaniu i implantacji1,2,3,4. Jednak jednolite właściwości fizyczne i biologiczne tradycyjnych przeszczepów tłuszczowych często ograniczają ich skuteczność w zaspokajaniu różnych potrzeb klinicznych5. Aby przezwyciężyć te ograniczenia, nasz zespół badawczy opracował innowacyjny protokół frakcjonowania tkanki tłuszczowej, przekształcający autologiczny tłuszcz w wyspecjalizowane składniki o odrębnych właściwościach i funkcjach fizykochemicznych.
Głównym celem protokołu jest frakcjonowanie autologicznej tkanki tłuszczowej na wyspecjalizowane składniki - Kompleks Matrycy Tłuszczowej (AMC), Żel Frakcji Naczyniowej Zrębu (SVF) i Fragment Kolagenu Tłuszczowego (ACF), z których każdy został zaprojektowany z myślą o konkretnych wyzwaniach klinicznych. Dostarczając komponenty o unikalnych właściwościach, takich jak zwiększona sztywność, wysoka gęstość komórek i formuły bogate w kolagen, protokół umożliwia precyzyjne i ukierunkowane strategie przeszczepiania6,7,8,9,10,11.
Tradycyjne przeszczepy tłuszczu, choć skuteczne w zwiększaniu objętości, często nie spełniają złożonych wymagań scenariuszy klinicznych. Jego nieprzewidywalne wchłanianie tłuszczu prowadzi do niestabilnej odbudowy objętości. Co więcej, ze względu na jednolite właściwości fizyczne i biologiczne tradycyjnych przeszczepów tłuszczu, nie są one w stanie zapewnić ukierunkowanego wypełnienia obszarów o szczególnych wymaganiach dotyczących przeszczepu, takich jak wsparcie strukturalne, wykonywanie precyzyjnych iniekcji na małych obszarach i osiąganie ukierunkowanej stymulacji kolagenu. Problemy te często wymagają wielu operacji, co zwiększa ból i obciążenie finansowe pacjentów1,2,5. Ten protokół frakcjonowania rozwiązuje te ograniczenia poprzez specyficzne wzbogacenie tkanki tłuszczowej w zawartość o szczególnej wartości z tradycyjnej tkanki tłuszczowej. Dzięki temu procesowi tworzymy składniki tkanki tłuszczowej o dostosowanych właściwościach, oferując w ten sposób klinicystom wszechstronny zestaw narzędzi do spersonalizowanego leczenia. W porównaniu z syntetycznymi wypełniaczami lub tradycyjnym przeszczepem tłuszczu, podejście to wykorzystuje tkankę autologiczną, eliminując ryzyko odrzucenia immunologicznego i zapewniając biokompatybilność3. Dodatkowo w procesie frakcjonowania powstają składniki o unikalnych właściwościach, takie jak AMC, który zapewnia wsparcie strukturalne i charakteryzuje się niskim współczynnikiem wchłaniania; SVF-żel, który zapewnia precyzyjne iniekcje i charakteryzuje się dużą gęstością komórek frakcji zrębu naczyniowego; oraz ACF, białkowe rusztowanie kolagenowe zdolne do kontrolowanego uwalniania czynników tłuszczowych, które wykazuje potencjał do zastosowań klinicznych w odmładzaniu skóry7,9,11. Takie podejście zmniejsza również potrzebę powtarzania procedur, poprawiając retencję przeszczepów i zadowolenie pacjenta10,12.
