Method Article

Mechaniczne przetwarzanie mikrotłuszczu wzbogaconego w SVF do rekonstrukcji urazowych ubytków tkanek miękkich

DOI:

10.3791/69984

February 20th, 2026

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Protokół ten opisuje powtarzalną metodę przygotowania mechanicznie przetworzonego mikrotłuszczu wzbogaconego SVF z autologicznej tkanki tłuszczowej i wstrzykiwania go do ubytków tkanek miękkich typu ubytkowego w celu rekonstrukcji klinicznej.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Urazowe ubytki tkanek miękkich stanowią poważne wyzwanie dla rekonstrukcji z powodu utraty tkanek, upośledzenia naczyń oraz trudności w uzyskaniu trwałego pokrycia. Tkanka tłuszczowa stanowi praktyczne źródło tkanki autologicznej, a mikrotłuszcz wzbogacony o frakcję naczyń stromalnych (SVF) może być przygotowywany wewnątrzoperacyjnie, bez trawienia enzymatycznego.
Niniejsze badanie przedstawia ustandaryzowany protokół kliniczny pobierania autologicznej tkanki tłuszczowej i przetwarzania jej na mikrotłuszcz wzbogacony w SVF do wstrzykiwania do ubytków tkanek miękkich typu ubytku urazowego. Tłuszcz jest pobierany ręcznie z uda lub brzucha przy niskim ciśnieniu ujemnym, mechanicznie rozdrobniony przez cięcie i emulgację strzykawką do strzykawki, filtrowany, aby uzyskać jednolitą konsystencję mikrotłuszczu, a następnie wirowany w celu izolacji frakcji zawierającej SVF. Przetworzony mikrotłuszcz jest wstrzykiwany przez całą jamę rany w wielowarstwowym wzorze. Ocena pooperacyjna obejmuje seryjne oceny kliniczne, dokumentację fotograficzną oraz pomiar zmniejszenia obszaru rany aż do epitelizacji.
W niewielkiej kohorcie metoda wiązała się z postępującym kurczem rany i całkowitą epitelizacją w ciągu około 4-8 tygodni, bez poważnych powikłań. Chociaż skład komórkowy i żywotność nie zostały zmierzone ilościowo, technika ta zapewniała wykonalne podejście wewnątrzoperacyjne, odpowiednie do warunków bez dostępu do przetwarzania enzymatycznego lub laboratoryjnego. Protokół ten oferuje praktyczną, minimalnie manipulowaną metodę dostarczania mikrotłuszczu wzbogaconego w SVF w leczeniu wad typu urazowych i może stanowić podstawę do dalszych kontrolowanych badań.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ubytki tkanek miękkich typu urazowe pozostają poważnym wyzwaniem rekonstrukcyjnym, ponieważ łączą utratę tkanek, upośledzoną miejscową perfuzję oraz wysokie ryzyko infekcji i powstawania martwej przestrzeni. Konwencjonalne techniki krycia, takie jak przeszczepy skóry o rozdzielonej grubości czy transfery płatów, zapewniają w wielu przypadkach trwałe pokrycie. Jednak często ogranicza je zachorowalność na miejscu dawcy, złożoność techniczna oraz zmienne długoterminowe rezultaty, zwłaszcza w zanieczyszczonych lub uszkodzonych łóżkach 1,2,3.

Tkanka tłuszczowa jest obficie i łatwo dostępnym źródłem heterogenicznej populacji komórek określanej jako frakcja naczyniowa stromalna (SVF). SVF obejmuje komórki stromalne mezenchymalne, progenitory śródbłonka, perycyty oraz wspierające elementy stromalne. Gdy jest zatrzymywane w cząstkach tkanki tłuszczowej, naturalny kontekst zewnątrzkomórkowy SVF jest zachowany podczas obsługi i podawania klinicznego4. Klinicznie odnotowano, że przeszczepy tłuszczowe wzbogacone w SVF (mikrotłuszcze wzbogacone w SVF) poprawiają retencję przeszczepu i są powiązane z przyspieszoną epitelizacją ran w różnych wskazaniach 5,6,7.

