Wpływ akupunktury ustnej z kontrolowaną przez pacjenta analgezją na ból, stan zapalny i krzepnięcie u pacjentów z rakiem żołądka

Podsumowanie

Przedstawiamy protokół badania akupunktury policzkowej + PCIA u 142 pacjentów z GC, aby zbadać ból, stan zapalny, krzepnięcie oraz mechanizmy przeciwbólowe.

Streszczenie

Akupunktura ustna w połączeniu z analgezją kontrolowaną przez pacjenta (PCIA) jest powszechnie stosowana po operacji. Badanie to koncentrowało się na efektach akupunktury w połączeniu z PCIA na ból pooperacyjny, reakcję zapalną oraz funkcję krzepnięcia u pacjentów z rakiem żołądka (GC). Od marca 2024 do stycznia 2025 roku wybrano 142 pacjentów z GC, którzy zostali przydzieleni do grupy rutynowej (79 przypadków) oraz grupy akupunktury policzkowej (63 przypadki). Zidentyfikowano poziomy mediatorów bólu w surowicy (SP, PGE2, β-EP i Glu), markery zapalne (IL-6, TNF-α, IL-10 i CD11b), parametry funkcji krzepnięcia (PT, APTT, TT, D-D i TAT), aktywację płytek krwi (GP IIb/IIIa, CD62P, GMP-140 i PAC-1). Indeksy serologiczne wskazywały na spadki po leczeniu SP, PGE2 i glu, a także wzrost β-EP w grupie akupunktury policzkowej (P<0,05). Ponadto w grupie stosującej akupunkturę policzkową zaobserwowano wyraźniejsze spadki IL-6 i CD11b oraz wzrost IL-10 w porównaniu do grupy rutynowej (P<0,05). Jeśli chodzi o funkcję krzepnięcia krwi, w grupie z akupunkturą policzkową zaobserwowano niższe wartości D-D, TAT i sCD62P po leczeniu w porównaniu z grupą rutynową (P<0.05). Tymczasem GP IIb/IIIa, CD62P, GMP-140 i PAC-1 w grupie akupunkturowej policzkowej były niższe niż w grupie rutynowej (P<0,05). Akupunktura ustna w połączeniu z PCIA może wywierać działanie przeciwbólowe poprzez wiele mechanizmów, w tym regulację równowagi mediatorów przeciwbólowych, łagodzenie stanu zapalnego, poprawę funkcji śródbłonka naczyń oraz korekcję stanu nadkrzepnięcia. Może również poprawić kliniczne wyniki leczenia przeciwbólowego i ograniczyć spożycie opioidów przy zapewnieniu odpowiedniego bezpieczeństwa.

Wprowadzenie

Laparoskopowa operacja raka żołądka (GC) jest małoinwazyjna, jednak ból pooperacyjny, reakcja hiperzapalna oraz zaburzenia krzepnięcia pozostają istotnymi problemami utrudniającymi powrót pacjenta do zdrowia¹. Analgezja kontrolowana przez pacjenta (PCIA) jest głównym programem analgezji pooperacyjnej w praktyce klinicznej², a jej efekt został wielokrotnie potwierdzony ^3,4. W ostatnich latach Tradycyjna Medycyna Chińska (TCM) została międzynarodowo doceniona za doskonałe bezpieczeństwo w zastosowaniach klinicznych ^5,6. Akupunktura policzkowa, jako rozwijająca się gałąź technologii mikroakupunktury TCM, została potwierdzona w wielu badaniach, które w połączeniu z PCIA mogą lepiej poprawić ból pacjentów po operacji⁷. Zhu DX i in. wyraźnie wskazali, że akupunktura położna w połączeniu z PCIA może zmniejszyć ból pooperacyjny u pacjentów z GC⁸. Jednak badanie wykazało, że badania analgetyczne w akupunkturze policzkowej w połączeniu z PCIA zazwyczaj obserwują zmiany bólu u pacjentów z perspektywy subiektywnej, takiej jak skala analogowa wzroku (VAS)⁹. Niewiele badań badało mechanizm łączenia akupunktury z PCIA na podstawie obiektywnych wskaźników klinicznych.

