Badanie to wykazuje, że Tanshinone IIA (Tan IIA) łagodzi włóknienie po zawale mięśnia sercowego, prawdopodobnie poprzez modulację IL-33/ST2, co pokazano na modelach zwierzęcych i dokowaniu molekularnym, a potwierdzone przez ELISA i Western Blot.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł badawczy
* These authors contributed equally
Badanie to wykazuje, że Tanshinone IIA (Tan IIA) łagodzi włóknienie po zawale mięśnia sercowego, prawdopodobnie poprzez modulację IL-33/ST2, co pokazano na modelach zwierzęcych i dokowaniu molekularnym, a potwierdzone przez ELISA i Western Blot.
Zawał mięśnia sercowego (MI), ciężka postać choroby wieńcowej, często prowadzi do włóknienia mięśnia sercowego, będącego kluczowym czynnikiem przyczyniającym się do dysfunkcji serca i niewydolności serca. Tkanka tłuszczowa naepikardza (EAT) jest coraz częściej powiązana z patologią sercowo-naczyniową poprzez modulację funkcji serca za pomocą cytokin. Tanshinone IIA (TanIIA), związek lipofilowy pochodzący z Salvia miltiorrhiza, wykazuje właściwości przeciwzapalne, antyoksydacyjne i przeciwwłókniowe. Celem tego badania było ocenę terapeutycznego potencjału TanIIA w łagodzeniu miokardowej fibrozy mięśnia sercowego po zakażeniu michologii oraz zbadanie jej podstawowych mechanizmów za pomocą integracyjnego podejścia łączącego eksperymenty in vivo oraz analizy in silico . Utworzono myszy model MI, a do oceny wiązania TanIIA z kluczowymi składnikami szlaku sygnalizacyjnego ekspresyjnego genu 2 (IL-33/ST2) ekspresyjnego szlaku stymulowanego przez interleukinę-33/stymulację wzrostu. Nasze wyniki wykazały, że leczenie TanIIA znacząco poprawiło funkcję serca, zmniejszyło uszkodzenia histologiczne oraz złagodziło włóknienie mięśnia sercowego, a także obniżyło poziom N-końcowego promózgowego peptydu natriuretycznego (NT-proBNP) oraz wysokoczułej troponiny serca I (hs-cTnI). TanIIA tłumiła także reakcje zapalne i stres oksydacyjny w surowicy, mięśniu sercowym i EAT. Mechanistycznie TanIIA obniżyła ekspresję IL-33 i ST2, tłumiła szlak różnicowania szlaku czynnika różnicującego szpiku szpikowego 88 (MyD88)/czynnika jądrowego kappa-B (NF-κB) oraz obniżyła poziom czynnika wzrostu transformującego β1 (TGF-β1). Analizy in silico wykazały również, że TanIIA wykazywał silne powinowactwa wiązawcze dla IL-33, ST2, MyD88 i NF-κB p65, przy czym najbardziej stabilna interakcja przewidziana jest dla ST2. Łącznie te wyniki wskazują, że TanIIA łagodzi włóknienie mięśnia sercowego wywołane przez MI, modulując zapalenie i stres oksydacyjny związany z EAT, potencjalnie poprzez wielocelowe hamowanie osi IL-33/ST2. Wyniki te wspierają TanIIA jako obiecującego terapeutycznego kandydata w leczeniu pozawałowej fibrozy mięśnia sercowego.
Zawał mięśnia sercowego, patologicznie definiowany jako śmierć kardiomiocytów z powodu przedłużonej niedokrwienia, pozostaje zagrażającym życiu zdarzeniem sercowo-naczyniowym1. Pomimo znaczących postępów w strategiach reperfuzji i farmakoterapii, MI pozostaje główną przyczyną zachorowalności i śmiertelności na całym świecie 2,3,4,5,6. Kluczowym patogenicznym skutkiem MI jest włóknienie mięśnia sercowego, czyli nadmierne odkładanie białek macierzy zewnątrzkomórkowej, które jest głównym czynnikiem późniejszych niepożądanych wyników klinicznych7. To włókniate bliznowacie, choć niezbędne do zapobiegania pęknięciu ściany komory, często staje się nieadaptacyjnym procesem naprawy izazwanym przez złożone szlaki zapalne i międzykomórkowe sygnały 5,7,8,9,10. Zastępując funkcjonalne mięśnie sercowe bliznami niekurczliwymi, nieadaptacyjne włóknienie prowadzi do zwiększonej sztywności komór, postępującej dysfunkcji serca, a ostatecznie do niewydolności serca 9,11. Dlatego badanie nowych terapii farmakologicznych, które celują i łagodzą włóknienie po zawale, jest kluczowym celem terapeutycznym dla poprawy długoterminowej zachorowalności i śmiertelności pacjentów.
