Artykuł metodologiczny

In vivo (in vivo ) Mikroskopia konfokalna: standardowa procedura operacyjna do wykrywania roztoczy nużeńca na brzegu powieki

DOI:

10.3791/68534

⸱

3 lipca 2025

 ,  , 
1National Clinical Research Center for Ocular Diseases, Eye Hospital, Wenzhou Medical University, 2Eye Hospital of Wenzhou Medical University at Hangzhou

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mikroskopia konfokalna in vivo jest obiecującą techniką obrazowania o wysokiej rozdzielczości. Przedstawiamy następującą procedurę dla klinicystów w celu wykrycia nużeńca na brzegu powieki in vivo.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Inwazja roztoczy Demodex może powodować zapalenie brzegu powieki, a zapalenie powiek Demodex może w przypadkach klinicznych powodować szereg chorób oczu. Wielu lekarzy diagnozuje porażenie oczu roztoczami nużeńca poprzez depilację rzęs i obserwację rzęs pod mikroskopem świetlnym in vitro. Jednak obecność resztek roztoczy po usunięciu rzęs i ból związany z zabiegiem są ograniczeniami standardowej opieki klinicznej.

Mikroskopia konfokalna in vivo (IVCM) to nieinwazyjna technika obrazowania, która pozwala klinicystom na szczegółową obserwację roztoczy Demodex na brzegu powieki bez depilacji. Technika ta umożliwia bezbolesną analizę, którą można wykonać w <30 min. Pomimo coraz większej uwagi poświęcanej temu badaniu, może być ono niedostępne dla wielu okulistów bez dużego doświadczenia. W artykule przedstawiono standardową procedurę operacyjną wizualizacji roztoczy Demodex na brzegu powieki za pomocą IVCM w celu promowania szerszego zastosowania tej metody w pracy klinicznej.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zapalenie powiek jest jedną z najczęściej spotykanych diagnoz okulistycznych w praktyce klinicznej. Dowody sugerują istotny związek między obecnością roztoczy Demodex a zapaleniem powiek1. Zarażenie roztoczy wiąże się zarówno z bezpośrednimi uszkodzeniami spowodowanymi przez Demodex2, jak i z reakcjami immunologicznymi wywołanymi przez jego wydzieliny, które mogą działać jako wektor dla bakterii i potencjalnie przyczyniać się do rozwoju zapalenia powiek3. Demodex blepharitis(DB) powoduje szereg niezadowalających zdarzeń, w tym uszkodzenie rogówki i powierzchni oka1, które negatywnie wpływają na jakość życia pacjenta 4,5.

Demodex to pasożytniczy roztocz, który zamieszkuje mieszki włosowe i gruczoły łojowe, a także obszary w ich pobliżu6. Wykrycie nużeńca w mieszkach rzęs lub wokół nich może pomóc w diagnozie DB7. Rozpoznanie kliniczne DB obejmuje depilację rzęs i obserwację Demodex pod mikroskopem świetlnym. Uznaje się jednak, że wiele roztoczy znajdujących się głęboko w mieszku włosowym może pozostać w otworze po usunięciu rzęs 8,9,10, co może prowadzić do niedoszacowania liczby roztoczy. Mikroskopia konfokalna in vivo (IVCM), nieinwazyjne narzędzie do obrazowania w okulistyce, oferuje alternatywne podejście do wizualizacji nużeńca w mieszkach rzęs lub wokół mieszków rzęs in vivo11. Technika ta zapewnia wgląd w mikrostruktury powierzchni oka i powiek z rozdzielczością podobną do histologicznej11. Roztocza można zidentyfikować wizualnie na podstawie ich charakterystycznej morfologii i ruchliwości. Jednak IVCM może stanowić wyzwanie techniczne dla okulistów, którzy nie mają dużego doświadczenia z tą metodą obrazowania12.

