Częstość występowania i rozmieszczenie gatunków roztoczy kurzu domowego w próbkach kurzu domowego z domów osób z dolegliwościami alergicznymi w Ordu, Turcja

Podsumowanie

To przekrojowe badanie gospodarstw domowych badało obecność i rozmieszczenie gatunkowe roztoczy domowych w klinicznie wybranych domach w prowincji Ordu w Turcji. Pobrano próbki pyłu ze 160 gospodarstw domowych, a gatunki roztoczy zidentyfikowano mikroskopowo, aby określić rozpowszechnienie roztoczy środowiskowych.

Streszczenie

To środowiskowe badanie przekrojowe badało rozpowszechnienie i rozmieszczenie gatunkowe roztoczy kurzu domowego w próbkach pyłu domowych pobranych z domów osób z dolegliwościami alergicznymi w prowincji Ordu w Turcji. Próbki pyłu pobrano ze 160 gospodarstw domowych, w których osoby zgłaszały astmę lub inne dolegliwości alergiczne podczas wizyt w przychodni. Choroby alergiczne opierały się na samooświadczeniach uczestników i nie zostały klinicznie potwierdzone. Próbki pobrano z różnych części domu, w tym sypialni i przestrzeni mieszkalnych, za pomocą przenośnego odkurzacza, i zbadano je mikroskopowo metodą wytrącania kwasem mlekowym. Identyfikacja gatunków przeprowadzono na próbkach pozytywnych przy użyciu standardowych kluczy morfologicznych. Roztocza domowe wykryto w 105 (65,6%) gospodarstwach domowych, z wykryciami przez cały rok. Najczęściej identyfikowanymi gatunkami były Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides spp., Cheyletus spp., Chortoglyphus arcuatus, Acarus siro, Glycyphagus domesticus, Oribatida spp. oraz Euroglyphus maynei. Analizy statystyczne nie wykazały istotnego związku między obecnością roztoczy a większością zmiennych demograficznych, środowiskowych czy mieszkaniowych; jednak wiek został zidentyfikowany jako czynnik związany z pozytywnością roztoczy. Wyniki wskazują, że roztocza pyłu domowego są bardzo powszechne w gospodarstwach domowych tego wilgotnego regionu Morza Czarnego i podkreślają ich potencjalne znaczenie dla osób z atopowymi warunkami. Dostarczanie pacjentom i ich rodzinom praktycznych informacji na temat środków zwalczania roztoczy w domu może poprawić jakość środowiska wewnętrznego i zarządzanie objawami.

Wprowadzenie

Roztocza domowe to stawonogi często spotykane w ludzkich osadach. Ze względu na mikroskopijne rozmiary często pozostają niezauważalne i utrzymują się w przestrzeniach mieszkalnych. Organizmy te żywią się głównie zrzucanymi cząstkami skóry ludzkiej i zwierzęcyej; Zarodniki grzybów i różne cząstki organiczne również należą do ich źródeł pożywienia. Cykl życia i gęstość populacji roztoczy zależą od czynników środowiskowych, takich jak temperatura, wilgotność względna i dostępność pożywienia. Środowiska wewnętrzne o odpowiednich warunkach mikroklimatycznych sprzyjają rozmnażaniu się roztoczy ^1,2,3.

Znaczenie roztoczy pyłu domowego w narażeniu środowiskowym zostało po raz pierwszy dostrzeżone na początku XX wieku; Związek między tymi organizmami a środowiskiem wewnętrznym został ustalony w połączeniu z dolegliwościami oddechowymi obserwowanymi u osób pracujących w młynach mącznych¹. Po zwróceniu uwagi Cooke'a na alergenne składniki w kurzu domowym, Voorhorst i in. (1967)⁴ wykazali, że roztocza są głównym biologicznym źródłem pyłu domowego, co jest uznawane za istotny kamień milowy w badaniach narażenia na środowisko wewnątrz budynków.

Wśród alergenów pochodzenia zwierzęcego zidentyfikowano 19 alergenów oddechowych, 28 spożywczych i 3 jadowe, a zauważono, że liczba alergenów zgłaszanych w literaturze wzrosła w czasie⁵. Antygeny pochodzące z roztoczy mogą gromadzić się w materiałach domowych, takich jak łóżka, kołdry, poduszki, pościel, tapicerowane meble, dywany oraz wyroby tekstylne wykonane z bawełny, wełny, piór lub innych włókien. Antygeny te mogą być uwalniane do środowiska za pomocą tych materiałów lub ruchów mechanicznych i rozprzestrzeniać się w powietrzu. Zgłoszono, że niektóre antygeny grupy II mają rozmiar cząstki mniejszy niż 5 μm, dlatego mogą występować w oddychalnej frakcji⁶.

