Artykuł metodologiczny

Zielona synteza nanocząsteczek magnezu z rodzimych neotropikalnych roślin sawanny do skalowalnych formuł nanofitokosmetycznych

DOI:

10.3791/70521

⸱

29 maja 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1S-Inova Biotech, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Universidade Católica Dom Bosco, 2Centro de Análises Proteômicas e Bioquímicas, Programa de Pós-graduação em Ciências Genômicas e Biotecnologia, Universidade Católica de Brasília

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Praca ta opisuje protokół do zielonej syntezy nanocząstek magnezu przy użyciu ekstraktu roślinnego Stryphnodendron adstringens , gatunku z rodzimej sawanny neotropikalnej, a następnie ich włączenie i ocenę w formulacji surowicy kosmetycznej.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Niniejsze badanie opisuje protokół zielonej syntezy nanocząstek na bazie magnezu przy użyciu ekstraktów etanolowych z adstringenów Stryphnodendron, gatunku rośliny pochodzącego z neotropikalnej sawanny, oraz ich włączenie do formuł nanofitokosmetycznych. Procedura obejmuje zbieranie i przygotowanie materiału roślinnego, a następnie ekstrakcji etanolem, w której fitochemikalia działają jako środki redukcyjne i stabilizujące jony magnezu. Nanocząstki są syntetyzowane w kontrolowanych warunkach, z użyciem chlorku magnezu i ekstraktów roślinnych, co umożliwia przyjazny środowisku proces bez użycia toksycznych środków redukcyjnych. Właściwości nanocząstek charakteryzuje się za pomocą dynamicznego rozpraszania światła oraz mikroskopii siły atomowej w celu oceny rozkładu rozmiarów, morfologii i zachowania koloidalnego. Protokół opisuje ponadto włączenie syntetyzowanych nanocząstek do formuły surowicy kosmetycznej. Stabilność ocenia się w warunkach kontrolowanego przechowywania poprzez monitorowanie właściwości organoletycznych, pH i lepkości. Metoda ta zapewnia powtarzalne i zrównoważone podejście do produkcji roślinnych nanocząstek magnezu oraz oceny ich zastosowania w preparatach kosmetycznych.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fitogeograficzna domena Cerrado, która obejmuje największą neotropikalną formację sawanny w Ameryce Południowej, stanowi najbardziej bioróżnorodny region tropikalnej sawanny na świecie. Ten ekosystem kryje tysiące gatunków roślin bogatych w metabolity wtórne, takie jak flawonoidy, polifenole, terpeny i kwasy fenolowe, z których wiele wykazuje udokumentowane działanie antyoksydacyjne, przeciwzapalne i fotoprotekcyjne, interesujące dla przemysłu kosmetycznego i farmaceutycznego 1,2,3,4 . Fitochemikalia te są szeroko wykorzystywane jako wartościowe składniki aktywne w funkcjonalnych preparatach kosmetycznych. Oprócz aktywności biologicznej, grupy funkcyjne hydroksylu i karbonylu obecne w wielu polifenolach i flawonoidach umożliwiają im działanie jako naturalne środki redukujące i stabilizujące jony metali w roztworze 5,6. Ta właściwość chemiczna jest coraz częściej badana w zielonej nanotechnologii do syntezy nanocząstek metali, co stanowi obiecującą i niedostatecznie wykorzystaną szansę na opracowanie zrównoważonych formuł kosmetycznych pochodzących z neotropikalnej bioróżnorodności 2,3,4,5,6.

Tradycyjnie nanocząstki (NP) powstawały metodą podejścia odgórnego, w którym materiały masowe rozkładano na nanocząstki za pomocą metod fizycznych, takich jak laserowa ablacja czy sputtering, oraz podejścia oddolne, gdzie NP budowane są z mniejszych jednostek przy użyciu dróg chemicznych lub biologicznych7. Chociaż metody chemiczne i fizyczne są skuteczne, często opierają się na toksycznych odczynnikach, wysokim zużyciu energii i złożonym sprzęcie. To doprowadziło do rozwoju podejść zielonej chemii, które kładą nacisk na zrównoważony rozwój, przyjazność dla środowiska i bezpieczeństwo w produkcji nanomateriałów6.