Aby ułatwić zastosowanie IVCM w rutynowych zastosowaniach klinicznych, w tym w diagnostyce różnicowej i obserwacji zdrowych powiek, a także DB, proponujemy standardową procedurę operacyjną (SOP) do obserwacji roztoczy Demodex na brzegu powieki. Protokół ten zapewnia klinicystom systematyczne podejście do wykrywania roztoczy in vivo.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Protokół ten koncentruje się na SOP używanym do obserwacji nużeńca na brzegu powieki za pomocą IVCM (ryc. 1). Badanie to zostało zatwierdzone przez Instytucjonalną Komisję Rewizyjną (IRB) Szpitala Okulistycznego Uniwersytetu Medycznego w Wenzhou (zatwierdzenie IRB nr H2023-022-K-20), a wymóg indywidualnej zgody na tę retrospektywną analizę został zniesiony ze względu na retrospektywny charakter. Opisane tutaj procedury odwołują się do opisów, które zostały zgłoszone wcześniej 11,13,14,15,16.

figure-protocol-1
Rysunek 1: Tomograf. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

1. Przygotuj urządzenie i program

  1. Włącz komputer.
    1. Po wyświetleniu pulpitu przełącz przełącznik kołyskowy z tyłu urządzenia z O na I. Poszukaj zielonej poświaty przełącznika kołyskowego wskazującej, że urządzenie jest włączone przed rozpoczęciem jakichkolwiek badań.
      UWAGA: Włączenie urządzenia przed uruchomieniem komputera może spowodować awarię łączności.
    2. Uruchom oprogramowanie i ustaw ustawienia programu przed badaniem. W menu Setup (Ustawienia ) wybierz opcję Options (Supplemental File 1: Supplemental Figure S1) (Plik uzupełniający 1): następnie zaznacz pole Pokaż numery obrazów , aby wyświetlić numer obrazu dla każdego obrazu. Ponadto zaznacz pole Pokaż informacje przy wyjściu , aby zapobiec niezamierzonemu zamknięciu oprogramowania.
      UWAGA: Wyświetlanie miniatur obrazów w postaci dużych ikon ułatwia bezpośrednią obserwację wyników. Nie zmieniaj często ustawień.
  2. Przygotowania przed badaniem
    1. Wyczyść obiektyw chusteczkami do czyszczenia soczewek. Zdezynfekuj zagłówek i podbródek wacikami nasączonymi alkoholem, aby uniknąć infekcji wynikających z zarazków chorobotwórczych przenoszonych przez brudne części urządzenia.
    2. Wyreguluj podbródek. Upewnij się, że pozioma pozycja podbródka jest prawidłowa: ściśnij razem dwie czarne dźwignie, aby pociągnąć podbródek do przodu, aż się zahaczy.
    3. Przesuń aparat do tyłu. Przekręć regulacyjną, aby upewnić się, że odsuwa się od pacjenta przed badaniem.
    4. Nałóż kroplę (około 0,02 ml) żelu okulistycznego na bazie karbomeru jako żel kontaktowy na przednią powierzchnię soczewki mikroskopu urządzenia.
      UWAGA: Upewnij się, że żel kontaktowy jest wolny od pęcherzyków powietrza i że używana jest tylko niewielka ilość. Zbyt duża ilość żelu kontaktowego nałożonego na przednią powierzchnię soczewki mikroskopu urządzenia może przedostać się do obiektywu i przylgnąć do elementów mechanicznych, prowadząc do uszkodzenia urządzenia.
    5. Zdejmij sterylną, jednorazową nasadkę z polimetakrylanu metylu (PMMA) z osłony ochronnej i mocno dociśnij boki nasadki do soczewki mikroskopu urządzenia, nie dotykając przedniej powierzchni nasadki (Rysunek 2).
      UWAGA: Aby prawidłowo założyć nasadkę z PMMA, upewnij się, że żel kontaktowy styka się z tylną powierzchnią nasadki bez pęcherzyków powietrza. Nakrętki są przechowywane w dedykowanym pojemniku, aby zapobiec uszkodzeniu sterylnego opakowania. Nie należy używać nakrętek z uszkodzonym opakowaniem, które mogą nieść ze sobą ryzyko infekcji podczas badania.
    6. Nałóż pojedynczą kroplę substytutu łez żelu na przednią powierzchnię nasadki jako żelowy pomost między nasadką a powieką (ryc. 2).
      UWAGA: Aby uniknąć pomyłek między żelami, do obu zastosowań używamy tego samego żelu okulistycznego na bazie karbomeru: substytutu żelu łez i żelu używanego jako środek między soczewką mikroskopu a nasadką.
    7. Utwórz nową kartotekę pacjenta lub wybierz istniejącą kartotekę pacjenta.