Koncepcja frakcjonowania tkanek biologicznych w celu optymalizacji wyników terapeutycznych jest dobrze ugruntowana, co widać w rozdzielaniu krwi na osocze, czerwone krwinki i płytki krwi dla docelowych zastosowań medycznych. W ostatnich latach stopniowo rozwijają się również badania i kliniczne zastosowania składników tkanki tłuszczowej13,14,15,16,17,18. Ten protokół frakcjonowania tkanki tłuszczowej opiera się na tej zasadzie, izolując składniki o różnych właściwościach do dostosowanego zastosowania klinicznego. Klinicyści mogą określić przydatność tej metody, biorąc pod uwagę potrzeby anatomiczne pacjenta, pożądane wyniki (np. zwiększenie objętości, wsparcie strukturalne lub odmłodzenie skóry) oraz dostępny sprzęt. Protokół ten jest szczególnie skuteczny w przypadkach wymagających precyzyjnej kontroli właściwości przeszczepu, takich jak odmładzanie twarzy, rewizja blizn lub złożone procedury rekonstrukcyjne7,10,12.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
To badanie zostało zatwierdzone przez Komisję Oceny Etyki w Szpitalu Nanfang w Kantonie, Chiny. Tkankę tłuszczową pobrano od zdrowych dawców, którzy wyrazili pisemną świadomą zgodę na udział w badaniu. Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt w Szpitalu Nanfang i przeprowadzone zgodnie z wytycznymi Narodowej Rady Zdrowia i Badań Medycznych (Chiny).
1. Przygotowanie tłuszczu
2. Ekstrakcja komponentów
3. Testowanie składników tłuszczu
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Poprzez zastosowanie różnych procedur mechanicznych przeprowadzonych podczas procesu chirurgicznego, z sukcesem przekształciliśmy tkankę tłuszczową w odrębne komponenty tłuszczowe o różnych charakterystykach. Są to kolejno: AMC, który zapewnia solidne wsparcie (Rycina 1A), HDF do dalszego wypełniania (Rycina 1B), żel SVF-gel do precyzyjnych iniekcji w małych obszarach (Rycina 1C) oraz ACF do usuwania drobnych zmarszczek lub w celu r...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Ten protokół frakcjonowania tkanki tłuszczowej obejmuje kilka krytycznych etapów, które zapewniają pomyślną izolację wyspecjalizowanych składników. Po pierwsze, odwirowanie pobranej tkanki tłuszczowej rozdziela ją na tłuszcz o wysokiej gęstości (HDF) i tłuszcz o niskiej gęstości (LDF), z których każdy ma odrębny skład macierzy komórkowej i zewnątrzkomórkowej (ECM)23,24. HDF, bogaty w żywotne adipocyty i komórki zrębu frakcji naczyniowej (SVF), jest dalej przetwar...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy oświadczają, że nie ma dla nich konfliktu interesów.
Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Nauk o Przyrodzie w Chinach (granty 81801932, 81901976, 81971852, 81772101 i 81901975).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 0,001% Epinefryna | Sigma-Aldrich | E4375 | |
| 0,06% Lidokaina | Sigma-Aldrich | L5647 | |
| 3-milimetrowa wieloportowa kaniula | Tulip Produkty medyczne, San Diego, CA, USA | / | |
| 50-ml probówki wirówkowe | Corning | 430829 | |
| Urządzenie do testowania obciążenia BOSE ElectroForce | Bose Corporation | / | |
| Collagenase | Worthington Biochemical | LS004176 | |
| Złącze Luer-Lok żeńskie-żeńskie | Biosciences | 309628 | |
| Urządzenie filtrujące z tuleją i sitami | wykonane na zamówienie (Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd.) | / | |
| Gauze | Medline Industries | MDS093944 | |
| Hematoksylina/Zestaw do barwienia eozyny | Sigma-Aldrich | HT110116 | |
| Zestaw do barwienia trichromu Massona | Sigma-Aldrich | HT15 | |
| Nagie myszy | Southern Mdical University | / | |
| Sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS) | Thermo Fisher Scientific | ||
| Okrągły sitko filtracyjne ze stali nierdzewnej (0,15 mm) | Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd. | / | |
| Okrągły sitko filtracyjne ze stali nierdzewnej (0,25 mm) | Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd. | / | |
| Sterylizowany worek filtracyjny ze 100 siatkami | Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd. | / | |
| Frakcja naczyniowa zrębu (SVF)-Ekstraktor żelowy | Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd. | / | |
| Trypsin | Thermo Fisher Scientific | 25200056 | |
| Zestaw do analizy Western Blot | Bio-Rad | 1705061 |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.