Niniejsze badanie ocenia skuteczność peelingów chemicznych z kwasów złożonych u pacjentów z umiarkowanym trądzikiem pospolitym. W badaniu typu split-face przeprowadzonym u 30 pacjentów, leczenie doprowadziło do obniżenia wyników w skali Global Acne Grading System, zmniejszenia zaczerwienienia skóry i poziomu porfiryn oraz redukcji ekspresji IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β i TLR2. Różnorodność mikrobiomu skóry uległa zmniejszeniu, szczególnie w odniesieniu do Staphylococcus, a podczas obserwacji nie zgłoszono żadnych działań niepożądanych.
Artykuł badawczy
Skuteczność chelicznego peelingu kwasami złożonymi u pacjentów z trądzikiem o nasileniu umiarkowanym: prospektywne badanie z kompleksową oceną twarzy
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Chemiczny peeling kwasami złożonymi jest powszechnie stosowany w leczeniu trądziku pospolitego (AV), jednak biologiczne mechanizmy leżące u podstaw jego efektów klinicznych nie są jeszcze w pełni poznane. Postawiliśmy hipotezę, że peeling kwasami złożonymi poprawi stopień nasilenia trądziku i będzie wiązał się ze zmianami w mikrobiomie skóry oraz redukcją miejscowych reakcji zapalnych u pacjentów z umiarkowanym AV. Celem niniejszego badania było zbadanie efektów klinicznych, mikrobiologicznych i zapalnych peelingu kwasami złożonymi w tej populacji. Przeprowadziliśmy prospektywne, randomizowane badanie z podziałem twarzy (split-face), w którym wzięło udział 30 pacjentów z umiarkowanym AV. Jedna połowa twarzy poddana była peelingowi kwasami złożonymi dwa razy w tygodniu przez 3 tygodnie (łącznie 6 sesji), po czym nastąpił 9-tygodniowy okres obserwacji. Przeciwna połowa twarzy nie otrzymywała żadnego leczenia przez pierwsze 3 tygodnie, a następnie poddano ją temu samemu protokołowi peelingu przez 3 tygodnie, z 6-tygodniową obserwacją po zabiegach. Mierniki efektów obejmowały Global Acne Grading System (GAGS), samoocenę pacjentów, standaryzowaną obrazowanie twarzy, biopsję skóry z immunohistochemią, ekstrakcję bakteryjnego DNA, amplifikację PCR oraz sekwencjonowanie genu 16S rRNA. U pacjentów odnotowano statystycznie istotną poprawę w punktacji GAGS (P < 0,001). Analiza obrazowania twarzy wykazała redukcję zaczerwienienia oraz odczytów porfiryn. Zmniejszyło się barwienie immunohistochemiczne dla interleukiny (IL)-1α, IL-6, IL-17, czynnika wzrostu TGF-β (TGF-β) oraz receptora Toll-podobnego 2 (TLR2). Zmniejszyła się alfa-różnorodność mikrobiomu skóry, z wyraźnym spadkiem względnej liczności Staphylococcus (P < 0,05). W trakcie badania nie zgłoszono żadnych zdarzeń niepożądanych. Peeling kwasami złożonymi był skuteczny i dobrze tolerowany w okresie obserwacji oraz wiązał się ze zmianami w mikrobiomie skóry i barwieniem miejscowych markerów zapalnych.