figure-protocol-2
Rysunek 2: Prawidłowe dopasowanie nasadki z PMMA i aplikacji żelu. Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tego rysunku.

2. Przygotuj pacjenta

UWAGA: Nie wykonuj tego badania, jeśli integralność rogówki jest wątpliwa.

  1. Aby uzyskać współpracę z pacjentem i zminimalizować potencjalne ryzyko, wyjaśnij mu następujące kwestie:
    1. Zapewnij pacjenta, że badanie aparatem jest bezpieczne, nawet jeśli dotyka ono powieki. Poinformuj pacjenta, że jego oko zostanie znieczulone kroplą środka znieczulającego miejscowo na brzegu powieki.
    2. Przystępując do badania, należy poprosić pacjenta, aby oparł podbródek na podbródku i oparł czoło o czoło przez cały czas trwania badania, aby uzyskać najlepszą jakość obrazu.
    3. Poinformuj pacjenta, że urządzenie zostanie przesunięte w pobliże powieki, aż dotknie go nasadka z PMMA. Zapewnij ich, że nie będą odczuwać żadnego bólu, gdy urządzenie dotknie ich powieki, chociaż poczują kontakt z nasadką PMMA. Poproś ich, aby natychmiast poinformowali lekarza, jeśli odczuwają ból podczas badania.
    4. Poinformuj pacjenta, że musi on utrzymać wzrok nieruchomo, podczas gdy klinicysta uzyskuje obrazy brzegu powieki w celu obserwacji Demodexu. Poproś pacjenta, aby poinformował lekarza, jeśli odczuwa jakiekolwiek zmęczenie; Będą mogli usiąść i odpocząć przez chwilę, zanim badanie będzie kontynuowane. Zostaną oni poinformowani o tym fakcie po zakończeniu badania.
  2. Postępuj zgodnie z instrukcjami na opakowaniu środka znieczulającego miejscowo i/lub żelu pod oczy, aby uniknąć przeciwwskazań do stosowania leków. Zapytaj pacjenta, czy ma jakieś alergie, aby potwierdzić, że alergie pacjenta nie są przeciwwskazaniami do stosowania miejscowego środka znieczulającego i/lub żelu do oczu.
    UWAGA: W wyniku niezidentyfikowanych alergii mogą wystąpić reakcje alergiczne na środek znieczulający miejscowo i/lub żel do oczu.
  3. Nałóż kroplę chlorowodorku proparakainy, środka znieczulającego miejscowo, na brzeg powieki, która ma być zbadana.
    UWAGA: Jeśli wystąpi reakcja alergiczna, natychmiast spłucz solą fizjologiczną.