Salvia miltiorrhiza (Danshen), tradycyjna medycyna chińska, oraz jej różne preparaty są szeroko stosowane w leczeniu chorób sercowo-naczyniowych. Tanshinone IIA, jego główny składnik lipofilowy, przypisuje się wiele właściwości kardioprotekcyjnych, w tym działanie przeciwmiażdżycowy, przeciwsercowo-niedokrwienne oraz antyoksydacyjne 12,13,14,15. Mechanistycznie TanIIA wywiera swoje działanie przeciwzapalne i przeciwfibrotyczne, modulując różnorodne szlaki sygnalizacyjne 13,14,15,16,17. Warto zauważyć, że wykazano, że TanIIA bezpośrednio atakuje adipocyty, tłumiąc ich reakcje zapalne i tym samym łagodząc dysfunkcje komórkowe18. Jednak czy te ochronne efekty TanIIA obejmują tkankę tłuszczową naepikardza, pozostaje do wyjaśnienia.
Tkanka tłuszczowa naepikardza, unikalny trzewny skład tłuszczu, jest silnie powiązana z patogenezą choroby wieńcowej (CAD), migotania przedsionków (AF) oraz niewydolności serca. Anatomicznie położone pomiędzy mięśniem sercowym a warstwą trzewną naepikardia bez pośredniej warstwy powięziowej, EAT umożliwia bezpośrednią komunikację parakrynu z sąsiednimi strukturami serca 19,20,21,22. W stanie fizjologicznym EAT jest kardioprotektywny, zapewnia wsparcie metaboliczne i uwalnia przeciwzapalne oraz antyoksydacyjne adipokiny 20,21,23,24,25,26. Natomiast podczas stanów patologicznych EAT staje się źródłem mediatorów prozapalnych, utleniających i profibrotycznych, które powodują niekorzystne remodelowanie serca 27,28,29,30. W konsekwencji sformułowano hipotezę, że TanIIA może hamować włóknienie mięśnia sercowego poprzez tłumienie odpowiedzi zapalnych i stresu oksydacyjnego w tłuszczu naepisercowym, potencjalnie poprzez nowy szlak sygnalizacyjny.
Interleukina-33, członek rodziny cytokin IL-131, jest znana ze swoich silnych właściwości przeciwhipertroficznych i przeciwfibrotycznych w układzie sercowo-naczyniowym25. Jego biologiczne efekty są pośredniczone przez odrębny kompleks receptorowy, ST2, który występuje w dwóch izoformach: receptorze transbłonowym (ST2L) inicjującym sygnalizację oraz rozpuszczalnym receptorze wabikowym (sST2), który sekwestrujeIL-3333. Klinicznie poziomy sST2 w surowicy są ostro podwyższone po zawale mięśnia sercowego (MI) i stanowią solidny marker prognostyczny dla niepożądanych skutków niewydolności serca i zapalenia mięśnia sercowego 33,34,35,36. Kanoniczna kaskada sygnalizacji IL-33/ST2L obejmuje rekrutację białka adaptora MyD88 oraz późniejszą aktywację TRAF6, co prowadzi do fosforylacji i degradacji inhibitora NF-κB (IκB) oraz w konsekwencji translokacji jądrowej NF-κB37,38. Ten szlak jest ściśle powiązany z innymi kluczowymi cytokiny zapalnymi; na przykład sygnalizacja IL-33/MyD88 może wspierać wydzielanie przeciwzapalnej cytokiny IL-1039, podczas gdy prozapalna cytokina TNF-α z kolei może wzmacniać odpowiedź zapalną poprzez aktywację NF-κB, aby wywołać ekspresję IL-33 40,41. Co ważne, zarówno IL-33, jak i ST2 są wyrażane w tkance tłuszczowej, gdzie uważa się, że wywierają lokalne działanie przeciwzapalne 31,42,43. Jednak to, czy efekty kardioprotekcyjne TanIIA wiążą się z modulacją osi IL-33/ST2, pozostaje nieznane.