W tym kontekście zielona synteza NP zyskała znaczną uwagę. Zdolność fitochemikaliów roślinnych do jednoczesnego działania jako środki redukujące, stabilizujące i pokrywające, umożliwiając efektywną syntezę metali i tlenku metalu NP, w połączeniu z ograniczeniami konwencjonalnych metod, które wymagają specjalistycznego sprzętu, ekstremalnych warunków i generują toksyczne odpady, uzasadnia opracowanie protokołu zielonej syntezy działającego w umiarkowanych warunkach i jest skalowalna. i nie produkuje niebezpiecznych produktówubocznych 6,7,8,9. Wśród NP tlenku metalu badanych w tej strategii, nanocząstki magnezu (MgNP) oferują istotne przewagi nad nanocząstkami srebra (AgNP) i nanocząstkami tlenku cynku (ZnO NP), ponieważ MgNP nie wykazują tendencji do bioakumulacji, wykazują niższą cytotoksyczność w komórkach ludzkich i są uznawane przez Amerykańską Agencję ds. Żywności i Leków (FDA) za ogólnie bezpieczne substancje dla ludzi10, 11. Dodatkowo, MgNP syntetyzowane z ekstraktów roślinnych Cerrado mają łączyć właściwości antyoksydacyjne i antybakteryjne magnezu z bioaktywnymi fitochemikaliami obecnymi w ekstrakcie, zwiększając tym samym ich kosmetyczną wartość funkcjonalną w porównaniu do konwencjonalnie syntetyzowanychodpowiedników 10.

W przemyśle kosmetycznym zastosowanie nanotechnologii zrewolucjonizowało rozwój produktów, poprawiając dostarczanie, stabilność i skuteczność składników aktywnych11. NP mogą przenikać głębiej w skórę, zapewniać kontrolowane uwalnianie i chronić wrażliwe związki przed degradacją, co czyni je bardzo cennymi w formułach skierowanych na starzenie się skóry, pigmentację, trądzik i ochronę przed słońcem10. Pomimo tych udokumentowanych zalet, zielona synteza MgNP wykorzystujących rodzime rośliny z sawann neotropikalnych jako środków redukcyjnych do zastosowań kosmetycznych pozostaje w dużej mierze niezbadana i brakuje jej standaryzacji metodologicznej. w przeciwieństwie do powszechnie zgłaszanych informacji o roślinach z Azji, Afryki i Europy 11,12,13,14. Większość istniejących badań poświęca ograniczoną uwagę włączeniu NP do funkcjonalnych formuł kosmetycznych oraz ich stabilności w warunkach kontrolowanego przechowywania 11,14,15. Obecny protokół pomaga wypełnić tę lukę metodologiczną, integrując w jednej, powtarzalnej metodologii zieloną syntezę MgNP z neotropikalnej flory, ich włączenie do nanofitokosmetycznej surowicy twarzy oraz kompleksową ocenę ich stabilności fizykochemicznej i funkcjonalnej.

Głównym celem tego protokołu jest opisanie standaryzowanej, powtarzalnej i skalowalnej metodologii zielonej syntezy MgNP z wykorzystą adstringenów Stryphnodendron, rośliny rodzimej dla sawann neotropikalnych Cerrado, jako czynnika redukującego i stabilizującego, wykorzystując tym samym jej wewnętrzne właściwości bioaktywne w formulacji surowicy twarzy. Rozwój MgNP syntetyzowanych z adstringenów S. do zastosowań miejscowych u ludzi stanowi nowatorską nanoformułę obecnie chronioną na podstawie brazylijskiego zgłoszenia patentowego (BR 10 2025 015416 1). Proponowany projekt eksperymentalny stanowi zrównoważone i biokompatybilne podejście do produkcji NP, unikające stosowania toksycznych środków redukcyjnych powszechnie stosowanych w konwencjonalnej syntezie NP, jednocześnie ułatwiając włączenie fitochemikaliów o potencjalnej aktywności biologicznej. Protokół ten jest szczególnie odpowiedni dla badaczy poszukujących przyjaznych środowisku metod wytwarzania nanocząsteczek do zastosowań kosmetycznych, farmaceutycznych lub biomedycznych, zwłaszcza gdy dostępne są ekstrakty roślinne bogate w flawonoidy i polifenole. Ponieważ związki te działają jako naturalne środki redukujące i stabilizujące, protokół ten można łatwo dostosować do innych gatunków roślin o podobnych profilach fitochemicznych, co pozwala na zastosowanie do rodzimej flory z różnych regionów biogeograficznych w oparciu o lokalną dostępność materiału roślinnego.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Materiał roślinny

