Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł badawczy

Biochemiczne i histopatologiczne skutki hirudoterapii w modelu szczura dotyczącym przewlekłego stresu fizjologicznego wywołanego wysiłkiem fizycznym

124 wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/70494

⸱

22 maja 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Faculty of Medicine, Department of Medical Parasitology, Kırşehir Ahi Evran University, 2Faculty of Medicine, Department of Histology and Embriyology, Kırşehir Ahi Evran University, 3Faculty of Sports Sciences, Department of Coaching Education, Kırşehir Ahi Evran University, 4Faculty of Medicine, Department of Medical Biochemistry, Kırşehir Ahi Evran University, 5Faculty of Medicine, Department of Physiology, Kırşehir Ahi Evran University

W tym artykule

Podsumowanie

Protokół ten ustanawia model przewlekłego stresu fizjologicznego wywołanego wysiłkiem u szczurów, aby zbadać reakcje stresowe. Umożliwia kontrolowaną ocenę interakcji hirudoterapii z ćwiczeniami poprzez profilowanie biochemiczne surowicy oraz analizę histopatologiczną. Zapewnia powtarzalne ramy do badania mechanizmów regeneracji po wysiłku.

Streszczenie

Przewlekłe ćwiczenia mogą wywoływać stres fizjologiczny, charakteryzujący się uszkodzeniem mięśni, zaburzeniami oksydacyjnymi oraz zmianami hormonalnymi, co może utrudniać regenerację i wydajność. Hirudoterapia, tradycyjna interwencja bioterapeutyczna zawierająca składniki przeciwzapalne, antyoksydacyjne i wspomagające krążenie, wzbudziła zainteresowanie jako potencjalna naturalna strategia zdrowienia. Celem tego badania było ocenę biochemicznych i histotokologicznych skutków hirudoterapii po przewlekłej aktywności fizycznej w modelu szczura o stresie fizjologicznym wywołanym wysiłkiem. Trzydziestu dwóch samców szczurów przydzielono do czterech grup: kontrola, hirudoterapia, ćwiczenia oraz hirudoterapia z ćwiczeniami. Przeanalizowano parametry biochemiczne surowicy oraz markery stresu oksydacyjnego, a mięśnie szkieletowe i tkanki wątroby przeanalizowano histopatologicznie, aby ocenić zmiany wywołane wysiłkiem oraz potencjalne efekty modulacyjne hirudoterapii. Szczury narażone na przewlekły ruch wykazywały biochemiczne i strukturalne wskaźniki stresu fizjologicznego. Hirudoterapia wiązała się z częściowym osłabieniem tych zmian, szczególnie w wynikach histopatologicznych, podczas gdy zmiany markerów stresu oksydacyjnego nie były statystycznie istotne. Wyniki te sugerują, że hirudoterapia może wywierać modulacyjny wpływ na procesy regeneracji po wysiłku; Jednak potrzebne są dalsze badania, aby wyjaśnić jego wpływ na szlaki stresu oksydacyjnego.

Wprowadzenie

Tradycyjne praktyki medyczne były stosowane w szerokim zakresie kontekstów klinicznych w leczeniu różnych ostrych i przewlekłych schorzeń 1,2. Wśród nich terapia pijawką medyczną (hirudoterapia) ma długą historię stosowania w różnych kulturach i systemach medycznych. W ostatnich latach to tradycyjne podejście odzyskało zainteresowanie naukowe ze względu na potencjalne efekty terapeutyczne w różnych schorzeniach klinicznych, w tym chorobach zapalnych, chorobach zwyrodnieniowych stawów oraz zaburzeniach naczyń 1,2,3. Efekty te przypisuje się głównie złożonej mieszance bioaktywnych cząsteczek obecnych w ślinie pijawki, które wykazują właściwości przeciwkrzepowe, przeciwzapalne i przeciwdrobnoustrojowe 3,4,5. Ponadto badania eksperymentalne na modelach zwierzęcych wykazały, że hirudoterapia może działać ochronnie przeciwko uszkodzeniom tkanek dzięki mechanizmom przeciwutleniaczym, przeciwzapalnym i antyapoptotyckim6.

