Badanie to wykazało techniczną wykonalność pilotażowego modelu zespolenia kręgosłupa u szczurów z użyciem tylnego koszyka i fiksacji płytki. Analiza histomorphometryczna po 12 tygodniach potwierdziła ciągłe łączenie kości i wyraźne wzorce dojrzewania kości wewnątrz koszyka. Ten techniczny model służy jako wstępna podstawa dla przyszłych dużych badań.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł badawczy
Opracowanie modelu fuzji międzycieleskowej ogona szczura: Pilotażowe badanie wykonalności
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Kręgi ogonowe szczurów są szeroko stosowane w badaniach nad regeneracją kości i fuzją kręgosłupa jako wygodne miejsca do testowania materiałów na transplantaty kostne i implantów. Wcześniejsze modele łączenia ogonów szczurów osiągnęły łączenie międzykręgowe poprzez usunięcie krążka i przeszczepienie kości, lub za pomocą zewnętrznych urządzeń do fiksacji. Mimo to, żaden taki model na małych zwierzętach nie został opracowany, który wykorzystywał klatki do fuzji międzykręgowej analogiczne do tych stosowanych klinicznie. Założono, że można ustanowić oceniane środowisko fuzji kości bez powikłań neurologicznych poprzez wykonanie tylnego wstawienia klatki naśladującego procedury kliniczne, uzupełnione fiksacją płytkową, w kręgach ogonowych szczurów. Ta wstępna pilotażowa studia (n = 1) została zaprojektowana w celu oceny wykonalności technicznej. Opracowano podejście chirurgiczne, w którym miniaturyzowana tytanowa klatka została precyzyjnie włożona do przestrzeni krążkowej między sąsiednimi kręgami ogonowymi, co ściśle naśladuje ludzką procedurę chirurgiczną. Tytan został wybrany dla klatki ze względu na jej szerokie zastosowanie kliniczne i biokompatybilność. Wstępne wyniki wykazały techniczną wykonalność tego podejścia. Wszczepiona klatka utrzymywała wysokość krążka i wyprostowanie kręgosłupa. Obserwowano progresywne wrastania kości przez klatkę, co zakończyło się potwierdzonym ciągłym połączeniem kostnym przez przestrzeń międzykręgową w 12 tygodni po operacji. Obecność ciągłej struktury łącznotkankowej oraz brak przesłoniętego tkanki włóknistej zostały potwierdzone radiologicznie i histologicznie. Ogólnie rzecz biorąc, ten oparty na klatce model łączenia ogona szczura zapewnia obiecującą platformę do oceny nowych biomateriałów i badania mechanizmów fuzji kości międzykręgowych. Jednak brak grupy kontrolnej i analizy statystycznej, z powodu jednoosobowego projektu, ogranicza ogólność tych wyników i wymaga dalszej weryfikacji.
Wprowadzenie
Fusja międzykręgowa jest uznanym leczeniem chirurgicznym dla różnych zaburzeń kręgosłupa, w tym niestabilności, spondylolistozy i chorób zwyrodnieniowych; szczególnie, ewoluowała przez około 70 lat jako standardowa procedura1,2. Zabieg polega na usunięciu krążka międzykręgowego i włożeniu klatki lub przeszczepu kości, aby promować solidną fuzję między sąsiednimi kręgami3,4. Co więcej, dodanie tylnego instrumentarium z klatką zmniejsza wskaźniki psuenartrozy i rozszerza jego wskazania kliniczne5. Niemniej jednak, powikłania takie jak psuenartroza i osiadanie klatki pozostają znaczącymi wyzwaniami klinicznymi, które wymagają niezawodnego opracowania modelu przedklinicznego do oceny nowych materiałów i czynników promujących fuzję6,7.
Węże były szeroko stosowane w badaniach nad fuzją kręgosłupa ze względu na ich ekonomiczną opłacalność, szybkie rozmnażanie, szybkie gojenie i łatwość obsługi8,9. Niemniej jednak, istniejące modele fuzji międzykręgowej u szczurów wykazują znaczne ograniczenia. W szczególności, przedni dostęp międzykręgowy lędźwiowy (ALIF) u szczurów wymaga poważnej manipulacji naczyń i narządów brzusznych, co skutkuje dużą inwazyjnością chirurgiczną i znacznym ryzykiem powikłań10,11. Przedni dostęp międzykręgowy lędźwiowy (PLIF) wiąże się z nieunikniony ryzykiem uszkodzenia neurologicznego z powodu niezwykle małych kanałów kręgowych i elementów nerwowych, co sprawia, że odprowadzenie nerwu jest prawie niemożliwe12. W rezultacie, większość badań na szczurach ograniczała się do fuzji tylno-bocznej (PLF), która strukturalnie nie pozwala na badanie mechanizmów fuzji kości w klatce, co jest krytycznym aspektem w warunkach klinicznych13. Co więcej, choć istnieją modele ogonowe, brakuje im systemu oceny, który integruje kliniczna klatka międzykręgowa z tyłowym mocowaniem płytki.
