Ocena wiekowo zróżnicowana Saccharomyces boulardii w randomizowanym badaniu kontrolowanym dla dzieci oraz w dorosłym badaniu obserwacyjnym zapalenia jelit zakaźnych

Podsumowanie

Protokół ten ocenia kliniczną skuteczność i bezpieczeństwo Saccharomyces boulardii specyficzną dla wieku jako terapii uzupełniającej zapalenie jelit, wykorzystując randomizowane badanie kontrolowane u pacjentów pediatrycznych oraz rzeczywiste badanie obserwacyjne u dorosłych.

Streszczenie

Zakaźne zapalenie jelit jelitowych pozostaje znaczącym globalnym obciążeniem zdrowotnym, szczególnie wśród dzieci poniżej piątego roku życia. Saccharomyces boulardii (S. boulardii), drożdże probiotyczne, były szeroko badane pod kątem swojej roli w redukcji biegunki; Jednak bezpośrednie porównania jego skutków w różnych grupach wiekowych pozostają ograniczone. Celem tego badania jest ocena i porównanie skuteczności oraz bezpieczeństwa S. boulardii u pacjentów pediatrycznych i dorosłych z zakaźnym zapaleniem jelit. Podwójnie ślepe, randomizowane, kontrolowane placebo badanie przeprowadzono na 186 dzieciach z ostrą biegunką, natomiast retrospektywne badanie obserwacyjne objęło 270 dorosłych pacjentów. Wszyscy uczestnicy otrzymali standardową terapię nawodniającą; grupy interwencyjne dodatkowo otrzymały S. boulardii. Głównym skutkiem była długość biegunki. Wyniki wtórne obejmowały częstotliwość występowania stolca, długość pobytu w szpitalu, częstotliwość nawrotów oraz działania niepożądane. U pacjentów pediatrycznych S. boulardii istotnie skrócił czas trwania biegunki (2,1 vs. 3,9 dnia w przypadku przypadków pozytywnego na rotawirusa), pobyt w szpitalu (3,2 vs. 4,8 dni) oraz częstość występowania stolca (4,2 vs. 6,7 stolca/dzień) w porównaniu z placebo (wszystkie p < 0,05). U dorosłych pacjentów S. boulardii wiązała się z krótszym czasem trwania biegunki (2,7 vs. 5,4 dnia), krótszym pobytem w szpitalu (3,6 vs. 5,2 dnia), wyższym wskaźnikiem ustąpienia objawów (77,8% vs. 15,8%) oraz niższym nawrotem (8,1% vs. 21,7%; wszystkie p < 0,01). Działania niepożądane były łagodne i porównywalne między grupami. S. boulardii wydaje się być bezpieczną i skuteczną terapią uzupełniającą zapalenie jelita zakaźnego, z różnicami klinicznymi zależnymi od wieku. S. boulardii wydaje się być bezpieczną i skuteczną terapią uzupełniającą w leczeniu zapalenia jelit zakaźnych zarówno u dzieci, jak i dorosłych. W każdej kohorcie zaobserwowano poprawę wyników klinicznych, w tym czas trwania biegunki, hospitalizacji i nawrotu. Zaobserwowane różnice między kohortą pediatryczną a dorosłą są opisowe i odzwierciedlają oddzielne analizy przeprowadzone według różnych projektów badań; dlatego nie przeprowadzono bezpośrednich porównań statystycznych między grupami wiekowymi.

Wprowadzenie

Zakaźne zapalenie jelita to stan zapalny jelita cienkiego wywołany przez patogeny bakteryjne, wirusowe lub pasożytnicze i stanowi poważne globalne obciążenie zdrowotne, dotykające zarówno dzieci, jak i dorosłych. Przenoszenie najczęściej następuje przez skażoną żywność lub wodę oraz przez przenoszenie z człowieka na człowieka, co czyni chorobę wysoce zakaźną ^1,2. Dzieci poniżej 5. roku życia są nieproporcjonalnie dotknięte, a zapalenie jelit zakaźnych znacząco przyczynia się do zachorowalności i śmiertelności w krajach o niskich i średnich dochodach ^3,4. Według Światowej Organizacji Zdrowia, choroby biegunkowe powodują około 525 000 zgonów rocznie wśród dzieci poniżej 5. roku życia, szczególnie w krajach o niskich i średnich dochodach. Rotawirus i norowirus są najczęstszymi wirusowymi przyczynami zapalenia jelit zakaźnych na całym świecie⁵. Ciężkie lub długotrwałe przypadki mogą wiązać się z powikłaniami, takimi jak stan zapalny, krwawy stolec i immunosupresja⁶.