Ślina Hirudo verbana, gatunku najczęściej stosowanego w terapii, zawiera różnorodne bioaktywne składniki, w tym hirudin, bdellin, eglin i calin, a także enzymy takie jak hialuronidaza i różne metabolity o niskiej masie molekularnej. Te składniki wykazują działanie przeciwkoagulacyjne, przeciwzapalne, antyoksydacyjne, fibrinolityczne, przeciwbólowe i przeciwnowotworowe 2,7. Ten szeroki profil aktywności biologicznej sugeruje, że ślina pijawki (LS) może służyć jako uzupełniające narzędzie terapeutyczne we współczesnych zastosowaniach biomedycznych; jednak jego ogólnoustrojowe skutki w określonych warunkach stresu fizjologicznego pozostają niedo do końca poznane3.

Intensywna lub długotrwała aktywność fizyczna może powodować mikrostrukturalne uszkodzenia błon mięśniowych, prowadząc do znaczącego wzrostu poziomu enzymów w surowicy takich jak kinaza kreatynowa (CK), dehydrogenaza mleczanowa (LDH) i aminotransferaza asparagianowa (AST). Aminotransferaza alaninowa (ALT) może również wzrastać w odpowiedzi na uszkodzenie mięśni, choć zazwyczaj w mniejszym stopniu niż AST 5,8,9. Dodatkowo, ćwiczenia o wysokiej intensywności lub długotrwałym czasie wywołują wzrost poziomu kortyzolu, kluczowego hormonu stresu, a reakcje różnią się w zależności od intensywności wysiłku, czasu trwania oraz indywidualnego stanu fizjologicznego10,11. Po wysiłku może również wystąpić wzrost poziomu glukozy we krwi, głównie wywołany glukozonegenezą pośredniczoną przez kortyzolem, co stanowi charakterystyczną dla metabolicznej reakcji stresowej12. Łącznie te wyniki pokazują, że zarówno biochemiczne markery uszkodzenia mięśni, jak i wskaźniki stresu metabolicznego mają tendencję do wzrostu po intensywnych ćwiczeniach5.

Badane są różne strategie, w tym masaż, zanurzanie w zimnej wodzie oraz bogate w antyoksydanty suplementy diety (np. polifenole, ekstrakt z kwaśnej wiśni i kurkumina), pod kątem ich potencjału wspierania regeneracji po wysiłku. Systematyczne przeglądy sugerują, że te interwencje mogą wpływać na parametr stresu oksydacyjnego i uszkodzenia mięśni; Jednak ich skuteczność znacznie różni się u poszczególnych osób i nie zawsze zapewniają wystarczającą ochronę biochemiczną 13,14,15. W związku z tym rośnie zainteresowanie poszukiwaniem alternatywnych lub komplementarnych podejść, które mogą przynieść dodatkowe korzyści w warunkach stresu fizjologicznego wywołanego wysiłkiem. W tym kontekście wykazano, że związki bioaktywne obecne w ślinie pijawki modulują stres oksydacyjny i reakcje zapalne7. Ponadto obserwacje kliniczne sugerują, że hirudoterapia może zmniejszać ból i stan zapalny, szczególnie w schorzeniach układu mięśniowo-szkieletowego i naczyniowego1.

Kilka związków zidentyfikowanych w LS, w tym flawonoidy, cząsteczki fenolowe i inne bioaktywne składniki, przyczynia się do tłumienia odpowiedzi zapalnych poprzez modulację szlaków stresu oksydacyjnego. Te właściwości antyoksydacyjne mogą działać synergicznie z innymi składnikami ślinowymi, zwiększając ogólny potencjał przeciwzapalny hirudoterapii 7,16. Ponadto wykazano, że inhibitory proteazy, takie jak bdellin i eglin, zmniejszają aktywność enzymów pochodzących z neutrofilów, co ogranicza uszkodzenia tkanek4. Ponadto wykazano, że różne peptydy i cząsteczki pochodzące z lipidów zidentyfikowane w tkankach pijawkowych wywierają hamujące działanie na szlaki sygnalizacji zapalnej17.