Ogon kręgosłupa u szczurów oferuje unikalne zalety dla badań nad fuzją międzykręgową. Dyski ogonowe wykazują silne podobieństwa geometryczne, składowe i mechaniczne do ludzkich krążków lędźwiowych, co sprawia, że są coraz bardziej popularne w badaniach nad krążkami14,15. Ponadto, chirurgia ogonowa zapewnia łatwy dostęp chirurgiczny, opłacalność i szybki pooperacyjny okres rekonwalescencji w porównaniu z podejściami lędźwiowymi16. Jednak do tej pory, żadne badania nie zgłosiły udanego włożenia klatki tylnej w szczurzym ogonie z szczegółową oceną histologiczną formowania kości wewnątrz i wokół klatki.
Ocena histologiczna, szczególnie dotycząca niedekalizacji histmorfometrii kości, pozostaje złotym standardem w ocenie osseointegracji i fuzji kostnej17,18. W szczególności, umożliwia ilościową analizę krytycznych parametrów formowania kości, w tym objętość kości/objętość tkanki (BV/TV), liczbę belkową i grubość belki, umożliwiając jednocześnie jakościową ocenę dojrzałości kości poprzez rozróżnienie kości węglanowej i warstwownej19,20. Taka szczegółowa ocena histmorfometryczna może ujawnić przestrzenne i czasowe wzorce osteokondukcji w klatce i na granicach klatka-kręg21,22. Niemniej jednak, kompleksowa ocena histmorfometryczna osteokondukcji klatki w modelach na szczurach jest niedostateczna.
Celem niniejszego badania było opracowanie pilotażowego modelu fuzji międzykręgowej ogona u szczurów z wykorzystaniem włożenia klatki tylnej i uzupełniającego mocowania płytki, aby wykazać jego techniczną wykonalność. W badaniu przedstawiono szczegółową technikę chirurgiczną i kompleksową ocenę histologiczną formowania kości wewnątrz klatki i na granicach końcówki kręgu. Zakładano, że można ustanowić oceniające środowisko fuzji kości bez powikłań neurologicznych poprzez wykonanie włożenia klatki tylnej naśladującego procedury kliniczne, uzupełnione mocowem płytki, w kłębuszach ogonowych szczura. Ten model zapewnia wydajną platformę do oceny materiałów fuzji międzykręgowej i, w istniejącej literaturze, reprezentuje początkowe techniczne zbadanie pomyślnego umieszczenia klatki tylnej za pomocą oceny osteokondukcji histmorfometrycznej w modelu na szczurach.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały przeprowadzone zgodnie z protokołami zatwierdzonymi przez Komitet ds. Opieki i Korzystania ze Zwierząt Uniwersytetu Jikei (numer zatwierdzenia 2023–034C1). Badanie to zostało zaprojektowane jako pilotażowe badanie wykonalności. Aby ocenić techniczną wykonalność tej niezwykle delikatnej i nowatorskiej procedury wprowadzania klatki tylnej do ogonowego odcinka kręgosłupa szczura przed walidacją na większą skalę, zgodnie z wytycznymi etycznymi, w celu zminimalizowania liczby zwierząt podczas wstępnej oceny technicznej, wykorzystano jedno zwierzę (n = 1). Jako standardową linię do badań nad fuzją kręgosłupa wybrano samce szczurów Sprague-Dawley (SD). Kryteria włączenia obejmowały zdrowe samce w wieku 8–10 tygodni, o masie ciała od 200–250 g, aby zapewnić, że wysokość krążka międzykręgowego (1.8–2.2 mm) jest zgodna z klatką o rozmiarze 2 mm. Wykluczono zwierzęta wykazujące spadek masy ciała o > 10% w okresie aklimatyzacji, obniżoną aktywność lub widoczne deformacje ogona. W badaniu wykorzystano samca szczura Sprague–Dawley (wiek 8 tygodni, masa ciała 221.8 g; Japan SLC, Shizuoka, Japonia). Zwierzę utrzymywano w kontrolowanym środowisku przy temperaturze 25°C i wilgotności względnej 50% (zakres dopuszczalny 30–70%) z 12-godzinnym cyklem światła/ciemności, z dostępem ad libitum do wody i standardowej karmy dla gryzoni. Szczury przetrzymywano w klatkach z pełnym dnem, wyposażonych w materiały do budowy gniazd oraz gryzaki w celu wzbogacenia środowiska. Przed procedurą chirurgiczną zastosowano 3-dniowy okres aklimatyzacji. Aby zapobiec podgryzaniu implantów w ogonie przez współlokatorów, szczura utrzymywano w warunkach pojedynczego zakwaterowania przez cały okres badania, co było kluczowym czynnikiem w tym projekcie eksperymentalnym.
