Tutaj oceniamy wpływ biocharów pochodzących z odpadów z fusów kawy, zużytego chmielu, drewna świerku i niedopałków papierosów na zdrowie gleby, oceniając aktywność mikroorganizmów, wzrost roślin oraz potencjalną ekotoksyczność bezkręgowców.
Artykuł badawczy
Tutaj oceniamy wpływ biocharów pochodzących z odpadów z fusów kawy, zużytego chmielu, drewna świerku i niedopałków papierosów na zdrowie gleby, oceniając aktywność mikroorganizmów, wzrost roślin oraz potencjalną ekotoksyczność bezkręgowców.
Biochar to produkt uzyskiwany poprzez podgrzewanie biomasy przez pirolizę w wysokich temperaturach i stał się powszechnym uzupełnieniem gleby, opartym na swoim potencjale do poprawy właściwości gleby, takich jak zatrzymanie wody, pH i dostępność składników odżywczych. Jednak biochar przygotowany z niektórych odpadów może wywierać negatywne ekotoksykologiczne skutki dla bioty glebowej. Głównym celem tego badania było ocenenie wpływu wybranych biocharów pochodzących z fusów kawy, zużytego chmielu, drewna świerkowego i niedopałków papierosów na zdrowie gleby, ze szczególnym uwzględnieniem aktywności mikroorganizmów, wzrostu roślin oraz potencjalnej ekotoksyczności. Gleby wzbogacone biocharem były inkubowane łącznie przez 15 dni, a następnie przeprowadzono szereg testów, w tym aktywność dehydrogenazy, ilościową ilościową analizę bakteryjną, test biotoksyczności fitotoksyczności z użyciem nasion Sinapis alba oraz test ekotoksyczności z użyciem Enchytraeus albidus. Dodatki do biowęgla mogą zmieniać pH gleby i wpływać na zatrzymanie wody. Biochar z niedopałków papierosów wykazał najwyższą stymulację kolonii bakteryjnych, z wartościami sięgającą do 1,00 ×10,6 CFU/mL w porównaniu do 8,47 × 10,4 CFU/mL w kontrolnych replikacjach, podczas gdy biochar z fusów kawowych zwiększał aktywność dehydrogenazy (3,53 × 10-3 mU/g), co sugeruje wyższą pojemność metaboliczną mikroorganizmów. Testy fitotoksyczności wykazały, że wzrost roślin wspomagały chmiel (162,96%) oraz biochar świerkowo-drewniany (206,66%), podczas gdy wyższe wskaźniki stosowania biocharu z niedopałków papierosów hamowały wzrost siewek (hamowanie 62,36%). Test ekotoksyczności z użyciem Enchytraeus albidus wykazał, że wszystkie biochary miały szkodliwy wpływ z wyjątkiem biocharu z niedopałków papierosów (33% stymulacji). Wyniki tego badania podkreślają, że wpływ biocharu na zdrowie gleby zależy od źródła, co ma istotne znaczenie dla zarządzania glebą. Badanie wskazuje na potrzebę dostosowania stosowania biowęgla w zależności od stężenia i rodzaju, aby zmaksymalizować jego korzyści przy jednoczesnym minimalizowaniu potencjalnych zagrożeń dla systemów glebowych.
W ostatnich latach biochar stał się wielofunkcyjnym i przyjaznym dla środowiska środkiem poprawczym do gleby, stosowanym w rolnictwie,1 oraz środkiem łagodzenia globalnego ocieplenia2. W miarę jak świat zmaga się z degradacją gleby, spadkiem wydajności upraw i wzrostem emisji dwutlenku węgla, biochar stał się zieloną alternatywą dla konwencjonalnych nawozów3 , a sekwestracja węgla zbliża się do4. W przeciwieństwie do nawozów syntetycznych, biochar z natury zwiększa żyzność gleby5, zmniejsza utratę składników odżywczych6 oraz zwiększa zatrzymanie wody7, co czyni go bardzo użytecznym w regionach z glebami zdegradowanymi lub o niskiej żyzności. Dodatkowo biochar wzmacnia funkcjonowanie mikroorganizmów, zapewniając stabilne siedlisko i źródło węgla dla korzystnych mikroorganizmów glebowych, które są ważne dla rozkładu materii organicznej i obiegu składników odżywczych8.