Pomimo tych ustaleń, potencjalna rola hirudoterapii w stresie fizjologicznym wywołanym wysiłkiem fizycznym pozostaje niewystarczająco zbadana, szczególnie w kontrolowanych modelach eksperymentalnych 1,2,4. Chociaż wcześniejsze badania wykazały jego działanie przeciwzapalne, przeciwkrzepowe i mikrokrążenie, a ćwiczenia są powszechnie znane z wywoływania uszkodzeń mięśni i reakcji stresu oksydacyjnego18, badania integrujące wyniki biochemiczne, hormonalne i histopatologiczne w ramach jednego eksperymentu są ograniczone.

Dlatego niniejsze badanie zostało zaprojektowane tak, aby dostarczyć kompleksowej eksperymentalnej oceny hirudoterapii w kontrolowanym modelu stresu fizjologicznego wywołanego wysiłkiem, integrując wyniki biochemiczne, hormonalne i histologiczne. To wielowymiarowe podejście ma na celu przyczynienie się do zrozumienia potencjalnych efektów modulacyjnych hirudoterapii oraz zapewnienie powtarzalnych ram do oceny komplementarnych interwencji bioterapeutycznych.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie procedury eksperymentalne przeprowadzono zgodnie z wytycznymi ARRIVE19. Protokół badania został przejrzany i zatwierdzony przez Lokalny Komitet Etyki ds. Eksperymentów na Zwierzętach Uniwersytetu Kırşehir Ahi Evran (Nr zatwierdzenia: 06/03/2025-05-1, Turcja). Wszystkie procedury były zgodne z wytycznymi instytucjonalnymi dotyczącymi opieki i wykorzystania zwierząt laboratoryjnych. Odczynniki i używany sprzęt są wymienione w Tabeli Materiałów.

1. Selekcja i zakwaterowanie zwierząt

Użyto trzydziestu dwóch samców szczurów wistar albinos (RRID: RGD_2308852; 8–12 tygodni, 200–250 g). Zwierzęta trzymano pojedynczo w klatkach poliwęglanowych (40 cm × 25 cm × 20 cm) z pościelą z drewna. Warunki środowiskowe utrzymywano na poziomie 22–24 °C z cyklem światła trwającym 12 godzin i 12 godzin ciemności. Jedzenie i woda były zapewniane ad libitum.

Przed eksperymentami przeprowadzono tygodniowy okres aklimatyzacji. W tym okresie zwierzęta były codziennie monitorowane pod kątem spożycia pożywienia, stanu nawodnienia, zachowań pielęgnacyjnych oraz aktywności lokomotorycznej. W badanie uwzględniono tylko zwierzęta wykazujące prawidłowe zachowania fizjologiczne.

2. Grupy eksperymentalne i randomizacja

Zwierzęta zostały losowo przydzielone do czterech grup eksperymentalnych (n = 8 na grupę) za pomocą komputerowo generowanej sekwencji randomizacji. Ukrycie alokacji zapewniano poprzez przypisanie zwierzętom numerów przed przydziałem grupowym. Grupy eksperymentalne składały się z grupy kontrolnej (C), która nie otrzymała interwencji; grupa ćwiczeń (E), która przechodziła wyłącznie ćwiczenia na bieżni; grupa hirudoterapeutyczna (H), która otrzymywała tylko hirudoterapię trzy razy w tygodniu; oraz grupę z połączoną hirudoterapią i ćwiczeniami (HE), która przeszła obie interwencje zgodnie z protokołem badania. Wszystkie interwencje prowadzono przez okres 2 tygodni. Aby zminimalizować zmienność okołodobową, wszystkie zabiegi wykonywano między 09:00 a 11:00.