Przygotowanie śrub i płytek
Materiały do wewnętrznej stabilizacji przygotowano przed zabiegiem chirurgicznym. Dostępne w handlu śruby ze stali nierdzewnej (pierwotna średnica: 1,2 mm, długość: 14 mm) przycięto do precyzyjnej długości 6 mm za pomocą obcinaczy drutu (Ryc. 1A). Śruby te wysterylizowano standardową metodą autoklawowania parowego w temperaturze 121 °C przez 20 min. W płytce do wewnętrznej stabilizacji z polioksymetylenu (POM) (długość 18 mm, szerokość 3 mm, grubość 1 mm) wywiercono otwory na śruby o średnicy 1,2 mm w odstępach 12 mm przy użyciu wiertarki ręcznej (Ryc. 1B–D). Następnie narożniki płytek POM zaoblono za pomocą obcinaczy drutu, aby zminimalizować podrażnienie otaczających tkanek miękkich (Ryc. 1E). Płytki wysterylizowano tlenkiem etylenu (EtO) lub plazmą nadtlenku wodoru, ze względu na wrażliwość termiczną polimeru. Klatka tytanowa posiada połączoną strukturę sieciową z kanałami podłużnymi o średnicy 300–500 µm. Jej powierzchnię przygotowano za pomocą technologii Lamellar 3D Titanium, aby uzyskać chropowatość mikro-powierzchni na poziomie 3–5 µm, co ułatwia bezpośredni przyrost kostny. Klatkę tytanową wysterylizowano poprzez naświetlanie gamma dawką 25 kGy przed implantacją.
Znieczulenie i procedura chirurgiczna
Aby uniknąć niepotrzebnego stresu metabolicznego, nie stosowano postu przedoperacyjnego. Znieczulenie wprowadzono za pomocą potrójnej mieszanki anestetyków składającej się z medetomidyny (0,15 mg/kg), midazolamu (2 mg/kg) i butorfanolu (2,5 mg/kg), którą podano podskórnie w okolicy grzbietu przy użyciu igły 25G23. W celu zapobieżenia wysychaniu rogówki do obu oczu zastosowano maść oftalmiczną, a zwierzę umieszczono na podkładce grzewczej z termostatem, utrzymującej temperaturę ciała na poziomie około 37 °C przez cały czas trwania procedury. Odpowiednią głębokość znieczulenia chirurgicznego oceniano co 15 min poprzez potwierdzenie zaniku odruchu cofania łapy (ucisk palca), utrzymanie różowych błon śluzowych oraz monitorowanie częstotliwości oddechów (70–110 oddechów/min). Następnie wykonano procedurę chirurgiczną zrostu międzytrzonowego kręgów ogonowych. Zwierzę ułożono w pozycji brzusznej (Ryc. 2A). Sierść nad nasadą ogona i w tylnej części grzbietu wygolono na obszarze obejmującym co najmniej 150% planowanej długości nacięcia (około 1,3 cm proksymalnie od nasady ogona, obejmując cały obszar, który zostanie odsłonięty przez pole operacyjne), a następnie usunięto luźne włosy. Wygolony obszar oraz cały ogon zdezynfekowano zgodnie z protokołem trzykrotnego naprzemiennego szorowania (70% etanol, preparat do szorowania z povidone-iodine i 70% etanol), aby zapewnić sterylność pola. W celu zidentyfikowania docelowych kręgów wykonano palpację manualną, zaczynając od kości krzyżowej w kierunku dystalnym. Pierwszy ruchomy staw zidentyfikowano jako połączenie sacrum-Co1, a segment bezpośrednio dystalny wyznaczono jako