Wprowadzenie
Trądzik pospolity (AV), powszechnie znany jako trądzik, jest przewlekłą zapalną chorobą skóry, która dotyka przede wszystkim mieszki włosowe i gruczoły łojowe. Charakteryzuje się występowaniem grudek, krostek, guzków i cyst, głównie na twarzy, klatce piersiowej i plecach. Choć trądzik dotyczy głównie nastolatków i młodych dorosłych, może pojawić się w każdym wieku, a jego globalna rozpowszechnienie szacuje się na 70% do 87% wśród osób w wieku od 12 do 24 lat1,2. Warto zauważyć, że trądzik może utrzymywać się w wieku dorosłym, szczególnie u kobiet, a zwiększona zapadalność jest obserwowana u osób w wieku 25 lat i starszych. Na rozwój trądziku wpływa wiele czynników, w tym zwiększona produkcja sebum3, hiperkeratyzacja mieszków włosowych4, kolonizacja bakteryjna5 oraz stan zapalny6. Cutibacterium acnes (C. acnes) i Staphylococcus epidermidis (S. epidermidis) to dwie kluczowe bakterie w mikrobiocie skóry, które odgrywają istotną rolę w regulacji odpowiedzi zapalnej. Stwierdzono, że równowaga między C. acnes a S. epidermidis ma krytyczne znaczenie dla utrzymania prawidłowej odpowiedzi zapalnej skóry5. Zaburzenie tej równowagi aktywuje markery związane ze stanem zapalnym, co wywołuje trądzik.
Obecne strategie leczenia trądziku obejmują zarówno opcje miejscowe, jak i systemowe, mające na celu zwalczanie różnych aspektów tego schorzenia. Należą do nich retinoidy do stosowania miejscowego, nadtlenek benzoylu7, antybiotyki miejscowe oraz środki systemowe, takie jak antybiotyki doustne i izotretynoina w cięższych przypadkach8. W ostatnich latach peeling chemiczny wyłonił się jako obiecująca metoda leczenia trądziku. Technika ta polega na nakładaniu specyficznych kwasów w celu złuszczania skóry, poprawy jej tekstury oraz zmniejszenia widoczności zmian trądzikowych i blizn9. Kwasy powszechnie stosowane w peelingach chemicznych to alfa-hydroksykwasy (AHA), takie jak kwas glikolowy, oraz beta-hydroksykwasy (BHA), takie jak kwas salicylowy. Kwasy te działają poprzez różne mechanizmy, w tym redukcję stanu zapalnego i zapobieganie powstawaniu zaskórników. W szczególności uwagę zwrócono na złożone formulacje kwasowe, łączące wiele rodzajów kwasów lub różne stężenia jednego kwasu, ze względu na ich potencjalne korzyści terapeutyczne. Główną zaletą kwasów złożonych jest ich zdolność do jednoczesnego oddziaływania na wiele szlaków zaangażowanych w patogenezę trądziku10.
Badania kliniczne oceniające skuteczność złożonego peelingu kwasowego w leczeniu trądziku wykazały obiecujące wyniki, w tym znaczną redukcję stopnia nasilenia trądziku i liczby zmian, a także poprawę tekstury skóry u pacjentów poddanych leczeniu11. Chociaż wcześniejsze badania zgłaszały korzyści kliniczne wynikające z zastosowania peelingów chemicznych w leczeniu trądziku, większość dostępnych dowodów koncentrowała się na formulacjach opartych na pojedynczym kwasie lub na efektach klinicznych, takich jak liczba zmian i stopień nasilenia trądziku. Choć wysunięto hipotezę, że połączenie właściwości złuszczających, przeciwzapalnych i przeciwdrobnoustrojowych tych kwasów przyczynia się do ich skuteczności, dokładne szlaki molekularne pozostają do pełnego wyjaśnienia. Z naszej wiedzy jest to pierwsze badanie analizujące wpływ kwasów złożonych na skład mikrobioty skóry oraz odpowiedzi zapalne u osób z trądzikiem o umiarkowanym nasileniu.
Protokół
Protokół badania został przeanalizowany i zatwierdzony przez Komisję Etyczną Pierwszego Szpitala Powiązanego z Uniwersytetem Medycznym w Chongqing (nr 2024-020-01). Badanie zostało zarejestrowane prospektywnie w Narodowym Rejestrze Badań Medycznych w Chinach (numer rejestracyjny: MR-50-24-036087; data rejestracji: 6 września 2024 r.). Przed włączeniem do badania od wszystkich uczestników uzyskano pisemną świadomą zgodę, w tym zgodę na publikację zanonimizowanych zdjęć twarzy. Badanie zostało przeprowadzone zgodnie z Deklaracją Helsińską.