Istnieją dwie główne strategie uzyskania SVF z lipoaspiratu. Trawienie enzymatyczne zazwyczaj daje wyższą liczbę komórek jądrowych na jednostkę objętości, ale wymaga dedykowanych odczynników, infrastruktury laboratoryjnej, dłuższego czasu przetwarzania i podlega ograniczeniom regulacyjnym w wielu jurysdykcjach 4,8. Natomiast metody przetwarzania mechanicznego obejmują cięcie, emulgację strzykawki na strzykawkę, filtrację oraz użycie urządzeń mechanicznych zamkniętego systemu. Te podejścia umożliwiają szybkie śródoperacyjne przygotowanie mikrotłuszczu wzbogaconego w SVF przy minimalnej manipulacji i krótszym czasie realizacji 6,9,10,11. Najnowsze systemy mechaniczne zgłaszały czas przetwarzania <15 min i wydajność zbliżoną do metod enzymatycznych w niektórych seriach, choć zmierzona liczba komórek i żywotność mogą się różnić w zależności od urządzenia i operatora9.

Pomimo rosnącej literatury dotyczącej mechanicznie przetwarzanego SVF oraz przeszczepów tłuszczowych w leczeniu przewlekłych wrzodów i choroby cukrzycowej stopy, ustandaryzowane, powtarzalne protokoły skierowane specjalnie do ubytków tkanek miękkich typu ubytku urazowego są rzadkie. Opublikowane raporty kliniczne najczęściej dotyczą przewlekłych wrzodów, ran cukrzycowych lub estetycznego przeszczepu tłuszczu. Jednak tylko nieliczne oferują procedurę stopniową wewnątrzoperacyjną, która określa parametry pobrania, końcowe punkty emulgacji, rozmiary porów filtracji, siłę wirowania (× g), dawkowanie na powierzchnię rany oraz kryteria gotowości do podawania rany w środowiskach urazowych 7,13.

Dlatego praktyczne wskazówki dotyczące zastosowania są ważne dla zespołów chirurgicznych rozważających takie podejście. Na podstawie dostępnej literatury i naszych doświadczeń operacyjnych, typowe objętości aspiratów wewnątrzoperacyjnych dla pojedynczej jamy wynoszą ~20-40 mL. Ta objętość zazwyczaj daje wystarczającą ilość przetworzonego mikrotłuszczu, by wypełnić małe i umiarkowane ubytki. Natomiast rekonstrukcje dużych objętości prawdopodobnie wykraczają poza zakres mechanicznego przetwarzania punktowego i mogą wymagać etapowych procedur lub alternatywnych metod 9,12. Mechaniczne podejścia SVF są również mniej odpowiednie do rażąco skażonych ran, dopóki infekcja nie zostanie opanowana; W takich przypadkach przed przeszczepem7 powinno poprzedzać zabieg usunięcia i leczenie infekcji (w tym ukierunkowane antybiotyki oraz, gdzie to stosowne, terapia ran pod ujemnym ciśnieniem).

Niniejsze prace mają na celu dostarczenie szczegółowego, powtarzalnego protokołu śródoperacyjnego przygotowania mikrotłuszczu wzbogaconego w SVF przez mechaniczne przetwarzanie oraz wstrzykiwania tego produktu do ubytków tkanek miękkich typu ubytkowego. Protokół kładzie nacisk na wyraźne parametry operacyjne (pobieranie, fragmentacja mechaniczna i emulgacja, filtracja, wirowanie wyrażone jako × g, technika iniekcji oraz obiektywne pomiary obszaru rany), aby inne zespoły chirurgiczne mogły przyjąć i zweryfikować metodę w swoich warunkach.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury zostały zatwierdzone przez Komitet Etyki Instytucjonalnej (Zatwierdzenie nr KL-2025062) i przeprowadzony zgodnie z Deklaracją Helsińską. Przed udziałem wszyscy pacjenci uzyskali pisemną świadomą zgodę.

