Artykuł metodologiczny

Bex-Plex Umożliwia jednoczesne wizualizacje markerów białkowych i transkryptów kwasów ribonucleinowych dla głębokiego profilowania przestrzennego nienaruszonych tkanek

DOI:

10.3791/70303

⸱

3 lipca 2026

 ,  ,  ,  , 
1Department of Pediatrics, Division of Allergy, Immunology, and Rheumatology, University of California San Diego

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Przedstawiamy tutaj protokół łączenia iteracyjnego barwienia białek (IBEX) z technologią hybrydyzacji in situ RNAscope dla głębokiej przestrzennej fenotypizacji nietkniętych, zamrożonych tkanek do zastosowań wysokiej rozdzielczości profilowania przestrzennego.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Przedstawiamy protokół umożliwiający jednoczesne przestrzenne profilowanie markerów białkowych i kwasów rybonukleinowych (RNA) z rozdzielczością pojedynczych komórek w nienaruszonych tkankach. Jednym z głównych problemów dotyczących nowotworów stałych jest niemożność przewidzenia reakcji pacjenta na interwencję terapeutyczną. Rozwikłanie tych złożoności wymaga ilościowych pomiarów zachowań komórkowych, interakcji i fenotypu w nienaruszonych tkankach. W szczególności proteom i transkryptom dostarczają się nakładających, ale nie powtarzających informacji, które mogą być kluczowe dla racjonalnego projektowania immunoterapii. Jednak obecnie nie ma prostej i niedrogej metody głębokiego profilowania zarówno stanu transkrypcyjnego, jak i funkcjonalnego wszystkich komórek w mikrośrodowisku nowotworowym, zachowując jednocześnie ich kluczowe informacje o lokalizacji przestrzennej. W tym celu z powodzeniem połączyliśmy platformę IBEX (iteracyjne wyblaklanie zwiększa wielość) z HiPlex RNAscope, aby jednocześnie wizualizować markery białkowe i transkrypty kwasów rybonukleinowych (RNA) z rozdzielczością pojedynczych komórek. To podejście zawiera zmodyfikowany krok pozyskiwania docelowych RNA w celu zachowania morfologii jądra komórkowego i umożliwienia dokładnego wyrównania obrazów między cyklami. „Bex-Plex” umożliwia nam przeprowadzenie niezmodyfikowanego protokołu IBEX na zamrożonych tkankach, po którym następuje protokół HiPlex RNAscope, w którym stosujemy zmodyfikowany krok pozyskiwania docelowych RNA, aby zapewnić dokładne wyrównanie na poziomie jądra komórkowego z cyklami IBEX. Ten protokół jest zoptymalizowany dla zamrożonych tkanek i umożliwia zintegrowaną przestrzenną analizę stanów komórkowych transkrypcyjnych i funkcjonalnych. Możliwość profilowania na tym poziomie pojedynczych komórek nie tylko zapewnia głębokie źródło informacji o tkankach, ale może również umożliwić prognozowanie nuansowanych interakcji komórkowych, które napędzają reaktywność terapeutyczną, zapewniając ramy dla badań nad przestrzenną biologią w mikrośrodowiskach nowotworowych i powiązanych systemach.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Od momentu ich wprowadzenia w 2011 roku immunoterapie przeciwnowotworowe, które zmniejszają supresję cytotoksycznych komórek T poprzez blokowanie inhibitorowych cząstek kontrolnych układu odpornościowego takich jak PDL-1 i CTLA-4, stały się złotym standardem leczenia guzów stałych1. Jednak, mimo szerokiego stosowania u pacjentów, skuteczność kliniczną tych leków znacznie różni się, ponieważ wiele nowotworów guzów stałych albo początkowo występuje z opornością na te terapie albo ostatecznie ją rozwija2. W wielu przypadkach jest to spowodowane niezwykle heterogeniczną naturą guzów stałych, nawet wśród tego samego rodzaju raka3. Bardziej dogłębne zrozumienie relacji komórkowych, które występują w guzach stałych, jest kluczowym elementem do opracowania lepszych metod leczenia. Dlatego też, identyfikowanie dokładnych mechanizmów i interakcji, które wywołują i utrzymują tę oporność, jest na pierwszym planie badań nad rakiem. W tym miejscu naszym celem jest opracowanie metody, która umożliwia zintegrowaną przestrzenną analizę ekspresji białek i RNA w całych tkankach, aby lepiej scharakteryzować te złożone interakcje komórkowe.