Projekt badania
Było to 12-tygodniowe, prospektywne, randomizowane badanie kliniczne z podziałem na połowy twarzy (split-face). Złożony peeling kwasowy zastosowany w tym badaniu składał się z AHA (4%), kwasu salicylowego (2%) i kwasu azelainowego (1,5%), przy całkowitym stężeniu kwasów wynoszącym około 7,5%. pH preparatu wynosiło 3,6. Przed rozpoczęciem badania przydział uczestników do grupy leczonej i kontrolnej został określony za pomocą losowej sekwencji wygenerowanej w arkuszu kalkulacyjnym przez oślepionego statystyka i wdrożonej przez oślepionego lekarza. Strona leczona była poddawana złożonemu peelingowi kwasowemu dwa razy w tygodniu przez 3 tygodnie (łącznie sześć sesji). Obszar zabiegowy był delikatnie oczyszczany łagodnym, nietłustym środkiem myjącym i całkowicie osuszany, a następnie nakładano peeling cienką, równomierną warstwą (~2 mL na połowę twarzy). Preparat nakładano w ustandaryzowanej kolejności: od czoła i skroni, przez policzki, nos, obszar okojoustny, aż po brodę, unikając powiek, warg, błon śluzowych i uszkodzonej skóry. Produkt pozostawiano w kontakcie ze skórą przez 15 min, a następnie neutralizowano wodą. Punktem końcowym badania klinicznego był łagodny, równomierny rumień z tolerowalnym mrowieniem lub uczuciem ciepła, bez nadmiernego pieczenia, obrzęku, pęcherzy lub rozległego efektu szronienia (frosting). Po usunięciu peelingu przez 15 min stosowano kojącą i nawilżającą maskę.
Uczestnicy zostali poinstruowani, aby unikać drażniących produktów do stosowania miejscowego, peelingów, mechanicznego usuwania zmian oraz bezpośredniej ekspozycji na słońce, a w ciągu dnia stosować krem z filtrem o szerokim spektrum działania. Po 3‑tygodniowej fazie leczenia nastąpił 9‑tygodniowy okres obserwacji. Strona kontrolna nie była poddawana żadnej interwencji podczas pierwszych 3 tygodni. Po tym wstępnym okresie oczekiwania na stronie kontrolnej przeprowadzono ten sam 3‑tygodniowy cykl peelingu kwasami złożonymi, po którym nastąpiło 6‑tygodniowe obserwowanie. Pięć sesji na każdą połowę twarzy zostało przeprowadzonych przez przeszkolony personel medyczny w szpitalu, natomiast jedną sesję na każdą połowę twarzy uczestnik wykonał w domu zgodnie ze zstandaryzowanymi instrukcjami przekazanymi przez badaczy. Uczestnik otrzymał zstandaryzowane instrukcje pisemne i ustne dotyczące ilości i rozmieszczenia produktu, kolejności aplikacji i obszaru zabiegu, wyznaczonego czasu ekspozycji oraz procedury usuwania produktu. Schematyczny przegląd projektu badania i przebiegu doświadczenia przedstawiono na Rysunku 1.
Rekrutacja pacjentów
Do badania zakwalifikowano trzydziestu pacjentów w wieku 18–60 lat z kliniczną diagnozą umiarkowanego trądziku pospolitego (AV). Kryteria włączenia obejmowały osoby każdej płci spełniające diagnostyczne kryteria umiarkowanego AV, odpowiadające stopniowi 2 (31–50 zmian, w tym zaskórniki, grudki i krostki) lub stopniowi 3 (51–100 zmian, w tym liczne grudki i krostki, sporadyczne duże zmiany zapalne oraz mniej niż trzy guzki). Wykluczono pacjentów, którzy mieli skórę światłoczułą lub stosowali leki uwrażliwiające na światło w ciągu poprzednich 4 tygodni; mieli w wywiadzie intensywną ekspozycję na słońce w ciągu ostatniego miesiąca lub przewidywali znaczną ekspozycję na słońce w ciągu 1 miesiąca po leczeniu; mieli blizny, aktywną infekcję lub niezagojone rany w miejscu leczenia; zdiagnozowany zespół niedoboru odporności; ciężką niewydolność serca, wątroby lub nerek; lub udokumentowaną chorobę psychiatryczną. Wszystkich 30 zakwalifikowanych uczestników ukończyło badanie i zostało uwzględnionych w analizie końcowej.