3. Wykonaj badanie

  1. Najpierw obserwuj prawe oko. Przesuń kamerę skanującą w lewo z punktu widzenia operatora. OD zostanie wybrany automatycznie w sekcji Ustawienia przez rozpoznawanie kamery od prawej do lewej.
  2. Przesuń kamerę CCD w lewo. Obróć obiektyw kamery CCD, aby wyregulować obraz kamery CCD (obraz kontrolny) prostopadle do osi optycznej kamery laserowej skanera.
  3. Rozpocznij nowe badanie.
    1. Obserwuj okno dialogowe Dane badania i na karcie Dane badania wybierz Heidelberg Retina Tomograph-Cornea z listy rozwijanej Urządzenie (Plik uzupełniający 1: Rysunek uzupełniający S2) i obserwuj wyświetlone okno dialogowe Ustawienia modułu rogówki .
    2. Wybierz FOV 400 z listy rozwijanej Field Lens (Obiektyw polowy ) i kliknij OK , aby potwierdzić (Plik uzupełniający 1: Rysunek uzupełniający S3).
    3. Poczekaj, aż otworzy się okno pobierania ; Wyświetlany jest obraz na żywo z kamery laserowej skanującej i obraz kontrolny. Jeśli obraz kontrolny nie jest wyświetlany, upewnij się, że kamery CCD jest prawidłowo podłączony do kamery CCD, a następnie uruchom ponownie okno akwizycji.
  4. Ustaw współczynniki w oknie akwizycji (Plik uzupełniający 1: Rysunek uzupełniający S4): wybierz 1x z listy rozwijanej CCD Zoom Factor , aby ustawić rozmiar obrazu kontrolnego. Zaznacz pola Automatyczna jasność i Automatyczna klarowność, aby automatycznie kontrolować jasność na żywo i sterować obrazami. Jeśli jednak automatyczna regulacja jasności jest wyłączona, użyj suwaka, aby sterować jasnością elementu sterującego i obrazów na żywo. Sprawdź, czy typ skanowania Sekcja został wybrany tak, aby pojedynczy obraz był pobierany i zapisywany za każdym razem, gdy naciśnięty jest przełącznik nożny.
  5. Uzyskaj obraz referencyjny.
    1. Przed rozpoczęciem akwizycji wyłącz automatyczną regulację jasności i przesuń suwak w lewo, aby dostosować jasność obrazu. Wyreguluj płaszczyznę ogniskową za pomocą kołka regulacyjnego tak, aby początkowe jasne odbicie było wyświetlane na obrazie na żywo z kamery skanującej laserowo po przyciemnieniu, wskazując przednią powierzchnię nasadki PMMA.
      UWAGA: Mikroskop pozwala na regulację ogniskowej w zakresie 10 μm.
    2. Kliknij przycisk Resetuj w sekcji Pozycja ostrości [μm] i poczekaj, aż wartość Pozycja ostrości [μm] zmieni się na 0; Bieżący obraz jest oznaczony jako obraz referencyjny. Wyłącz automatyczne resetowanie i zaznacz pole Automatyczna jasność ; Jasność obrazu na żywo będzie kontrolowana automatycznie.
    3. Jeśli zamiast wartości w sekcji Pozycja ostrości [μm] wyświetlane są linie przerywane lub jeśli wyświetlane wartości nie zmieniają się pomimo regulacji płaszczyzny ogniskowej, upewnij się, że obiektywu mikroskopu jest prawidłowo podłączony.
      UWAGA: Pozycja ostrości [μm] dla pachymetrii wyświetla położenie płaszczyzny ogniskowej aktualnie wyświetlanego obrazu w mikronach. Jeśli płaszczyzna ogniskowej zostanie przesunięta później, rzeczywiste położenie płaszczyzny ogniskowej jest obliczane w odniesieniu do położenia obrazu referencyjnego.
  6. Podnieś lub obniż wysokość stołu do badań dla pacjenta. Umieść podbródek pacjenta na podbródku, a czoło na podnóżku czoła (ryc. 3A,B). Wyreguluj wysokość podbródka za pomocą przeznaczonej do tego czarnej regulacyjnej urządzenia tak, aby górne powieki pacjenta zrównały się z czerwonymi znakami na kolumnie zagłówka.
  7. Powiedz pacjentowi, aby patrzył w dół przed stałe źródło światła wskaźnika i nie spuszczał wzroku (ryc. 3A,B).
    UWAGA: Ruch gałek ocznych podczas zbierania obrazu może skutkować złą jakością obrazu i uszkodzeniem powierzchni oka.