  1. Selekcja i dokumentacja
    1. Wybierz zdrowe rośliny S. adstringens rosnące w reprezentatywnych obszarach środowiska naturalnego do zbierania kory. Zapisz miejsce pobierania próbek, datę pobrania, współrzędne geograficzne za pomocą urządzenia GPS oraz lokalne warunki środowiskowe w momencie pobierania.
    2. Przeprowadz identyfikację botaniczną na podstawie specjalistycznej literatury taksonomicznej dla gatunków neotropikalnych sawann. Potwierdź identyfikację, konsultując się z wykwalifikowanym taksonomem17.
    3. Zbieranie i oddzielanie reprezentatywnego materiału roślinnego do dokumentacji zielnika, w tym struktur wegetatywnych i rozrodczych (np. liście, kwiaty, owoce i małe gałązki).
      UWAGA: Zbieraj materiał z zielnika oddzielnie od kory używanej do procedur eksperymentalnych. Prasuj i susz materiał roślinny standardowymi technikami zielnika, montuj okazy voucherowe i składaj je w uznanym zielniku, aby zapewnić śledzenie.
  2. Zbieranie kory
    1. Zbieraj korę z pnia drzewa S. adstringens na etapach BBCH (Biologische Bundesanstalt, Bundessortenamt i Chemische Industrie) 31–39, odpowiadającym fazie wzrostu wegetatywnego opisanej w wcześniejszych badaniach fenologicznych16,17.
      UWAGA: Przechowywać zebrany materiał w ciemnym worku, aby zapobiec degradacji metabolitów wtórnych oraz degradacji metabolitów wtórnych.
  3. Określanie wilgotności
    1. Waż próbki kory za pomocą wagi analitycznej. Podziel materiał na trzy repliki i zapisz początkowe wagi.
    2. Próbki kory umieść w piecu w temperaturze 105 °C. Susz próbki, aż osiągną stałą wagę.
      UWAGA: Stała waga osiąga się, gdy dwa kolejne pomiary różnią się nie więcej niż o 1 mg, co wskazuje na całkowite usunięcie wilgoci.
    3. Wyjmij próbki z piekarnika, pozwól im ostygnąć do temperatury pokojowej i zapisz ostateczną wagę. Oblicz zawartość wilgoci i suchej materii za pomocą następujących równań:
      figure-protocol-1
      Sucha materia (%) = 100 - Wilgotność (%)
      Gdzie:
      W1 = waga pustego pojemnika
      W2 = waga pojemnika + próbka przed suszeniem
      W3 = waga pojemnika + próbka po wysuszeniu

2. Przygotowanie ekstraktu

UWAGA: Wszystkie procedury związane z materiałami niebezpiecznymi były przeprowadzane zgodnie z międzynarodowo uznanymi wytycznymi dotyczącymi bezpieczeństwa chemicznego18.

  1. Opłucz świeżo zebraną korę bieżącą wodą, aby usunąć glebę, kurz i zanieczyszczenia powierzchniowe.
  2. Próbki kory umieść w piecu w temperaturze 36 °C na 72 godziny. Zmielić wysuszoną korę za pomocą młynka nożowego, aby uzyskać drobny proszek.
  3. Zważ 200 g sproszkowanej kory i przelej ją do kolby Erlenmeyera. Dodaj 1000 ml etanolu 98%.
    UWAGA: Etanol jest wysoce łatwopalny. Trzymaj się z dala od źródeł zapłonu i pracuj w dobrze wentylowanym pomieszczeniu.
  4. Zamknij kolbę i utrzymuj ją w temperaturze pokojowej przez 72 godziny, chronioną przed światłem. Mieszaj mieszankę raz na 24 godziny.
  5. Ekstrakt najpierw przefiltruj przez metalową siatkę, a następnie przez bawełnę, używając lejka, aby usunąć resztki zanieczyszczenia.