Li i in. (2009)⁷ stwierdzili, że pewna liczba roztoczy może produkować znaczącą ilość antygenu dziennie. Podkreślano, że wysoki poziom ekspozycji środowiskowej, zwłaszcza w dzieciństwie, może być istotny dla rozwoju uwrażliwienia; Może się to różnić w zależności od indywidualnych i środowiskowych czynników ^8,9,10. Jednak zauważa się, że większość tych zależności została oceniona na podstawie poziomu narażenia środowiskowego i że wnioski przyczynowe dotyczące wyników klinicznych należy podejmować z ostrożnością.

Zgłaszano, że częstość występowania chorób alergicznych wzrasta około 1% rocznie; Sugerowano, że ten wzrost może być związany ze zmianami czynników środowiskowych, a nie z postępem w metodach diagnostycznych¹¹. Czynniki takie jak globalne zmiany klimatu, zanieczyszczenie powietrza, zwiększona ekspozycja na pyłki oraz rosnąca częstotliwość ekstremalnych zjawisk pogodowych zostały zasugerowane jako możliwe przyczyny narażenia na alergeny środowiskowe¹². Astma jest uznawana za jedną z najczęstszych chorób przewlekłych na świecie, z częstością występowania od 1% do 18% w zależności od regionu¹³.

Rozmieszczenie i częstość występowania roztoczy domowych mogą być zależne od takich czynników jak cechy klimatyczne, struktura zabudowa, metoda pobierania próbek oraz częstotliwość próbkowań, jak podkreślono w literaturze ^7,14. Jednak badania z dużymi próbkami i jedną metodą pobierania są ograniczone, zwłaszcza w regionach o wilgotnym klimacie, takich jak region Morza Czarnego. Ta sytuacja wymaga oceny obecności i rozmieszczenia roztoczy domowych na poziomie regionalnym w kontekście narażenia na środowisko.

Celem tego przekroju i opisowego badania jest określenie częstości występowania i rozmieszczenia gatunkowego roztoczy domowych w próbkach pyłu domowego pobranych z domów w prowincji Ordu, gdzie średnia roczna temperatura wynosi 14,4 °C, a wilgotność względna waha się między 60%–90% w miesiącach letnich, oraz ocena czynników środowiskowych i demograficznych, które mogą wpływać na obecność roztoczy. Badanie zakłada, że wilgotny i umiarkowany klimat prowincji Ordu tworzy odpowiednie warunki mikroklimatyczne dla obecności roztoczy pyłu domowego, a ich występowanie może się różnić w zależności od czynników środowiskowych wewnątrz budynku.

Protokół

Badanie to zostało zatwierdzone przez Komitet Etyki Badań Klinicznych Uniwersytetu Ordu (nr zatwierdzenia: 09/11/2017–138). Badanie przeprowadzono zgodnie z odpowiednimi wytycznymi etycznymi instytucjonalnymi i krajowymi, w tym Deklaracją Helsińską. Wszyscy uczestnicy biorący udział w badaniu uzyskali pisemną świadomą zgodę. Uzyskana zgoda wyraźnie obejmuje przeprowadzanie wizyt domowych oraz pobieranie próbek pyłu domowego z mieszkań.

1. Projekt badania

Jest to przekrojowe badanie rozpowszechnienia roztoczy pyłu domowego, przeprowadzone w prowincji Ordu w Turcji. Próbki pyłu domowego zostały pobrane z konkretnych powierzchni wewnętrznych, gdzie powszechnie spodziewane jest gromadzenie się roztoczy. Pobierano próbki z materacy, materiałów pościelowych (poduszki i kołdry), dywanów oraz tapicerowanych mebli znajdujących się w sypialniach i salonach. Pył zbierano przenośnym odkurzaczem, a próbki z różnych miejsc w tym samym gospodarstwie domowym łączyły się w kompozytową próbkę pyłu domowego.