Co2, definiując tym samym docelowe miejsce Co2–Co3. Lidokainę (2 mg/kg, 1%) podano podskórnie wzdłuż planowanego miejsca nacięcia w formie blokady linii skóry i odczekano 5 min przed wykonaniem nacięcia. Na powierzchni grzbietowej wykonano nacięcie podłużne o długości około 2 cm, rozciągające się od drugiego do trzeciego kręgu ogonowego (Co2–Co3) (Ryc. 2B), aby odsłonić powierzchnię tylną każdego z kręgów. Podczas odsłaniania zachowano ostrożność, aby zidentyfikować i uniknąć uszkodzenia grzbietowej żyły ogonowej; do opanowania drobnych krwawień stosowano rozwarstwianie tępe oraz elektrokoagulację bipolarną. Aby przygotować miejsce zrostu, pierścień włóknisty między kręgami Co2 i Co3 nacięto skalpelem (Ryc. 2C). Następnie pierścień włóknisty i jądro miażdżyste starannie usunięto za pomocą kuretażu przy użyciu kuretażu i małych pęset (Ryc. 2D). Krok ten wykonano pod dużym powiększeniem chirurgicznym (≥3,5x). Kompletność usunięcia określono obiektywnie poprzez wizualne potwierdzenie punktowych krwawień (objaw „krwawiącej płytki granicznej”) i całkowity brak pozostałości tkanki miękkiej. Za niedopuszczalne uszkodzenie płytki granicznej uznano głębokie nadżerki obejmujące > 25% całkowitej powierzchni lub penetrację do kości gąbczastej o głębokości > 0,5 mm. Następnie tytanową klatkę (przekrój 2 × 2 mm, wysokość 2 mm) (Ryc. 2E) wprowadzono głęboko w przestrzeń międzykręgową, aż do osiągnięcia fizycznego oporu i wizualnego potwierdzenia pełnego kontaktu powierzchniowego z obiema płytkami granicznymi, tworząc ciasne dopasowanie cierne (Ryc. 2F, 2G).
Fiksacja i zamknięcie rany
Aby odsunąć skórę i tkanki miękkie od miejsca, które miało zostać wyrównane, zastosowano retraktor samopodtrzymujący, co zapewniło bezpośrednią wizualizację powierzchni kości i zapobiegło nieswoistym uszkodzeniom tkanek miękkich przez obracający się wiertło. W celu ułatwienia fiksacji płytki, powierzchnię kości wokół wyznaczonych miejsc otworów w kręgach Co2 i Co3 wyrównano za pomocą ręcznej frezarki elektrycznej pracującej z prędkością 7 800 RPM, wyposażonej w sferyczne wiertło typu pilnik o rozmiarze 2,0 mm (Rycina 2H). Otwory kostne wiercono pojedynczo w odstępach odpowiadających otworom na śruby w plastikowej płytce do wewnętrznej fiksacji, używając wiertarki ręcznej z wiertłem o średnicy 1,2 mm (Rycina 2I). Następnie do otworów w plastikowej płytce wstępnie wprowadzono dwie śruby ze stali nierdzewnej o średnicy 6 mm (Rycina 2J). Śruby wprowadzono pod kątem 90° na znormalizowaną głębokość 5 mm, zachowując odstęp między środkami śrub wynoszący 12 mm (Rycina 2K). Przed zamknięciem rany, luźne i poszarpane krawędzie tkanek powstałe podczas rozwarstwienia tępym instrumentem zostały precyzyjnie wycięte i usunięte z pola operacyjnego, aby wspomóc prawidłowe gojenie rany. Na koniec nacięcie skóry zamknięto szwami z nylonu 4-0, a ogon ponownie zdezynfekowano 70% etanolem, kończąc procedurę.