Probiotyki, takie jak Saccharomyces boulardii, wywierają działanie terapeutyczne poprzez mechanizmy takie jak hamowanie przyczepności patogenów, modulację odpowiedzi immunologicznej gospodarza oraz redukcję zapalenia jelit. Efekty te przyczyniają się do wzmocnionej obrony gospodarza i szybszej klinicznej rekonwalescencji ^5,6. Z biegiem czasu świadomość probiotyków jako metody terapeutycznej oraz liczba randomizowanych badań klinicznych znacznie wzrosła⁷. Chociaż zapalenie jelita zakaźnego dotyka zarówno dzieci, jak i dorosłych, przebieg choroby i wyniki choroby różnią się znacznie – u dzieci dominują etiologie wirusa, a u dorosłych częściej występują infekcje bakteryjne lub mieszane ^7,8,9. Te rozróżnienia wskazują, że reakcje terapeutyczne mogą się różnić w zależności od wieku i wymagają porównawczej oceny.

Rotawirus pozostaje główną przyczyną ciężkiego ostrego zapalenia żołądka i jelit u niemowląt i małych dzieci na całym świecie. Objawy kliniczne obejmują łagodną, samoograniczającą się biegunkę po ciężkie odwodnienie wymagające hospitalizacji⁷. Transmisja odbywa się głównie drogą kału–doustną, bezpośrednio lub przez skażoną żywność i wodę⁸. Według Światowej Organizacji Zdrowia, choroby biegunkowe powodują około 525 000 zgonów rocznie wśród dzieci poniżej 5. roku życia, szczególnie w krajach o niskich i średnich dochodach^(3,9,10). Rotawirusy zostały po raz pierwszy opisane w 1973 roku w błonie śluzowej dwunastnicy sześciu niemowląt z ostrym zapaleniem żołądka i jelit i są obecnie uważane za najczęstsze czynniki powodujące chorobę¹¹. Zakażenie rotawirusem występuje zarówno u dzieci, jak i dorosłych i zwykle powoduje łagodne objawy¹². Dane z Indii stanowią około 20% przypadków¹³. Zakażenie rotawirusem jest najczęstsze u niemowląt, z wskaźnikiem hospitalizacji na poziomie około 40%¹⁴. Według aktualnych statystyk, Indie odpowiadają za 23% zgonów z powodu biegunki,¹⁵%. W Indiach infekcja rotawirusem dotyka około 11,37 miliona dzieci w wieku <5 lat^{i 16} lat. Transmisja następuje drogą kału–doustną, zarówno bezpośrednio, jak i pośrednio, przez skażoną żywność i wodę¹⁷. Obraz kliniczny obejmuje zakażenie podkliniczne do ciężkiego przebiegu choroby¹⁸. Okres inkubacji trwa około 24–72 godzin, a choroba zazwyczaj ustępuje w ciągu 3–7 dni¹⁹.

Norowirus jest najczęstszą przyczyną ostrych ognisk zapalenia żołądka i jelit we wszystkich grupach wiekowych i szczególnie występuje w populacjach dorosłych²⁰ lat. Charakteryzujące się ostrymi wymiotami i wodnistą biegunką, zakażenie norowirusem jest wysoce zaraźliwe i wymaga bardzo niskiej dawki zakaźnej. Transmisja następuje drogą kałowo-ustną, zanieczyszczonymi powierzchniami, jedzeniem, wodą oraz cząstkami aerozoli podczas wymiotów²¹. Po rotawirusie jest uważany za drugą najczęstszą przyczynę chorób na świecie. Zakażenie norowirusem zostało po raz pierwszy zidentyfikowane w 1968 roku²². Ten wirus jest wysoce zaraźliwy i przenosi się drogą kałowo-doustną za pomocą skażonej żywności i wody, podobnie jak infekcja rotawirusem u małych dzieci i niemowląt²³ lat. Częstość występowania norowirusa jest najwyższa u małych dzieci w krajach o niskich dochodach^{24 lata}. Często wykrywana jest w próbkach kału i stanowi główną przyczynę sporadycznech wybuchów²⁵. Tabela 1 i Tabela 2 podsumowują epidemiologiczne i kliniczne różnice między infekcjami rotawirusem a norowirusem. Ogniska mogą szybko rozprzestrzeniać się w placówkach klinicznych, takich jak kliniki i domy opieki, ze względu na wysoką zakaźność i niską dawkę zakaźną²⁶. Według przeglądów literatury i najnowszych danych, na świecie występuje około 185 000 przypadków zapalenia żołądka i jelit, z czego 18% jest przypisane norowirusowi²⁷. Dane z Indii pozostają ograniczone, szczególnie w regionach północno-wschodnich. Częstość występowania zakażeń norowirusem w Indiach waha się od 1,4% do 44%, a niedawne badanie z Kalkuty wykazało około 6% wśród dzieci poniżej 5. roku życia²⁸ lat.