3. Ocena aktywności antyoksydacyjnej

  1. Przygotuj roztwór DPPH o pojemności 100 mM (2,2-difenylo-1-picyklohydrazyl) w metanolu.
    UWAGA: Metanol jest toksyczny i wysoce łatwopalny. Noszę okap i noszę odpowiedni sprzęt ochronny. DPPH jest drażniąca i może być szkodliwa, jeśli zostanie wdychana lub połknięta. Unikaj bezpośredniego kontaktu i wdechu.
    UWAGA: Chroń roztwór przed światłem, wykonując badanie w warunkach słabego oświetlenia, a przy obchodzeniu się z metanolem i DPPH zawsze wykonuj w rękawiczkach.
  2. Rozcieńcz ekstrakt z kory etanolicznej S. adstringens w metanolu, aby uzyskać stężenia od 0,1% do 5% (v/v). Przygotuj roztwory witaminy C w tych samych stężeniach jako kontrolę dodatnią.
  3. Do każdej studni płyty 96-dołowej należy podać 100 μL roztworu DPPH.
  4. Dodaj 50 μL ekstraktu lub roztworu witaminy C do każdego dołka.
    UWAGA: Użyj DPPH + metanolu jako kontroli ujemnej, a metanolu jako blanku. Wszystkie pomiary wykonuj w trybie czterokrotnym.
  5. Inkubuj płytkę przez 30 minut w temperaturze pokojowej w ciemności.
  6. Zmierz absorpcję przy 515 nm za pomocą spektrofotometru.
  7. Oblicz aktywność radykalnego wypławiania za pomocą następującego równania:
    figure-protocol-2
    Gdzie:
    Kontrola ABS = absorpcja DPPH + metanol
    Próbka ABS = absorbancja DPPH + ekstrakt

4. Analiza żywotności komórek

  1. Hodowanie prawidłowych ludzkich fibroblastów skórnych (NHDF) w podłożu RPMI-1640 z dodatkiem 10% surowicy płodowej bydła i 1% penicylin-streptomycyny. Utrzymuj ogniwa w temperaturze 37 °C przy stężeniu 5% CO₂.
  2. Komórki nasienne przekształcają się w płytki z 96 dołkami na 3 × 104 komórek /dołek i inkubują przez 24 godziny.
  3. Zamień podłoże na 100 μL świeżego medium i dodaj 50 μL roztworu ekstraktu. Inkubuj przez 24 godziny.
  4. Usuń podłoże i dodaj 10 μL roztworu MTT do każdego dołka. Inkubuj przez 4 godziny, aby umożliwić formowanie formazu.
    UWAGA: Odczynnik MTT jest toksyczny i należy go obchodzić w rękawiczkach oraz odpowiednim środku ochronnym. Unikaj kontaktu skórnego i wzrokowego.
  5. Dodaj 60 μL roztworu rozpuszczalności (HCl w izopropanolu), aby rozpuścić kryształy.
    UWAGA: Kwas solny jest żrący i może powodować poważne oparzenia. Obchodzić się z odpowiednim sprzętem ochronnym i pracować w okapie przeciwparowym. Izopropanol jest łatwopalny i należy go obchodzić z dala od źródeł zapłonu w dobrze wentylowanym miejscu.
  6. Zmierz absorpcję przy 540 nm za pomocą spektrofotometru.
    UWAGA: Testy żywotności komórek przeprowadzono w grupach kontrolnych leczonej i nieleczonej, przy czym każdy stan analizowano w czterokrotnych dołkach.
  7. Oblicz żywotność komórek za pomocą:
    Żywotność komórek (%) = (Ekstrakt próbki ABS/Kontrola komórek ABS) x 100
    Gdzie:
    ABS Cell Control = absorpcja nieprzetworzonych dołków kontrolnych zawierających wyłącznie komórki i pożywkę hodowlową.
    Ekstrakt próbki ABS = chłonność studni zawierających komórki objęte ekstraktem roślinnym.

5. Zielona synteza nanocząstek magnezu

  1. Dodaj 9890 μL wody destylowanej do sterylnej rurki reakcyjnej.
  2. Dodaj 100 μL ekstraktu roślinnego.
  3. Dodaj 10 μL 1 M MgCl₂, aby uzyskać końcowe stężenie 10 mM.
    UWAGA: Chlorek magnezu może powodować podrażnienia. Obchodzić się z odpowiednim sprzętem ochronnym i unikać kontaktu z oczami oraz skórą.
    UWAGA: Reakcja bazowa składa się z 1% ekstraktu (v/v) + 10 mM MgCl₂ w objętości 10 mL. Aby zoptymalizować powstawanie NP, stężenie ekstraktu można dostosować, zachowując końcową objętość i stężenie MgCl₂.
  4. Dokładnie wymieszaj, aby ujednolicić roztwór.
  5. Inkubuj w temperaturze 75 °C przez 18 godzin.
    UWAGA: Podwyższone temperatury mogą powodować oparzenia. Używaj odpowiedniego sprzętu ochronnego podczas obsługi podgrzanych próbek.
    UWAGA: Zmiana koloru może wskazywać na powstawanie nanocząstek.
  6. Pozwól mieszance ostygnąć do temperatury pokojowej przed charakterystyką.

6. Charakteryzacja nanocząstek

  1. Dynamiczne rozpraszanie światła (DLS)
    1. Przenieś ~750 μL zawiesiny nanocząstek do komórki pomiarowej.
    2. Umieść komórkę w przyrządzie i wykonaj pomiary w temperaturze 25 °C.
    3. Zbieraj dane o rozmiarze cząstek za pomocą odpowiedniego trybu detekcji.
    4. Analizuj każdą próbkę w trzech egzemplarzach, z pięcioma podpróbowaniami na pomiar.
  2. Mikroskopia sił atomowych (AFM)
    1. Nałóż 10 μL zawiesiny nanocząstek na świeżo rozszczepioną mikę.
    2. Susz próbkę w osuszacu przez 2 godziny.
    3. Delikatnie opłucz arkusz miki trzy razy 20 μL przefiltrowanej wody destylowanej. Zwróć próbkę do osuszacza i pozwól jej wyschnąć w temperaturze pokojowej przez dodatkowe 2 godziny.
      UWAGA: Płukanie usuwa nadmiar soli i poprawia jakość obrazu.
    4. Konfiguruj mikroskop sił atomowych, wykonując konfigurację instrumentów i wyrównanie lasera zgodnie z instrukcjami producenta. Wykonaj zdjęcia powierzchniowe NP o obszarze skanowania 500 × 500 nm.
      UWAGA: AFM służy do jakościowej oceny chropowatości powierzchni oraz wizualizacji cech morfologicznych MgNP syntetyzowanych z S. adstringens, generując wysokorozdzielcze, trójwymiarowe obrazy powierzchni.

7. Formułowanie nanofitokosmetycznej substancji

  1. Faza podgrzewana
    1. Waż 29,7 g wody oczyszczonej, 0,50 g hydroksyetylocelulozy (HEC) oraz 3 g gliceryny w osobnych pojemnikach.
    2. Włóż wodę do mieszadła magnetycznego i podgrzej do 70–75 °C delikatnym mieszaniem.
    3. Stopniowo dodawaj HEC do podgrzanej wody i mieszając, aby uniknąć zgrudkowania.
      UWAGA: Nawodnienie może wymagać 15–30 minut.
    4. Dodaj glicerynę i mieszaj, aż uzyskasz jednorodną formę.
  2. Faza chłodzenia
    1. W oddzielnych zlewkach waż 30 g oczyszczonej wody, 3 g niacynamidu, 33,3 g MgNP zsyntetyzowanych z adstringens S. adstringens, 0,3 g kwasu hialuronowego o niskiej masie cząsteczkowej oraz 0,2 g alkoholu benzylowego i kwasu dehydrooctowego, aby utworzyć fazę chłodzenia.
    2. Rozpuszcz niacynamid całkowicie w wodzie w temperaturze pokojowej.
    3. Dodaj kwas hialuronowy i mieszaj, aż będzie równo.
    4. Dodaj S. adstringens MgNPs i delikatnie wymieszaj.
    5. Dodaj konserwant i wymieszaj.
  3. Miksowanie
    1. Schłodzić podgrzaną fazę do ~40 °C.
    2. Stopniowo dodaj fazę chłodzenia do fazy podgrzanej podczas mieszania.
    3. Zmierz pH preparatu. Dla formuł surowicy zawierających niacynamid odpowiedni jest docelowy pH 5,0–6,5.
      UWAGA: Niacynamid jest stabilny w okolicach pH od neutralnego do lekko kwaśnego. Używaj niewielkich ilości kwasu cytrynowego lub wodorotlenku sodu, aby w razie potrzeby dostosować pH.

8. Ocena stabilności kosmetycznej

  1. Stabilność wstępna (12 dni)
    1. Przygotuj cztery replikowane próbki serum kosmetycznego w szczelnie zamkniętych pojemnikach.
    2. Poddaj próbki sześciu kolejnym cyklom zamrażania i rozmrażania. Przechowuj próbki w temperaturze 50 °C przez 24 godziny, a następnie w −5 °C przez 24 godziny, kończąc jeden pełny cykl co 48 godzin.
    3. Po każdym cyklu rejestruj cechy organoletyczne, obserwując formułę pod kątem zmian w wyglądzie, kolorze, zapachu i separacji fazowej.
    4. Zmierz pH czterech próbek w temperaturze pokojowej, używając skalibrowanego cyfrowego miernika pH. Określ lepkość za pomocą wiskometru obrotowego zgodnie z instrukcjami producenta sprzętu.
      UWAGA: Akceptowalne są wariacje ≤10%. Zmiany przekraczające ten próg mogą wskazywać na niestabilność formuły i powinny być dalej zbadane. Jeśli formuła przejdzie wstępne badanie, przeprowadź przyspieszony test stabilności.
  2. Przyspieszona stabilność (90 dni)
    1. Przygotuj osiem próbek preparatu kosmetycznego. Przechowuj cztery próbki w temperaturze 50 °C i cztery w 4 °C.
    2. Oceniaj po 0, 1, 7, 15, 30, 60 i 90 dniach.
    3. Oceń i rejestruj cechy organoletyczne, obserwując formułę pod kątem zmian w wyglądzie, kolorze, zapachu i separacji fazowej.
    4. Zmierz pH próbek w temperaturze pokojowej, używając skalibrowanego cyfrowego miernika pH. Określ lepkość za pomocą wiskometru obrotowego zgodnie z instrukcjami producenta sprzętu.
      UWAGA: Ocena stabilności została przeprowadzona zgodnie z wytycznymi ustalone przez Brazylijską Agencję Nadzoru Zdrowia19. W Stanach Zjednoczonych testy stabilności są zgodne z zaleceniami FDA20. W Unii Europejskiej ocena stabilności jest zgodna z Rozporządzeniem (WE) nr 1223/200921, które nakazuje dołączenie Raportu o Bezpieczeństwie Produktów Kosmetycznych (CPSR). Załącznik I niniejszego rozporządzenia wymaga udokumentowanych danych o stabilności, aby wspierać bezpieczeństwo i trwałość formuły kosmetycznej, przy czym testy są zazwyczaj przeprowadzane zgodnie z harmonizowanymi wytycznymi ISO/TR 18811:201822, "Wytyczne dotyczące testów stabilności produktów kosmetycznych".