Poza rolnictwem, biochar pełni także rolę zielonego rozwiązania w zakresie utylizacji odpadów, ponieważ przekształca pozostałości biomasy, takie jak pozostałości rolnicze, leśne i odpady spożywcze, w długoterminowy materiał węglowy9. To nie tylko ogranicza gromadzenie odpadów, ale także kompensuje gazy cieplarniane poprzez wychwytywanie węgla, który w przeciwnym razie uciekałby jako dwutlenek węgla (CO2) lub metan (CH4). W porównaniu z innymi mechanizmami sekwestracji węgla, biochar oferuje długoterminową, zintegrowaną strategię glebową, która łagodzi atmosferycznyCO2 oraz wspiera zdrowe gleby orazwysokie plony.
Pomimo uznanych korzyści — takich jak zwiększenie żyzności gleby, zdolność do zatrzymywania wody oraz właściwości stymulujące mikroorganizmy — istnieją ciągłe obawy dotyczące potencjalnych efektów ekotoksykologicznych dla bioty glebowej11. Chociaż biochar jest zazwyczaj korzystny dla aktywności mikroorganizmów i różnorodności, niektóre surowce lub warunki przetwarzania mogą wytwarzać toksyczne związki szkodliwe dla mikroorganizmów glebowych i ich funkcji ekologicznej12.
Aby ocenić potencjalne ryzyko związane z biocharami, konieczne są oceny etotoksykologiczne. Bakterie (rozkładacze), rośliny (producenci) oraz bezkręgowce (konsumenci) należą do grup taksonomicznych wykorzystywanych w badaniach nad ekotoksycznością gleby i osadów. Te taksony reprezentują zarówno środowiska lądowe, jak i wodne13.
Komplementarna funkcja enchytraeidów z dżdżownicami w funkcjonowaniu ekosystemu glebowego stanowi podstawę rozwoju bioanaliz dla tych organizmów. W biotestach enchytraeidy służą jako lądowe modele biologiczne do badania skutków chemikaliów takich jak pestycydy (np. dimetoan, atrazyna, karbendazym) oraz metali śladowe (np. ołów,, miedź, kadm)14.
Oprócz testów opartych na organizmach, aktywność enzymów mikroorganizmów jest kolejnym sposobem oceny zdrowia gleby. Aktywność dehydrogenazy gleby jest wskaźnikiem aktywności oksydacyjnej mikroorganizmów15. Testy dehydrogenazy w mieszaninach glebowo-biocharowych są skuteczne w ilościowym określaniu aktywności mikroorganizmów i ogólnego zdrowia gleby. Ponieważ enzymy dehydrogenazy biorą udział w oddychaniu mikroorganizmów, ich aktywność odzwierciedla biologiczną aktywność gleby. Jest to przydatne do oceny jakości gleby, żyzności oraz wpływu biocharu na mikroorganizmy. Test mierzy redukcję chlorku trifenyltetrazolu (TTC) do tryfenylformazonu (TPF), który jest określany spektrofotometrycznie. Wyższa produkcja TPF jest wskaźnikiem wyższej aktywności mikroorganizmów.
Spodziewamy się, że biochar produkowany z różnych surowców będzie miał unikalny wpływ na zdrowie gleby. Efekty te zależą od ich cech chemicznych i fizycznych, które mogą zmieniać parametry fizykochemiczne gleby, wpływając tym samym na aktywność mikroorganizmów, wzrost roślin oraz toksyczność organizmów glebowych.
W niniejszym badaniu oceniamy wpływ biocharów pochodzących z odpadów na wiele wskaźników zdrowia gleby, w tym pH, aktywność mikroorganizmów, wzrost roślin oraz przeżywalność bezkręgowców (Rysunek 1). Trzy stężenia (1%, 5%, 10% św/w) czterech różnych biocharów pochodzących z odpadów zostały zmieszane z glebą ogrodową i ocenione pod kątem wymienionych powyżej efektów. Zawartość wilgoci, pH oraz dobór organizmów testowych były starannie kontrolowane, aby zapewnić ekologiczne znaczenie badania.
1. Przygotowanie biocharu
UWAGA: Zobacz Tabelę materiałów , aby poznać szczegóły dotyczące biocharów używanych tutaj jako materiałów testowych. Warunki pirolizy, skład pierwiastkowy oraz dane analizy bezpośredniej zostały dostarczone przez producentów (Tabela 1).
