Protokół ten opisuje powtarzalną metodę przygotowania mechanicznie przetworzonego mikrotłuszczu wzbogaconego SVF z autologicznej tkanki tłuszczowej i wstrzykiwania go do ubytków tkanek miękkich typu ubytkowego w celu rekonstrukcji klinicznej.
Method Article
Protokół ten opisuje powtarzalną metodę przygotowania mechanicznie przetworzonego mikrotłuszczu wzbogaconego SVF z autologicznej tkanki tłuszczowej i wstrzykiwania go do ubytków tkanek miękkich typu ubytkowego w celu rekonstrukcji klinicznej.
Urazowe ubytki tkanek miękkich stanowią poważne wyzwanie dla rekonstrukcji z powodu utraty tkanek, upośledzenia naczyń oraz trudności w uzyskaniu trwałego pokrycia. Tkanka tłuszczowa stanowi praktyczne źródło tkanki autologicznej, a mikrotłuszcz wzbogacony o frakcję naczyń stromalnych (SVF) może być przygotowywany wewnątrzoperacyjnie, bez trawienia enzymatycznego.
Niniejsze badanie przedstawia ustandaryzowany protokół kliniczny pobierania autologicznej tkanki tłuszczowej i przetwarzania jej na mikrotłuszcz wzbogacony w SVF do wstrzykiwania do ubytków tkanek miękkich typu ubytku urazowego. Tłuszcz jest pobierany ręcznie z uda lub brzucha przy niskim ciśnieniu ujemnym, mechanicznie rozdrobniony przez cięcie i emulgację strzykawką do strzykawki, filtrowany, aby uzyskać jednolitą konsystencję mikrotłuszczu, a następnie wirowany w celu izolacji frakcji zawierającej SVF. Przetworzony mikrotłuszcz jest wstrzykiwany przez całą jamę rany w wielowarstwowym wzorze. Ocena pooperacyjna obejmuje seryjne oceny kliniczne, dokumentację fotograficzną oraz pomiar zmniejszenia obszaru rany aż do epitelizacji.
W niewielkiej kohorcie metoda wiązała się z postępującym kurczem rany i całkowitą epitelizacją w ciągu około 4-8 tygodni, bez poważnych powikłań. Chociaż skład komórkowy i żywotność nie zostały zmierzone ilościowo, technika ta zapewniała wykonalne podejście wewnątrzoperacyjne, odpowiednie do warunków bez dostępu do przetwarzania enzymatycznego lub laboratoryjnego. Protokół ten oferuje praktyczną, minimalnie manipulowaną metodę dostarczania mikrotłuszczu wzbogaconego w SVF w leczeniu wad typu urazowych i może stanowić podstawę do dalszych kontrolowanych badań.
Ubytki tkanek miękkich typu urazowe pozostają poważnym wyzwaniem rekonstrukcyjnym, ponieważ łączą utratę tkanek, upośledzoną miejscową perfuzję oraz wysokie ryzyko infekcji i powstawania martwej przestrzeni. Konwencjonalne techniki krycia, takie jak przeszczepy skóry o rozdzielonej grubości czy transfery płatów, zapewniają w wielu przypadkach trwałe pokrycie. Jednak często ogranicza je zachorowalność na miejscu dawcy, złożoność techniczna oraz zmienne długoterminowe rezultaty, zwłaszcza w zanieczyszczonych lub uszkodzonych łóżkach 1,2,3.
Tkanka tłuszczowa jest obficie i łatwo dostępnym źródłem heterogenicznej populacji komórek określanej jako frakcja naczyniowa stromalna (SVF). SVF obejmuje komórki stromalne mezenchymalne, progenitory śródbłonka, perycyty oraz wspierające elementy stromalne. Gdy jest zatrzymywane w cząstkach tkanki tłuszczowej, naturalny kontekst zewnątrzkomórkowy SVF jest zachowany podczas obsługi i podawania klinicznego4. Klinicznie odnotowano, że przeszczepy tłuszczowe wzbogacone w SVF (mikrotłuszcze wzbogacone w SVF) poprawiają retencję przeszczepu i są powiązane z przyspieszoną epitelizacją ran w różnych wskazaniach 5,6,7.