3. Protokół przewlekłych ćwiczeń

Ćwiczenia wykonywano za pomocą zmotoryzowanej bieżni dla gryzoni wyposażonej w regulowaną siatkę stymulacji elektrycznej. Zwierzęta były umieszczone w indywidualnych pasach bieżni (Rysunek 1). Przeprowadzono dwudniową fazę adaptacji z prędkością 15 m/min przez 15 min dziennie. Po okresie adaptacji intensywność ćwiczeń wzrosła do 20 m/min, a zwierzęta były poddawane codziennym sesjom biegowym po 45 minut dziennie przez 2 tygodnie. Delikatny bodziec elektryczny (1,0 mA) był stosowany przez siatkę, gdy było to konieczne, aby utrzymać ciągłą pracę.

  1. Kryteria wyczerpania
    Wyczerpanie definiowano jako niezdolność do opuszczenia siatki uderzeniowej podczas trzech kolejnych stymulacji (~5 sekund każda). Zwierzęta osiągające ten próg były natychmiast usuwane. Protokół ten został zaadaptowany z wcześniej ustalonych modeli ćwiczeń na bieżni dla gryzoni, z określonymi kryteriami adaptacji, progresji intensywności i wyczerpaniem20.
  2. Zastosowanie hirudoterapii
    Pijawki lecznicze (Hirudo verbana, ~2 g) pozyskano z instytucjonalnie certyfikowanego źródła. Przed aplikacją okolice grzbietowe każdego zwierzęcia były golone elektrycznym obcinakiem, a skórę delikatnie czyściły sterylną solą fizjologiczną, bez środków antyseptycznych, aby nie zniechęcić przyczepienia pijawki. Zwierzęta umieszczano następnie w przezroczystej akrylowej tubie ograniczającej, aby ograniczyć ruch i minimalizować stres. Pojedyncza pijawka została umieszczona na grzbietowej linii środkowej, a skuteczne przyczepienie zostało wizualnie potwierdzone przez usta fiksacyjne ssaczki. Karmienie było dozwolone przez 10 minut (Rysunek 2). Po okresie aplikacji pijawki odłączano przez wystawienie miejsca przyłączenia na 70% pary etanolu za pomocą bawełnianego aplikatora umieszczonego około 1–2 cm od miejsca. Po odłączeniu miejscowe krwawienie kontrolowano sterylną gazą, delikatnie naciskając przez około 1–2 minuty, nie stosując żadnych szwów. Aplikacje były składane trzy razy w tygodniu przez 2 tygodnie. Procedura ta została przeprowadzona na podstawie wcześniej opisanych protokołów eksperymentalnych i klinicznych hirudoterapii ze standaryzowanymi parametrami aplikacji21.

4. Eutanazja i pobieranie krwi

Na koniec eksperymentu (24 godziny po ostatniej interwencji)6 zwierzęta zostały znieczulone dootrzewnowkowo ketaminą (75 mg/kg) i ksylazyną (10 mg/kg). Odpowiednią głębokość znieczulenia potwierdzono przez brak wycofania pedałów i odruchów rogówkowych. Następnie pobranie krwi wewnątrzsercowej wykonano za pomocą sterylnej strzykawki o pojemności 5 mL przez nakłucie lewej komory. Eutanazja została zakończona przez wykrwawienie, a następnie torakotomię. Następnie zebrano mięsień przyśrodkowy i tkanki wątroby mięśnia przyśrodkowego i wątroby. Próbki krwi przetwarzano w ciągu 1 godziny po pobraniu przez przenos do probówek do aktywatora zakrzepów i wirowanie w 1 000 × g przez 15 minut w temperaturze 4 °C. Rozdzielone surowice były następnie alicytatowane na części po 200 μL i przechowywane w temperaturze −80 °C do czasu analizy.