1. Selekcja pacjentów i ocena przedoperacyjna

  1. Uwzględnić dorosłych pacjentów z ubytkami tkanek miękkich wymagającymi interwencji rekonstrukcyjnej po zakończeniu odpowiedniej chirurgicznej debridementu.
    UWAGA: Ubytki powinny wykazywać dobrze zarysowaną próchnicę z otaczającą żywotną tkanką i brak trwających martwic w momencie rekonstrukcji.
  2. Wykluczać pacjentów z aktywną infekcją ogólnoustrojową lub niekontrolowaną miejscową infekcją rany, źle kontrolowaną cukrzycą (definiowaną jako HbA1c utrzymującą się >8% mimo leczenia), istotną chorobą obwodową naczyń obwodowych dotykającą dotkniętą kończynę, znanymi zaburzeniami krzepnięcia lub aktualnymi lekami przeciwzakrzepowymi, których nie można bezpiecznie przerwać, nowotworami dotyczącymi miejsca ubytku lub przeciwwskazaniami do liposukcji lub znieczulenia określonych przez ocenę przedoperacyjną.
  3. Przeprowadz zbieranie danych bazowych i ocenę ran
    1. Dokumentuj podstawowe cechy pacjenta, w tym wiek, płeć, lokalizację rany, mechanizm urazu oraz czas od urazu do rekonstrukcji.
    2. Przeprowadz ocenę rany po standardowym przygotowaniu rany. Mierz długość i szerokość nawinięcia sterylną linijką w najszerszych miejscach. Zdobędź standardowe zdjęcia cyfrowe z ustaloną odległością i orientacją. Oblicz powierzchnię rany (cm²) za pomocą analizy planymetrycznej na podstawie skalibrowanych zdjęć (patrz Krok 6.6).
  4. Zapewnij poradnictwo przedoperacyjne. Wyjaśnij kroki proceduralne, przewidywane korzyści, potencjalne ryzyka (w tym infekcję, resorpcję tłuszczu i konieczność dodatkowych zabiegów), wymagania dotyczące opieki pooperacyjnej oraz harmonogram wizyt kontrolnych.
  5. Potwierdź zrozumienie i uzyskaj pisemną świadomą zgodę przed operacją

2. Przygotowanie przedoperacyjne

  1. Przygotowanie sprzętu sterylnego
    1. Przygotuj wymagany sprzęt sterylny, w tym: kaniule do liposukcji (średnica 2-3 mm, tępa końcówka), strzykawki Luer-lock (pojemność 10-20 mL), sterylne złącza Luer-lock do transferu strzykawki na strzykawkę, nożyczki chirurgiczne, kanniule do zastrzyków tępych końcówek (22G × 50 mm).
    2. Przed użyciem popewnij integralność i sterylność wszystkich urządzeń.
  2. Przygotowanie i infiltracja roztworu tumescentnego
    1. Pobierz 1000 ml soli fizjologicznej 0,9% do jałowego pojemnika
    2. Dodaj 2 ml epinefryny w stosunku 1:1 000, aby uzyskać końcowe stężenie 1:500 000. Dokładnie wymieszaj w sterylnych warunkach.
    3. Podłącz roztwór do strzykawki Luer-lock za pomocą 2-3m tępej kaniulki infiltracyjnej
      UWAGA: Lidokaina jest celowo pomijana, aby umożliwić oddzielne, kontrolowane dawki znieczulenie.
    4. Wprowadzaj roztwór do miejsca dawcy podskórnego (np. brzucha lub uda) za pomocą powolnych, wachlarzowatych przejść od głębokich do powierzchownych poziomów.
    5. Dostosuj całkowitą objętość zgodnie z powierzchnią miejsca dawcy oraz przewidywaną objętością lipoaspiracji.
    6. Infiltruj do momentu, gdy tkanka wykazuje jednolitą tumescencję i zwężenie naczyń.
    7. Poczekaj 10-15 minut po infiltracji, aby umożliwić maksymalne skurczenie naczyń przed pobraniem. UWAGA: Epinefryna zmniejsza krwawienia śródoperacyjne i ułatwia pobieranie tłuszczu. Pominięcie lidokainy zapobiega przekraczaniu bezpiecznych dawek znieczulenia i umożliwia oddzielne znieczulenie miejscowe lub regionalne.
  3. Podawanie znieczulenia
    UWAGA: Znieczulenie podaje się oddzielnie od roztworu tumescentnego, wybiera się na podstawie wielkości wady, miejsca dawcy oraz tolerancji pacjenta. Jedno z poniższych podejść do znieczulenia jest wybierane na podstawie wielkości ubytku, miejsca dawcy oraz tolerancji pacjenta.
    1. Infiltracja lokalna (blok polowy): Infiltracja lidokainy 0,5-1% adrenaliną w skali 1:200 000 za pomocą tępego końcówki (22G × 50 mm) kaniuli. Rozprzestrzenia się promieniowo wokół nerwów czuciowych zaopatrujących miejsce dawcy. Daj 5-10 minut na pełny efekt znieczulenia przed manipulacją miejscem dawcy lub infiltracją tumescentną.
      UWAGA: Maksymalna dawka: 7 mg/kg lidokainy z epinefryną, dostosowana do masy pacjenta i chorób współistniejących.
    2. Znieczulenie regionalne (opcjonalnie): Stosuj blokady nerwów obwodowych sterowane ultrasonografią w zależności od miejsca dawcy. Stosuj bupiwakainę (0,25-0,5%) lub ropivakainę (0,5%), dawkowaną zgodnie ze standardowymi zaleceniami. Potwierdź początek blokady (10-20 min) przed zbiorem.
    3. Znieczulenie ogólne: Zarezerwowane dla dużych wad lub zabiegów łączonych. Przeprowadzaj procedury zgodnie z instytucją i standardowym monitoringiem.
      UWAGA: Upewnij się, że całkowita dawka adrenaliny ogólnoustrojowej ze wszystkich infiltrowanych roztworów pozostaje w akceptowanych granicach bezpieczeństwa klinicznego.