Opieka pooperacyjna i eutanazja
W fazie bezpośredniej rekonwalescencji (dzień 0) zwierzę monitorowano co 15 min, a temperaturę odbytu podtrzymywano do momentu osiągnięcia pełnej pozycji brzusznej i celowej lokomocji. W ramach oceny długoterminowej (tygodnie 1–12) wdrożono codzienny system punktacji oparty na wskaźniku kondycji ciała (BCS), stanie pielęgnacji i ogólnej aktywności, wraz z codziennym monitorowaniem miejsca operowanego pod kątem infekcji lub rozstąpienia się rany. W ciągu pierwszych 48 h na dnie klatki zapewniono wilgotną karmę. Masę ciała mierzono co tydzień. Humanitarne punkty końcowe dla wczesnej eutanazji zdefiniowano ściśle jako: utratę masy ciała ≥20%, BCS ≤2,0, trwałą niemożność dotarcia do jedzenia/wody > 12 h, objawy silnego bólu/duszności lub ciężkie powikłania w miejscu operowanym (np. martwicę). Zwierzęta spełniające te kryteria poddano humanitarnej eutanazji w ciągu 24 h. Opieka pooperacyjna obejmowała podanie cefaleksyny (15 mg/kg) domięśniowo bezpośrednio po operacji oraz w 24 h po zabiegu w celu zapobiegania infekcji. W celu przeciwbólowego podano karprofen (5 mg/kg) podskórnie bezpośrednio po operacji oraz w 12, 24 i 48 h po zabiegu, łącznie cztery dawki. Szwy skórne usunięto 10–14 dni po operacji. W 12. tygodniu po implantacji szczura poddano eutanazji poprzez przedawkowanie izofluranu. Następnie pobrano en bloc odcinek od drugiego do trzeciego kręga ogonowego i utrwalono go w 70% etanolu.
Zalecenia dotyczące szkolenia, rozwiązywanie problemów i wielkość próby. Aby ułatwić pomyślne wdrożenie tego wymagającego protokołu, nowi operatorzy muszą przeprowadzić 3–5 procedur ćwiczebnych na trupich szczurach, osiągając biegłość, gdy trzy kolejne implantacje nie wykażą radiologicznie błędnego ustawienia. Typowe rozwiązania problemów obejmują wstępny pomiar wysokości krążka międzykręgowego za pomocą promieni rentgenowskich w celu optymalizacji wyboru rozmiaru klatki oraz ponowną weryfikację płaskości kości grzbietowej, aby zapobiec migracji klatki. W przypadku niewystarczającego zakotwiczenia śruby zaleca się stosowanie niższych prędkości wiercenia. W przyszłych badaniach walidacyjnych zaleca się minimalną wielkość próby n = 6 do 10 na grupę (z dodatkowymi 10–20% na wypadek ubytków), aby uzyskać wystarczającą moc statystyczną. Ponadto przyszłe badania muszą uwzględniać grupy kontrolne (np. pusta klatka lub aut przeszczep), aby zwalidować działanie biomateriału.
Analiza radiograficzna i histologiczna
Skanowanie mikrotomografią komputerową (micro-CT) oraz radiografia cyfrowa zostały wykonane przy użyciu systemu mikro-CT z napięciem lampy 80 kV i prądem 0,1 mA. Podczas akwizycji zastosowano filtr aluminiowy o grubości 1,0 mm, aby zminimalizować artefakty utwardzania wiązki wywołane przez tytanowy implant. W celu oceny podłużnej wykonano obrazowanie in vivo w 1. i 4. tygodniu po operacji przy rozmiarze woksela 120 µm. Podczas każdej sesji obrazowania in vivo zwierzęta znieczulono tą samą kombinacją trzech leków i dawkami medetomidyny, midazolamu i butorfanolu, które zastosowano podczas operacji. Po skanowaniu odwrócono działanie znieczulenia za pomocą atipamezolu (0,75 mg/kg, podskórnie). Obrazowanie ex vivo przeprowadzono w 12. tygodniu po operacji, używając uchwytu do próbek o średnicy 24 mm i rozmiaru woksela 24 µm. Dane z tomografii komputerowej i obrazy radiograficzne zrekonstruowano za pomocą standardowego algorytmu