To badanie jest pierwszym, które bada wpływ akupunktury policzkowej w połączeniu z PCIA na obiektywne wskaźniki kliniczne, w tym mediatory bólu, funkcję krzepnięcia i aktywację płytek krwi u pacjentów z GC, potwierdzając tym samym wielosystemowe efekty regulacji akupunktury ustnej na organizm człowieka. Wyniki tego badania pomogą lekarzom lepiej zrozumieć mechanizm przeciwbólowy akupunktury policzkowej w połączeniu z PCIA.

Protokół

Badanie uzyskało zgodę Szpitala Uniwersytetu Jiangnan i ściśle przestrzegało zasad Deklaracji Helsińskiej. Jest to badanie obserwacyjne retrospektywne, a rejestracja do badania klinicznego nie była wymagana zgodnie z odpowiednimi krajowymi wytycznymi dotyczącymi badań retrospektywnych w momencie projektowania i wdrażania badania. Odczynniki, materiały eksploatacyjne i potrzebny sprzęt są wymienione w Tabeli Materiałów.

1. Osoby badawcze

Przeprowadzono retrospektywne badanie na 142 pacjentach GC przyjętych do naszego szpitala w okresie od marca 2024 do stycznia 2025 roku. Wielkość próby została obliczona za pomocą oprogramowania PASS.

Kryteria włączenia: (1) Genetyczna Krzyż Mineralna (stopnie I-III w TNM); (2) Zaplanowana lub ukończona standardowa laparoskopowa operacja radykalna z rozwarstwieniem węzła chłonnego D2; (3) Wiek 40–75 lat, niezależnie od płci, z indeksem masy ciała (BMI) 18,5–28 kg/m²; (4) Brak przedoperacyjnej neoadiuwantnej chemioterapii; (5) Zakaz stosowania leków przeciwbólowych poza protokołem w ciągu 24 godzin od operacji.

Kryteria wykluczenia: (1) Ciężka niewydolność serca/wątroby/nerek, choroby autoimmunologiczne, aktywne infekcje lub zaburzenia krzepnięcia; (2) Urazy skóry lub infekcje twarzy; (3) Długotrwałe stosowanie leków przeciwzakrzepowych/przeciwpłytowych (np. warfaryna, klopidogrel przez >1 tydzień); (4) Przewlekła historia bólu (wynik Skali Analogowej Wzrokowej [VAS] ≥4 utrzymuje się > 3 miesiące); (5) Zaburzenia psychiatryczne lub poznawcze; (6) Wcześniejsze leczenie akupunktury.

Wśród nich 79 pacjentów otrzymało standardowe zmartwienie pooperacyjne (grupa rutynowa), a kolejnych 63 pacjentów również otrzymało terapię akupunkturą policzkową (grupa akupunktury policzkowej) (Rysunek uzupełniający 1). Obie grupy wykazały porównywalne dane wyjściowe, takie jak wiek, płeć i BMI (P>0,05, Tabela 1).

2. Grupowanie i interwencje

Pompa PCIA (sufentanyl 1,5 μg/kg + tropisetron 10 mg, dawka tła 2 mL/h), heparyna o niskiej masie molekularnej (4000 IU dziennie od 12 godzin po operacji) oraz cefuroksymu (1,5 g co 8 godzin przez 24 godziny), a pobieranie krwi żylnej pod kątem funkcji krzepnięcia wykonano o 08:00 następnego dnia (12 godzin po podaniu LMWH, przed kolejną dawką), aby uniknąć bezpośredniego wpływu LMWH na wykrywanie wskaźnika krzepnięcia. Wszyscy pacjenci w obu grupach otrzymali powyższą standaryzowaną pooperacyjną analgezję, leki przeciwzakrzepowe i leczenie przeciwzakażeniowe, z rutynowym monitorowaniem parametrów życiowych i opiece pooperacyjnej zgodnie z kliniczną ścieżką laparoskopową radykalnej gastrektomii dla GC.

1. Akupunktura policzkowa
   Interwencja akupunktury poustnej rozpoczęto 12 godzin po operacji, raz dziennie przez 3 kolejne dni, przy tym samym wyborze punktu akupunkturowego i metodzie operacyjnej dla każdego leczenia: lewy grzbietowy, obustronny punkt Zhongjiao i Xiaojiao. Dezynfekcja alkoholowa była wykonywana przed wkłuciem igły. Używając specjalistycznych jednorazowych igieł do akupunktury policzkowej (0,18 mm × 13 mm), praktykujący stosowali nacisk na rurkę przed szybkim przenikaniem skóry, a następnie wprowadzali igły pionowo na głębokość 3 mm z czasem zatrzymania 30 minut. Wszystkie wbijanie i manipulacje igłami były wykonywane przez licencjonowanych akupunkturzystów TCM z ponad 5-letnim doświadczeniem klinicznym w akupunkturze policzkowej, aby zapewnić standaryzację interwencji.