3. Pozyskiwanie tłuszczu

  1. Wybierz miejsce dawcy (brzuch i/lub udo) na podstawie następujących kryteriów
    1. Dostępność wystarczającej ilości tkanki tłuszczowej podskórnej, umożliwiającej odpowiedni pobór bez deformacji konturu
    2. Brak miejscowego bliznowacenia, infekcji lub wcześniejszych operacji, które mogłyby pogorszyć jakość tkanek.
    3. Dostępność pacjenta i jego położenie na stole operacyjnym, aby umożliwić sterylną infiltrację i aspirację.
      UWAGA: Wybór miejsca z odpowiednią ilością tkanek i minimalnym wcześniejszym urazem ułatwia regularne pobieranie tłuszczu i zmniejsza powikłania proceduralne.
  2. Wykonaj nacięcie skóry o grubości 2-3 mm skalpelem nr 11, w warunkach sterylnych. Nacinać przez naskórek i skórę aż do warstwy podskórnej, nie penetrując głębszej powięzi ani mięśni.
  3. Utrzymuj małe, kontrolowane cięcie, aby zminimalizować blizny.
  4. Przymocuj liposukcyjną kaniulę o średnicy 2-3 mm do strzykawki Luer-lock o pojemności 10-20 mL.
  5. Wprowadź kaniulę przez nacięcie skórne do podskórnej warstwy tłuszczowej, pozostając powierzchowną względem powięzi pod spodem.
  6. Stosuj delikatne, wielokierunkowe ruchy, aby równomiernie rozłożyć kaniulę na docelowej płaszczyźnie podskórnej.
  7. Należy ręcznie stosować niskie podciśnienie, delikatnie wyciągając tłok strzykawki, aby zasysać tkankę tłuszczową.
  8. Unikaj agresywnego ssania, aby zminimalizować uraz mechaniczny komórek pochodzących z tłuszczu.
  9. Kontynuuj aspirację w małych, kontrolowanych alikwotach, przesuwając kaniulę w warstwie podskórnej, aby zmaksymalizować efektywność zbioru.
    UWAGA: Utrzymuj strzykawkę w temperaturze pokojowej (20-25 °C), aby zachować żywotność komórek.
  10. Pobierz około 20-40 ml lipoaspiratu, dostosowanego do wielkości defektu.
  11. Po aspiracji usuń kaniulę i zamknij nacięcie skóry pojedynczym nylonowym szwem 3-0 lub 4-0 lub użyj sterylnych pasków klejących do mniejszych nacięć kłutych. Nałóż sterylny opatrunek na miejsce dawcy.
  12. Aspirowany lipoaspirat początkowo znajduje się w strzykawce Luer-lock używanej do pobierania. Delikatnie odłącz kaniulę do zbierania i przełóż lipoaspirat do nowej sterylnej strzykawki Luer-lock o pojemności 10-20 mL do dalszego przetwarzania.
  13. Unikaj kontaktu z powietrzem, wysokimi temperaturami lub nadmierną siłą mechaniczną. Utrzymuj aspirat w temperaturze pokojowej (20-25 °C) aż do przetworzenia (np. oczyszczania, wirowania lub wtrysku).
    UWAGA: Użycie świeżej, sterylnej strzykawki zapobiega zanieczyszczeniu i umożliwia ustandaryzowane przetwarzanie. Delikatne traktowanie zachowuje żywotność frakcji naczyń adipocytów i stromalnych