filtrowanej projekcji wstecznej i przeanalizowano przy użyciu przeglądarki DICOM. Zdefiniowano kryteria ilościowe do oceny zrostu kostnego. Radiologicznie udaną fuzję potwierdzono, gdy na obrazach micro-CT w co najmniej trzech kolejnych przekrojach zaobserwowano ciągłą strukturę beleczkową łączącą kranialną i kaudalną płytkę końcową kręgu. Podczas segmentacji obrazu zastosowano globalny próg 700 jednostek Hounsfielda (HU). Histomorfometrycznie, stosunek BV/TV wynoszący 70% lub więcej wewnątrz klatki uznano za próg wypełnienia przestrzeni i fuzji fizycznej. Histologicznie zrost kostny zdefiniowano jako całkowite mostkowanie kostne od strony kranialnej do kaudalnej bez obecności tkanki włóknistej. Do analizy histologicznej wykonano sekwencyjne znakowanie fluorochromem poprzez podskórny wtrysk kalceiny (8 mg/kg) na 2 dni przed eutanazją, aby zidentyfikować przestrzenną dystrybucję aktywnej mineralizacji w końcowym punkcie czasowym (12 tydzień). Wycięte kręgi kaudalne utrwalono w 70% etanolu przez 7 dni i zabarwiono en bloc barwnikiem do kości Villanuevy. Próbki odwodniono w rosnącym stężeniu etanolu, zatopiono w żywicy z polimetakrylanu metylu i przecięto w płaszczyźnie pośrodkowej w precyzyjnym centrum geometrycznym klatki, wyznaczonym na podstawie obrazowania Micro-CT przed cięciem, używając mikrotomu z tarczą diamentową. Nieodwapione próbki szlifowane (grubość 5 µm) przygotowano w Instytucie Histomorfometrii Kości Ito (Niigata, Japonia). Obrazy pozyskano za pomocą mikroskopu w świetle przechodzącym oraz konfokalnego mikroskopu skanującego do nakładania fluorescencji. Dalszą analizę przeprowadzono pod mikroskopem w świetle spolaryzowanym, a analizę histomorfometryczną wykonano za pomocą komputerowego analizatora obrazu. Obszar zainteresowania (ROI) zdefiniowano jako całkowitą objętość wewnętrzną klatki, z wyłączeniem metalowych wsporników, i podzielono go na kranialny i kaudalny obszar ROI wewnątrz klatki. Tkankę kostną zidentyfikowano po purpurowym/magenta kolorze w barwieniu Villanuevy. Kość lamelarna (Lm.V) została zdefiniowana przez jej wysoce zorganizowaną, równoległą strukturę lamelarną w świetle spolaryzowanym, podczas gdy kość tkana (Wo.V) wykazywała zdezorganizowane wzory włókien.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Masa ciała (Tabela 1)
Masa ciała była mierzona do 12 tygodni po operacji, wykazując stały wzrost (od 221,8 g do 346,8 g), co wskazuje na homeostazę fizjologiczną i pośrednio potwierdza brak ciężkiego chronicznego stresu. Potwierdzono to poprzez codzienne wielomodalne oceny, które wykazały prawidłową aktywność oraz niepowikłane gojenie ran.
Rana (Rycina 3)
Go...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Tu, nowy model fuzji międzykręgowej ogona szczura został stworzony. Model ten polega na włożeniu klatki tytanowej drogą tylną wzmocnionej mocowaniem płytą i śrubą. Następnie ocena formowania kości wewnątrklatkowo została przeprowadzona za pomocą szczegółowej analizy histomorphometrycznej. Wyróżniające się cechy tego modelu to trzy: 1) ściśle naśladuje kliniczne procedury fuzji międzykręgowej lędźwiowej tylnej lub fuzji międzykręgowej lędźwiowej przezotworowej łącząc klatkę międzykręgową z instrumentacją tylną; 2) wykorzy...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy deklarują, że nie otrzymali żadnego wynagrodzenia, honorariów konsultingowych ani innych osobistych korzyści finansowych od firmy.