Istnieją dwie główne strategie uzyskania SVF z lipoaspiratu. Trawienie enzymatyczne zazwyczaj daje wyższą liczbę komórek jądrowych na jednostkę objętości, ale wymaga dedykowanych odczynników, infrastruktury laboratoryjnej, dłuższego czasu przetwarzania i podlega ograniczeniom regulacyjnym w wielu jurysdykcjach 4,8. Natomiast metody przetwarzania mechanicznego obejmują cięcie, emulgację strzykawki na strzykawkę, filtrację oraz użycie urządzeń mechanicznych zamkniętego systemu. Te podejścia umożliwiają szybkie śródoperacyjne przygotowanie mikrotłuszczu wzbogaconego w SVF przy minimalnej manipulacji i krótszym czasie realizacji 6,9,10,11. Najnowsze systemy mechaniczne zgłaszały czas przetwarzania <15 min i wydajność zbliżoną do metod enzymatycznych w niektórych seriach, choć zmierzona liczba komórek i żywotność mogą się różnić w zależności od urządzenia i operatora9.
Pomimo rosnącej literatury dotyczącej mechanicznie przetwarzanego SVF oraz przeszczepów tłuszczowych w leczeniu przewlekłych wrzodów i choroby cukrzycowej stopy, ustandaryzowane, powtarzalne protokoły skierowane specjalnie do ubytków tkanek miękkich typu ubytku urazowego są rzadkie. Opublikowane raporty kliniczne najczęściej dotyczą przewlekłych wrzodów, ran cukrzycowych lub estetycznego przeszczepu tłuszczu. Jednak tylko nieliczne oferują procedurę stopniową wewnątrzoperacyjną, która określa parametry pobrania, końcowe punkty emulgacji, rozmiary porów filtracji, siłę wirowania (× g), dawkowanie na powierzchnię rany oraz kryteria gotowości do podawania rany w środowiskach urazowych 7,13.
Dlatego praktyczne wskazówki dotyczące zastosowania są ważne dla zespołów chirurgicznych rozważających takie podejście. Na podstawie dostępnej literatury i naszych doświadczeń operacyjnych, typowe objętości aspiratów wewnątrzoperacyjnych dla pojedynczej jamy wynoszą ~20-40 mL. Ta objętość zazwyczaj daje wystarczającą ilość przetworzonego mikrotłuszczu, by wypełnić małe i umiarkowane ubytki. Natomiast rekonstrukcje dużych objętości prawdopodobnie wykraczają poza zakres mechanicznego przetwarzania punktowego i mogą wymagać etapowych procedur lub alternatywnych metod 9,12. Mechaniczne podejścia SVF są również mniej odpowiednie do rażąco skażonych ran, dopóki infekcja nie zostanie opanowana; W takich przypadkach przed przeszczepem7 powinno poprzedzać zabieg usunięcia i leczenie infekcji (w tym ukierunkowane antybiotyki oraz, gdzie to stosowne, terapia ran pod ujemnym ciśnieniem).
Niniejsze prace mają na celu dostarczenie szczegółowego, powtarzalnego protokołu śródoperacyjnego przygotowania mikrotłuszczu wzbogaconego w SVF przez mechaniczne przetwarzanie oraz wstrzykiwania tego produktu do ubytków tkanek miękkich typu ubytkowego. Protokół kładzie nacisk na wyraźne parametry operacyjne (pobieranie, fragmentacja mechaniczna i emulgacja, filtracja, wirowanie wyrażone jako × g, technika iniekcji oraz obiektywne pomiary obszaru rany), aby inne zespoły chirurgiczne mogły przyjąć i zweryfikować metodę w swoich warunkach.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Wszystkie procedury zostały zatwierdzone przez Komitet Etyki Instytucjonalnej (Zatwierdzenie nr KL-2025062) i przeprowadzony zgodnie z Deklaracją Helsińską. Przed udziałem wszyscy pacjenci uzyskali pisemną świadomą zgodę.
1. Selekcja pacjentów i ocena przedoperacyjna
2. Przygotowanie przedoperacyjne
3. Pozyskiwanie tłuszczu
4. Mechaniczne przetwarzanie mikrotłuszczu wzbogaconego SVF
5. Wstrzyknięcie w miejsce defektu
6. Opieka pooperacyjna i kontrola
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Łącznie ośmiu pacjentów z ubytkami tkanek miękkich typu ubytku urazowego zostało leczonych według opisanego protokołu.