UWAGA: Zawsze wykonuj pirolizę w laboratorium dobrze wentylowanym i wyposażonym w odpowiedni system wyciągów lub oparów. Noś rękawiczki odporne na wysoką temperaturę, fartuch laboratoryjny, okulary ochronne oraz przyłbicę, jeśli jest to konieczne.
Tabela 1: Podstawowe cechy badanych biocharów. Prosimy kliknąć tutaj, aby pobrać tę tabelę.
2. Charakterystyka chemiczna biocharu
3. Przygotowanie mieszanin glebowo-biocharowych
4. Pomiar pH mieszanin glebowo-biocharowych
5. Test toksyczności Enchytraeus albidus

6. Test fitotoksyczności

7. Ilościowa ilościowa kolonia bakteryjna

8. Określenie suchej materii (DM)
UWAGA: Używaj rękawic odpornych na wysoką temperaturę podczas obsługi gorących misek.

9. Test aktywności dehydrogenazy (DHA)


Rysunek 1: Schematyczne przedstawienie eksperymentalnego przepływu pracy. Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Charakterystyka chemiczna
Biochary wykazały istotne różnice w składzie pierwiastkowym (Tabela 2). Wapń (Ca) i potas (K) były najwyższe w biocharach z niedopałków papierosów i zużytych chmielów. Biochar świerkowego drewna miał najwięcej aluminium (Al) i żelaza (Fe). Miedź (Cu) i magnez (Mg) były silnie wzbogacone w biochar z wykorzystanego chmielu. Ołów (Pb), kadm (Cd) i inne metale śladowe występowały w niewielkich ilościach we wszystkich próbkach.
Tabela 2: Skład chemiczny biowęgla. Główne składniki pierwiastkowe różnych biocharów użytych w badaniu. Prosimy kliknąć tutaj, aby pobrać tę tabelę.
Zmiany pH w okresie inkubacji
We wszystkich zabiegach pH mieszanin glebowo-biocharowych miało tendencję do niewielkiego wzrostu z czasem (Rysunek 2). Najwyższą wartość pH odnotowano dla mieszaniny z biocharem z niedopałków papierosów na poziomie 10% objętej węglem i osiągnięciem 9,48 w 15. dniu; To leczenie wykazało największy wzrost w czasie. Biochar z fusów kawowych również powodował stopniowy wzrost, z maksymalnym pH 8,94 przy 10% w/w 15 dnia. Biochar chmielowy podniósł pH o 16,57%, z maksymalną wartością 9,20 przy 10% powierzchni mét/t. Dla porównania, mieszanka biocharu świerka i drewna osiągnęła pH 8,56 przy 10% masy masowej i średniej. Grupa kontrolna wykazała najniższe pH, w zakresie od 6,57 do 7,66 z minimalnymi zmianami w czasie.

Rysunek 2: Zmiany pH w czasie w mieszaninach glebowo-biocharowych. pH gleby zmierzone w dniach 0, 10 i 15 dla każdej poprawki biocharu wynosiło 1%, 5% i 10% objętości węgla i tłuszczu. Prosimy kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego wykresu.
Zatrzymanie wody i utrata wagi
Zdolność zatrzymywania wody we wszystkich typach biocharu była niższa niż w glebie kontrolnej bez biocharu (Rysunek 3). Grupa kontrolna straciła 3,67% masy masy w ciągu 15 dni, co wskazuje na najwyższe zatrzymanie wody. Wśród biocharów oczyszczanie niedopałków papierosów miało najmniejszą utratę wody, zmniejszając się o 5,89% w trakcie inkubacji, a tym samym największe zatrzymanie wśród biocharów. Podobny, lecz bardziej umiarkowany wzorzec zaobserwowano w biocharze chmielowym (9,22% całkowita utrata masy, przy większych stratach przy wyższych stężeniach). Biochar z fusów kawowych wykazał największą utratę masy ciała (do 16,56%), co wskazuje na najniższe zatrzymanie wody. Mieszanka świerku i drewna straciła średnio 10,22%.

Rysunek 3: Utrata masy mieszanin glebowo-biocharowych podczas inkubacji. Zmiana wagi jako wskaźnik zatrzymania wody przez 15 dni dla wszystkich biocharów i stężeń. Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tej figurki.