Mikrośrodowisko guza (TME) składa się z nienowotworowych składników komórkowych i strukturalnych, które kształtują wzrost guza i odpowiedź immunologiczną, w tym fibroblastów związanych z rakiem, naciekanych komórek immunologicznych, składników naczyniowych i macierzy pozakomórkowej4. Ostatnio stało się jasne, że skład i organizacja TME silnie wpływają na to, czy guzy są przepuszczalne czy odporne na infiltrację immunologiczną, co jest jednym z głównych czynników determinujących skuteczność immunoterapii5. W wielu rakach fenotyp „immunologicznej pustyni”, charakteryzujący się niską liczbą limfocytów T i obecnością wysoce immunosupresyjnych populacji komórek szpikowych, koreluje ze słabą skutecznością terapii blokady punktów kontrolnych6,7. Sygnalizacja chemokin steruje wieloma z tych dynamikami rekrutacyjnymi. Na przykład, CXCL1 i CCL2 przyciągają immunosupresyjne komórki szpikowe, podczas gdy oś CXCR3-CXCL9/CXCl10 rekrutuje zarówno cytotoksyczne, jak i regulacyjne komórki T do guza8. W konsekwencji, nisz-specyficzne środowisko sygnałowe może potężnie wpływać na fenotypy i funkcje komórek. Na przykład u pacjentów z rakiem jelita grubego oś CCL5-CCR5 kontroluje funkcję supresyjną makrofagów związanych z guzem (TAMs) a blokowanie tego sygnału skierowuje TAM w kierunku fenotypu przeciwnowotworowego i koreluje ze zwiększonymi reakcjami klinicznymi9. Co więcej, bezpośrednie interakcje między komórkami immunologicznymi, fibroblastami związanymi z rakiem i/lub komórkami nowotworowymi poprzez ICAM i PDL-1 mogą wywołać wyczerpanie odpornościowe i osłabić odporność przeciwnowotworową10. Razem, te odkrycia podkreślają znaczenie przestrzennie rozdzielonych analiz w zrozumieniu, w jaki sposób TME wpływa na skuteczność terapii.

Imunofluorescencyjne (IF) obrazowanie pozostaje podstawowym podejściem do wizualizacji ekspresji białek i interakcji komórka-komórka w tkankach. Pole to rozwinęło się od konwencjonalnego 3-4 kolorowego IF do przepływów obrazowania o wysokim poziomie treści, które opierają się na iteracyjnym barwieniu i obrazowaniu. W tych metodach, duże zestawy danych są generowane poprzez powtarzające się cykle oznaczania przeciwciałami, obrazowania i inaktywacji lub usuwania fluoroforu, tak aby dodatkowe markery mogły zostać oznaczone i przedstawione obrazowo11. Iteracyjne Bielżenie Rozszerza Wielokanałowość (IBEX) zostało niedawno wprowadzone jako przyjazny dla użytkownika i opłacalny platforma iteracyjnego obrazowania12. Zgodny z użyciem komercyjnych przeciwciał i konwencjonalnych mikroskopów, IBEX wykorzystuje tetrahydroboran litu (LiBH4) do gaszenia fluorescencji większości najczęściej stosowanych barwników bez uszkodzenia epitopów tkankowych, pozwalając na uzyskanie do 75 parametrów dla pojedynczej tkanki13. Obrazy uzyskane z tego cyklicznego barwienia są scalone za pomocą oprogramowania open-source SimpleITK, aby wyprodukować złożone zestawy danych odpowiednie dla przestrzennej analizy wysokowymiarowej.