Ocena wyników
Obiektywne oceny
Analiza rumienia i porfiryn
W zestandaryzowanych warunkach środowiskowych (stała temperatura, wilgotność i oświetlenie) zastosowano system obrazowania twarzy do przechwytywania obrazów obustronnego czoła, policzków, linii żuchwy oraz innych obszarów objętych zmianami w punkcie wyjścia oraz podczas każdej wizyty kontrolnej. System ten umożliwił obiektywną kwantyfikację intensywności rumienia oraz poziomu porfiryn.
Pobieranie próbek mikrobioty i immunohistochemia
Profilowanie mikrobiomu skóry wykonano na podstawie wymazów mikrobiologicznych pobranych ze strony leczonej przed rozpoczęciem terapii oraz w 3. tygodniu. DNA mikrobiologiczne wyekstrahowano z wymazów przy użyciu określonego zestawu do ekstrakcji, zgodnie z protokołem producenta, a następnie określono ilość odzyskanego DNA. Region 16S rRNA bakterii amplifikowano z użyciem uniwersalnych starterów 341F (5’-CCTACGGGNGGCWGCAG-3’) i 805R (5’-GACTACHVGGGTATCTAATCC-3’). Amplifikację rozpoczęto od denaturacji w 98 °C przez 30 s, po czym przeprowadzono 32 cykle: 98 °C przez 10 s, 54 °C przez 30 s oraz 72 °C przez 45 s. Końcową elongację przeprowadzono w 72 °C przez 10 min.
Amplikony PCR oczyszczono przy użyciu określonych kulek i poddano kwantyfikacji przed oceną biblioteki. Jakość produktu oceniono za pomocą bioanalizatora oraz zestawu do ilościowej PCR, po czym zakwalifikowane amplikony połączono w celu sekwencjonowania. Zdemultipleksowane surowe odczyty przetworzono, usuwając najpierw sekwencje starterów programem Cutadapt. Odczyty parne (paired-end) zmontowano w programie FLASH, a za pomocą fqtrim wyeliminowano odczyty o wartościach jakości poniżej 20, długości poniżej 100 bp lub z zasadami niejednoznacznymi stanowiącymi więcej niż 5% sekwencji. Czyste tagi, które przeszły filtrowanie jakości, zachowano do dalszych analiz. Chimery usunięto programem Vsearch, a do odszumiania pozostałych odczytów i generowania wariantów sekwencji amplikonów (ASV) wykorzystano DADA2.
Adnotacja gatunków została przeprowadzona w programie QIIME2 za pomocą wtyczki feature-classifier w oparciu o bazy danych SILVA oraz NT-16S. Program QIIME2 posłużył również do obliczenia różnorodności alfa i beta. Skład bakterii oceniono na podstawie profili względnej liczebności. Różnice w liczebności na poziomie rodzaju badano za pomocą testu Wilcoxona, przyjmując poziom istotności P < 0,05. Analizę efektu wielkości dyskryminantu liniowego (LDA) wykonano przy użyciu nsegata-lefse, przyjmując progi LDA ≥3,0 oraz P < 0,05.