Podziękowania
Dziękujemy Ito Bone Histomorphometry Institute (Niigata, Japonia. https://itobone.sakura.ne.jp/) za pomoc w przygotowaniu preparatów histologicznych. Jesteśmy również wdzięczni firmie Stryker (MI, USA) za dostarczenie koszy tytanowych i wsparcie finansowe dla tego badania. Na koniec dziękujemy firmie Editage (www.editage.com) za redagowanie językowe. To badanie było finansowane przez Stryker (MI, USA).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 4-0 nylon sutures | Natsume | ER-25-30N2 | |
| Bright-field microscope | Keyence. (Osaka, Japan) | BZ-X800 | |
| Butorphanol | FUJIFILM | 021-19001 | |
| Calcein | FUJIFILM | 76082 | |
| Carprofen | FUJIFILM | 037-19761 | |
| Cefalexin | FUJIFILM | 036-11051 | |
| Computerized image analyzer | System Supply Co. (Nagano, Japan) | Histometry RT CSS-840 | |
| Confocal laser-scanning microscope for fluorescence merging | Carl Zeiss. (Jena, Germany) | LSM 980 | |
| Curette | Natsume | E-8-00 | |
| Diamond saw microtome | Leica. (Wetzlar, Germany) | SP1600 | |
| Electric drill | TAMIYA | N/A | https://www.amazon.co.jp /%E3%82%BF%E3%83% 9F%E3%83%A4-%E3% 82%AF%E3%83%A9% E3%83%95%E3%83% 88%E3%83%84%E3% 83%BC%E3%83%AB% E3%82%B7%E3%83% AA%E3%83%8F%E3% 82%BA-%E3%83%8E-42-%E9%9B %BB%E5%8B%95%E3% 83%8F%E3%83%B3%E3 %83%87%E3%82%A3%E3 %83%AA%E3%83%A5%E3 %E3%83%BC%E3%82% BF%E3%83%BC-%E3% 83%91%E3%83%A9%E3 %83%A2%E3%83%87%E3 %83%AB%E7%94%A8%E5% %B7%A5%E5%85%B7/dp/B 01LZ05WWY/ref=sr_1_2?ad grpid=54785347873&dib=eyJ 2IjoiMSJ9.f61YHQv80N0nxws VOdlrIFtTsQoJICvSb4t4rVt97 FEBWkOo4ilX5O2lZH-5vADU HT9CRXO308QpVFqdBNli0C osd4iBSfSzEcKxP9HMX4DhiI S-Qko5ix33W7FjPQqpgTWbj3 CV_vBytnvfqvSyoGN9IB8445o 5Kc0pjeKPG-SRR3Ixpqr2-FT_ ZgUyWstoyQVFTcv_Rq_K4-E OWnuT41BBYtBh757EOAoBe z2lkCd6Psz99wZxfUuvzRUAH Ecq9QV6EmiT9LAY8dYYq08k aLt7Klqx2k-MdV8XbWRxgKk. 7TWzXBGA1PeNmB4me_Cz4 mMFAKBAv5H3YXAw_HPuLd E&dib_tag=se&hvadid=651687 588880&hvdev=c&hvexpln=0& hvlocphy=1009309&hvnetw=g& hvocijid=5538300633798619650 --&hvqmt=e&hvrand=55383006 33798619650&hvtargid=kwd-33 4267191534&hydadcr=4289_13 319726&jp-ad-ap=0&keywords= %E3%82%BF%E3%83%9F%E3 %83%A4+%E9%9B%BB%E5% 8B%95%E3%83%8F%E3%83% B3%E3%83%87%E3%82%A3% E3%83%89%E3%83%AC%E3% 83%AB&mcid=6b8ff8c984ba3d45 be477b407ef2d1ba&qid=1767395 580&sr=8-2 |
| hand drill | VEAGIA | N/A | https://www.amazon.co.jp/dp/B0D2 9B4W18/ref=sspa_dk_detail_5?pd _rd_i=B0D29B4W18&pd_rd_w=xe kNz&content-id=amzn1.sym.f293b e60-50b7-49bc-95e8-931faf86ed1e &pf_rd_p=f293be60-50b7-49bc-95e8 -931faf86ed1e&pf_rd_r=HPW6B367R QC0VPB7WTTS&pd_rd_wg=E8mAS &pd_rd_r=dbeb0aa7-1bea-4f40-99dd -38bcb05c8234&sp_csd=d2lkZ2V0T mFtZT1zcF9kZXRhaWw&th=1 |
| Medetomidine | FUJIFILM | 135-17473 | |
| Midazolam | FUJIFILM | 135-13791 | |
| Pin vise | ANEX | N/A | https://www.amazon.co.jp/%E3%82% A2%E3%83%8D%E3%83%83%E3% 82%AF%E3%82%B9-ANEX-%E3% 83%A9%E3%83%90%E3%83%BC %E3%82%B0%E3% |
Bibliografia
- Mobbs, R. J., Phan, K., Malham, G., Seex, K., Rao, P. J. Lumbar interbody fusion: techniques, indications, and comparison of interbody fusion options including PLIF, TLIF, MI-TLIF, OLIF/ATP, LLIF, and ALIF. J Spine Surg. 1 (1), 2-18 (2015).
- Cole, C. D., McCall, T. D., Schmidt, M. H., Dailey, A. T. Comparison of low back fusion techniques: transforaminal lumbar interbody fusion (TLIF) or posterior lumbar interbody fusion (PLIF) approaches. Curr Rev Musculoskelet Med. 2 (2), 118-126 (2009).
- Mummaneni, P. V., et al. Guideline update for the performance of fusion procedures for degenerative disease of the lumbar spine. Part 11: interbody techniques for lumbar fusion. J Neurosurg Spine. 21 (1), 67-74 (2014).