2. Populacja badawcza i definicja kohorty klinicznej

Populacja badawcza składa się z osób, które odwiedziły ambulatoryjne kliniki ucha, nosa i gardła oraz chorób wewnętrznych w Szpitalu Edukacji i Badań Uniwersytetu Ordu z powodu astmy i/lub dolegliwości alergicznych. Kryteria włączenia uczestników to osoby w wieku 18 lat lub starsze, zgoda na pobranie próbek pyłu z ich środowiska domowego oraz zgoda na wypełnienie ankiety. Osoby, które nie wyraziły zgody na wizytę domową, nie wyraziły pisemnej zgody lub dla których nie udało się uzyskać wystarczającej ilości próbek pyłu domowego, zostały wykluczone z badania. Diagnozy kliniczne oceniano na podstawie samoraportów pacjentów oraz powodów wizyt w przychodni; Nie przeprowadzono żadnej weryfikacji klinicznej ani testów diagnostycznych. Każdy pacjent był przypisywany gospodarstwu domowym, a analizy przeprowadzano na poziomie gospodarstwa domowego. Prowincja Ordu znajduje się we wschodnim regionie Morza Czarnego w Turcji i charakteryzuje się wilgotnym, umiarkowanym klimatem z całoroczną wysoką wilgotnością, co może sprzyjać przetrwaniu i rozprzestrzenianiu się roztoczy domowych.

3. Jednostka próbkowania i metoda próbkowania

Główną jednostką próbkową w tym badaniu było gospodarstwo domowe. Pobrano wiele próbek subpyłu z różnych miejsc wewnętrznych w każdym gospodarstwie domowym, ze szczególnym uwzględnieniem sypialni i przestrzeni mieszkalnych. Chociaż te podpróbki zostały zebrane oddzielnie, zostały zebrane i przeanalizowane jako pojedyncza złożona próbka pyłu domowego w laboratorium, aby oddać całkowitą ekspozycję na roztocza wewnątrz budynku. Aby oszacować gęstość roztoczy, około 1 g pyłu z każdej złożonej próbki domowej przetworzono metodą wytrącenia kwasu mlekowego. Wszystkie roztocza obserwowane w przygotowanych mikroskopowych preparatach pochodzących z tej próbki pyłu zostały policzone. Łączna liczba wykrytych roztoczy została następnie wyrażona jako liczba roztoczy na gram pyłu domowego.

Każde gospodarstwo domowe było próbkowane tylko raz i nie przeprowadzono powtarzających próbek. Próbki pyłu domowego pobierano za pomocą jednorazowych worków przydzielonych do każdego obszaru pobierania próbek oraz przenośnego odkurzacza o mocy ssania 1200 W. Pobieranie próbek przeprowadzono ze standaryzowaną częstotliwością około 2 min/^m2 , aby zapewnić spójność i powtarzalność we wszystkich gospodarstwach domowych.

4. Procedury laboratoryjne i identyfikacja roztoczy

Po przyniesieniu próbek do laboratorium przesiewano je, aby usunąć grube cząstki. Próbki zostały zbadane metodą wytrącania kwasem mlekowym. Metoda wytrącania kwasu mlekowego została zastosowana do oczyszczania próbek pyłu poprzez rozpuszczanie organicznych zanieczyszczeń, co ułatwiło separację i wizualizację roztoczy oraz umożliwiło niezawodną mikroskopową detekcję i identyfikację morfologiczną. Do 5 mL kwasu mlekowego w probówkach dodano jeden gram kurzu domowego. Probówki były delikatnie mieszane i inkubowane przez 1 godzinę. Po inkubacji próbki pobrane zarówno z powierzchni, jak i dna cieczy były montowane między szkiełkiem a pokrywką i badane pod mikroskopem świetlnym w rozdzielczości 100×, 200× i 400× powiększeniach¹⁵. Następnie przeprowadzono identyfikację gatunków na próbkach pyłu, w których wykryto roztocza.