Komplementarnie do fenotypu na poziomie białek, metody przestrzennej transkryptomiki mogą dostarczyć cenny informacji o stanie transkrypcyjnym komórek w ich natywnym środowisku. Warto zauważyć, że hybrydyzacja in situ (ISH) jest popularną techniką do identyfikacji lokalizacji sekwencyj DNA lub RNA w określonej tkankach11. RNAscope jest dobrze ugruntowanym podejściem ISH, który używa sond z unikalną chemią Z, aby specyficznie wzmacniać transkrypty RNA w rozdzielczości pojedynczej cząsteczki i jest kompatybilny z wieloma różnymi typami próbek14. Jako szeroko przyjęta i komercyjnie dostępna platforma poprzez Advanced Cell Diagnostics (ACD), RNAscope oferuje zweryfikowane sondy przeciwko szerokiej gamie celów, upraszczając projektowanie eksperymentów dla różnorodnych zastosowań

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Procedury opisane w tym protokole zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i ich Użycia Instytucjonalnego Uniwersytetu Kalifornijskiego w San Diego (numer protokołu S24049). W tych eksperymentach użyto myszy obojga płci w wieku 7-12 tygodni z genetycznym tłem C57BL/6, trzymane w warunkach wolnych od specyficznych patogenów.

1. Przygotowanie tkanek

  1. Eutanazja eksperymentalnych myszy przy użyciu zatwierdzonych pierwotnych i wtórnych środków (np. eutanazja CO2 i dyslokacja szyjna) i pozyskanie tkanek o zainteresowaniu do suplementowanego pożywka.  
  2. Przygotuj świeżą zasobę utrwalacza tkankowego poprzez rozcieńczenie 4% zasobu paraformaldehydu (PFA) do 0,5% lub 1% PFA w 1X PBS. Użyj 0,5% PFA dla tkanek o mniejszym objętości, takich jak węzły chłonne i 1% PFA dla tkanek o większym objętości, takich jak guzy..   
    UWAGA: Paraformaldehyd jest łatwopalny i toksyczny w przypadku spożycia lub połknięcia. Obsługuj z zachowaniem właściwych środków ochrony osobistej i unikaj kontaktu ze skórą lub oczami.
  3. Przenieś tkanki do 24-dołkowej płytki z 2 ml utrwalacza na dołek i inkubuj przez noc w 4°C.
    Uwaga: Inkubacja przez ponad 16 godzin może prowadzić do problemów z nadmiernym utrwalaniem.
  4. Wypełnij dołki nowej 24-dołkowej płytki 1X PBS i przenieś tkanki z płytki z utrwalaczem.
    Punkt przerwy: Jeśli jest to potrzebne, tkanki można przechowywać w 1X PBS w 4°C przez maksymalnie 7 dni.
  5. Usuń nadmiar tkanki tłuszczowej/szczątków z tkanek jednocześnie używając mikroskopowej platformy sekcjonującej i narzędzi. Dodaj niewielką objętość 1X PBS bezpośrednio do tkanki, aby zapobiec odwodnieniu podczas cięcia.
  6. Przygotuj 30% roztwór w/v sacharozy poprzez rozcieńczenie sacharozy proszkowej w 1X PBS.
  7. Przenieś tkanki do 24-dołkowej płytki z 2 ml 30% sacharozy na dołek i inkubuj przez noc w 4°C w celu odwodnienia. Tkanki są odpowiednio odwodnione, gdy opadają na dno dołków.
  8. Wypełnij oznaczone foremki kriogeniczne OCT i umieść tkanki jednocześnie w foremkach. Orientacja tkanki będzie zależna od pochodzenia, ale naszą standardową rekomendacją jest, aby największa powierzchnia była równoległa do dna foremki kriogenicznej. Upewnij się, że tkanki są całkowicie zanurzone w OCT.
  9. Umieść na suchym lodzie przez 10 minut, aby zamrozić i przechowuj w -80°C.