5. Analiza biochemiczna i ELISA

Parametry biochemiczne, w tym ALT, AST, LDH, CK, glukoza, elektrolity i kortyzol, były analizowane za pomocą automatycznego analizatora biochemicznego zgodnie ze standaryzowanymi procedurami laboratoryjnymi. Wszystkie testy ELISA dla CAT, SOD, MDA i GPX były wykonywane zgodnie z instrukcjami producenta w warunkach standaryzowanych. Próbki surowicy rozcieńczano w proporcji 1:5 z buforem próbek, gdy wymagał to protokół zestawu. Następnie do wyznaczonych dołków dodano 50 μL próbek standardowych i 50 μL próbek surowicy i inkubowano w temperaturze 37 °C przez 60 minut. Po inkubacji płytki były myte pięć razy, używając dostarczonego bufora do usuwania niezwiązanych składników. Następnie do każdego dołku dodawano przeciwciało wykrywające (50 μL) i inkubowano w temperaturze 37 °C przez 30 minut. Następnie dodano roztwór substratu, a mieszanina reakcji była inkubowana przez 10–15 minut w ciemnych warunkach, aby umożliwić rozwój koloru. Reakcję zakończono dodaniem 50 μL roztworu stopowego, a gęstość optyczną zmierzono na poziomie 450 nm za pomocą czytnika mikropłytek. Wszystkie próbki zostały przeanalizowane w duplikacie, aby zapewnić wiarygodność analityczną i powtarzalność.

6. Analiza histopatologiczna

Do oceny histopatologicznej próbki tkanek przetwarzano zgodnie ze standardowymi procedurami histopatologicznymi22. Tkanki początkowo utrwalono w 10% neutralnej buforowanej formalinie przez 72 godziny, następnie odwodniono przez serię stopniowego etanolu składającą się z 50%, 70%, 80%, 96% i 100% etanolu, z inkubacją 1 godziną przy każdym stężeniu. Po odwodnieniu tkanki były usuwane z ksylenem przez dwa kolejne okresy po 30 minut, a następnie osadzane w blokach parafinowych. Przekroje o grubości 5 μm pozyskano za pomocą mikrotomu obrotowego i barwione hematoksyliną i eozyną (H&E) oraz Masson's Trichrome do badań histologicznych. Na koniec barwione preparaty zostały zbadane za pomocą mikroskopu świetlnego wyposażonego w cyfrowy system obrazowania.

7. Analiza statystyczna

Analiza danych była przeprowadzana za pomocą oprogramowania statystycznego. Rozkład danych oceniano za pomocą testu Kołmogorowa–Smirnowa. Dla danych normalnie rozproszonych zastosowano jednokierunkową metodę ANOVA, a następnie test post hoc Tukeya. Dla danych o rozkładzie nienormalnym zastosowano test Kruskala–Wallisa, a następnie test Mann–Whitney U. Wartość p < 0,05 uznano za statystycznie istotną.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Parametry uszkodzenia mięśni i zmęczenia

Markery uszkodzeń mięśni w surowicy wykazały, że poziomy kinazy kreatynowej (CK) różniły się istotnie w poszczególnych grupach (p < 0,05). Chociaż wartości LDH, AST i ALT wykazywały tendencje wzrostowe w grupie ćwiczeniowej (E), zmiany te nie były istotne statystycznie (p > 0,05). Stężenia CK były najwyższe w grupie E, podczas gdy grupa HE wykazywała wyraźnie niższe poziomy, zbliżające się do poziomu grupy kontrolnej i...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Badanie wykazało, że hirudoterapia wiąże się z mierzalnymi zmianami wybranych parametrów związanych ze stresem fizjologicznym wywołanym wysiłkiem. Podwyższenia CK, LDH, AST i ALT zaobserwowane w grupie ćwiczącej odzwierciedlają zaburzenia sarkolemalów i wyciek enzymów, zgodnie z wcześniejszymi raportami opisującymi te markery jako wskaźniki obciążenia mięśniowego 23,24,25. Dla porównania, grupa HE wykazywała poziomy enzymów bliż...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Podziękowania