Test toksyczności i rozrodu E. albidus
Rozmnażanie E. albidus przy stężeniu 5% biocharu w/w wykazało wyraźną zależność od surowca. W kontroli gleby OECD populacja wzrosła z 15 do 24 (wzrost o 60%, Rysunek 4). Biochar świerkowo-drewniany dał jedynie 7 ocalałych osobników (53% hamowanie, Rysunek 5). Chmiel i fusy z kawy dały po 12 ocalałych egzemplarzy (20% hamowanie, Rysunek 5). Biochar z niedopałków papierosów stymulował rozmnażanie o 33%, z łącznie 20 robakami, w tym potomstwami.

Rysunek 4: Zmiana populacji netto E. albidus w glebie poddawanej biocharowi. Początkowa i ostateczna liczba robaków po 5 dniach. Zbadano stężenie mieszane 5% w każdym biocharu. Dane reprezentują średnią ± odchylenia standardowego (n = 3). Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tej figurki.

Rysunek 5: Toksyczne lub stymulujące działanie na E. albidus. Efekt netto na robaki w porównaniu do kontroli kontrolnej. Wartości dodatnie wykazują hamowanie; wartości ujemne wskazują na stymulację. Dane reprezentują średnią ± odchylenie standardowe. Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tej figurki.
Fitotoksyczność
Wydłużenie korzenia u S. alba zmierzono po 10-dniowej inkubacji przy 1%, 5% i 10% masy masowej (Rysunek 6). W glebie niezmienionej średnia długość korzenia wynosiła 237 mm. Biochar z fusów kawowych w stosunku 1% w/w dawał 79,16% stymulacji; wyższe stężenia powodowały hamowanie, do 47,08% przy 5% śnieczki i tłuszczu. Biochar świerkowo-drewniany stymulował wzrost we wszystkich stężeniach, osiągając szczyt 206,66% przy 10% w/w. Biochar z niedopałków papierosów dawał 41,01% stymulacji przy 1% w/w, ale hamował wzrost przy 5% i 10% w/w, osiągając hamowanie 62,36% przy 10% w/w. Biochar chmielowy stymulował wzrost we wszystkich wskaźnikach (38,97%, 31,75% i 162,96% odpowiednio 1%, 5% i 10% tygodniowo).

Rysunek 6: Fitotoksyczność na Sinapis alba. Hamowanie lub stymulacja wzrostu korzeni w porównaniu do kontroli po 10 dniach wzrostu we wszystkich terapiach biowęglem. Wartości dodatnie wykazują hamowanie; wartości ujemne wskazują na stymulację. Dane reprezentują średnią ± odchylenia standardowego (n = 3). Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tej figurki.
Ilościowa ilościowa kolonia bakteryjna
Liczenie kolonii bakteryjnej oceniano po 10 dniach (Rysunek 7). Średnia kontrola wynosiła 8,47 × 104 CFU/mL. Biochar kawowy przyniósł 7,33 × 104 CFU/mL przy poziomie 1% tygodniowo, a następnie wzrósł do 1,18 × 10 5i 1,50 × 105 CFU/mL odpowiednio 5% i 10% tygodniowo. Biochar świerkowo-drewniany dawał 1,97 × 105 CFU/mL przy 1% tew/mL, spadając do 9,73 × 104 i 4,93 × 104 CFU/mL przy 5% i 10% w/mL (5%) i 10% w/w. Biochar z niedopałków papierosów generował 5,40 × 10,4 CFU/mL przy 1% teście/w, a najwyższą stymulację przy 10% w/w (1,00 × 10,6 CFU/mL). Biochar chmielowy wykazywał niewielką stymulację we wszystkich stężeniach, osiągając szczyt na poziomie 1,07 × 105 CFU/mL przy 5% w/w.

Rysunek 7: Wzrost bakterii w glebie impregnowanej biowęglem. Bakteryjne CFU/mL po 10 dniach inkubacji dla wszystkich terapii i stężeni. Do porównania dołączono kontrolę. Dane reprezentują średnią ± odchylenia standardowego (n = 3). Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tej figurki.