Spośród zakwalifikowanych uczestników 10 pacjentów wybrano losowo do analizy immunohistochemicznej mediatorów zapalnych, w tym IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β i TLR2. Próbki biopsji skóry (2 mm) pobrano z aktywnych zmian trądzikowych w punkcie wyjścia (tydzień 0) oraz w 3. tygodniu po dezynfekcji jodoforem. Próbki utrwalono w 4% paraformaldehydzie, zatopiono w parafinie i pocięto na sekcje o grubości 4 μm. Sekcje zatopione w parafinie (4 μm) poddano deparafinizacji i rehydratacji. Odzyskiwanie antygenów przeprowadzono z użyciem buforu EDTA (pH 9,0) przy pomocy podgrzewania w mikrofalach. Endogenną peroksydazę zneutralizowano 3% H2O2, po czym sekcje potraktowano 3% surowicą kozią w celu ograniczenia niespecyficznego wiązania przeciwciał. Następnie sekcje inkubowano przez noc w temperaturze 4 °C z przeciwciałami pierwszorzędowymi: IL-1α (1:400), IL-6 (1:400), IL-17A (1:400), TGF-β (1:400) i TLR2 (1:300). W następnym kroku sekcje inkubowano przez 30 min w temperaturze pokojowej z zestawem przeciwciał wtórnych Polymer-HRP, a następnie przeprowadzono detekcję z użyciem chromogenu DAB i barwienie kontrastowe hematoksyliną. Kontrole negatywne inkubowano z PBS zamiast przeciwciał pierwszorzędowych. Obrazy wykonano za pomocą skanera cyfrowego przy powiększeniu 400×. Na każdą sekcję losowo wybrano pięć pól, a ocenę przeprowadzili dwaj dermatolodzy w ślepej próbie.
Oceny subiektywne
Globalna ocena badacza
W punkcie wyjścia oraz w 12. tygodniu dermatolog, nieznający przydziału do grup terapeutycznych, ocenił stopień nasilenia trądziku na całej twarzy, stosując Globalny System Stopniowania Trądziku (GAGS).
Samoocena pacjenta
Pod koniec okresu leczenia i obserwacji uczestnicy ocenili postrzeganą poprawę kliniczną przy użyciu czterostopniowej skali samooceny. Wyniki zdefiniowano następująco: 0 – brak poprawy lub pogorszenie; 1 – lekka poprawa; 2 – umiarkowana poprawa; oraz 3 – wyraźna poprawa.
Ślepa ocena wyników
Aby zmniejszyć błąd oceny, dermatolog nieznający przydziału do grup terapeutycznych niezależnie ocenił poprawę kliniczną na podstawie zdjęć wyjściowych.
Monitorowanie bezpieczeństwa
W każdej wizycie kontrolnej oceniano zdarzenia niepożądane w celu oceny bezpieczeństwa leczenia.
Analiza statystyczna
Przed rozpoczęciem badania oszacowano wielkość próby niezbędną do wykrycia zmiany w ogólnym wyniku GAGS dla całej twarzy od poziomu wyjściowego do 12. tygodnia. Obliczenie wielkości próby oparto na badaniu pilotażowym dotyczącym peelingu kwasami złożonymi; przy założeniu ustandaryzowanej wielkości efektu wewnątrz grupy uczestników równej 0.60, dwustronnego poziomu istotności 0.05 oraz mocy 80%, wymaganych było 24 ocenialnych uczestników. Uwzględniając 20% ubytek osób, docelowa liczba rekrutowanych uczestników wyniosła 30.
Analizę statystyczną przeprowadzono przy użyciu oprogramowania statystycznego oraz oprogramowania do tworzenia wykresów (patrz Tabela materiałów). Dane ciągłe opisano zgodnie z ich rozkładem. Zmienne o rozkładzie zbliżonym do normalnego przedstawiono jako średnią ± odchylenie standardowe, natomiast zmienne o rozkładzie innym niż normalny przedstawiono jako medianę z rozstępem międzykwartylowym lub zakresem, w zależności od kontekstu. Dane kategoryczne wyrażono jako liczebność i wartości procentowe.
Rozkład danych oceniono za pomocą testu Shapiro-Wilka, co potwierdzono poprzez wizualną analizę histogramów i wykresów Q-Q. Ze względu na małą liczebność próby oraz fakt, że kilka zmiennych nie wykazywało rozkładu normalnego, analizy główne przeprowadzono z wykorzystaniem testów nieparametrycznych. Główne wyniki, w tym wyniki GAGS, powierzchnię obszarów czerwonych oraz poziomy porfiryn, analizowano za pomocą znakowego testu Wilcoxona dla par.