Dziękujemy pracownikom Laboratorium Badawczego Uniwersytetu Kırşehir Ahi Evran za wsparcie w opiece nad zwierzętami i pobieraniu próbek. Dziękujemy również cennej pomocy technicznej udzielanej przez Laboratoria Histologii i Biochemii podczas przetwarzania tkanek i analiz biochemicznych. Badanie to zostało wsparte przez Jednostkę Koordynację Projektów Badawczych Uniwersytetu Kırşehir Ahi Evran (BAP) w ramach Projektu nr TIP. A2.25.004.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
-80 stopni; C Deep Freezer (Model DF590)Nü veDF590Przechowywanie próbek przy − 80 stopni; C
Akrylowa rurka zabezpieczającaNie maNie maPrzezroczysty akrylowy ogranicznik (6 cm średnicy, 20 cm długości) używany do unieruchamiania podczas hirudoterapii
Automatyczny analizator biochemiczny (Alinity)AbbottNie maWykorzystywane do analizy parametrów biochemicznych surowicy
Automatyczny procesor tkanekLeica BiosystemsNie maOdwodnienie tkanek i infiltracja parafiny
Wirówka (Model FC5706)Korporacja OHAUSFC5706Maksymalna prędkość: 6000 obr./min (≈ 4000 i razy; g, w zależności od promienia wirnika)
Cyfrowy aparat mikroskopowy (Axiocam 208 kolorowy)Carl ZeissAxiocam 208 kolorPozyskiwanie obrazów w histopatologii
Eosin Y (żółtawy)Merck / Sigma-Aldrich1.15935.0025H& Barwienie E (składnik eozynowy)
Ethanol Absolute (99,5%)Tekkim KimyaTK.200655.05001Stosowane w serii odwodnienia etanolu
Roztwór Formaldehydu (~37%)Merck / Sigma-Aldrich1.04002.2500Wykorzystywane do utrwalania tkanek
Roztwór hematoksyliny HarrisaBESTLABBS-002H& Barwienie E (składnik hematoksyliny)
Chlorowodorek ketaminyKlasa farmaceutyczna (źródło komercyjne nie podano)Nie maStosowany do znieczulenia otrzewnewnego (75 mg/kg)
Mikroskop świetlny (Primo Star)Carl ZeissPrimo StarObrazowanie histopatologiczne
Masson' Zestaw do barwienia trichromowegoGBLREF 5022Stosowane do barwienia tkanki łącznej
Zmotoryzowana bieżnia dla gryzoniColumbus InstrumentsExer-3/6Wykorzystywane do ćwiczeń na bieżni z kontrolowaną prędkością i stymulacją elektryczną
Zestaw Rat Catalase (CAT) ELISABT LABE0869Rapłyta 96-dołkowa; Pomiar aktywności AT w surowicy
Zestaw ELISA do peroksydazy glutationu szczura (GPX1)Reed BiotechRE2557Rpłyta 96-dołkowa; Pomiar aktywności AT w surowicy
Zestaw ELISA z malondialdehydem szczura (MDA)BT LABE0156Rapłyta 96-dołkowa; Pomiar aktywności AT w surowicy
Zestaw ELISA do dysmutazy nadtlenku szczura (SOD)BT LABE0168Rapłyta 96-dołkowa; Pomiar aktywności AT w surowicy
Rotacyjny mikrotom (Autocut)Leica BiosystemsRM AutocutCięcie 5 μ Sekcje parafiny m
Ogrzewacz do zjeżdżalniLeica BiosystemsHI1210Suszenie preparatów histologicznych
Ksylazyna chlorowodorkowaKlasa farmaceutyczna (źródło komercyjne nie podano)Nie maStosowany do znieczulenia otrzewnewkowego (10 mg/kg)
Ksylen (mieszanina izomerów)Tekkim KimyaTK.090270.05003Oczyszczanie tkanek przed osadzeniem parafiny