Aktywność dehydrogenazy
Biochar z fusów kawowych wywoływał najwyższą aktywność dehydrogenazy we wszystkich stężeniach, osiągając szczyt na poziomie 1% w/w (3,53 × 10-3 mU/g) i pozostając porównywalny na poziomie 5% i 10% w/w (2,38 × 10-3 i 2,62 × 10-3 mU/g) (patrz Rysunek 8). Biochar chmielu zwiększył aktywność o 1% w/w (2,39 × 10-3 mU/g), ale spadł o 5% (6,34 × 10-4 mU/g) i stał się ujemny przy 10% w/w (−8,30 × 10-4 mU/g). Biochar z niedopałków papierosów był dodatni na poziomie 1% średnicy tygodniowej (1,29 × 10-3 mU/g) i spadł do −7,26 × 10-4 oraz −8,53 × 10-4 mU/g przy 5% i 10% mU/g. Biochar świerkowo-drewniany był ujemny we wszystkich stężeniach (−5,53 × 10-4 oraz −5,19 × 10-4 mU/g przy 1% i 5% w/w; −3,11 × 10-4 mU/g przy 10% w/w), pozostając niższy niż u grupy kontrolnej.

Rysunek 8: Aktywność dehydrogenazy w glebie wzbogaconej o biochar. Aktywność enzymów mikrobiologicznych we wszystkich typach i stężeniach biocharu. Wartości są względne do gleby kontrolnej bez dodatku biowęgla. Wartości dodatnie wskazują na wyższą aktywność enzymów w porównaniu do grupy kontrolnej, a wartości ujemne na niższą aktywność enzymów niż u grupy kontrolnej. Dane reprezentują średnią ± odchylenia standardowego (n = 3). Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tej figurki.
Zobacz Tabelę 3 i Tabelę 4 , aby uzyskać podsumowanie wyników.
Tabela 3: Wpływ biowęgla na pH gleby i zatrzymanie wody. Pokazuje początkowe i końcowe wartości pH, ΔpH oraz % utraty wody podczas inkubacji. Prosimy kliknąć tutaj, aby pobrać tę tabelę.
Tabela 4: Podsumowanie biologicznych skutków i wyników DHA. Połączone dane dotyczące rozmnażania robaków, fitotoksyczności, liczby mikroorganizmów oraz aktywności enzymów dla wszystkich terapii.
oznacza stymulację i
hamowanie. W przypadku wyników DHA wartości pozytywne wskazują na wyższą aktywność enzymów w porównaniu do grupy kontrolnej, a wartości ujemne na niższą aktywność enzymów niż u grupy kontrolnej. Prosimy kliknąć tutaj, aby pobrać tę tabelę.
DOSTĘPNOŚĆ DANYCH:
Dane będą przesyłane do publicznego repozytorium: DOI/URL: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.30128803.v1
Mieszanka gleby i zużytego fusu kawowego wykazała wysoką zasadowość, z pH 8,94, co jest zgodne z wcześniej zgłaszanym pH 9,419. Biochar wykazał również największy wzrost utraty masy ciała w porównaniu z próbką kontrolną, co wskazuje na niską zdolność zatrzymywania wilgoci, prawdopodobnie wynikającą z niskiej powierzchni, ograniczającej tendencję adsorpcyjną wody20,21. Te właściwości fizyczne stworzyły niekorzystne warunki dla E. albidus, powodując 20% hamowanie przetrwania i rozmnażania robaków.
W testach fitotokowości S. alba wykazała stymulację na poziomie 79,16% przy stężeniu 1% w/w, podczas gdy przy wyższych stężeniach, np. 5% w/w, biochar hamował wydłużenie korzenia o 47,08%. Jest to zgodne z raportami22 , że fitotoksyczne działanie biocharu z fusów kawowych na Lactuca sativa było spowodowane kwasami karboksylowymi. Ponadto badania wykazały, że rozpuszczalne fenole i kwasy karboksylowe również zakłócają transport auxiny, co skutkuje progiem fitotoksycznym23.
Liczba kolonii bakteryjnych wzrosła wraz ze wzrostem stężenia biocharu kawowego (1,50 × 10-5 CFU/mL przy stężeniu 10% w/w), co wskazuje, że ten biochar stwarzał sprzyjające warunki dla bakterii uprawnych. Biochar kawowy wykazywał również najwyższą aktywność DHA (3,53 × 10-3 mU/g), co sugeruje, że stymulował zarówno populacje mikrobiologiczne nadające się do uprawy, jak i nie. Potwierdzają to również badania24 , które obserwowały korzystny wpływ biowęgla kawowego na aktywność enzymatyczną gleby.