  8. Użyj bawełnianego wacika, aby odchylić górną powiekę, całkowicie odsłaniając korzeń rzęs i brzeg powieki. Ustaw odbicie wiązki laserowej na poziomie górnej powieki pacjenta, przekręcając regulacyjną urządzenia. Powoli przesuwaj skanującą kamerę laserową w kierunku górnego brzegu powieki pacjenta, aż delikatnie dotknie pionowo środka nasadki PMMA (ryc. 3C). Jeśli pacjent zgłasza dyskomfort, zatrzymaj się i sprawdź ustawienie nasadki PMMA.
    UWAGA: Nie należy wywierać zbyt dużego nacisku na powiekę pacjenta. Kontakt nasadki z PMMA z powieką pacjenta spowodowany niewystarczającym mostkiem żelowym, ruchem gałki ocznej i głowy pacjenta i/lub zbyt silnym ruchem kamery operatora może spowodować uszkodzenie powierzchni oka i powieki.
  9. Dokładnie zeskanuj nasadę rzęsy od strony skroniowej w kierunku nosowej strony brzegu powieki, wykonując drobne poziome ruchy brzegu powieki, umożliwiając ocenę rzęs i ich mieszków włosowych. Skanuj i uzyskuj obrazy, obracając soczewkę mikroskopu urządzenia zgodnie z ruchem wskazówek zegara lub przeciwnie do ruchu wskazówek zegara, stopniowo modyfikuj płaszczyznę ostrości, aby obserwować cały mieszek włosowy i korzeń rzęs oraz zanotuj różne głębokości wyświetlane na obrazie na żywo ze skanującej kamery laserowej. Uzyskuj obrazy, skanując od sześciu do dziesięciu mieszków włosowych rzęs na oko, z próbkowaniem rozmieszczonym w skroniowych, środkowych i nosowych obszarach brzegu powieki.
    UWAGA: Jeśli na obrazie na żywo z kamery skanującej laserowej wyświetlany jest niewielki refleks i utrzymuje się on podczas zmiany położenia płaszczyzny ogniskowej, może to wskazywać na obecność pęcherzyków powietrza w żelu kontaktowym. Aby rozwiązać ten problem, odnów żel kontaktowy.
  10. Zapisz obrazy ręcznie i zapisz wszystkie podejrzane obrazy roztoczy Demodex poprzez naciśnięcie pedału nożnego. Włącz sprzężenie zwrotne dźwięku pedału, aby zweryfikować pomyślne pobranie obrazu. Jeśli nie są wyświetlane żadne struktury powiek, a na obrazie na żywo ze skanującej kamery laserowej widoczne są tylko silnie odblaskowe warstwy graniczne, może to oznaczać, że kontakt między nasadką z PMMA a brzegiem powieki pacjenta został przerwany. Aby rozwiązać ten problem, ustaw kamerę ponownie w odpowiednim położeniu, aż nasadka z PMMA prawidłowo dotknie brzegu powieki pacjenta.
  11. Jeśli obraz na żywo wydaje się rozmazany, zniekształcony lub nie pokazuje struktury mieszków włosowych, problemy te mogą wskazywać, że pacjent porusza głową lub mruga. Przypomnij pacjentowi, aby skupił się na świetle fiksującym, aby zminimalizować ruch. Jeśli to możliwe, dostosuj jasność, płaszczyznę ogniskową i pozycję skanowania, aby poprawić jakość obrazu.
  12. Jeśli skanująca kamera laserowa wymaga regulacji lub pacjent odczuwa zmęczenie lub ból, poproś pacjenta, aby usiadł wygodnie, przesunął skanującą kamerę laserową do tyłu i ponownie wyregulował kamerę. Jeśli pacjent nadal odczuwa dyskomfort podczas badania i nie wykazuje oznak złagodzenia objawów po odpoczynku, należy przerwać zabieg i przełożyć go na inny termin, aby zapewnić bezpieczeństwo pacjenta.
  13. Jeśli pacjent jest badany kilka razy w ciągu dnia, zapisz wszystkie obrazy w tej samej zakładce badania w oknie podglądu obrazu.
  14. Przyjrzyj się lewemu oku, przesuń kamerę w prawo z punktu widzenia operatora i poczekaj na automatyczne wybranie systemu operacyjnego . Zdejmij nasadkę PMMA z urządzenia, załóż nową nasadkę PMMA na soczewkę mikroskopu urządzenia i powtórz poprzednie kroki.