Bibliografia

  1. Hosseini, M., Jadidi, A., Derakhshan Barjoei, M. M., Salehi, M. Applications of leech therapy in medicine: A systematic review. Front Med. 11, 1-7 (2024).
  2. Shakouri, A., Wollina, U. Time to change theory: medical leech from a molecular medicine perspective; leech salivary proteins playing a potential role in medicine. Adv Pharm Bull. 11 (2), 261-270 (2021).
  3. Alaama, M., et al. Development of leech extract as a therapeutic agent: A chronological review. Pharmacol Res - Mod Chin Med. 10, 100355(2024).
  4. Sig, A. K., Guney, M., Uskudar Guclu, A., Ozmen, E. Medicinal leech therapy–an overall perspective. Integr Med Res. 6 (4), 337-343 (2017).
  5. Brancaccio, P., Lippi, G., Maffulli, N. Biochemical markers of muscular damage. Clin Chem Lab Med. 48 (6), 757-767 (2010).
  6. Davoodi, F., et al. Leech therapy (Hirudo medicinalis) attenuates testicular damages induced by testicular ischemia/reperfusion in an animal model. BMC Vet Res. 17 (1), 1-15 (2021).
  7. Bilden, A., et al. Investigating the therapeutic potential of crude leech saliva based on its anticancer, antioxidant, and anti-inflammatory effects. Curr Issues Mol Biol. 47 (5), 328(2025).
  8. Ozkan, I., Ibrahim, C. H. Dehydration, skeletal muscle damage and inflammation before the competitions among the elite wrestlers. J Phys Ther Sci. 28 (1), 162-168 (2016).
  9. Röcker, L., Kiesewetter, H. Effect of physical exercise on laboratory test results. Clinical Laboratory Diagnostics. Thomas, L. , Frankfurt. Available from: https://clinical-laboratory-diagnostics.com/k51.html 51(2020).
  10. Torres, R., Koutakis, P., Forsse, J. The effects of different exercise intensities and modalities on cortisol production in healthy individuals: A review. J Exerc Nutr. 4 (4), 19(2021).
  11. Soslu, R., et al. Effects of high-intensity interval training program on pituitary function in basketball players: A randomized controlled trial. Front Physiol. 14, 1-10 (2023).
  12. Gordon, B. A., Taylor, C. J., Church, J. E., Cousins, S. D. A comparison of the gluco-regulatory responses to high-intensity interval exercise and resistance exercise. Int J Environ Res Public Health. 18 (1), 1-11 (2021).
  13. Zhang, X., Zhong, Y., Rajabi, S. Polyphenols and post-exercise muscle damage: A comprehensive review of the literature. Eur J Med Res. 30 (1), 260(2025).
  14. Martin, J. An evidence-based approach for optimising sports recovery practices following DOMS-inducing exercise: A systematic review and meta-analysis. , (2023).
  15. Wang, H., Wang, L., Pan, Y. Impact of different doses of cold water immersion (duration and temperature variations) on recovery from acute exercise-induced muscle damage: A network meta-analysis. Front Physiol. 16, 1-15 (2025).
  16. Cuevas-Cianca, S. I., Romero-Castillo, C., Gálvez-Romero, J. L., Juárez, Z. N., Hernández, L. R. Antioxidant and anti-inflammatory compounds from edible plants with anti-cancer activity and their potential use as drugs. Molecules. 28 (3), 1488(2023).
  17. Meriaux, C., et al. Multiple changes in peptide and lipid expression associated with regeneration in the nervous system of the medicinal leech. PLoS One. 6 (4), e18359(2011).
  18. Nédélec, M., et al. Recovery in soccer: Part 1. Sports Med. 42 (12), 997-1015 (2012).
  19. Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. Improving bioscience research reporting: The ARRIVE guidelines for reporting animal research. PLoS Biol. 8 (6), 6-10 (2010).
  20. Liu, Y., et al. Treadmill exercise alleviates neuroinflammation, demyelination, and apoptosis induced by hyperactivation of microglia in the hippocampus of senescent mice by regulating the SIRT1/PPARγ pathway. Neurochem Res. 50 (6), 330(2025).
  21. Bilden, A., et al. Effects of hirudotherapy on liver functions, lipid profile, and insulin sensitivity in rats with metabolic syndrome. BMC Complement Med Ther. 26 (1), 34(2026).
  22. Henderson, M. X. Hematoxylin and eosin stain for paraffin-embedded tissue sections. , (2023).