- Phan, K., Thayaparan, G. K., Mobbs, R. J. Anterior lumbar interbody fusion versus transforaminal lumbar interbody fusion--systematic review and meta-analysis. Br J Neurosurg. 29 (5), 705-711 (2015).
- Teng, I., Han, J., Phan, K., Mobbs, R. A meta-analysis comparing ALIF, PLIF, TLIF, and LLIF. J Clin Neurosci. 44, 11-17 (2017).
- Rao, P. J., Loganathan, A., Yeung, V., Mobbs, R. J. Outcomes of anterior lumbar interbody fusion surgery based on indication: a prospective study. Neurosurgery. 76 (1), 7-23 (2015).
- Salzmann, S. N., Plais, N., Shue, J., Girardi, F. P. Lumbar disc replacement surgery: successes and obstacles to widespread adoption. Curr Rev Musculoskelet Med. 10 (2), 153-159 (2017).
- Kang, H., Wang, F., Nan, Y., et al. A novel rat model of interbody fusion based on anterior lumbar corpectomy and fusion (ALCF). BMC Musculoskelet Disord. 22 (1), 965 (2021).
- Khan, S. N., Lane, J. M. Spinal fusion surgery: animal models for tissue-engineered bone constructs. Biomaterials. 25 (9), 1475-1485 (2004).
- Nakashima, T., et al. Osteoconductivity and neurotoxicity of silver-containing hydroxyapatite coating cage for spinal interbody fusion in rats. JOR Spine. 6 (1), e1236 (2022).
- Yoshizato, H., et al. Animal Model for Anterior Lumbar Interbody Fusion: A Literature Review. Spine Surg Relat Res. 8 (4), 373-382 (2024).
- Levin, J. M., Tanenbaum, J. E., Steinmetz, M. P., Mroz, T. E., Overley, S. C. Posterolateral fusion (PLF) versus transforaminal lumbar interbody fusion (TLIF) for spondylolisthesis: a systematic review and meta-analysis. Spine J. 18 (6), 1088-1098 (2018).
- Lee, J. H., Lee, C. K., Chang, B. S. Animal models for spinal fusion. Spine J. 5 (6 Suppl), 209S-216S (2005).
- Yeh, Y. C., et al. Characterization of a novel caudal vertebral interbody fusion in a rat tail model: An implication for future material and mechanical testing. Biomed J. 40 (1), 62-68 (2017).
- Elliott, D. M., Sarver, J. J. Validation of the rat caudal disc as a model for the human lumbar disc for study of disc degeneration and regeneration. Spine. 29 (23), 2661-2667 (2004).
- Alanay, A., Wang, J. C., Shamie, A. N., Napoli, A., Chen, C., et al. A novel application of high-dose (50kGy) gamma irradiation for demineralized bone matrix: effects on fusion rate in a rat spinal fusion model. Spine J. 8 (5), 789-795 (2008).
- Chu, L., et al. Evaluation of interbody fusion efficacy and biocompatibility of a polyetheretherketone/calcium silicate/porous tantalum cage in a goat model. J Tissue Eng Regen Med. 16 (9), 838-850 (2022).
- Walsh, W. R., et al. Preclinical evaluation of lateral interbody fusions using 3D printed PEEK or 3D printed titanium cages. N Am Spine Soc J. 23, 100756 (2025).
- Li, W., et al. Optimization of 3D-printed titanium interbody cage design. Part 2: An in vivo study of spinal fusion in sheep. Spine J. 24 (3), 523-534 (2024).
- Walsh, W. R., et al. In vivo. Assessment of AMP2, a Novel Ceramic-Binding BMP-2, in Ovine Lumbar Interbody Fusion. Spine. 49 (19), 1324-1335 (2024).
- Martin, B. I., et al. Cervical interbody fusion cages. An animal model with and without bone morphogenetic protein. Spine. 23 (7), 758-765 (1998).
- Kandziora, F., et al. Experimental fusion of the sheep cervical spine. Part I: Effect of cage design on interbody fusion. Eur Spine J. 11 (3), 235-243 (2002).
- Kirihara, Y., Takechi, M., Kurosaki, K., Kobayashi, Y., Saito, Y., et al. Effects of an anesthetic mixture of medetomidine, midazolam, and butorphanol in rats: strain difference and antagonism by atipamezole. Exp Anim. 65 (1), 27-36 (2016).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