figure-protocol-3
Rysunek 3: Ułożenie pacjenta. (A,B) Pacjent jest ustawiony. (C) Nasadka jest regulowana tak, aby dotykała powieki. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

4. Po badaniu

  1. Wyjdź z egzaminu; Upewnij się, że obrazy mieszków rzęsowych są przechowywane, a uzyskane obrazy są wyświetlane w oknie podglądu obrazu. W przeciwnym razie akwizycja obrazu mogła się nie powieść lub dane mogły nie zostać zapisane. Po pierwsze, wyklucz potencjalne awarie sprzętu, takie jak problemy z połączeniem oprogramowania lub awaria pedału. Po rozwiązaniu problemu wyjaśnij sytuację pacjentowi i powtórz badanie.
  2. Poproś pacjenta, aby nie pocierał oczu po badaniu, dopóki efekt znieczulenia miejscowego nie zmniejszy się.
  3. Zdejmij nasadkę PMMA z urządzenia.
  4. Wyczyść soczewkę mikroskopu chusteczkami do czyszczenia soczewek.
  5. Wybierz opcję Sortuj według czasu akwizycji (szybko) w oknie dialogowym Opcje i obserwuj uzyskane obrazy mieszków rzęsowych wyświetlane w kolejności od strony skroniowej do nosa (plik uzupełniający 1: rysunek uzupełniający S5) - kolejność skanowania nasady rzęsy wzdłuż brzegu powieki. Przejrzyj wszystkie obrazy, wybierz obrazy o wysokiej jakości do analizy (Rysunek 4) i usuń obrazy o niskiej jakości. Poproś obserwatora, aby ocenił obrazy pod kątem obecności roztoczy i zapisał łączną liczbę mieszków włosowych rzęs z roztoczami Demodex dla każdego oka.
    UWAGA: Wysokiej jakości obrazy pokazują wyraźną morfologię roztoczy, a obrazowana część roztocza powinna być jak największa, najlepiej większa niż 100 μm. Jeśli obrazy wysokiej jakości nie są dostępne, wymagana jest niezależna ocena przez drugiego obserwatora. Jeżeli wyniki uzyskane przez dwóch obserwatorów są niezgodne, trzeci obserwator musi wydać orzeczenie w celu rozstrzygnięcia rozbieżności i ustalenia ostatecznego wyniku, który należy włączyć do raportu.
  6. Twórz raporty, umieszczając obraz wysokiej jakości od strony skroniowej do strony nosowej w lightboxie raportu. Z szablonów raportów i formatów zliczania roztoczy (patrz plik uzupełniający 2) wybierz odpowiedni szablon raportu do opisania wyników na podstawie wyników badania.

figure-protocol-4
Ryc. 4: Denomeks wewnątrz mieszka rzęsowego. (Obrazy: 400 μm x 400 μm). orazW mieszku włosowym obserwuje się trzy roztocza Demodex (żółta strzałka), a pojedynczą rzęsę zaznacza się (biała strzałka). (B) W mieszku włosowym obserwuje się pięć roztoczy Demodex (żółta strzałka), a pojedynczą rzęsę zaznacza się (biała strzałka). Ponieważ roztocza mogą migrować na różnych głębokościach, obrazowanie w jednej płaszczyźnie ogniskowej może uchwycić fragmentaryczne części pojedynczych roztoczy, powodując w ten sposób niepełną reprezentację morfologiczną. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