2. Sekcjonowanie tkanek

Uwaga: Wszystkie reagenty i materiały laboratoryjne używane w tym protokole muszą być wolne od RNazy. Zachowaj ostrożność, aby zapobiec zanieczyszczeniu podczas obsługi szkieł.

  1. Pokądź wolne od RNazy szkła mikroskopowe 15 μL kleju na bazie chromu i inkubuj przez 1 godzinę w 60°C w piekarniku. Pokądzone szkła chromu mogą być przechowywane w temperaturze pokojowej (RT) przez maksymalnie miesiąc przed użyciem.
  2. Wyjmij tkanki osadzone w OCT z zamrażarki -80°C i umieść w -20°C kriostat/kryotome, aby się wyrównać przez co najmniej 20 minut.
  3. Secjonuj tkanki na pokądzone szkła chromu o grubości 10-15 μm.
  4. Przechowuj szkiełka z przekrojami w 4°C lub, jeśli barwienie ma nastąpić tego samego dnia, pozwól szkiełkom wyrównać się do RT. Przekrojone szkiełka mogą być przechowywane w 4°C przez maksymalnie 5 dni przed użyciem.

3. Barwienie białek

  1. W misce do mokania, zanurz szkło do barwienia w wolnym od RNazy 1X PBS przez 5 minut, aby usunąć nadmiar OCT z tkanek.
  2. Użyj hydrofobowego pióra do rysowania pudełek wokół tkanek na szkle i pozwól wyschnąć przez 2 minuty.
  3. Przygotuj bufor blokujący w postaci 10 μg·mL-1 bloka receptora FC anty-mysiego w wolnym od RNazy 1X PBS. Dodaj bufor blokujący do próbek na szkle, używając wystarczającej ilości, aby stworzyć bańkę, która całkowicie pokrywa tkankę (100-150 μL·przekroju-1).
    Uwaga: Czasami dodatek FBS lub BSA (zazwyczaj 1-2%) do bufora blokującego jest wymagany dla trudnych tkanek i/lub markerów.
  4. Inkubuj szkiełka w RT w wilgotnej skrzynce barwienia przez 1 godzinę, a następnie przemyj, całkowicie zanurzając je w misce do mokania wypełnionej wolnym od RNazy 1X PBS przez 5 minut. 
  5. Przygotuj roztwór pierwotnego przeciwciała barwiącego w wolnym od RNazy 1X PBS, planując 100-200 μL na sekcję tkanki.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Rysunek 1 : Przegląd przepływu Bex-Plex.
Zastygłe zamrożone tkanki przekrojone na powleczone chromalu śluzowatej szkło mikroskopiczne przechodzą do 3 cykli standardowego IBEX, a następnie do trzech cykli RNAScope HiPlex, przy czym początkowy krok odzyskiwania docelowego przeprowadza się w 60°C przez 1 godzinę. Obrazy z osobnych cykli są następnie rejestrowane i wyrównane za pomocą znacznika fiduksjalnego (np. ...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Przepływ pracy Bex-Plex integruje iteracyjną platformę barwienia białek, IBEX, z hybrydyzacją in situ RNAscope w celu umożliwienia jednoczesnego wykrywania białek i transkryptów RNA w rozdzielczości pojedynczych komórek. Głównym celem tego protokołu jest dostarczenie metody, która umożliwia zintegrowaną przestrzenną analizę ekspresji białek i RNA w całych tkankach. Możliwość pomiaru zarówno ekspresji białek, jak i RNA w tej samej tkance wcześniej stwarzały trudności techniczne: wysokie koszty, skomplikowane krok...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie deklarują konfliktu interesów finansowych. W przygotowaniu tego rękopisu nie użyto żadnych narzędzi opartych na AI.