Biochar chmielowy spowodował wzrost zasadowości gleby i umiarkowaną średnią utratę masy ciała (10%). W testach fitotokoksiczności biochar był korzystny dla stymulacji wydłużania korzenia, zwłaszcza przy wyższych stężeniach (162,96% stymulacji). Jeśli chodzi o aktywność mikroorganizmów, biochar chmielowy nie wykazał znaczących zmian w liczbie bakterii (do 1,00 × 10-5 CFU/mL), co może wynikać z równowagi w składzie chemicznym. Chociaż chmiel zawierał najwięcej miedzi (Cu), która może być toksyczna dla mikroorganizmów, ponieważ hamuje układy enzymów bakteryjnych25, zawierał także wyższe poziomy pierwiastków, takich jak potas (K) i fosfor (P), które powinny wspierać wzrost mikroorganizmów poprzez poprawę syntezy chlorofilu w siewkach26. Aktywność DHA również odzwierciedlała ten neutralny efekt, wskazując na stabilną odpowiedź o ograniczonym wpływie biologicznym.
Biochar niedopałków spowodował wzrost zasadowości gleby z czasem (do pH 9,48). Był produkowany w wyższej temperaturze pirolizy (700 °C), co skutkowało bardziej zasadowym biocharem wspierającym wzrost bakterii. Ta obserwacja jest zgodna z wcześniejszymi badaniami27, które wykazały, że biochar poprawia pH gleby, a tym samym poprawę warunków siedliskowych. Spośród wszystkich zabiegów biochar niedopałków papierosów zachowywał najwyższą zawartość wilgoci (do 94%), co może również tłumaczyć efekt stymulujący na przeżywalność i rozmnażanie E. albidus . Wysokie zatrzymanie wilgoci można powiązać ze zmianami mikrostrukturalnymi w temperaturze 700 °C, co powoduje powstanie mikroporów zatrzymujących warstwy wody28. Inną przyczyną efektu stymulującego może być wysoka zawartość wapnia (Ca), fosforu i K w biocharu niedopałków, które są korzystnymi elementami dla przetrwania i rozmnażania robaków.
W badaniach mikrobiologicznych biochar niedopałków papierosów wykazywał najwyższą stymulację bakteryjną przy wyższych stężeniach, sięgając około 1,00 × 10-6 CFU/mL, w przeciwieństwie do aktywności DHA, która nie wykazywała takiego samego poziomu wzrostu. To odkrycie sugeruje selektywną stymulację bakterii hodowalnych, a nie całej społeczności mikroorganizmów.
Mieszanka biocharu gleby i drewna świerkowego spowodowała jedynie niewielki wzrost pH, co również odnotowały badania29, które wykazały pH 7,87 dla biocharu pochodzącego z iglastych. Temperatura produkcji była najniższa (600 °C) spośród wszystkich biocharów użytych w tym badaniu. Zdolność biocharu do zatrzymywania wody była umiarkowana w porównaniu z innymi typami biowęgla, ponieważ nie wykazywał on ekstremalnej utraty masy ciała.
Jednak w przypadku przeżycia i rozrodu Eisenia foetida , biochar z drewna świerkowego wykazywał najwyższą toksyczność (53% efekt śmiertelny). Jedną z prawdopodobnych przyczyn mogą być podwyższone poziomy pierwiastków takich jak aluminium (Al), żelazo (Fe) i mangan (Mn), które są znane z toksyczności dla dżdżownic, ponieważ zakłócają regulację pH ich jelit i powodują stres oksydacyjny30. Podobne wyniki odnotowano w badaniach, w których Eisenia foetida doświadczyła znacznego spadku biomasy z powodu toksyczności metali ciężkich w glebie spowodowanej nadmiernym użyciem agrochemikaliów31.
Biochar świerka spowodował największą stymulację wydłużania korzenia w teście fitotoksyczności (do 206% stymulacji). Sugeruje to, że w przeciwieństwie do wrażliwości na robaki, wysokie stężenia metali mogą stanowić niezbędne mikroelementy dla gatunków roślin, takich jak S. alba. Niskie stężenia tego biowęgla stymulowały kolonie bakterii; jednak liczba kolonii malała wraz ze wzrostem koncentracji. Efekt ten wskazuje na wrażliwość bakterii na niskie poziomy K i P oraz wysoką zawartość pierwiastków toksycznych (Al, Fe, Mn). Ta obserwacja jest zgodna z zmierzoną aktywnością DHA, która była niższa niż w glebie kontrolnej, prawdopodobnie z powodu niskiego stosunku wodoru do węgla (H/C), co czyniło węgiel niedostępnym32. Wyniki te sugerują, że biochar ze świerka nie wspiera wzrostu mikroorganizmów ze względu na niską zawartość składników odżywczych lub związki hamujące.