3. Pobieranie krwi i badania

Krew żylna na czczo pobrano od pacjentów 1 dzień przed operacją (stan początkowy, przed leczeniem) oraz 72 godziny po operacji (po leczeniu) w następujących badaniach:

1. Test immunosorbentny związany z enzymami plazmowymi (ELISA)
   Do płytki z 96 dołkami dodano przeciwciało wychwytujące (rozcieńczone w 1:100) i inkubowano w temperaturze 4 °C przez noc. Każda studnia została zablokowana 200 μL 5% BSA-PBS, następnie dodano 100 μL próbki osocza do badania (β-EP przy rozcieńczeniu 1:2, TAT przy rozcieńczeniu 1:10) oraz inkubacji 2 godziny. Następnie dodano biotinylowane przeciwciało wtórne (1:2000), Streptawidyna-HRP oraz substrat TMB, z wartością OD zmierzoną na poziomie 450 nm.
2. Serum ELISA
   50 μL standardu/próbki zostało połączone z 50 μL odczynnika wykrywającego przeciwciała przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Po dodaniu 100 μL streptawidyny-HRP reakcja została opracowana przy użyciu 100 μL substratu TMB i zatrzymana na 2 M H₂SO₄. Poziomy IL-6, TNF-α i IL-10 zostały określone za pomocą pomiaru podwójnej długości fali przy 450 nm/540 nm.
3. Radioimmunotest
   Plazma EDTA (1 mL) była zakwaśona 1% TFA i poddawana ekstrakcji w fazie stałej przy użyciu kolumny C18. Po dodaniu wtórnego kompleksu przeciwciało-PEG mieszanina była odwirowana (3500 × g, 20 min), a radioaktywność SP (cpm) mierzono za pomocą licznika γ.
4. Test chemiluminescencji:
   Do wykrywania poziomów PGE2 użyto zautomatyzowanego analizatora elektrochemiluminescencji.
   1. Cytometria przepływowa
      Po inkubacji z 100 μL krwi pełnej z EDTA antykoagulowanym oraz 5 μL przeciwciał dodano 2 ml buforu BD Pharm Lyse. Próbki zostały przeanalizowane cytometrem przepływowym, a średnia intensywność fluorescencji (MFI) CD11b, GP IIb/IIIa, CD62P, GMP-140 i PAC-1 została obliczona za pomocą FlowJo v10.
   2. Analiza funkcji krzepnięcia
      Do wykrywania poziomów PT, APTT, TT i D-D zastosowano zautomatyzowany analizator krzepnięcia.

4. Analiza statystyczna

Analiza danych została przeprowadzona przy użyciu SPSS 26.0. Do porównania danych liczenia [n(%)] zastosowano testy chi-kwadrat. Zmienne ciągłe, podawane jako χ±s), analizowano za pomocą testu t-test niezależnych próbek (z testami t-parami do porównań wewnątrzgrupowych). Korekta Bonferroniego została użyta do korekty wartości P dla wielokrotnych porównań między różnymi wskaźnikami wynikowymi, a wartości P <0,05 uznano za istotne statystycznie.

Wyniki

Wpływ akupunktury ustnej w połączeniu z PCIA na mediatory bólu w surowicy
Podstawowe poziomy mediatorów bólu były podobne w obu grupach (P>0,05). Po interwencji obie grupy wykazały istotne zmiany w poziomach tych mediatorów bólu, z wyraźnym spadkiem SP, PGE2 i Glu oraz podwyższonym β-EP (P<0,05). Jednak grupa akupunktury policzkowej wykazała wyraźniejsze poprawy niż grupa rutynowa (P<0,05) (Rysunek 1).

Wpływ akupunktury policzkowej w ...