S.No	Cechy	Rotawirus	Norowirus
1.	Średni wiek zakażenia	34,74 miesiąca	29,65 miesiąca
2.	Nasilenie objawów	Bardziej intensywne przy wyższym nawodnieniu	Mniej silne, więcej wymiotów
3.	Rozpowszechnienie gorączki	Wyższe (44,3%)	Niższe (45%)
4.	Czas trwania objawów	Dłuższy	Krótsze
5.	Współinfekcje	Często z patogenami bakteryjnymi	Rzadziej spotyka się, bez znaczącego wpływu

Tabela 1: Porównanie rotawirusa i norowirusa u dzieci. Przedstawiono porównawczy przegląd klinicznych i epidemiologicznych cech zakażeń rotawirusem i norowirusem u dzieci. Zmienne to średni wiek, nasilenie objawów, częstość występowania gorączki, czas trwania choroby oraz częstotliwość współinfekcji.

S.No	Cechy	Rotawirus	Norowirus
1.	Wirusologia	Wirus podwójnie niwersowego RNA	Wirus jednoniciowego RNA
2.	Częste u dorosłych	Rzadziej występujące, zwykle łagodne lub bezobjawowe	Bardzo częsta, główna przyczyna zapalenia żołądka i jelit u dorosłych
3.	Transmisja	Droga kałowo-oralna, przez jedzenie/wodę, powierzchnie	Droga kałowo-oralna, wysoce zaraźliwa przez powietrze, jedzenie i wodę
4.	Dawka zakaźna	Umiarkowany	Bardzo niskie (10-100 cząstek wirusa może wywołać infekcję)
5.	Okres inkubacji	1-3 dni	12-48 godzin
6.	Czas trwania choroby	3-8 dni	1-3 dni
7.	Typowe objawy	Wodnista biegunka, wymioty, gorączka, ból brzucha	Ostre wymioty, wodnista biegunka, nudności, skurcze
8.	Nasilenie u dorosłych	Łagodne do umiarkowane, bardziej nasilone u osób z obniżoną odpornością	Często samoograniczające, ale mogą powodować wybuchy u dorosłych.
9.	Szczepienia	Dostępne (doustne, żywe osłabienie), ale nie stosowane u dorosłych	Obecnie nie ma dostępnej szczepionki

Tabela 2: Porównanie norowirusa i rotawirusa u dorosłych. Przedstawiono cechy wirusologiczne, wzorce transmisji, przejawy kliniczne oraz nasilenie zakażeń rotawirusem i norowirusem w populacjach dorosłych.

Saccharomyces boulardii jest stosowany klinicznie od połowy XX wieku i jest wspierany przez liczne randomizowane badania kontrolowane oraz metaanalizy potwierdzające jego skuteczność w ostrym zapaleniu żołądkaⁱ jelit. Zgłaszane korzyści obejmują skrócenie czasu trwania biegunki, mniejszą częstotliwość stolców, krótsze pobyty w szpitalu oraz korzystny profil bezpieczeństwa zarówno u dzieci, jak i dorosłych w^{wieku 30 lat}. Jest to probiotyk na bazie drożdży i jest szeroko dostępny jako suplement diety³¹. Duże prospektywne badania kliniczne kontrolowane placebo dodatkowo wyjaśniły mechanizmy działania i wesprzeły rozwój nowych zastosowań terapeutycznych³².