Biochary pozyskiwano jako materiały testowe z zewnętrznych laboratoriów i produkowano w warunkach rutynowo stosowanych przez każdego dostawcę, w tym w różnych temperaturach pirolizy. Naszym celem było ocenenie reprezentatywnych biocharów pochodzących z odpadów w miarę dostarczania, zamiast izolować wpływ temperatury na różne surowce; dlatego w tym badaniu nie można w pełni oddzielić wpływu temperatury od wpływu na surowce. Szczegółowe parametry produkcji, takie jak szybkość ogrzewania, atmosfera gazowa i czas pobytu, nie były dostępne od dostawców; podawano jedynie podane temperatury i cechy pierwiastkowe (zob. Tabela 1 i Tabela 2).
Biorąc pod uwagę wyniki tego badania, można stwierdzić, że biochar chmielowy miał ogólnie zrównoważony efekt z umiarkowanymi skutkami ubocznymi środowiskowymi. Wspierał wzrost roślin we wszystkich stężeniach, wykazywał umiarkowane zmiany pH i zdolność do zatrzymywania wody, a ponadto nie miał drastycznego wpływu na drobnoustroje i robaki w glebie w porównaniu z innymi testowanymi biocharami.
Wyniki te pokazują, jak ważne jest dobór odpowiedniego typu biowęgla wraz z jego odpowiednimi stężeniami do poprawek gleby, aby zapewnić rzeczywistą poprawę jakości gleby i wzrostu roślin, bez wywoływania negatywnych skutków ubocznych.
Kilka etapów protokołu, w tym temperatura pirolizy i tempo stosowania biowęgla, miało zauważalny wpływ na wyniki tego badania. Wyższe temperatury pirolizy skutkowały wyższą zasadowością biowęgla i wpływały na stymulację rozmnażania się robaków oraz wzrostu bakterii, co widać w przypadku biowęgla niedopałka. Natomiast niższe temperatury pirolizy skutkowały mniejszą ilością zasadowego biocharu i wiązały się z najwyższą toksycznością robaków oraz zmniejszoną aktywnością mikroorganizmów, jak w przypadku biocharu drewna świerkowego. Wpływ szybkości aplikacji zależał od rodzaju biocharu oraz badanego organizmu. Niższe stężenia biocharu z fusów kawowych powodowały efekt stymulujący wydłużanie korzeni i wysoką aktywność DHA, podczas gdy wysokie stężenia biocharu z niedopałków papierosów powodowały najwyższy możliwy wzrost bakterii możliwych do uprawy.
W metodzie badania wprowadzono pewne korekty, aby rozwiązać typowe problemy, takie jak niespójne liczebności rodzin. Obejmuje to pozwolenie na 2-godzinną homogenizację zawiesin glebowych oraz wykorzystanie rozcieńczenia seryjnego 10-2 do uzyskania optymalnej i porównywalnej liczby kolonii. Dodatkowo, wytyczne OECD, test nr 220, mają na celu ocenę wpływu chemikaliów testowych na robaki Enchytraeid. Sugeruje on obliczenie stężenia śmiertelnego 50 (LC50) uzyskanego na podstawie zakresu stężeń chemicznych testowanych w teście pomiarowym. W tym badaniu celem było ocenenie ogólnego toksycznego wpływu biocharów pochodzących z odpadów na przeżywalność i rozmnażanie robaków; dlatego śmiertelny efekt został określony na podstawie procentowej zmiany liczby robaków od początku do końca testu i zgłoszono jako śmiertelny efekt procentowy.
Protokół ten jest powtarzalny w warunkach laboratoryjnych i na niewielką skalę (np. próbki 100 g). Jednak skalowanie na większą objętość gleby może powodować różnice w wynikach. Można to kontrolować poprzez właściwe mechaniczne mieszanie gleby i użytego biowęgla oraz kontrolowany system nawadniania, aby utrzymać stały poziom wilgoci. Dodatkowo efekty biowęgla znacznie się różniły w zależności od rodzaju surowca i temperatury pirolizy, co sugeruje przyszłe badania mające na celu indywidualną charakterystykę każdego materiału przed zastosowaniem.