Wielkości efektu oraz 95% przedziały ufności obliczono dla głównych wyników klinicznych. W przypadku sparowanych porównań nieparametrycznych jako miary wielkości efektu zastosowano korelację rangowo-biseryjną dla par dopasowanych. Korelację rang Spearmana wykorzystano do oceny zależności między zmiennymi ciągłymi lub porządkowymi. Testy statystyczne były dwustronne, a wyniki uznano za istotne przy P < 0.05.
Analizy mikrobiomu przeprowadzono na próbkach pobranych od tych samych uczestników z grupy leczonej. Różnorodność alfa oceniano przy użyciu indeksów Shannona i Simpsona. Zmiany w indeksach różnorodności alfa pomiędzy próbkami wyjściowymi a próbkami po leczeniu oceniano za pomocą powiązanego testu znaków Wilcoxona.
Skład społeczności bakteryjnej podsumowano za pomocą względnej liczności na poziomach typu, rodziny i rodzaju. Taksony o niskiej liczności lub niskim rozpowszechnieniu zachowano do analizy opisowej. Różnice we względnej liczności określonych taksonów między próbkami wyjściowymi a próbkami po leczeniu oceniano za pomocą parowych testów nieparametrycznych. W analizach mikrobiomu testy na poziomie taksonów miały charakter eksploracyjny i raportowane są niepoprawione wartości P. Wszystkie testy były obustronne, z progiem istotności P < 0.05.
Wyniki
Wyjściowe charakterystyka pacjentów
Do badania włączono trzydziestu pacjentów, którzy przeszli wszystkie procedury badawcze. Podsumowanie wyjściowych cech demograficznych i klinicznych przedstawiono w Tabeli 1.
Analiza skóry VISIA
Leczenie za pomocą peelingu kwasowego doprowadziło do widocznej poprawy zmian trądzikowych na obu połowach twarzy. Analiza VISIA potwierdziła znaczną redukcję rumienia i poziomu porfiryn podczas kontroli w 12. tygodniu. Wynik dla obszarów czerwonych spadł z 32,34 ± 6,32 w punkcie wyjściowym do 18,34 ± 8,32 w 12. tygodniu, co wskazuje na zmniejszenie stanu zapalnego skóry. Wartości porfiryn spadły z 34,24 ± 9,53 do 17,34 ± 8,43 (P < 0,05). Reprezentatywne zmiany w zakresie rumienia przedstawiono na Ryc. 2.
Wyniki skuteczności klinicznej
W 12. tygodniu całkowite wyniki GAGS dla całej twarzy były znacząco niższe w porównaniu z wartościami wyjściowymi (P < 0,001; Rysunek 3). Wyniki samooceny pacjentów wykazały, że 3,3% pacjentów oceniło poprawę jako łagodną (wynik 1), 83,3% jako umiarkowaną (wynik 2), a 13,3% jako wyraźną (wynik 3) (Tabela 2). Ślepa próba oceny przeprowadzona przez badacza przyniosła niemal identyczne wyniki: 83,3% umiarkowanej poprawy i 16,7% wyraźnej poprawy. Nie zaobserwowano żadnych zdarzeń niepożądanych, w tym pozapalnej hiperpigmentacji, pęcherzy, strupów, łuszczenia, bliznowacenia przerostowego ani tworzenia się keloidów.
Zmiany w α-różnorodności mikrobioty skóry
Złożony peeling kwasowy wiązał się ze znacznym spadkiem indeksów Shannona i Simpsona (P < 0.05; Rysunek 4), co wskazuje na zmniejszenie wewnątrzpróbkowej różnorodności mikrobiologicznej po zastosowaniu zabiegu.
Modulacja struktury mikrobioty skóry
Sekwencjonowanie genu 16S rRNA wykazało, że mikrobiota skóry u pacjentów z AV składała się głównie z pięciu głównych typów: Proteobacteria, Actinobacteria, Firmicutes, Bacteroidetes oraz Cyanobacteria (Rycina 5A). Względna liczebność Proteobacteria wykazała istotną tendencję wzrostową po leczeniu (P < 0.05).