5. Codziennie wyłączaj urządzenie po pracy

  1. Po zamknięciu wszystkich okien dialogowych i okien zamknij oprogramowanie.
  2. Wyłącz komputer.
  3. Wyłącz urządzenie, przełączając przełącznik kołyskowy z tyłu urządzenia z I na O. Aby uzyskać optymalną wydajność systemu i bezpieczeństwo danych, najpierw zamknij oprogramowanie, a następnie wyłącz urządzenie.
    UWAGA: Urządzenie nie powinno być włączone w sposób ciągły zbyt długo, zwłaszcza dłużej niż cały dzień.
  4. Regularnie konserwuj zasilacz awaryjny (UPS) podłączony do sprzętu i zapewnij jego prawidłowe działanie, aby zapobiec utracie danych lub awarii urządzenia spowodowanej nagłymi przerwami w dostawie prądu.
  5. Wykonuj regularne kopie zapasowe, takie jak korzystanie z pamięci masowej dołączonej do sieci (NAS).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Postępując zgodnie z opisaną powyżej procedurą SOP, przebadaliśmy pacjentów z podejrzeniem zarażenia nużeńcem w 2024 roku. Ponadto porównaliśmy dane z 2023 r., kiedy ta SOP nie była stosowana. Jak pokazano na rycinie 5, liczba pacjentów, którzy przeszli IVCM w celu wykrycia nużeńca w 2024 r., jest znacznie wyższa niż w roku poprzednim. Procedura ta pozwala na badanie pacjentów w różnym wieku, od 4 lat do 92 lat.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ektopasożyt Demodex jest jednym z najczęstszych pasożytów u ludzi. Roztocza te żyją w mieszkach włosowych, gruczołach Meiboma (MG) i gruczołach łojowych i są przezroczyste, wydłużone i mierzą 0,15-0,4 mm długości17. IVCM wykonywany za pomocą urządzenia zapewnia obrazy w czasie rzeczywistym o wymiarach 400 μm x 400 μm z rozdzielczością poprzeczną 1 μm/piksel i powiększeniem 800x. Dzięki IVCM można uzyskać szczegółowe obrazy nużeńca w mieszkach rzęsowych; Można również monitorować ...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Badania te były wspierane przez grant z Krajowego Administracyjnego Departamentu Nauki i Technologii Tradycyjnej Medycyny Chińskiej - Zhejiang Prowincjonalna Administracja Tradycyjnej Medycyny Chińskiej Współtworzenie Planu Nauki i Technologii (GZY-ZJ-KJ-23086). Mikroskopię konfokalną in vivo wykonano przy użyciu tomografu siatkówki Heidelberg Retina Tomograph III z dodatkiem modułu rogówki Rostock. Autorzy pragną wyrazić wdzięczność firmie Heidelberg Engineering GmbH, wszystkim uczestnikom i osobom pracującym nad tą standardową procedurą operacyjną.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Żel okulistyczny na bazie karbomeru, Vidisic  Bausch and Lomb, Berlin, Niemcy8187195
Oprogramowanie Heidelberg Eye Explorer  Heidelberg Engineering GmbH, Heidelberg, NiemcyWersja 1.3.3.0
Tomograf siatkówki III w Heidelbergu  Heidelberg Engineering GmbH, Heidelberg, NiemcyPrzekaźnik HRT3-08398
Chlorowodorek proparakainyAlcon Laboratories, Fort Worth, Teksas, Stany Zjednoczone8387271
Czapka TomoCap  Heidelberg Engineering GmbH, Heidelberg, Niemcy18829Nasadka z PMMA