Dlatego niniejsze badanie zostało zaprojektowane do przetestowania głównej hipotezy, że TanIIA zapobiega włóknieniu mięśnia sercowego poprzez łagodzenie stanu zapalnego i stresu oksydacyjnego wynikającego z tkanki tłuszczowej naepikardia poprzez modulację szlaku IL-33/ST2. Konkretnie wysunęliśmy hipotezę, że działanie terapeutyczne jest napędzane bezpośrednim, wielocelowym zaangażowaniem TanIIA w kluczowe białka w tej kaskadzie sygnalizacyjnej. Aby to potwierdzić, przyjęliśmy podwójne podejście. Najpierw wykorzystano model szczura zawału mięśnia sercowego, aby potwierdzić skuteczność TanIIA in vivo w łagodzeniu niekorzystnych remodelacji serca. Po drugie, aby zapewnić bezpośrednią molekularną podstawę dla tych obserwacji, zastosowano dokowanie obliczeniowe do scharakteryzowania potencjalnego wiązania TanIIA z czterema kluczowymi węzłami szlaku — IL-33, ST2, MyD88 i NF-κB p65. Poprzez badanie mechanizmu od poziomu tkanki aż po konkretne zdarzenia wiązania molekularnego, celem tego badania mają na celu stworzenie nowatorskich mechanistycznych ram dla efektów kardioprotekcyjnych TanIIA.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wszystkie eksperymentalne procedury i praktyki dobrostanu zwierząt były prowadzone ściśle zgodnie z Etycznymi Przepisami dotyczącymi Opieki i Wykorzystania Zwierząt Laboratoryjnych Komitetu Etycznego Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Jiangxi (nr JZLLSC2023-0702), Chiny.
Symulacje dokowania molekularnego
Zastosowano podejście in silico do dokowania molekularnego do badania bezpośrednich interakcji między TanIIA a IL-33, ST2L, MyD88 i NF-κB p65. Współrzędne 3D TanIIA zostały pobrane z bazy danych PubChem, a początkowy plik SDF został następnie przekonwertowany do formatu PDB. Struktura krystaliczna IL-33 (PDB ID: 4KC3), ST2L (PDB ID: 4KC3), MyD88 (PDB ID: 7L6W) oraz NF-κB p65 (PDB ID: 1NFI) została pozyskana z banku białek. Początkowe przetwarzanie receptora przeprowadzono w PyMOL (v2.3.4), gdzie usunięto cząsteczki wody i oryginalne ligandy, a następnie dalsze przygotowanie w AutoDockTools do dodawania wodoru i przypisywania ładunku. Obie cząsteczki zostały ostatecznie przekształcone w format PDBQT. AutoDock Vina (v1.1.2) został wykorzystany do przeprowadzenia symulacji dokowania w ramach zdefiniowanego grid boxa centrowanego wokół aktywnego miejsca. Optymalna pozycja wiązania została wybrana na podstawie najniższej energii wiązania, a szczegółowe interakcje zidentyfikowano za pomocą narzędzia internetowego PLIP. Ostateczna zadokowana konformacja została zwizualizowana za pomocą PyMOL (wersja 2.3.4).
Zwierzęta
Samce szczurów Sprague-Dawley (SD), klasa SPF, w wieku 6 tygodni i ważący 200 ± 20g (certyfikat nr SCXK(Su)2023-0009). Szczury były utrzymywane w ustandaryzowanych warunkach, w tym w 12-godzinnym cyklu światła/ciemności oraz temperaturze 22 °C ± 2 °C. Podczas eksperymentu zwierzęta miały nieograniczony dostęp zarówno do jedzenia, jak i wody.
Protokół eksperymentalny
Model zawału mięśnia sercowego na szczurze został opracowany poprzez podwiązanie lewej przedniej zstępującej (LAD) tętnicy wieńcowej. Szczury operowane przez fikcję przechodziły te same zabiegi chirurgiczne bez podwiązywania LAD. Krótko mówiąc, szczury były znieczulone poprzez intraperitonealną iniekcję 1% pentobarbitalu sodu (50 mg/kg), a następnie intubację i wentylację endotchawicową. Wykonano torakotemię lewej strony, aby odsłonić serce. Następnie LAD został podwiązany niechłannym szwem 4-0. Pomyślna indukcja indukcji MI została potwierdzona przez uniesienie segmentu ST na ciągłym elektrokardiogramie oraz widoczne zblednięcie przedniej ściany lewej komory. Po operacji szczury otrzymywały cefoksytynę sodową (200 mg/kg/d, IP) przez trzy dni. Dwadzieścia cztery godziny po operacji ocalałe szczury zostały losowo przydzielone do sześciu grup (n = 10 na grupę):
Grupa pozorowa: otrzymała zastrzyki soli fizjologicznej dootrzewnowej (1 mL·kg-1·dzień-1).