4. Mechaniczne przetwarzanie mikrotłuszczu wzbogaconego SVF

  1. Pozwól pobranej lipoaspiratowi stać pionowo w sterylnych strzykawkach Luer-lock 10-20 mL przez 5 minut w temperaturze pokojowej (20-25 °C), aby umożliwić rozdzielenie grawitacyjne.
  2. Po staniu widoczne stają się trzy wyraźne warstwy (górna warstwa olejowa [wolna frakcja lipidowa], środkowa warstwa tłuszczowa, dolna warstwa wodna/krwi).
  3. Stosując technikę sterylną, trzymaj strzykawkę pionowo z dyszą skierowaną do góry i delikatnie przesuwaj tłok, aby usunąć górną warstwę oleju, aż pozostanie tylko frakcja tłuszczowa. Odwróć strzykawkę i ostrożnie usuń dolną warstwę wodną/krwi, powoli przesuwając tłok lub zasycając sterylną strzykawką. Zachowaj tylko środkową frakcję tłuszczową do dalszego przetwarzania.
    UWAGA: Usunięcie wolnego oleju i składników wodnych zmniejsza ilość produktów zapalnych oraz poprawia spójność przeszczepu i żywotność komórek.
  4. Przenieś zachowaną frakcję tłuszczową do sterylnej misy ze stali nierdzewnej lub szklanej. Używając sterylnych nożyczek chirurgicznych, delikatnie rozdrobnij tkankę tłuszczową na fragmenty o wielkości około 1-2 mm, unikając nadmiernego ucisku lub sił ścinania.
  5. Załaduj posiekaną tkankę tłuszczową do 10 mL strzykawki Luer-lock. Podłącz tę strzykawkę do drugiej 10 mL strzykawki Luer-lock za pomocą sterylnego złącza Luer-lock żeńsko-żeńskie.
  6. Mechanicznie emulguj tkankę tłuszczową, przenosząc ją tam i z powrotem między dwoma strzykawkami przez 20-30 przejść, w stałym, umiarkowanym tempie. Kontynuuj, aż uzyskamy jednolitą, wstrzykiwającą konsystencję mikrotłuszczów.
    UWAGA: Przetworzony tłuszcz powinien wyglądać na jednorodnie emulgowany z minimalnym widocznym separacją oleju.
  7. Odłącz złącze Luer-lock i przelej emulgowany mikrotłuszcz ze strzykawki do sterylnej rurki wirówki kompatybilnej z wirnikiem. Upewnij się, że probówki są wyważone objętością przed wirowaniem.
  8. Wiruj zgromadzony tłuszcz w temperaturze około 400 × g przez 3 minuty w temperaturze pokojowej.
  9. Po wirowaniu widoczne są trzy warstwy: górna warstwa olejowa, frakcja mikrotłuszczu wzbogacona w środkowy SVF, dolna warstwa wodna/krew (Rysunek 1).
  10. Używając sterylnej strzykawki, ostrożnie zasysaj tylko środkową warstwę mikrotłuszczu wzbogaconą SVF, unikając skażenia sąsiednich warstw.
  11. Zebraną frakcję przepuścić przez sterylny filtr ze stali nierdzewnej o pojemności 500-1000 μm, aby usunąć włókniste zanieczyszczenia i duże cząstki. Ten krok ułatwia płynne wstrzykiwanie i minimalizuje zatykanie kaniuli podczas porodu przeszczepu.
  12. Wypełnij filtrowany mikrotłuszcz wzbogacony SVF do sterylnych strzykawek o pojemności 1-5 mL, aby natychmiast podniecić.