  23. Tiller, N. B., Wills, W. S. Exercise-induced increases in “liver function tests” in a healthy adult male: Is there a knowledge gap in primary care? J Fam Med Prim Care. 6 (2), 169-170 (2017).
  24. Chen, R., Ma, X., Ma, X., Cui, C. The effects of hydrotherapy and cryotherapy on recovery from acute post-exercise induced muscle damage: A network meta-analysis. BMC Musculoskelet Disord. 25 (1), 749(2024).
  25. Xiao, F., Kabachkova, A. V., Jiao, L., Zhao, H., Kapilevich, L. V. Effects of cold water immersion after exercise on fatigue recovery and exercise performance: Meta-analysis. Front Physiol. 14, 1-15 (2023).
  26. Gholami, M. The effect of massage on the exhausted aerobic exercise-induced muscle damage indicators in healthy young men. J Heal Reports Technol. 9 (4), e137253(2023).
  27. Bayram, S. Ş, Kızıltan, G. The role of omega-3 polyunsaturated fatty acids in diabetes mellitus management: A narrative review. Curr Nutr Rep. 13 (3), 527-551 (2024).
  28. Ni, C., et al. Effect of exercise and antioxidant supplementation on cellular lipid peroxidation in elderly individuals: Systematic review and network meta-analysis. Front Physiol. 14, 1113270(2023).
  29. Lamichhane, G., et al. Twelve-week curcumin supplementation improves glucose homeostasis and gut health in prediabetic older adults: A pilot, double-blind, placebo-controlled trial. Nutrients. 17 (13), 1-15 (2025).
  30. Zinkow, A., Grodzicki, W. Molecular mechanisms linking omega-3 fatty acids and the gut–brain axis. Molecules. 30, 71(2025).
  31. Ihsan, M., Abbiss, C. R., Allan, R. Adaptations to post-exercise cold water immersion: Friend, foe, or futile? Front Sports Act Living. 3, 2013-2020 (2021).
  32. Jackson, M. J. Exercise-induced adaptations to homeostasis of reactive oxygen species in skeletal muscle. Free Radic Biol Med. 225, 494-500 (2024).
  33. Powers, S. K., Jackson, M. J. Exercise-induced oxidative stress: Cellular mechanisms and impact on muscle force production. Physiol Rev. 88 (4), 1243-1276 (2008).
  34. Mason, S. A., Trewin, A. J., Parker, L., Wadley, G. D. Antioxidant supplements and endurance exercise: Current evidence and mechanistic insights. Redox Biol. 35, 101471(2020).
  35. Reed, E. L., et al. Cardiovascular and mood responses to an acute bout of cold water immersion. J Therm Biol. 118, 103727(2023).
  36. Ahmed, V., Marinova, D. Study of the effect of massage therapy on serum cortisol concentration in a patient with chronic stress. Eurasia Proc Heal Environ Life Sci. 16, 35-41 (2024).
  37. Wang, L., Meng, Q., Su, C. H. From food supplements to functional foods: Emerging perspectives on post-exercise recovery nutrition. Nutrients. 16 (23), 1-29 (2024).
  38. Hatakeyama, N., et al. Mechanical stimulation of the lower extremities with a textile-based pneumatic massager increases parasympathetic activity and lowers blood glucose levels. J Soc Fiber Sci Technol. 80 (2), 23-32 (2024).
  39. Hackney, A. C., Walz, E. A. Hormonal adaptation and the stress of exercise training: The role of glucocorticoids. Trends Sport Sci. 176 (5), 139-148 (2018).
  40. Hill, E. E., et al. Exercise and circulating cortisol levels: The intensity threshold effect. J Endocrinol Invest. 31 (7), 587-591 (2008).
  41. Kuo, T., Harris, C. A., Wang, J. C. Metabolic functions of glucocorticoid receptor in skeletal muscle. Mol Cell Endocrinol. 380 (1-2), 79-88 (2013).
  42. McKenna, M. J., et al. A century of exercise physiology: Effects of muscle contraction and exercise on skeletal muscle Na+,K+-ATPase, Na+ and K+ ions, and on plasma K+ concentration—historical developments. Eur J Appl Physiol. 124, 681-751 (2024).
  43. Baker, L. B., et al. Mild dehydration does not alter acute changes in sweat electrolyte concentrations during exercise. Physiol Rep. 12, 1-11 (2024).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Efekty biochemicznemarkery stresu oksydacyjnegouszkodzenie mi niregeneracja powysi kowaterapia przeciwzapalna
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki Korzystania

Zasady

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.