Grupa MI: otrzymała zastrzyki soli fizjologicznej do otrzewnowej (1 mL·kg-1·dzień-1).
Grupa TanIIA-L (niskie dawki): otrzymała zastrzyki TanIIA dootrzewnowe (7,5 mg·kg-1·dzień-1).
Grupa TanIIA-M (średnia dawka): otrzymała zastrzyki TanIIA wewnątrzotrzewnowe (15 mg·kg-1·dzień-1).
Grupa TanIIA-H (wysoka dawka): otrzymała zastrzyki TanIIA dootrzewnowe (30 mg·kg-1·dzień-1).
Grupa XST (kontrola pozytywna): otrzymała doustną dawkę valsartanu (30 mg·kg-1·dzień-1).
Wszystkie terapie były podawane codziennie przez 28 kolejnych dni. Dawki TanIIA i XST zostały wybrane na podstawie wcześniejszych badań oraz naszych wstępnych, nieopublikowanych danych44,45.
Elektrokardiogram (EKG) i echokardiografia
Po 28 dniach leczenia funkcja serca została oceniona za pomocą przeztorakalnej echokardiografii. W przypadku 2% znieczulenia izofluranowego (tryb ruchu) wykonano obrazy trybu M w celu określenia średnic lewej komory na końcu rozkurczowym/skurczowym (LVIDd/s). Frakcja wyrzutowa lewej komory (LVEF) oraz skrócenie frakcyjne (LVFS) zostały następnie obliczone na podstawie średnio trzech kolejnych cykli sercowych. Dodatkowo przed operacją, 15 minut po ligacji oraz w punkcie końcowym eksperymentalnym rejestrowano elektrokardiogramy w celu monitorowania aktywności elektrycznej serca.
Pobieranie próbek i barwienie 2,3,5-tryfenylotrazolu chlorkiem (TTC)
Krew z aorty brzusznej była wirowana w 1370 × g przez 15 minut w celu wyizolowania surowicy przechowywanej w temperaturze -80 °C. Serce i tkanka tłuszczowa naepisercowego zostały szybko usunięte i zważone. Do analiz molekularnych tkanki stref granicznych EAT i zawału były mrożone w ciekłym azocie i przechowywane w temperaturze -80 °C. Inne próbki tkanek zostały utrwalone w 4% paraformaldehydzie do badań histologicznych. Dodatkowo wybrane serca były zamrażane w temperaturze -20 °C, przecinane i barwione metodą TTC w celu oceny wielkości zawału. Materiały i tkanki zwierzęce są wykorzystywane i traktowane zgodnie z przepisami bezpieczeństwa laboratoryjnego.
Badanie histologiczne
Do oceny histologicznej sekcje parafinowe poddawano barwieniu hematoksyliny i eozyny (H&E) w celu obserwacji morfologii mięśnia sercowego. Trójchromowe barwienie Massona wykorzystano do oceny stopnia włóknienia mięśnia sercowego oraz wielkości adipocytów naepikardlicznych, przy czym ilościowo określano frakcję objętości kolagenu (CVF). Dodatkowo, stosunek kolagenu typu I do typu III w obszarze niezadziornym został określony przez barwienie pikrosirius red (PSR). Wszystkie sekcje zostały zeskanowane cyfrowo do analizy ilościowej.
Immunohistochemia
Sekcje mięśnia sercowego z osadzeniem parafiny zostały odparafinizowane i ponownie nawodnione. Pobranie antygenu przeprowadzono z użyciem buforu cytrynianowego (pH 6,0). Cięcia blokowano 3% BSA, a następnie inkubowano przez noc w temperaturze 4 °C z pierwotnymi przeciwciałami przeciwko kolagenowi I, kolagenowi III, IL-33, ST2, MyD88, NF-κB p65 i TGF-β1. Następnie sekcje inkubowano z przeciwciałem wtórnym znakowanym HRP przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Barwienie było wizualizowane za pomocą DAB, a jądra były kontrumaowane hematoksyliną. Obrazy były rejestrowane za pomocą skanera cyfrowego i analizowane za pomocą oprogramowania do analizy obrazów, aby ilościowo określić zintegrowaną gęstość optyczną (IOD) pozytywnego barwienia.