Skuteczność S. boulardii w skróceniu czasu trwania i nasilenia biegunki jest dobrze udokumentowana. Jednak badania te zazwyczaj ograniczają się do populacji pediatrycznej lub dorosłych, z nielicznymi bezpośrednimi porównaniami wyników w grupach^{wiekowych 28–32 lata}. Biorąc pod uwagę różnice w czynnikach etiologicznych, odpowiedziach immunologicznych i wynikach klinicznych między dziećmi a dorosłymi, ocena odpowiedzi terapeutycznych specyficznych dla wieku jest kluczowa. W porównaniu z bakteryjnymi probiotykami, takimi jak Lactobacillus spp., S. boulardii oferuje zalety, w tym odporność na antybiotyki oraz większą stabilność przewodu pokarmowego. Tak więc, chociaż S. boulardii jest uznawany za skuteczną terapię uzupełniającą, zależność jej korzyści terapeutycznych od wieku pozostaje niejasna.

S. boulardii jest stosowany w Europie od 1950 roku i był oceniany w wielu badaniach klinicznych³³. Kilka wytycznych klinicznych wspiera bezpieczeństwo i skuteczność probiotyków w leczeniu ostrego zapalenia żołądka i jelit. S. boulardii jest jednym z najczęściej stosowanych probiotyków w praktyce klinicznej i jest zalecany przez różnych ekspertów klinicznych³⁴. Jest szeroko stosowany w zapobieganiu i leczeniu biegunki, w tym zakażeń rotawirusem i norowirusem u dzieci^{w wieku 35 lat}. Badania kliniczne wykazały, że skraca czas trwania biegunki w ostrym zapaleniu jelit i infekcji rotawirusem, z korzystnym profilem bezpieczeństwa i minimalnymi skutkami ubocznymi²³. Metaanaliza obejmująca 1 282 pacjentów na kohortę wykazała, że pacjenci pediatryczni wykazywali szybsze ustępowanie objawów, podczas gdy dorośli wykazywali niższe wskaźniki nawrotów. Dodatkowo, badania z Afryki Zachodniej wykazały poprawę kliniczną u dzieci z ostrą biegunką po leczeniu S. boulardii, w tym normalizację częstości kału do drugiego dnia terapii³². Szczep ten wykazał również skuteczność w zakażeniu rotawirusem poprzez zmniejszenie częstotliwości kałusu i skracenie czasu choroby u niemowląt w porównaniu z grupami^kontrolnymi 20,21,22,23,24. Inne badania odnotowały zmniejszoną częstość zakażeń rotawirusem u noworodków hospitalizowanych, podkreślając jego potencjał profilaktyczny³⁰. S. boulardii jest uważana za bezpieczną opcję leczenia u dzieci30. Proponowane mechanizmy działania obejmują hamowanie toksyn bakteryjnych, działanie przeciwzapalne oraz stymulację błony śluzowej jelita 26,29,35.

Podejście podwójnego projektowania zostało przyjęte, aby zrównoważyć rygor metodologiczny z praktyczną zastosowalnością. Randomizowane badanie kontrolowane było możliwe u pacjentów pediatrycznych, podczas gdy ograniczenia etyczne i praktyczne wymagały retrospektywnego projektu obserwacyjnego u dorosłych. Porównania między kohortami są zatem eksploracyjne i opisowe.

Aby sprostać ograniczonej dostępności badań bezpośrednio porównujących odpowiedzi specyficzne dla wieku na S. boulardii, zastosowano podejście podwójnego projektu. Randomizowane badanie kontrolowane przeprowadzono u pacjentów pediatrycznych, natomiast u dorosłych zastosowano retrospektywny projekt obserwacyjny ze względu na ograniczenia etyczne i praktyczne. Co ważne, obie kohorty zostały przeanalizowane niezależnie. Wszelkie zaobserwowane różnice między wynikami pediatrycznymi a dorosłymi są przedstawiane opisowo i nie są przeznaczone do bezpośrednich porównań statystycznych ani interpretacji wnioskowej.

Protokół

Wszystkie procedury z udziałem uczestników ludzkich były przeprowadzane zgodnie z instytucjonalnymi i krajowymi standardami etycznymi. Randomizowane badanie kontrolowane dla dzieci zostało zatwierdzone przez Komisję Etyki Szpitala Czwartego w Harbinie w Harbinie, Chiny (nr zatwierdzenia: KY2026-06). Przed zapisem do programu uzyskano pisemną świadomą zgodę rodziców lub opiekunów prawnych wszystkich uczestników pediatrii. Retrospektywne badanie kohortowe dla dorosłych zostało zatwierdzone przez Komisję Etyczną Szpitala Czwartego w Harbinie w Harbinie w Chinach (nr zatwierdzenia: KY2026-06), z wyłączeniem świadomej zgody ze względu na retrospektywny charakter badania.

