Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł badawczy
* These authors contributed equally
U pacjentów z uszkodzeniem rdzenia kręgowego (SCI) uporządkowanie CASC11 jest związane z ciężkością obrażeń. In vitro, downregulacja CASC11 łagodzi apoptozę i stany zapalne, sugerując związek z osią miR-130b-5p/SPP1. Te wyniki sugerują potencjalną rolę CASC11 jako kandydata biomarkera w patogenezie SCI.
Uraz rdzenia kręgowego (SCI) jest poważnym urazem ośrodkowego układu nerwowego. To jednocentrowé, obserwacyjne i in vitro badanie zbadał potencjał diagnostyczny CASC11 oraz jego możliwy mechanizm regulacji w SCI z wykorzystaniem klinicznych próbek surowicy i modeli komórek stymulowanych lipopolisacharydami.poziomy CASC11, miR-130b-5p i SPP1 zmierzono za pomocą czasowej reakcji łańcuchowej polimerazy w rzeczywistym czasie (RT-qPCR). Funkcje komórkowe i relacje dotyczące docelowych obszarów oceniono za pomocą zestawu do liczenia komórek kit-8 (CCK-8), cytometrii przepływowej, western blot, enzymatycznego testu immunosorbentowego (ELISA), raportu dual-luciferase oraz testu RNA immunoprecipitation (RIP). CASC11 był wysoce ekspresowany w SCI i związany z stanem zapalnym jako potencjalny biomarker diagnostyczny. W komórkach PC-12 traktowanych lipopolisacharydami (LPS), wyciszenie CASC11 łagodziło stłumioną aktywność komórek, apoptozę i stan zapalny, co zostało odwrócone przez inhibitor miR-130b-5p. Te odkrycia sugerują, że CASC11 jest związany z ciężkością SCI, podczas gdy dane in vitro wskazują na jego udział w odpowiedziach zapalnych i apoptotycznych poprzez osie CASC11/miR-130b-5p/SPP1. Badanie to jest ograniczone przez swój jednocentrowy projekt i brak potwierdzenia in vivo.
Uraz rdzenia kręgowego (SCI) oznacza tymczasowe lub trwałe zaburzenie układowe wynikające z uszkodzenia rdzenia kręgowego spowodowane siłami zewnętrznym lub chorobami, prowadzące do upośledzenia funkcji układu nerwowego ruchowego, czuciowego, odruchowego i autonomicznego1,2. Pacjenci często napotykają na trwałe niedobory czynności fizycznych i powikłania, powodując znaczne cierpienia i obciążenia dla osób i rodzin. Etiologia SCI jest ogólnie klasyfikowana na urazy traumatyczne i nietraumatyczne pochodzenie3. Urazy traumatyczne, głównie wynikające z złamań kręgosłupa z powodu zewnętrznyc....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Rekrutacja osób badanych
Pacjenci z ostrym urazem kręgosłupa (n = 300) leczeni w szpitalu od stycznia 2023 do maja 2025 roku zostali wybrani i sklasyfikowani w grupie całkowitego uszkodzenia rdzenia kręgowego (CSCI) (stopień A, n = 98), grupie niecałkowitego uszkodzenia rdzenia kręgowego (ISCI) (stopnie B, C i D; n = 95) oraz grupie z normalną funkcją neurologiczną (NNF) (stopień E, n = 107) zgodnie ze skalą upośledzenia American Spinal Injury Association (klasyfikacja AIS). Dla pacjentów z grupy NNF radiologiczne dowody na USK, takie jak obrzęk, stłuczenie lub ucisk, potwierdzono za pomocą obrazowania rezonansem magnetyczn....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Podstawowe dane dotyczące badanych
Charakterystyka początkowa pacjentów w grupach Kontrolnej, NNF, ISCI i CSCI przedstawiona jest w Tabeli 1. Analiza statystyczna nie wykazała istotnych różnic między grupami w zmiennych takich jak płeć, wiek, wskaźnik masy ciała (BMI), etiologia urazu i czas urazu (P > 0,05). Istotne różnice między czterema grupami obserwowano w przypadku długości pobytu, stopnia ASIA i stężenia pro-zapalnych cytokin takich jak czynni.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
SCI to wyniszczająca choroba ośrodkowego układu nerwowego, która często prowadzi do znaczących niedoborów w czuciowości, kontroli ruchowej i funkcji układu autonomicznego, co znacząco obniża jakość życia pacjenta i jego dalszy rokowanie18. Pacjenci mogą prezentować upośledzenie funkcjonalne i utratę czucia po urazie kręgosłupa, a badania obrazowe (takie jak MRI) mogą być wykorzystywane do oceny wystąpienia SCI19. Początek SCI wyzwala szkodliwe kaskady uszkodzeń wtórnych, kt.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do ujawnienia.
Nie dotyczy.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| BCA protein assay kit | Yeasen, China | P0010 | |
| CCK-8 solution | Sigma-Aldrich, USA | 96992 | |
| Dual-luciferase reporter vector | Promega, USA | E133A | wektor pmirGLO |
| Dulbecco’s Modified Eagle Medium | ATCC, Manassas, VA, USA | 30-2002 | |
| ELISA kit for IL-1β | R&D Systems, USA | DY401 | |
| ELISA kit for IL-6 | R&D Systems, USA | HS600B | |
| ELISA kit for TNF-α | R&D Systems, USA | DTA00C | |
| Fetal bovine serum | Gibco, Grand Island, NY, USA | 10099141 | |
| Flow cytometer | BD FACSCalibur, USA | FACS101 | |
| Image analysis software | NIH, Bethesda, MD, USA | version 1.44p | oprogramowanie ImageJ |
| Isopropanol | Beijing Chemical Factory, China | 32064 | |
| Lipid-based transfection reagent | Invitrogen, Carlsbad, CA, USA | L3000008 | Lipofectamine 3000 |
| Lipopolysaccharide | Sigma-Aldrich, USA | L2880 | |
| Lysis buffer | Beyotime, China | P0013D | bufor RIPA |
| Microplate reader | Reagen, China | RNE90002 | |
| PC-12 and BV-2 cells | ATCC, Manassas, USA | ||
| Phenol-chloroform reagent | Thermo, USA | 15596026 | reagent Trizol |
| Reverse transcription kit | Takara, Japan | RR047A | PrimeScript RT Kit |
| RNA-binding protein immunoprecipitation kit | Millipore, USA | 17-700 | Magna RIP Kit |
| RNase-free microtubes | Axygen, Corning, NY, USA | MCT-150-C-S | |
| Serum separator tubes | Terumo, Tokyo, Japan | VP-AS109K60 | |
| Statistical analysis software | San Diego, USA | version 9.0 | GraphPad Prism |
| SYBR Green premix | Takara, Japan | RR420A | SYBR Premix Ex Taq |