Test immunosorbentowy związany z enzymami
Stężenia hs-cTnI, NT-proBNP, IL-33 i ST2 zostały ilościowo określone w próbkach surowic. Dodatkowo zmierzono poziomy IL-10 i TNF-α w surowicy, homogenatach mięśnia sercowego oraz lizatach tkanki tłuszczowej naepikardia. Wszystkie testy przeprowadzono przy użyciu komercyjnie dostępnych zestawów enzymatycznych immunosorbentnych (ELISA) zgodnie z protokołami producenta.
Western blotting
Całkowite białko zostało wyekstrahowane z homogenatów tkankowych, a stężenia określone za pomocą testu kwasu bicynchoninowego (BCA). Równe ilości białka zostały oddzielone elektroforezą żelu sodu dodecylosiarczanu i poliakrylamidu (SDS-PAGE) i przeniesione do membran fluorku poliwinylidenu (PVDF). Po zablokowaniu mlekiem beztłuszczowym o stężeniu 5% błony były inkubowane przez noc w temperaturze 4 °C z pierwotnymi przeciwciałami przeciwko IL-10, czynnikowi martwicy nowotworów-α (TNF-α), IL-33, ST2, NF-κB p65, TGF-β1 oraz GAPDH (1:1000). Następnie błony były inkubowane z przeciwciałem wtórnym sprzężonym z HRP (1:5000) i wizualizowane za pomocą odczynnika ECL. Intensywności pasmowe były ilościowo określane za pomocą oprogramowania, a poziomy białek normalizowano do GAPDH jako wewnętrzną kontrolę.
Analiza statystyczna
Wszystkie analizy statystyczne przeprowadzano przy użyciu oprogramowania do statystyki medycznej. Dane są przedstawiane jako średnia ± błąd standardowy średniej. Do porównań między dwiema niezależnymi grupami zastosowano test t. W przypadku wielu grup zastosowano jednokierunkowy lub dwukierunkowy test ANOVA, a następnie test Tukeya post hoc. We wszystkich analizach P < 0,05 uznano za istotne statystycznie.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wpływ TanIIA na funkcję serca u szczurów z zawałem mięśnia sercowego (Rysunek 1)
Stan zdrowia i zmiany masy ciała: Szczury z grupy MI wykazywały zły stan ogólny, z wydłużeniem brzucha, natomiast szczury z grupy TanIIA wykazywały poprawę zdrowia, zwiększone spożycie pokarmu i wody oraz zwiększoną aktywność. Po 4 tygodniach zaobserwowano istotny wzrost masy ciała u szczurów z grupy TanIIA w porównaniu do tych z grupy MI (P < 0,01) ...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Niniejsze badanie bada wpływ TanIIA na włóknienie mięśnia sercowego po zawale mięśnia sercowego oraz mechanizmy leżące u podstaw tego procesy. Główne ustalenia są następujące: (1) TanIIA łagodzi niekorzystne przebudowy serca i poprawia funkcjonowanie serca poprzez hamowanie włóknienia serca. (2) Stwierdzono, że TanIIA hamuje włóknienie mięśnia sercowego poprzez tłumienie odpowiedzi zapalnych i stresu oksydacyjnego w tłuszczu naepisercowym. (3) TanIIA pośredniczy w działaniach antyfibrotycznych poprzez szlak sygnalizacyjn...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy deklarują, że nie mają znanych konkurujących ze sobą interesów finansowych ani relacji osobistych, które mogłyby wpłynąć na prace opisane w tym artykule.