5. Wstrzyknięcie w miejsce defektu

  1. Wykonaj ostateczne oczyszczanie rany, a następnie dokładne płukanie bezpłodną solą fizjologiczną, aż cała martwicza tkanka zostanie usunięta.
  2. Potwierdź gotowość rany obecnością zdrowej tkanki granulacyjnej i/lub krwawieniem punktacyjnym, co wskazuje na odpowiednią perfuzję i żywotność tkanek.
  3. Stosując technikę sterylną, wprowadź tępą kaniulę (średnica 1,2-2,0 mm) do ubytku przez krawędź rany lub sąsiadnią nienaruszoną skórę, unikając bezpośredniego wejścia przez centralną podstawę rany, jeśli to możliwe.
    1. Głębokość i płaszczyzna tkanek: Przesunąć kaniulę do płaszczyzny tkanki podskórnej bezpośrednio powierzchniowej od dna rany; Unika się umieszczenia wewnątrzmięśniowego, chyba że głębokość defektu jest wyraźnie wskazana.
    2. Kąt włożenia: Wkładaj kaniulę pod niskim kątem skośnym (około 10-30°) względem powierzchni rany, aby ułatwić kontrolowaną, warstwową depoziciję.
    3. Ustawienie kaniuli: Utrzymuj czubek kaniuli w dobrze unaczynionych płaszczyznach tkanek, aby zoptymalizować przeżycie przeszczepu i zminimalizować ekstruzję.
  4. Wstrzyknij mikrotłuszcz wzbogacony SVF za pomocą wielowarstwowej, wstecznej techniki wachlarzania, składając małe aliquoty podczas powolnego wycofywania kaniuli.
  5. Równomiernie rozłóż przeszczep na podstawę rany, brzegi oraz otaczającą tkankę podskórną, aby uzyskać równomierne wypełnienie i zmaksymalizować kontakt z unaczynionymi tkankami biorcy.
  6. Dostosuj objętość wtrysku zgodnie z wielkością i głębokością ubytku, zazwyczaj w zakresie od 5 do 12 mL.
  7. Iniekcje są przerywane, gdy defekt zostanie odpowiednio wypełniony i odtworzone kontury tkanek, co zapobiega nadmiernej korekcji lub nadmiernemu napięciu tkanek.
    UWAGA: Unikaj przepełniania, aby zmniejszyć ryzyko martwicy tłuszczu, zaburzonej perfuzji lub ekstruzji przeszczepu.
  8. Okryj ranę gazą wazelinową (petrolatową), umieszczoną w niekompresyjnym kontakcie z powierzchnią rany.
  9. Zastosowaj dodatkowy opatrunk, aby chronić miejsce, jednocześnie pozwalając na pasywny drenaż i minimalizując siły ścinające na wstrzyknięty mikrotłuszcz.

6. Opieka pooperacyjna i kontrola

  1. Podawaj antybiotyki profilaktyczne zgodnie z protokołem instytucjonalnym, uwzględniając wielkość rany, stan zanieczyszczenia oraz czynniki ryzyka specyficzne dla pacjenta.
  2. Instruuj pacjentów, aby unikali nacisku, ścinania lub tarcia zarówno w miejscach dawcy, jak i przeszczepu przez 1-2 tygodnie po operacji, aby zminimalizować przemieszczenie przeszczepu i zoptymalizować integrację.
  3. Sprawdzaj opatrunki rany podczas każdej wizyty kontrolnej i wymieniaj gazę wazelinową (petrolatum) w razie potrzeby. Nie zdejmuj siłą przylegającej gazy; Pozwalamy na spontaniczne odwarstwienie podczas epitelizacji, aby zapobiec zakłóceniom regenerującej się tkanki.
  4. Umów wizyty kontrolne na 1, 2, 4 i 12 tygodni po zabiegu.
  5. Zdobądź standaryzowane zdjęcia cyfrowe przy każdej wizycie, używając stałego aparatu w odległości rany, w stałych warunkach oświetleniowych oraz skali referencyjnej (np. sterylnej linijki) umieszczonej w tej samej płaszczyźnie co rana. Zapewnia to spójność oceny podłużnej.
  6. Mierz powierzchnię rany za pomocą oprogramowania ImageJ (National Institutes of Health (NIH), USA) za pomocą analizy planymetrycznej.
    1. Importuj standaryzowane zdjęcia ran do ImageJ
    2. Kalibruj skalę obrazów za pomocą linijki referencyjnej
    3. Ręcznie przerysuj margines rany za pomocą narzędzia do wyboru wielokątów.
    4. Obliczaj powierzchnię nawinięcia automatycznie za pomocą funkcji pomiarowej oprogramowania.
  7. Do oceny wyników definiuj całkowitą epitelizację jako pełne pokrycie powierzchni rany bez wysięku, wymogu opatrunku lub potrzeby interwencji wtórnej.
  8. Dokumentuj wszystkie powikłania pooperacyjne, w tym infekcję, martwicę tłuszczu, krwiaka, seromę lub opóźnione gojenie się rany.
    UWAGA: Utylizować wszystkie odpady biologiczne zgodnie z instytucjonalnymi przepisami dotyczącymi bezpieczeństwa biologicznego.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Łącznie ośmiu pacjentów z ubytkami tkanek miękkich typu ubytku urazowego zostało leczonych według opisanego protokołu.