Wkład autorów:

SK przyczynił się do kuracji danych, analizy danych, badań i pisania. CM przyczynił się do kuracji danych. PH przyczynił się do analizy danych. AV przyczynił się do kuracji danych. VM przyczynił się do konceptualizacji, kuracji danych, analizy danych, nadzoru i pisania.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Praca ta była wspierana przez Katedrę Pediatrii, Dywizję Alergii, Immunologii i Reumatologii Uniwersytetu Kalifornijskiego w San Diego oraz grant NIH NIGMS R00GM147841 (MOSAIC K99/R00) i NCI U54CA272220 (grant UC San Diego FIRST). Autorzy chcieliby dodatkowo podziękować Andrea Radtke za opracowanie oryginalnej metody IBEX, bez której nie bylibyśmy w stanie stworzyć Bex-Plex.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
1.5 ml microcentrifuge tubesBiopioneerMCNT-1.5F
200 proof EtOHFisher ScientificBP28184
20X SSC bufferInvitrogenAM9765
24 well plates
Alexa Fluor 488 anti-mouse CD11b AntibodyBiolegend101217
Alexa Fluor 523 anti-mouse CD3e AntibodyInvitrogen58-0032-82
Alexa Fluor 647 anti-mouse Ly6G AntibodyBiolegend127610
Alexa Fluor 700 anti-mouse CD68 AntibodyBiolegend137025
BD Cytofix/Cytoperm fixation and permeablization solutionBD554722
Chrome alum gelatinFisherNC1692262
Confocal microscope (e.g Leica Stellaris)
CryomoldsVWR25608-922
Cryostat (e.g CryoStar NX50 Cryostat)Thermofisher Scientific957100
Cryostat blades (e.g Leica Low Profile Disposable Blades DB80LX)Leica Biosystems14035843496
DAPIThermofisher Scientific62248
Dissection microscope (e.g Zeiss SteREO Discovery.V8)
Dissection tools
Dry Ice
Dunk tank for slide staining (e.g Simport Scientific EasyDip Slide Staining Jars)Fisher Scientific 22-038-489
Fluoromount-GFisherOB10001
Heated water bath
Histology brushes (e.g. Ted Pella Camel Hair Brushes)Fisher ScientificNC2023341
Hybridization oven (e.g. HybEZ II Hybridization System)ACD321710
Image analysis software of choice
ImmEdge Hydrophobic Barrier PAP PenVector LaboratoriesH-4000
Kimwipes VWR21905-026
Lithium borohydrideSTREM Chemicals93-0397
Micropipettes (P-10, P-20, P-200, P-1000)
Mini Microcentrifuge (e.g. Corning LSE Mini Microcentrifuge)Corning6770
Mouse BD Fc BlockBD553142
No 1.5 CoverglassVWR48393-241
Pipette tips (P-10, P-20, P-200, P-1000)
RNAscope HiPlex Probe, mm-CD274-T7ACD420501-T7
RNAscope HiPlex Probe, mm-IL-10-T6ACD317261-T6
RNAscope HiPlex12 Reagents Kit v2 (includes detection kit, cleaving stock solution, protease reagents, target retreival reagents, and wash buffer)ACD324409
RNAscope Protease IIIACD322337
RNase ZAPMillipore SigmaR2020-250
Simple ITK software: https://github.com/niaid/sitk-ibex
Slide staining tray/humidity chamber
Sucrose BioxtraSigmaS7903-1KG
Superfrost Plus Microscope slidesVWR48311-703
Tissue-Tek OCTVWR25608-930
Tween-20, Molecular Biology gradePromegaH5152
UltraPure DNase/RNase free waterFisher Scientific10977023