1. Projekt badania i identyfikacja kohort

1. Identyfikacja populacji badawczej
   1. Pobierz szpitalną dokumentację medyczną pacjentów pediatrycznych i dorosłych z ostrym zapaleniem jelita zakaźnego w okresie od stycznia 2020 do stycznia 2022. Zidentyfikowano łącznie 186 pacjentów pediatrycznych; 10 zostało wykluczonych z powodu niepełnych danych, co dało 176 uczestników do analizy.
   2. Potwierdź zapalenie jelita zakaźnego za pomocą oceny klinicznej i testów stolca. Pobierz świeże próbki stolca w sterylnych pojemnikach na stolec w ciągu 24 godzin od przyjęcia. Wykonaj test na rotawirusa za pomocą szybkiego testu immunochromatograficznego antygenu kału zgodnie z instrukcjami producenta.
2. Definiowanie ramion do nauki
   1. Analizować kohorty pediatryczne i dorosłych niezależnie ze względu na różnice w projekcie badania (randomizowane badanie kontrolowane vs retrospektywne badanie obserwacyjne). Nie wykonuj testów statystycznych porównujących wyniki między grupami wiekowymi. Wszelkie porównania między grupami interpretuj wyłącznie opisowo.
   2. Przypisz pacjentów pediatrycznych do grupy interwencyjnej (S. boulardii) lub grupy placebo, stosując losowy harmonogram przydziałów.
   3. Przypisz dorosłych pacjentów do grupy interwencyjnej, jeśli otrzymali S. boulardii w ramach rutynowej opieki klinicznej.
   4. Zidentyfikuj historyczną grupę kontrolną dorosłych dopasowaną 1:1 według wieku, płci i diagnozy, która nie otrzymała S. boulardii.
      UWAGA: Zbiory danych pediatrycznych i dorosłych są analizowane oddzielnie i nie są łączone do celów statystycznych.

2. Kryteria kwalifikacji uczestników

1. Kryteria włączenia
   1. Kohorta pediatryczna: Uzyskaj pisemną, świadomą zgodę rodziców lub opiekunów prawnych przed zapisem do programu. Uwzględnić dzieci w wieku 6–48 miesięcy przyjęte z ostrą biegunką zakaźną potwierdzoną wywiadem klinicznym i badaniem stolca. Potwierdzić początek biegunki w ciągu 72 godzin przed przyjęciem do szpitala. Sprawdź, czy uczestnicy tolerują terapię rehydratacji doustnej i czy są medycznie stabilni.
   2. Kohorta dorosłych: Uwzględnić pacjentów w wieku ≥18 lat, którzy w ciągu ostatnich 24 godzin mieli ≥3 nieuformowane stolce i trwające objawy ≤5 dni. Potwierdzić etiologię zakaźną, z wyłączeniem Clostridioides difficile. Uzyskaj zgodę na świadomą zgodę ze względu na retrospektywny charakter badania.
2. Kryteria wykluczenia
   1. Wykluczać pacjentów pediatrycznych z ciężkim niedożywieniem (waga do wzrostu Z-score < −3), brudną krwią w stolcu, statusem wyłącznego karmienia piersią lub niedawnym stosowaniem antybiotyków w ciągu 14 dni.
   2. Wyklucz uczestników z przewlekłymi chorobami przewodu pokarmowego, niedoborem odporności lub ciężką chorobą ogólnoustrojową.
   3. Wykluczyć dorosłych pacjentów z wcześniejszymi operacjami jelit, terapią immunosupresyjną, niedawnym użyciem probiotyków w ciągu dwóch tygodni lub niemożnością wyrażenia zgody.
      UWAGA: Zbieranie danych może zostać wstrzymane po identyfikacji kohorty i wznowione przed analizą statystyczną.

3. Określenie wielkości próby

1. Obliczanie wielkości próby pediatrycznej
   1. Ustaw alfa na 0,05 i moc na 80%. Oblicz wielkość próby, aby wykryć średnią różnicę 1,5 dnia w czasie trwania biegunki przy odchyleniu standardowym 2,0 dnia.
   2. Zwiększyć wielkość próby o 10%, aby uwzględnić potencjalne porzucenie, co skutkuje 90 uczestnikami w każdej grupie.
2. Określenie wielkości próby dorosłych
   1. Oszacuj minimum 250 uczestników na grupę, aby wykryć różnicę w ustąpieniu objawów o 15%.
   2. Włączyć 270 dorosłych zarówno do grup kontrolnych interwencyjnych, jak i historycznych, aby zapewnić odpowiednią moc statystyczną.