Charakterystyka kohorty
W grupie było pięciu mężczyzn i trzy kobiety, o średnim wieku 51,5 ± 11,7 roku (zakres 38-74 lata). Wady znajdowały się na kończynie dolnej (n = 5), kończynie górnej (n = 2) oraz tułowiu (n = 1). Średnia maksyma...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Niniejsze badanie opisuje klinicznie stosowalny i powtarzalny protokół mechanicznego przetwarzania i przeszczepu mikrotłuszczu wzbogaconego w SVF w leczeniu ubytków tkanek miękkich typu ubytków pourazowych. Protokół jest przeznaczony do wdrożenia w miejscu opieki w standardowych warunkach operacyjnych i stawia na prostotę proceduralną, bezpieczeństwo oraz wykonalność ponad charakterystykę biologiczną. W tej niewielkiej serii klinicznej wszystkie leczone defekty wykazywały postępujące zamykanie rany i osiągnęły pełną epit...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do zgłoszenia.
Badanie to zostało wsparte przez Specjalny Program Specjalny Międzynarodowej Współpracy Naukowej i Technologicznej Prowincji Prowincji Hubei (Grant nr 2023EHA043) oraz Dział Urazów i Mikroortopedii Szpitala Zhongnan Uniwersytetu w Wuhan w ramach Narodowego Kluczowego Projektu Badań Klinicznych 2025 (Nr Projektu: 2025LCYJZX-ZD003). Autorzy serdecznie dziękują dr Qi Baiwenowi za jego wcześniejsze badania, które zainspirowały to badanie oraz za cenne wskazówki dotyczące metodologii klinicznej. Dziękujemy również zespołom pielęgniarskim i chirurgicznym Szpitala Zhongnan za pomoc w opiece nad pacjentem i w dalszej opatrzeniu.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 0,9% soli fizjologicznej | Baxter Healthcare (lub odpowiednik) | Różne | Stosowany jako roztwór bazowy dla roztworu tumescentnego |
| Kaniula z tępym wtryskiem (22G i razy; 50 mm) | CONPUVON ( ;), Chiny | DZ 22 razy; 50-C5 | Stosowany do wielowarstwowych wstrzyków mikrotłuszczu wzbogaconego SVF |
| Wirówka | Długoletnia Biotechnologia ( ), Chiny | LTA-1600 | Kliniczna wirówka zdolna do wygenerowania około 400 i razy; g |
| Aparat cyfrowy / smartfon | Dowolny | Nie ma | Standaryzowana fotografia nawinięć podczas kontroli |
| Epinefryna | Lokalna apteka szpitalna | Różne | Dodano do soli fizjologicznej, aby uzyskać końcowe stężenie 1:500 000 |
| Oprogramowanie ImageJ (wersja 1.53 lub nowsza) | Narodowe Instytuty Zdrowia (USA) | Wolne oprogramowanie | Wykorzystywane do planymetrycznego pomiaru powierzchni rany |
| Kanula liposukcyjna (2– 3 mm) | Standardowy dostawca medyczny | Nie ma | Wykorzystywane do pobierania tkanki tłuszczowej z miejsca dawcy |
| Złącze luer-lock (żeńskie na żeńskie) | Becton Dickinson (lub odpowiednik) | Różne | Stosowany do mechanicznej emulgacji strzykawki między strzykawkami |
| Strzykawka z blokadą luer-lock (1, 5, 10, 20 mL) | Hongda Medical Devices ( ), Chiny | Nieokreślone (podaż instytucjonalna) | Wykorzystywane do aspiracji, obróbki mechanicznej i wtrysku |
| Sterylny opatrunek / bandaż | Apteka szpitalna | Nie ma | Do pokrycia ran pooperacyjnych |
| Nożyczki chirurgiczne (sterylne) | Guangzhou Baitang Medical Devices Co., Ltd. | BT00301 (lub podobny model reprezentatywny) | Wykorzystywane do mechanicznej fragmentacji tkanki tłuszczowej |
| Gaza wazelinowa (10 cm i razy; 10 cm) | Huaxi Medical Dressing Co., Ltd. ( ), Chiny | Nieokreślone (podaż instytucjonalna) | Nieprzylegające opatrunki stosowane do leczenia ran pooperacyjnych |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission
;), Chiny
), Chiny
), Chiny
), Chiny