Badania były wspierane przez Główną Dyscyplinę Prowincji Jiangxi, Dyscyplinę Medycyny Integracyjnej Chińskiej i Zachodniej, Uniwersytet Medycyny Chińskiej w Jiangxi (zxyylxk20220103). Dalsze finansowanie pozyskano z wielu inicjatyw wspieranych przez Xiaomin Wang, w tym z Projektu Badawczego Nauki i Technologii Departamentu Edukacji Prowincji Jiangxi (GJJ2200940), Projektu Zespołu Nauczycielskiego Wysokiego Szczebla Jiangxi (2020008), Projektu Reformy Nauczania Podyplomowego w Jiangxi (JXYJG2019117), Kursów Wysokiej Jakości dla Studentów Jiangxi (2020041) oraz Projektu Innowacji Studentów Medycyny Chińskiej Uniwersytetu Jiangxi (2023091). Fundator uczestniczył w projektowaniu badania, decyzji o publikacji oraz przygotowaniu rękopisów.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Zestaw do ilościowania białek BCA | Thermo Fisher Corporation | PICPI23223 | |
| Zestaw CAT | Biotechnologia Shanghai Enzyme Link | 202211202 | |
| Przeciwciało I | Wuhan Servicebio Biotechnology Co., Ltd | GB114197 | |
| Przeciwciało przeciwciało kolagenu III | Shenyang Wanleibio Biotechnology Co., Ltd | WL03186 | |
| Przeciwciało GAPDH | Korporacja Technologii Sygnalizacji Komórkowej | #5174 | |
| GraphPad Prism | GraphPad Software Corporation | Wersja 9.0 | |
| Zestaw GSH | Biotechnologia Shanghai Enzyme Link | 202211131 | |
| H& Roztwór barwienia E | Beijing Solarbio Technology Co., Ltd | H8070; G1100 | |
| Przeciwciało przeciw królikom IgG dla kóz znakowanych HRP | Beijing Solarbio Technology Co., Ltd | SE134 | |
| Hs-cTnI Zestaw | Shanghai Yuanjie Biotechnology Co., Ltd | 20220808 | |
| Przeciwciało IL-10 | Shenyang Wanleibio Biotechnology Co., Ltd | WL03088 | |
| IL-10 Zestaw | Shanghai Yuanjie Biotechnology Co., Ltd | 202211172 | |
| IL-33 Zestaw | Shanghai Yuanjie Biotechnology Co., Ltd | 202211192 | |
| Przeciwciało IL-33 | Shenyang Wanleibio Biotechnology Co., Ltd | WL04438 | |
| Oprogramowanie ImageJ | Narodowe Instytuty Zdrowia | wersja Fiji | |
| Image-Pro | Media Cybernetics, USA | Wersja 6.0 | |
| Samce szczurów Sprague-Dawley (SD) | Jiangsu Jicui Yaokang Biotechnology Co., Ltd | SCXK(Su)2023-0009 | |
| Zestaw do barwienia Masson | Wuhan Bolf Biotechnology Co., Ltd | 20221218 | |
| Zestaw MDA | Biotechnologia Shanghai Enzyme Link | 202211171 | |
| Przeciwciało MyD88 | Shenyang Wanleibio Biotechnology Co., Ltd | WL02494 | |
| NT-proBNP Zestaw | Shanghai Yuanjie Biotechnology Co., Ltd | 20220805 | |
| Czynnik jądrowy kappa-B(NF-κ Przeciwciało B)(s65) & Nbsp; | Abmart Corporation | TP56372 | |
| Open Babel | Projekt narzędzi do cheminformatics open source | Wersja 2.3.2 | |
| Membrany fluorku poliwinylidenu (PVDF) | Merck Millipore | R9M2784 | |
| Rozwiązanie PSR | Beijing Solarbio Technology Co., Ltd | G1472 | |
| Zestaw SOD | Biotechnologia Shanghai Enzyme Link | 202211201 | |
| Przeciwciało ST2 | Proteintech Group Corporation | 11920-1-AP | |
| Zestaw ST2 | Shanghai Yuanjie Biotechnology Co., Ltd | 202211183 | |
| Statystyczne rozwiązania produktowe i usługowe (SPSS) | IBM Corporation | Wersja 26.0 | |
| Zastrzyk sodu sulfotanshinonu | Shanghai Pharmaceutical First Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd | 2012303 | |
| Superczuły luminescencyjny odczynnik ECL | Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd | MA0186 | |
| TGF i beta; 1 przeciwciało | ABclonal Corporation | A2124 | |
| Kapsuła Titanvin Valsartan | Hunan Qianjin Xiangjiang Pharmaceutical Co., Ltd | 211120 | |
| TNF-α Zestaw | Shanghai Yuanjie Biotechnology Co., Ltd | 202211202 | |
| TNF-α Przeciwciało | Shenyang Wanleibio Biotechnology Co., Ltd | WL01581 | |
| Rozwiązanie TTC | Fuzhou Phygene Biotechnology Co., Ltd | 20210620 | |
| System ultradźwiękowy o ultrawysokiej rozdzielczości dla małych zwierząt | VEVO | Vevo 2100 |