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Cheng, A. M., Sheha, H., Tseng, S. C. Recent advances on ocular Demodex infestation. Curr Opin Ophthalmol. 26 (4), 295-300 (2015).
  2. Czepita, D., Kuźna-Grygiel, W., Czepita, M., Grobelny, A. Demodex folliculorum and Demodex brevis as a cause of chronic marginal blepharitis. Ann Acad Med Stetin. 53 (1), discussion 67 63-67 (2007).
  3. Clifford, C. W., Fulk, G. W. Association of diabetes, lash loss, and Staphylococcus aureus with infestation of eyelids by Demodex folliculorum (acari: Demodicidae). J Med Entomol. 27 (4), 467-470 (1990).
  4. O'Dell, L., et al. Psychosocial impact of Demodex blepharitis. Clin Ophthalmol. 16, 2979-2987 (2022).
  5. Yeu, E., Holdbrook, M. J., Baba, S. N., Gomes, P. J. Psychosocial impact of Demodex blepharitis. Invest Ophthalmol Vis Sci. 62 (8), 1261-1261 (2021).
  6. Wu, M., Wang, X., Han, J., Shao, T., Wang, Y. Evaluation of the ocular surface characteristics and Demodex infestation in paediatric and adult blepharokeratoconjunctivitis. BMC Ophthalmol. 19 (1), 67(2019).
  7. Zou, D., et al. Characteristics of bacterial community in eyelashes of patients with Demodex blepharitis. Parasit Vectors. 17 (1), 64(2024).
  8. Coston, T. O. Demodex folliculorum blepharitis. Trans Am Ophthalmol Soc. 65, 361-392 (1967).
  9. Mastrota, K. M. Method to identify Demodex in the eyelash follicle without epilation. Optom Vis Sci. 90 (6), e172-e174 (2013).
  10. Gao, Y. Y., et al. High prevalence of demodex in eyelashes with cylindrical dandruff. Invest Ophthalmol Vis Sci. 46 (9), 3089-3094 (2005).
  11. Randon, M., et al. In vivo confocal microscopy as a novel and reliable tool for the diagnosis of Demodex eyelid infestation. Br J Ophthalmol. 99 (3), 336-341 (2015).
  12. Muntz, A., Purslow, C., Wolffsohn, J. S., Craig, J. P. Improved Demodex diagnosis in the clinical setting using a novel in situ technique. Cont Lens Anterior Eye. 43 (4), 345-349 (2020).
  13. Kojima, T., et al. In vivo evaluation of ocular demodicosis using laser scanning confocal microscopy. Invest Ophthalmol Vis Sci. 52 (1), 565-569 (2011).
  14. Tas, A. Y. Interobserver and intraobserver agreements of the detection of Demodex infestation by in vivo confocal microscopy. Beyoglu Eye J. 7 (3), 173-180 (2022).
  15. Wang, Y. -J., Ke, M., Chen, X. -M. Prospective study of the diagnostic accuracy of the in vivo laser scanning confocal microscopy for ocular demodicosis. Am J Ophthalmol. 203, 46-52 (2019).
  16. hrt3 rostock cornea module user manual v. 1.5 english. , Heidelberg Engineering GmbH. http://www.HeidelbergEngineering.com (2025).
  17. Lee, S. H., Chun, Y. S., Kim, J. H., Kim, E. S., Kim, J. C. The relationship between Demodex and ocular discomfort. Invest Ophthalmol Vis Sci. 51 (6), 2906-2911 (2010).
  18. Sattler, E. C., et al. Noninvasive in vivo detection and quantification of Demodex mites by confocal laser scanning microscopy. Br J Dermatol. 167 (5), 1042-1047 (2012).
  19. Duncan, N., Sood, P., Khandelwal, S. Demodex blepharitis: Its role and treatment in ocular surface disease. Curr Ophthalmol Rep. 10 (4), 107-113 (2022).
  20. Luo, X., Li, J., Chen, C., Tseng, S., Liang, L. Ocular demodicosis as a potential cause of ocular surface inflammation. Cornea. 36 Suppl 1 (Suppl 1), S9-S14 (2017).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Wykrywanie Demodexobrazowanie nieinwazyjnepier cie w osa rz syel oftalmicznybrzeg powieki

Powiązane artykuły