Dyskusja

To badanie jest pierwszym, które systematycznie ocenia wielocelowe efekty regulacyjne akupunktury policzkowej w połączeniu z terapią PCIA na mediatory bólu, reakcje zapalne oraz funkcję krzepnięcia u pacjentów poddawanych laparoskopowi GC. Wyniki wskazały, że akupunktura ustna nie tylko skutecznie łagodziła ból (co potwierdzają obniżenie SP, PGE2 i glu oraz podwyższony poziom β-EP), ale także zmniejszała stan zapalny (co odzwierciedla selektywne hamowanie ekspresji IL-6 i neutrofili CD11b), jednocześnie łagodząc nadkrzep...

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Akupunktura policzkowa	Maanshan Bond Medical Devices Co., LTD	Numer rejestracyjny: 20202080581	Terapia mikronakłuciowaną w leczeniu chorób ogólnoustrojowych poprzez nakłuwanie konkretnych punktów akupunkturnych na policzku
Cefuroksym.	Glaxo Wellcome UK Limited	Numer serii: H20020200	Antybiotyki cefalosporyny drugiej generacji wywierają szerokospektralne działanie antybakteryjne, hamując syntezę ścian komórkowych bakteryjnych.
Analizator elektrochemiluminescencji	Roche	COBAS E 411	Sprzęt do wykrywania medycznego oparty na technologii elektrochemiluminescencji wykrywa substancje śladowe poprzez reakcje antygen-przeciwciała połączone z sygnałami elektroluminescencji.
Cytometr przepływowy	Beckman Coulter	CytoFLEX nano	Instrumenty oparte na zasadzie detekcji optycznej mierzą fizyczne i chemiczne parametry charakterystyczne komórek w przepływie cieczy, aby umożliwić automatyczną analizę i sortowanie komórek. ‌
W pełni automatyczny analizator krzepnięcia krwi	Mindray	C2000-A	Poziomy czynników krzepnięcia, systemów antykoagulacyjnych i układów fibrynolitycznych w próbkach krwi ludzkiej i zwierzęcej zostały wykryte i przeanalizowane za pomocą technik takich jak metoda krzepnięcia, metoda chromogenicznego substratu oraz immunoturbidymetria.
Zestaw IL-10 ELISA	Beijing Yishao Shenzhou Technology Co., LTD	SEKA10947
Zestaw IL-6 ELISA	Beijing Yishao Shenzhou Technology Co., LTD	KIT10395A	Biologiczne narzędzie wykrywania oparte na specyficznych reakcjach antygen-przeciwciało oraz systemach katalitycznego amplifikacji enzymatycznej jest szeroko stosowane w medycynie, biologii i monitoringu środowiskowym.
Heparyna o niskiej masie molekularnej	Hainan General Alliance Pharmaceutical Co., LTD	Numer serii: H20010300	Lek przeciwzakrzepowy zależny od trombiny III – głównie stosowany w zapobieganiu i leczeniu zakrzepicy żył głębokich, a także odpowiedni do zapobiegania zakrzepom krwi podczas hemodializy.
Pompa PCIA	Henan Longshan Medical Devices Co., LTD	Numer rejestracyjny: 20202140237	Urządzenie medyczne, które pomaga pacjentom łagodzić ból spowodowany operacją, urazem lub chorobami przewlekłymi poprzez ciągłe lub na żądanie dostarczanie środków przeciwbólowych organizmowi.
Analizator radioimmunoasej	Revvity Biomedical (Shanghai) Co., LTD	GC-911R	Instrument używany do określania stopnia wiązania radioaktywnych markerów i przeciwciał w organizmie, często stosowany do pomiaru hormonów, leków, markerów nowotworowych itp. we krwi.
SPSS	IMB	v.26.0	Wykorzystywane do statystyki danych, eksploracji danych oraz analizy predykcyjnej.
Sufentanyl	EuroCept B.V.	Numer partii: H20150125	Silny opioidowy środek przeciwbólowy oraz specyficzny μ -Agonista receptora.
TNF-α Zestaw ELISA	Lubisz (Shanghai) Life Sciences Co., LTD	YLK1341E
Tropisetron	Fu 'an Grupa Farmaceutyczna Ningbo Tianheng Pharmaceutical Co., LTD	Numer partii: H20052460	Antagonista receptora 5-HT3, głównie stosowany w zapobieganiu i leczeniu nudności, wymiotów oraz wymiotów pooperacyjnych spowodowanych chemioterapią nowotworową.