Próbki, w których wykryto roztocza, definiowano jako "pozytywne na roztocza". Obecność co najmniej jednego roztocza w dowolnym stadium rozwoju (larwy, nimfy lub dorosłego osobnika) w mieszkaniu uznano za wystarczające, by miejsce zamieszkania uznano za pozytywne na roztocza. Aby rozpoznać gatunki w próbkach pozytywnych, roztocza widoczne pod stereomikroskopem zbierano za pomocą cienkończelnej igły do strzykawki insulinowej po filtracji z supernatantu na papier filtracyjny i montowano je w ośrodku Hoyera. Przygotowane okazy były badane pod mikroskopem świetlnym w celu identyfikacji morfologicznej. Analizy statystyczne przeprowadzono przy użyciu oprogramowania do analizy statystycznej 16,17,18,19,20. Okazy identyfikowano do gatunków, rodzajów lub wyższych poziomów taksonomicznych, w zależności od etapu rozwoju i dostępności cech diagnostycznych. Dermatophagoides spp. obejmuje stadia larwalne, protonimfowe i deutonymfowe, których nie udało się wiarygodnie zidentyfikować na poziomie gatunku. Oribatida reprezentuje roztocza zidentyfikowane na poziomie rzędu. Niezidentyfikowane larwy i nimfy odnoszą się do niedojrzałych okazów, a niezidentyfikowane imago do dorosłych osobników, których nie można było taksonomicznie sklasyfikować z powodu niewystarczających lub uszkodzonych cech morfologicznych. Całkowita liczba reprezentuje skumulowaną liczbę wszystkich osobników roztoczy wykrytych w próbkach pozytywnych.

5. Definicje zastosowań geodezyjnych i zmiennych

Przeprowadzono ankietę zawierającą pytania dotyczące cech demograficznych, struktury mieszkaniowej, czynników środowiskowych oraz dolegliwości alergicznych. Dane zostały ocenione na podstawie oświadczeń uczestników i nie zostały klinicznie zweryfikowane.

6. Analiza statystyczna

Związek między zmiennymi kategorycznymi badano za pomocą testu chi-kwadrat, a zmianę gęstości roztoczy w zależności od cech demograficznych i życiowych za pomocą testów Mann-Whitney U lub Kruskal-Wallis. Do badania związku między zmienną zależną (pozytywność roztoczy) a zmiennymi niezależnymi zastosowano regresję logistyczną binarną. Obliczono ilorazy szans (OR) z 95% przedziałami ufności (CI).

Wyniki

Występowanie gatunków
Taksony zgłaszane są na poziomie gatunku lub rodzaju, gdzie możliwe było rozpoznanie morfologiczne; Okazy zidentyfikowane tylko na wyższych poziomach taksonomicznych są wyraźnie wskazane. W badaniu zbadano próbki pyłu z 160 gospodarstw domowych. Roztocza kurzu wykryto w 105 gospodarstwach domowych, natomiast w 55 gospodarstwach domowych oceniono jako negatywne. Wartości gęstości roztoczy obliczono na podstawie całkowitej liczby roztoczy zaobserwowanych w preparatach mikroskopowyc...

Dyskusja

Tabela 6 porównuje rozpowszechnienie roztoczy domowych w różnych krajach i regionach Turcji, wraz z projektem pobierania próbek, wielkością próby oraz cechami klimatycznymi. Podczas badań widać, że występowanie roztoczy jest zazwyczaj wyższe w regionach o gorącym, wilgotnym klimacie; W szczególności wskaźniki pozytywności osiągnęły 100% w badaniach, w których próbki pobierano regularnie z tych samych miejsc zamieszkania. Dla porównania, wskaźniki częstości występowania były niższe w badaniach stosujących...

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Przenośny odkurzacz (1200 W)	Arcelik	S 7564	Używany do zbierania kurzu w domu
Jednorazowe worki odkurzające	Arcelik	Kompatybilny z S 7564	Jednorazowe dla każdego gospodarstwa domowego
Sitko (drobna siatka)	Izolatorium	092.01.001	Usuwanie grubych cząstek
Probówki (15 mL)	Izolatorium	077.01.015	Do wytrącania kwasu mlekowego
Kwas mlekowy (90%)	Merck	100135	Oczyszczanie kurzu
Mikroskop świetlny	Olympus	CX43	&razy; 100 i razy; 200 i razy; 400 powiększeń
Mikroskop stereo	Olympus	SZ61	Kolekcja widocznych roztoczy
Szkiełka mikroskopowe	Izolatorium	064.01.001	Przygotowanie próbki
Folia pokrywcza	Izolatorium	064.02.001	Przygotowanie próbki
Hoyer' Medium s	Sigma-Aldrich	H3147	Podłoże mocujące dla roztoczy
Końcówki strzykawek (PP)	Eppendorf	30000813	Transfer roztoczy
Papier filtrujący	Co, człowieku	Klasa 1	Filtracja supernatantu
RPMI-1640 średni	Gibco	11875-093	Propagacja pasożytów
Oprogramowanie do analizy statystycznej	IBM	SPSS v22.0	Analiza danych