Charakterystyka kohorty

W grupie było pięciu mężczyzn i trzy kobiety, o średnim wieku 51,5 ± 11,7 roku (zakres 38-74 lata). Wady znajdowały się na kończynie dolnej (n = 5), kończynie górnej (n = 2) oraz tułowiu (n = 1). Średnia maksyma...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Niniejsze badanie opisuje klinicznie stosowalny i powtarzalny protokół mechanicznego przetwarzania i przeszczepu mikrotłuszczu wzbogaconego w SVF w leczeniu ubytków tkanek miękkich typu ubytków pourazowych. Protokół jest przeznaczony do wdrożenia w miejscu opieki w standardowych warunkach operacyjnych i stawia na prostotę proceduralną, bezpieczeństwo oraz wykonalność ponad charakterystykę biologiczną. W tej niewielkiej serii klinicznej wszystkie leczone defekty wykazywały postępujące zamykanie rany i osiągnęły pełną epit...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do zgłoszenia.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Badanie to zostało wsparte przez Specjalny Program Specjalny Międzynarodowej Współpracy Naukowej i Technologicznej Prowincji Prowincji Hubei (Grant nr 2023EHA043) oraz Dział Urazów i Mikroortopedii Szpitala Zhongnan Uniwersytetu w Wuhan w ramach Narodowego Kluczowego Projektu Badań Klinicznych 2025 (Nr Projektu: 2025LCYJZX-ZD003). Autorzy serdecznie dziękują dr Qi Baiwenowi za jego wcześniejsze badania, które zainspirowały to badanie oraz za cenne wskazówki dotyczące metodologii klinicznej. Dziękujemy również zespołom pielęgniarskim i chirurgicznym Szpitala Zhongnan za pomoc w opiece nad pacjentem i w dalszej opatrzeniu.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
0,9% soli fizjologicznejBaxter Healthcare (lub odpowiednik)RóżneStosowany jako roztwór bazowy dla roztworu tumescentnego
Kaniula z tępym wtryskiem (22G i razy; 50 mm)CONPUVON (figure-materials-1;), ChinyDZ 22 razy; 50-C5Stosowany do wielowarstwowych wstrzyków mikrotłuszczu wzbogaconego SVF
Wirówka  Długoletnia Biotechnologia (figure-materials-2), ChinyLTA-1600Kliniczna wirówka zdolna do wygenerowania około 400 i razy; g
Aparat cyfrowy / smartfonDowolnyNie maStandaryzowana fotografia nawinięć podczas kontroli
EpinefrynaLokalna apteka szpitalnaRóżneDodano do soli fizjologicznej, aby uzyskać końcowe stężenie 1:500 000
Oprogramowanie ImageJ (wersja 1.53 lub nowsza)Narodowe Instytuty Zdrowia (USA)Wolne oprogramowanieWykorzystywane do planymetrycznego pomiaru powierzchni rany
Kanula liposukcyjna (2– 3 mm)Standardowy dostawca medycznyNie maWykorzystywane do pobierania tkanki tłuszczowej z miejsca dawcy
Złącze luer-lock (żeńskie na żeńskie)Becton Dickinson (lub odpowiednik)RóżneStosowany do mechanicznej emulgacji strzykawki między strzykawkami
Strzykawka z blokadą luer-lock (1, 5, 10, 20 mL)Hongda Medical Devices (figure-materials-3), ChinyNieokreślone (podaż instytucjonalna)Wykorzystywane do aspiracji, obróbki mechanicznej i wtrysku
Sterylny opatrunek / bandażApteka szpitalnaNie maDo pokrycia ran pooperacyjnych
Nożyczki chirurgiczne (sterylne)Guangzhou Baitang Medical Devices Co., Ltd.BT00301 (lub podobny model reprezentatywny)Wykorzystywane do mechanicznej fragmentacji tkanki tłuszczowej
Gaza wazelinowa (10 cm i razy; 10 cm)Huaxi Medical Dressing Co., Ltd. (figure-materials-4), ChinyNieokreślone (podaż instytucjonalna)Nieprzylegające opatrunki stosowane do leczenia ran pooperacyjnych