4. Procedury interwencji i kontroli

1. Podawaj Saccharomyces boulardii w dawce 250 mg dwa razy dziennie (dwa razy dziennie) przez 5 dni, stosując doustne formuły z saszetki. Przed podaniem rozpuszczaj zawartość saszetki w wodzie lub mleku w temperaturze pokojowej. Podawaj preparat doustnie po karmieniu, aby poprawić tolerancję. Równocześnie zapewniać standardową terapię rehydratacji doustnej (ORT) zgodnie z wytycznymi WHO 23,24,25.
   1. Stosuj dostępne komercyjnie formuły zawierające Saccharomyces boulardii lub równoważne szczepy zatwierdzone do stosowania klinicznego.
   2. Rozpuszczaj zawartość saszetki w wodzie lub mleku w temperaturze pokojowej tuż przed podaniem doustnym.
2. Grupa kontrolna pediatryczna
   1. Podawaj doustnie saszetki placebo zawierające obojętną maltodekstrynę (250 mg na saszetkę) doustnie dwa razy dziennie (dotychczasowo) przez 5 dni, zgodnie z harmonogramem dawkowania grupy interwencyjnej. Rozpuszczaj placebo w wodzie lub mleku przed podaniem i podawaj po karmieniu. Upewnij się, że saszetki placebo są identyczne pod względem wyglądu, smaku, wagi i opakowania jak saszetki Saccharomyces boulardii , aby utrzymać oślepienie.
   2. Zapewnij standardową terapię rehydratacji doustnej.
   3. Zapewnij doustne nawadnianie za pomocą soli doustnej o niskiej osmolarności. U pacjentów wymagających nawodnienia dożylnego należy podawać roztwór chlorku sodu o stężeniu 0,9% lub roztwór mleczanu Ringera, w zależności od nasilenia odwodnienia i oceny lekarza. Grupa interwencyjna dla dorosłych
3. Grupa interwencyjna dla dorosłych
   1. Zidentyfikuj dorosłych pacjentów, którzy otrzymali S. boulardii w ramach rutynowej opieki klinicznej. Dokumentuj równoległe leczenie, w tym doustne lub dożylne nawadnianie oraz terapię antybiotykową.
4. Grupa kontrolna dorosłych dorosłych
   1. Identyfikacja dopasowanych dorosłych pacjentów, którzy otrzymali standardową opiekę wspierającą bez S. boulardii. Wykonuj dopasowanie na podstawie wieku, płci i diagnozy. Należy przyznać, że potencjalne czynniki zakłócające, takie jak stosowanie antybiotyków, choroby współistniejące i nasilenie choroby, mogły nie zostać w pełni kontrolowane.
   2. Zapisz szczegóły leczenia z elektronicznej dokumentacji medycznej.
5. Ocena i obsługa zmiennych zakłócających w dorosłej kohorcie
   1. Wyodrębniaj dane dotyczące potencjalnych zmiennych zakłócających z elektronicznej dokumentacji medycznej, w tym stosowania antybiotyku (typ i czas trwania), początkowego nasilenia choroby (częstotliwość biegunki, obecność odwodnienia i potrzeba podawania płynów dożylnych), choroby współistniejące (np. cukrzyca i przewlekłe choroby przewodu pokarmowego) oraz czas trwania objawów przed przyjęciem.
   2. Porównaj cechy wyjściowe między grupami interwencyjnymi a kontrolnymi, aby ocenić równowagę po dopasowaniu.
   3. Przeprowadz analizy stratyfikacyjne oparte na kluczowych czynnikach zakłócających, w tym antybiotykowej koterapii (tak/nie) oraz nasileniu choroby (łagodne vs umiarkowane).
   4. Przeprowadz wielowymiarową analizę regresji logistycznej w celu oceny związku między użyciem Saccharomyces boulardii a wynikami klinicznymi (np. ustępowaniem objawów i nawrotem) wraz z uwzględnieniem zidentyfikowanych czynników zakłócających.
   5. Przedstawij skorygowane ilorazy szans (aOR) z 95% przedziałami ufności (CI).
   6. Należy przyznać, że pozostałości zakłóceń mogą się utrzymywać ze względu na retrospektywny charakter badania.