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Proces suszenia kory roślinnej jest kluczowym krokiem w zachowaniu związków bioaktywnych i zapewnieniu ich zastosowania w przemyśle spożywczym, farmaceutycznym i kosmecetycznym. Z kolei niewystarczające suszenie może prowadzić do nadmiernego przyciemnienia, utraty aromatu, skażenia mikroorganizmów oraz degradacji związków bioaktywnych, co obniża jakość surowej kory. Tabela 1 podsumowuje kryteria stosowane do rozróżniania prawidłowo i niewłaściwie suszonego materiału roślinnego.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Przedstawiony tutaj protokół opisuje powtarzalny sposób pracy dla zielonej syntezy MgNP z wykorzystaniem ekstraktu S. adstringens oraz ich włączenia do formuły surowicy nanofitokosmetycznej. Kilka kroków jest niezbędnych, aby zapewnić wiarygodne rezultaty. Po pierwsze, zbieranie i dokumentacja materiału roślinnego musi być starannie ustandaryzowana, w tym dokładne rejestrowanie współrzędnych geograficznych, warunków środowiskowych i stadium fenologicznego, ponieważ zmienność fizjologii rośliny i wtórnej zawartoś...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów. Źródła finansowania nie miały żadnej roli w projektowaniu badania, zbieraniu danych, analizie, interpretacji ani decyzji o publikacji wyników.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy pragną podziękować Universidade Católica Dom Bosco oraz Universidade Católica Brasília za wsparcie podczas budowy tego dzieła. Prace te były również wspierane przez Conselho Nacional de Pesquisa (CNPq), Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal (FAPDF), Financiadora de Estudos e Projetos (FINEP) oraz Fundação de Apoio à Pesquisa do Mato Grosso do Sul (FUNDECT).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Płyty z 96 dołamiSigma-AldrichM0812Testy komórkowe
Benzylalkohol i Kwas dehydrooctowySigma-Aldrich1,09,626Konserwant
Rurki wirówkowe (15 mL / 50 mL)Sokół (Corning)430766Obsługa próbek
Kwas cytrynowySigma-AldrichC0759Regulacja pH
Inkubator CO2ThermoFisher Scientific3110Inkubator CO2 stosowany do hodowli komórek
Materiał do filtrów bawełnianychLokalny dostawcaLH R/260Filtracja
Suszarkamerck BAF424002141Suszenie
DPPH (2,2-difenyl-1-pikrylhydrazyl)Sigma-AldrichD9132Badanie antyoksydacyjne
SuszarkaNovaÉ tica400/5NDRPiec do suszenia materiału roślinnego
Łatwy piekarnikSolidSteelSSE-85LPiekarnik używany do testów stabilności kosmetycznej
Kolby Erlenmeyera 1000 mLPRACA SAMOWIDRYCZNA76200B01000Ekstrakcja
Etanol (98%)Dinamica-Quimica contemporaneaS.10.0051.015.36Rozpuszczalnik ekstrakcyjny
Serum bydła płodu (FBS)Gibco (Thermo Fisher)ES-009-CSuplementacja
ZamrażarkaGeloparGTPC-575Zamrażarka używana do testów stabilności
GlicerynaBottica botanikaTBV084.003904.086Nawilżacz
Kwas hialuronowy (niskiej masy cząsteczkowej)Bottica botanikaJ201220136Środek nawadniający
Kwas solny (HCl)Sigma-Aldrich1,00,317Rozpuszczalność MTT
Hydroksyetyloceluloza (HEC)Bottica botanikaAH230641697Zagęszczacz
IzopropanolSigma-Aldrich100995 Rozpuszczalność MTT
Młyn noży7LAB920Willye 4& razy; 4 OstrzaMielenie liści, korzeni, nasion i bulw
Chlorek magnezu (MgCl2)Sigma-Aldrich1,01,872Synteza nanocząstek
mieszadło magnetyczne– Płyta grzewczaIKA5030000Miksowanie
MetanolSigma-Aldrich900641Badanie DPPH
Arkusze mikiThermoFisher ScientificNC9655733Przygotowanie do AFM
Czytnik mikropłytThermoFisher ScientificMultiskan GO 1510-03581Czytnik mikropłyt
Odczynnik MTTSigma-AldrichCT01-5Badanie żywotności komórki
Komórki NHDFBCRJ0089Ludzkie fibroblasty skórne
NiacynamidBottica botanika211847Składnik aktywny
PiekarnikTermo ScientificPR305225MSuszenie
Penicylina– StreptomycynaGibco (Thermo Fisher)15140122Antybiotyk
pHmeterDigimedDM-220Stosowany do monotorowania pH w testach stabilności
Pipety i wskazówki Eppendorf30078551Obsługa cieczy
Woda oczyszczona / destylowanaMerck (Milli-Q)ZIX7010T0COgólne zastosowanie
LodówkaMetalfrioVB40W Lodówka używana do testów stabilności
Wiskometr obrotowyNovotestVISC-5SAWykorzystywane do pomiaru widoczności w testach stabilności
RPMI-1640 średniGibco (Thermo Fisher)  11875093Hodowla komórkowa
SkalaBEL InżynieriaHPBG-2285Waga do ważenia materiałów
Mikroskop sondowy skanującySHIMADZUSPM-9700HTAFM, mikroskop sondowy skanujący
Wodorotlenek sodu (NaOH)Dinamica-Quimica contemporaneaP.10.0594.024.00Regulacja pH
SpektrofotometrThermoFisher ScientificA51119700CAbsorpcja
Witamina C (kwas askorbinowy)Sigma-AldrichPHR1008Kontrola dodatnia
Zetasizer ProMalvern PanalyticalZetasizer ProDla dynamicznego rozpraszania światła i rozmiaru zety

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Plant ExtractsEthanol ExtractionStryphnodendron AdstringensDynamic Light ScatteringAtomic Force MicroscopyColloidal StabilityCosmetic Serum
Film wkrótce dostępny

Powiązane artykuły