Protokół różni się od innych technik oceny zdrowia gleby tym, że oferuje połączenie parametrów fizykochemicznych, takich jak pH i zatrzymanie wilgoci, oraz biologicznych reakcji na uzupełnianie gleby różnymi rodzajami biocharu. Uwzględnienie analizy aktywności enzymów wraz z tradycyjnymi liczbami kolonii mikroorganizmów daje wgląd w funkcjonowanie mikroorganizmów nieuprawianych. Ponadto badanie opierało się na różnych surowcach biocharu w różnych stężeniach, co dodaje praktycznego znaczenia dla rzeczywistych strategii poprawy gleby.
Przyszłe badania mogą obejmować testowanie dodatkowych surowców, takich jak obornik, łuski ryżu czy osad ściekowy, aby porównać ich wpływ na ekosystemy glebowe. Długoterminowe próby terenowe mogą być również dostosowane do oceny efektów sezonowych i wyników plonów. Badanie to pokazuje wpływ biocharu pochodzącego z odpadów zależny od surowców i stężenia na zdrowie gleby. Niektóre biochary stymulowały aktywność mikroorganizmów i wzrost roślin, podczas gdy inne wywoływały hamujące lub toksyczne reakcje u organizmów glebowych. Wybór odpowiednich rodzajów biowęgla i dawki aplikacji jest niezbędny, aby zmaksymalizować korzyści i minimalizować ryzyko związane z zarządzaniem glebą.
Autorzy deklarują, że nie mają żadnych konfliktów interesów.
Prezentowane prace zostały sfinansowane przez projekt BIOCIRKL (reg. nr. TN02000044), wspierany przez Czech Recovery Plan oraz Agencję Technologiczną Republiki Czeskiej w ramach Narodowego Programu Centrów Kompetencji w latach 2023-2028.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 1,3,5- Trifenyltetrazolium formaz | Sigma-Aldrich, Czechy | 93145 | |
| 2,3,5- chlorek trifenyltetrazolu | Sigma-Aldrich, Czechy | T8877 | |
| autoklawowy CertoClav Classic | CertoClav, Austria | 8510174 | |
| Węglan wapnia | Sigma-Aldrich, Czechy | 239216 | |
| wirówka MPW-251 | MPW Med. Instrument, Polska | 10251 | |
| Biochar niedopałki papierosów | Uniwersytet w Hohenheim, Niemcy | Produkowano w kątach 700 i stopień; C | |
| Licznik kolonii CC-200 | Cole-Parmer | 14212-04 | |
| Enchytraeus albidus | INVITAL Aqua s.r.o. | ||
| Etanol | Penta, Czechy | 70390-11003 | |
| Biochar biomasy chmielu | Laboratorium Akademii Nauk Republiki Czeskiej | Produkowany w kątach 650 i stopień; C | |
| Komórka Q inkubatora | Pol-Lab, Polska | ||
| Kuchenka mikrofalowa | Anton Paar, Multiwave PRO | ||
| Notebook PC DELL Latitude 3510 | Dell Products, Irlandia | ||
| Nośnik Agar Media | OXOID, Czechy | CM0003B | |
| OECD gleba | Microbiotest, Belgia | ||
| pH WTW inoLab pH 7110 | Xylem Analytics, Niemcy | 1AA112 | |
| Sinapis alba nasion | Microbiotest, Belgia | ||
| Spektrofotometr M4 UV-Spektrometr widzialny | VWR | 76520-716 | |
| Biochar z wykorzystanych fusów kawowych | Laboratorium Akademii Nauk Republiki Czeskiej | Produkowany w kątach 650 i stopień; C | |
| Biochar ze świerku | Olesnice, Czechy | Produkowany w kątach 600 i stopień; C | |
| Stereomikroskop MSZ5000-T-IL-TL | A.Kruss Optronic, Niemcy | MSZ5000-T-IL-TL | |
| Tris Base | Sigma-Aldrich, Czechy | 252859 | |
| wideo okular VOPC93 USB 2.0 | A.Kruss Optronic, Niemcy | VOPC93 | |
| Waga KERN EMB | KERN, Niemcy |