5. Oślepianie i randomizacja

1. Randomizacja pediatryczna
   1. Wygeneruj sekwencję randomizacji pediatrycznej za pomocą oprogramowania statystycznego z randomizacją blokową. Utrzymuj ukrycie alokacji za pomocą kolejno numerowanych, nieprzezroczystych, zapieczętowanych kopert przygotowanych przez niezależnego farmaceuty.
2. Oślepianie
   1. Niewidomi badacze, opiekunowie i oceniający wyniki do przydziału grup w badaniu pediatrycznym. Ślepi analitycy danych na alokację leczenia podczas analizy statystycznej dla obu kohort.
      UWAGA: Nie wykonuj oślepiania w dorosłej kohorcie retrospektywnej.
      UWAGA: Obchodzenie się z próbkami biologicznymi zgodnie z odpowiednimi protokołami bezpieczeństwa biologicznego. Noś środki ochrony osobistej (rękawiczki, fartuch laboratoryjny, maseczka). Utylizacja zanieczyszczonych materiałów zgodnie z wytycznymi instytucjonalnymi dotyczącymi odpadów biomedycznych.

6. Ocena wyników

1. Główny wynik
   1. Mierz czas trwania biegunki jako liczbę dni od pierwszej dawki interwencji do ostatniego nieuformowanego stolca, po czym następuje 24 godziny bez biegunki.
2. Wyniki wtórne u pacjentów pediatrycznych
   1. Rejestruj częstotliwość stolca co 24 godziny aż do rozwiązania. Mierz czas trwania hospitalizacji w dniach.
   2. Zarejestrowano częstość wymiotów podczas leczenia. Oceń kliniczne wyleczenie do 5. dnia. Dokumentuj wszystkie zdarzenia niepożądane.
3. Wyniki wtórne u dorosłych pacjentów
   1. Oceń ustąpienie objawów do 7. dnia. Rekordowa nawrot biegunki w ciągu 14 dni.
   2. Mierz czas pobytu w szpitalu. Oceń wpływ równoległej terapii antybiotykowej. Dokumentuj zdarzenia niepożądane z elektronicznej dokumentacji medycznej.
4. Ocena diagnostyczna
   1. Pobieraj świeże próbki stolca przed podaniem probiotyków lub placebo, jeśli to możliwe.
   2. Przebadaj próbki stolca dziecięcego na obecność rotawirusa za pomocą szybkiego antygenowego testu immunochromatograficznego. Zapisz wynik jako pozytywny lub rotawirusowy negatywny.
   3. Dla dorosłych pacjentów wyniki badania kału, diagnozę kliniczną oraz kategorię patogenu z elektronicznej dokumentacji medycznej.

7. Analiza statystyczna

1. Analiza danych pediatrycznych
   1. Wykonuj analizę statystyczną za pomocą oprogramowania statystycznego.
   2. Wyrażamy zmienne ciągłe jako średnią ± odchylenia standardowego (SD). Oceń normalność zmiennych ciągłych za pomocą testu Shapiro–Wilka. Analizuj dane o rozkładzie nienormalnym za pomocą testu Mann–Whitney U.
   3. Porównaj zmienne ciągłe za pomocą niezależnego próbnego testu t. Porównaj zmienne kategoryczne za pomocą testu chi-kwadrat lub testu dokładnego Fishera, jeśli to stosowne.
2. Analiza danych dorosłych
   1. Przedstawiamy zmienne kategoryczne jako częstotliwości i procenty. Oblicz iloraz szans (OR) z 95% przedziałami ufności (CI). Porównaj za pomocą testu chi-kwadrat.
   2. Wykonaj wielowymiarową analizę regresji logistycznej, aby uwzględnić potencjalne czynniki zakłócające, takie jak stosowanie antybiotyków, początkowy poziom ciężkości choroby oraz choroby współistniejące.
   3. Przedstawij skorygowane ilorazy szans (aOR) z 95% przedziałami ufności (CI).
   4. Przeprowadz analizy podgrupowe podzielone na status współterapii antybiotykowej.
   5. Rozważmy p < 0,05 jako statystycznie istotne.
3. Próg istotności
   1. Zdefiniuj istotność statystyczną jako p < 0,05. Brakujące dane zostały obsłużone za pomocą analizy kompletnej sprawy. Raportuj szacunki efektu z 95% przedziałami ufności, jeśli to dotyczy.

Wyniki

Tabela 3 podsumowuje demograficzne i kliniczne cechy wyjściowe uczestników pediatrycznych (n = 176). Średni wiek dzieci otrzymujących S. boulardii wynosił 23,0 ± 12,3 miesiąca, w porównaniu do 21,2 ± 11,8 miesiąca w grupie placebo. Rozkład płci był porównywalny między grupami (S. boulardii: 47 samców/43 samic; placebo: 51 mężczyzn/35 kobiet). Analiza chi-kwadrat rozkładu płci nie wykazała statystycznie istotnej różnicy (χ² = 0,63, p = 0,428), co potwierdza, że grupy były dobr...

Dyskusja

Co ważne, wyniki z kohort pediatrycznych i dorosłych nie powinny być bezpośrednio porównywane. Badanie pediatryczne było randomizowanym badaniem kontrolowanym, natomiast kohorta dorosłych była retrospektywna, obserwacyjną. Dlatego wszelkie różnice obserwowane między kohortami są opisowe i mogą odzwierciedlać różnice w projektowaniu badania, cechach populacji lub etiologii choroby podstawowej, a nie prawdziwe efekty porównawcze leczenia. Badanie jest prezentowane w formacie uporządkowanego protokołu, aby zwiększyć powtarz...

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Komputer z oprogramowaniem statystycznym	IBM; R Foundation for Statistical Computing	SPSS v25.0; R v4.3.1	Licencjonowane oprogramowanie statystyczne Cel: analiza danych
Ekonorma	Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd., Beijing	CNCM I-745	Odmiany komercyjne Przeznaczenie: NA
System elektronicznej dokumentacji medycznej	System informacji szpitalnej	System instytucjonalny	Bezpieczna cyfrowa baza danych pacjentów Cel: Ekstrakcja danych (kohorta dorosłych)
Florastor	Biocodex, Francja	(S. boulardii CNCM I-745)	Odmiany komercyjne Przeznaczenie: NA
IBM SPSS Statistics wersja 25.0	IBM Corp., Armonk, NY, USA	Wersja 25.0	Wykorzystywane do analizy statystycznej, w tym testów chi-kwadrat, obliczania ilorazu szans oraz testów istotności
Płyn dożylny (0,9% chlorku sodu)	Baxter Healthcare / Fresenius Kabi	Według dostawcy	Sterylny roztwór soli izotonicznej Cel: Dożylna rehydratacja
Doustne sole nawadniające (ORS)	Formuła Światowej Organizacji Zdrowia	Worytek ORS standardowy WHO	ORS o niskiej osmolarności (Na + 75 mmol/L) Dożylna rehydratacja Cel: Doustna terapia rehydratyczna
Środki ochrony osobistej (PPE)	3M / równoważnik	Rękawiczki, maski, fartuchy laboratoryjne	Jednorazowy sprzęt ochronny Cel: Zgodność z bezpieczeństwem biologicznym
Saszetki placebo (maltodeksteryna)	Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd., Pekin, Chiny.	Specjalnie przygotowane	250 mg w saszetce, identyczne z wyglądem z aktywnym lekem Cel: interwencja kontrolna
Wersja oprogramowania R 4.3.1	Fundacja R ds. Obliczeń Statystycznych, Wiedeń, Austria	Wersja 4.3.1	Wykorzystywane do analizy statystycznej, analizy podgrup oraz modelowania regresji wielozmiennej
Oprogramowanie do randomizacji	Oprogramowanie R / GraphPad Prism	v4.3.1 / v10	Komputerowo generowana randomizacja bloków Cel: sekwencja alokacji
Szybki zestaw do testu antygenowego na rotawirusa	Abbott Diagnostics / SD Biosensor	SD BIOLINE Rota/Adeno	Badanie immunochromatograficzne Cel: Wykrywanie rotawirusów
Saszetki Saccharomyces boulardii CNCM I-745	[Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd., Pekin, Chiny.	[Wstaw kod katalogowy/produktu]	250 mg liofilizowanych drożdży probiotycznych na saszetkę Cel: Interwencja
Pojemnik na zbieranie stolca (sterylny)	Thermo Fisher Scientific / odpowiednik	Pojemnik sterylny o pojemności 120 mL	Nieszczelne, sterylne Cel: pobranie próbki stolca
Pojemnik/woreczek transportujący kał	BD Biosciences / równoważny	Zestaw transportowy okazów	Transport oznaczony jako zagrożenie biologiczne, szczelnie Cel: Obsługa próbek