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Hidalgo, D. A. Aesthetic improvements in free-flap mandible reconstruction. Plastic and Reconstructive Surgery. 88 (4), 574-585 (1991).
  2. Pu, L. L. Q. Free flaps in lower extremity reconstruction. Clinics in Plastic Surgery. 48 (2), 201-214 (2021).
  3. Wong, C. H., Wei, F. C. Microsurgical free flap in head and neck reconstruction. Head & Neck. 32 (9), 1236-1245 (2010).
  4. Aronowitz, J. A., Lockhart, R. A., Hakakian, C. S. Mechanical versus enzymatic isolation of stromal vascular fraction cells from adipose tissue. SpringerPlus. 4, 713(2015).
  5. Sforza, M., et al. Mechanical isolation of stromal vascular fraction from adipose tissue: methods and cellular outcomes. Stem Cell Research and Therapy. 16 (1), 560(2025).
  6. Condé-Green, A., et al. Shift toward mechanical isolation of adipose-derived stromal vascular fraction: review of upcoming techniques. Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 4 (9), e1017(2016).
  7. Cervelli, V., et al. Application of enhanced stromal vascular fraction and fat grafting mixed with PRP in post-traumatic lower extremity ulcers. Stem Cell Research. 6 (2), 103-111 (2011).
  8. Senesi, L., et al. Mechanical and enzymatic procedures to isolate the stromal vascular fraction from adipose tissue: preliminary results. Frontiers in Cell and Developmental Biology. 7, 88(2019).
  9. Solodeev, I., Meilik, B., Gur, E., Shani, N. A closed-system technology for mechanical isolation of high quantities of stromal vascular fraction from fat for immediate clinical use. Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 11 (6), e5096(2023).
  10. Uguten, M., et al. Comparing mechanical and enzymatic isolation procedures to isolate adipose-derived stromal vascular fraction: a systematic review. Wound Repair and Regeneration. 32 (6), 1008-1021 (2024).
  11. Semina, E. V., et al. Improvement in nanofat preparation technology: simple and easy-to-use adipose tissue harvesting with Liporevive. JPRAS Open. 46, 187-199 (2025).
  12. Prakash, O., et al. Utility of fat grafting in chronic wounds. Indian Journal of Plastic Surgery. 57 (3), 201-207 (2024).
  13. Sbitan, L., Qandah, A., Alzraikat, N., Camargo, C. P. Adipose tissue and fat-derived products in wound, ulcer, and scar management: a systematic review. Frontiers in Surgery. 12, 1666776(2025).
  14. Qi, B. W., et al. Effect of negative pressure wound therapy combined with microfat grafting on diabetic foot wounds. Chinese Journal of Microsurgery. 43 (4), 371-373 (2020).
  15. Liu, D., et al. Clinical outcomes of fat particle grafting for reconstruction of cavity-type soft tissue defects. Chinese Journal of Injury Repair and Wound Healing (Electronic Edition). 15 (5), 351-354 (2020).
  16. Aronowitz, J. A., Ellenhorn, J. D. Adipose stromal vascular fraction isolation: a head-to-head comparison of four commercial cell separation systems. Plastic and Reconstructive Surgery. 132 (6), 932e-939e (2013).
  17. Carvalho, P. P., Gimble, J. M., Dias, I. R., Gomes, M. E., Reis, R. L. Xenofree enzymatic products for the isolation of human adipose-derived stromal/stem cells. Tissue Engineering Part C: Methods. 19 (6), 473-478 (2013).
  18. Bora, P., Majumdar, A. S. Adipose tissue-derived stromal vascular fraction in regenerative medicine: a brief review on biology and translation. Stem Cell Research and Therapy. 8 (1), 145(2017).
  19. Tiryaki, K. T., Cohen, S., Kocak, P., Canikyan Turkay, S., Hewett, S. In vitro comparative examination of the effect of stromal vascular fraction isolated by mechanical and enzymatic methods on wound healing. Aesthetic Surgery Journal. 40 (11), 1232-1240 (2020).
  20. Orgill, D. P., Bayer, L. R. Negative pressure wound therapy: past, present and future. International Wound Journal. 10 (Suppl. 1), 15-19 (2013).
  21. Argenta, L. C., Morykwas, M. J. Vacuum-assisted closure: a new method for wound control and treatment: clinical experience. Annals of Plastic Surgery. 38 (6), 563-576 (1997).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Stromal Vascular FractionMicrofat ProcessingSoft Tissue ReconstructionAdipose Tissue HarvestMechanical FragmentationSyringe EmulsificationFat GraftingWound EpithelializationAutologous TissueTraumatic Tissue Defects

Related Articles