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ribas, A., Wolchok, J. D. Cancer immunotherapy using checkpoint blockade. Science. 359 (6382), 1350-1355 (2018).
  2. Zhao, X., Subramanian, S. Intrinsic resistance of solid tumors to immune checkpoint blockade therapy. Cancer Res. 77 (4), 817-822 (2017).
  3. Bailey, P., et al. Exploiting the neoantigen landscape for immunotherapy of pancreatic ductal adenocarcinoma. Sci Rep. 6 (35848), (2016).
  4. Belli, A., et al. Targeting the microenvironment in solid tumors. Canc Treat Rev. 65 (1), 22-32 (2018).
  5. Fridman, W. H., Zitvogel, L., Sautès–Fridman, C., Kroemer, G. The immune contexture in cancer prognosis and treatment. Nat Rev Clin Oncol. 14 (1), 717-734 (2017).
  6. Bonaventura, P., et al. Cold tumors: A therapeutic challenge for immunotherapy. Front Immunol. 10 (168), (2019).
  7. Li, J., et al. Tumor cell-intrinsic factors underlie heterogeneity of immune cell infiltration and response to immunotherapy. Immunity. 49 (1), 178-193 (2018).
  8. Tokunaga, R., et al. CXCL9, CXCL10, CXCL11/CXCR3 axis for immune activation - A target for novel cancer therapy. Cancer Treat Rev. 63 (1), 40-47 (2018).
  9. Halama, N., et al. Tumoral immune cell exploitation in colorectal cancer metastases can be targeted effectively by anti-CCR5 therapy in cancer patients. Cancer Cell. 29 (1), 587-601 (2016).
  10. Kawasaki, K., et al. PD-L1-expressing cancer-associated fibroblasts induce tumor immunosuppression and contribute to poor clinical outcome in esophageal cancer. Cancer Immunol Immunother. 72 (11), 3787-3802 (2023).
  11. Lee, C. Y. C., McCaffrey, J., McGovern, D., Clatworthy, M. R. Profiling immune cell tissue niches in the spatial -omics era. J allergy Clin Immunol. 155 (3), 663-677 (2025).
  12. Radtke, A. J., et al. IBEX: an iterative immunolabeling and chemical bleaching method for high-content imaging of diverse tissues. Nat Protoc. 17 (1), 378-401 (2022).
  13. Radtke, A. J., et al. IBEX: A versatile multiplex optical imaging approach for deep phenotyping and spatial analysis of cells in complex tissues. Proc Natl Acad Sci U.S.A. 117 (52), 33455-33465 (2020).
  14. Wang, F., et al. RNAscope: a novel in situ RNA analysis platform for formalin-fixed, paraffin-embedded tissues. J Mol Diagn. 14 (1), 22-29 (2012).
  15. Stack, E. C., Wang, C., Roman, K. A., Hoyt, C. C. Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: A review, with an assessment of tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis. Methods. 70 (1), 46-58 (2014).
  16. Maltez, V. I., et al. Agonistic anti-CD40 antibody treatment converts resident regulatory T cells into activated type 1 effectors within the tumor microenvironment. Immunity. , (2026).
  17. Ben-Chetrit, N., et al. Integration of whole transcriptome spatial profiling with protein markers. Nat Biotechnol. 41, 788-793 (2023).
  18. Grabinski, T. M., Kneynsberg, A., Manfredsson, F. P., Kanaan, N. M. A method for combining RNAscope in situ hybridization with immunohistochemistry in thick free-floating brain sections and primary neuronal cultures. PLoS ONE. 10 (3), e0120120(2015).
  19. Dikshit, A., Zong, H., Anderson, C., Zhang, B., Ma, X. J. Simultaneous visualization of RNA and protein expression in tissue using a combined RNAscope in situ hybridization and immunofluorescence protocol. Methods Mol Biol. 2148, 301-312 (2025).
  20. Radtke, A. J., et al. The IBEX knowledge-base: A central resource for multiplexed imaging techniques. PLoS Biol. 23 (3), e3003070(2025).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Cancer ResearchAllIBEXCancerImagingTumor MicroenvironmentSpatial Transcriptomics
Film wkrótce dostępny

Powiązane artykuły