Na poziomie rodzin dominujące taksony obejmowały Burkholderiaceae, Staphylococcaceae, Corynebacteriaceae oraz Neisseriaceae (Rysunek 5B). Względna liczebność Cutibacterium (dawniej Propionibacterium) oraz Staphylococcus uległa znacznemu zmniejszeniu po zastosowaniu leczenia (P < 0.05). Analiza korelacji Spearmana dla 30 najliczniejszych rodzajów została przedstawiona na Rysunku 6.
Ekspresja markerów stanu zapalnego
Barwienie immunohistochemiczne wykazało słabsze barwienie IL‑1α, IL‑6, IL‑17, TGF‑β oraz TLR2 w leczonych zmianach skórnych w porównaniu z wartościami wyjściowymi (Rycina 7).
Złożony peeling kwasowy okazał się skuteczną i dobrze tolerowaną interwencją w leczeniu umiarkowanego trądziku pospolitego w okresie obserwacji. Poprawie klinicznej towarzyszyły zmiany w mikrobiomie skóry oraz zmniejszenie intensywności barwienia markerów zapalnych. Dalsze badania są uzasadnione w celu wyjaśnienia dokładnych wzajemnych zależności molekularnych między modulacją mikrobiomu a regulacją odpornościową po peelingu, z celem dopracowania protokołów terapeutycznych do rutynowego zastosowania klinicznego.
Dostępność danych:
Zbiory danych wygenerowane i/lub analizowane w ramach niniejszego badania nie są publicznie dostępne ze względu na prywatność uczestników i ograniczenia etyczne, ale można je uzyskać od autora korespondencyjnego na uzasadnioną prośbę.
Rycina 1. Schematyczny przegląd projektu badania i przebiegu doświadczeń. Skróty: GAGS = Global Acne Grading System; IHC = immunohistochemia. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.
Rycina 2. Ocena rumienia lewej i prawej połowy twarzy. (A) Stan wyjściowy oraz (B) tydzień 12 u 25-letniej pacjentki. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.
Rycina 3. Wyniki GAGS dla całej twarzy w punkcie wyjściowym i w 12. tygodniu (n = 30). Grupy porównano za pomocą testu znaków Wilcoxona; ***P < 0.001. Skrót: GAGS = Global Acne Grading System. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.
Rysunek 4. Indeksy różnorodności przed i po leczeniu. (A) indeks różnorodności Shannona i (B) indeks różnorodności Simpsona (n = 30). Dane przedstawiono jako mediany, a słupki błędów reprezentują rozstępy międzykwartylowe (IQR). Grupy porównano za pomocą sparowanego testu znaków Wilcoxona; P = 0,021. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.
Rycina 5. Względna liczebność bakterii przed i po leczeniu (n = 30). (A) Typy bakterii i (B) rodziny przed i po leczeniu. Różnice we względnej liczebności oceniono za pomocą powiązanego testu znaków Wilcoxona. Względna liczebność Proteobacteria wzrosła znacząco po leczeniu (P = 0.024). Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.
Rysunek 6. Mapa ciepła korelacji Spearmana dla 30 najliczniejszych rodzajów. Skala kolorów obejmuje zakres od -1 do 1. Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku.
Rysunek 7Reprezentatywne barwienie immunohistochemiczne (A) poziom wyjściowy i (B) tydzień 3 po leczeniu w podgrupie biopsji obejmującej 10 pacjentów. Wiersze przedstawiają IL-6, IL-17, TGF-β, TLR2 i IL-1α. Paski skali = 100 µmSkróty: IL = interleukina; TGF-β = czynnik wzrostu transformującego beta; TLR2 = receptor Toll-podobny 2. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.
| Parametr | Średnia ± SD (mediana; zakres) lub n (%) |
| Wiek (lata) | 23.77 ± 6.50 (18–42) |
| