Obniżenie poziomu miR-483-3p jest słabym wskaźnikiem prognostycznym w NSCLC. Nadmierna ekspresja miR-483-3p tłumi złośliwe fenotypy komórek NSCLC, których funkcję odwróciła nadmierna ekspresja KIF3B.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł badawczy
Obniżenie poziomu miR-483-3p jest słabym wskaźnikiem prognostycznym w NSCLC. Nadmierna ekspresja miR-483-3p tłumi złośliwe fenotypy komórek NSCLC, których funkcję odwróciła nadmierna ekspresja KIF3B.
MikroRNA odgrywają szeroką rolę w niedrobnokomórkowym raku płuca (NSCLC). Aby zbadać wartość kliniczną miR-483-3p w NSCLC oraz jego molekularnym celu, do tego badania zrekrutowano 350 pacjentów z NSCLC. Wyniki RT-qPCR wykazały, że histologiczna ekspresja miR-483-3p w guzie stopniowo malała wraz ze wzrostem stadium przerzutów do węzła nowotworowego (TNM). Krzywa charakterystyki operacyjnej odbiornika (ROC) pokazała, że poziom histologicznego miR-483-3p skutecznie odróżnia pacjentów NSCLC z wysokim stadium TNM (III) od tych z niskim stadium (I+II) (obszar pod krzywą ROC = 0,869). Krzywa Kaplan-Meier wykazała, że pacjenci NSCLC z niską ekspresją miR-483-3p wykazywali niższy wskaźnik przeżycia ogólnego przez 5 lat. Po uwzględnieniu innych czynników zakłócających, wielowymiarowa analiza Coxa dodatkowo zidentyfikowała miR-483-3p jako niezależny czynnik ochronny dla przeżycia NSCLC. Mechanistycznie test RNA z metodą pull-down wykazał, że wzrost wytrącenia miR-483-3p był współwytrącony z mRNA KIF3B i hamował jego ekspresję, co hamowało złośliwe fenotypy komórek NSCLC i wywoływało apoptozę. Podsumowując, obniżenie poziomu miR-483-3p stanowi słaby marker prognostyczny w NSCLC, potencjalnie wpływając na postęp nowotworu poprzez negatywną regulację KIF3B.
Wśród zgonów związanych z rakiem jedną z głównych przyczyn jest niedrobnokomórkowy rak płuc (NSCLC). Wysoki wskaźnik śmiertelności przypisuje się przede wszystkim agresywnemu rozwojowi guzów, wczesnym przerzutom oraz rozwojowi nabytej odporności 1,2,3. Pomimo postępów w obecnych strategiach klinicznych, ogólne rokowanie dla pacjentów z NSCLC pozostaje słabe 4,5,6. Oprócz wyzwań biologicznych, pacjenci NSCLC często doświadczają silnego obciążenia objawowego, w tym bólu, duszności, zmę....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Komisja Etyka Drugiego Szpitala Afiliowanego Uniwersytetu Medycznego w Nankinie zatwierdziła to badanie. Podstawowe zasady Deklaracji Helsińskiej były konsekwentnie stosowane przez cały proces badawczy. Wszyscy indywidualni uczestnicy biorący udział w badaniu uzyskali pisemną świadomą zgodę. Szczegółowe informacje o wszystkich materiałach i odczynnikach zostały przedstawione w Tabeli Materiałów.
Analiza bioinformatyczna:
Baza danych Gene Expression Omnibus (www.ncbi.nlm.nih.gov) została zastosowana do przeszukiwania zbiorów danych związanych z NSCLC. GSE171517 t....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Obniżony poziom miR-483-3p oznacza złe rokowanie w NSCLC
Diagram Venna (Ilustracja uzupełniająca 1) wskazuje, że miR-483-3p jest obniżony zarówno w próbkach surowicy pacjentów z NSCLC, jak i w liniach komórkowych NSCLC opornych na chemioterapię. Jednokierunkowa analiza ANOVA wykazała, że ekspresja miR-483-3p w guzie stopniowo maleje wraz ze wzrostem stadium TNM (Rysunek 1A). Analiza krzywej ROC została przeprowadz.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Badanie to systematycznie badało rolę miR-483-3p w tłumieniu guzów NSCLC oraz jego mechanizm poprzez analizę próbek klinicznych i badanie mechanizmów molekularnych. Celem tego badania były dwa etapy: (1) ustalenie, czy miR-483-3p pełni rolę niezależnego markera prognostycznego w NSCLC oraz (2) wyjaśnienie mechanizmu molekularnego, dzięki któremu miR-483-3p może hamować fenotypy złośliwe poprzez celowanie w KIF3B. Nasze wyniki sugerują wartość kliniczną miR-483-3p jako niezależnego markera prognostycznego i mogą pomóc wyj.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 0,1% kryształowego fioletu | Solarbio/Chiny | G1064 | |
| 0,25% trypsyna-EDTA | Gibco/USA | 25200056 | |
| 4% paraformaldehydu | Beyotime/Chiny | P0099 | |
| System 7500 Fast RT-PCR | Biosystemy stosowane / USA | 4351106 | |
| A549 | Procell/Chiny | CL-0016 | |
| Medium specyficzne dla A549 | Procell/Chiny | CM-0016 | |
| Zestaw do barwienia Annexin V-FITC/PI | Beyotime/Chiny | C1062S | |
| BEAS-2B | RECELL/CHIN | STM-CL-5102 | |
| Zestaw do Liczenia Komórek-8 (CCK-8) | Solarbio/Chiny | CA1210 | |
| Medium DMEM | MeilunBio/Chiny | PWL003 | |
| Surowica bydła płodowa | Gibco/USA | A5256701 | |
| Oprogramowanie GraphPad Prism | GraphPad | Wersja 7.0 | |
| H1299 | Procell/Chiny | CL-0165 | |
| Medium specyficzne dla H1299 | Procell/Chiny | CM-0165 | |
| H520 | Procell/Chiny | CL-0402 | |
| Medium specyficzne dla H520 | Procell/Chiny | CM-0402 | |
| HCC827 | Procell/Chiny | CL-0094 | |
| Medium specyficzne dla HCC827 | Procell/Chiny | CM-0094 | |
| mRNA KIF3B | Genscript Biotech/Chiny | Dostosowane | |
| Odczynnik Lipo6000 | Beyotime/Chiny | C0526 | |
| miR-483-3p agonista/agonista-NC | MedChemExpress/USA | HY-R01451A | |
| oe-KIF3B/oe-NC | RiboBio/Chiny | Dostosowane | |
| Penicylina/streptomycyna | Solarbio/Chiny | P1400 | |
| Pierce RNA 3' Zestaw do zakończenia destiobiotynylu | Thermo Fisher Scientific/USA | 20163 | |
| PrimeScript RT Reagent Kit (Perfect Real Time) | TaKaRa/Japonia | RR037A | |
| si-KIF3B/si-NC | RiboBio/Chiny | Dostosowane | |
| SPSS | IBM | Wersja 23.0 | |
| Magnetyczne kulki streptawidyny | New England Biolabs/USA | S1420S | |
| SYBR Green Pro Taq HS Premix | Dokładna biologia/Chiny | AG11701 | |
| Komora transwellowa | Corning/USA | 3428 | |
| Odczynnik TRIzol | Invitrogen/USA | 15596026CN |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.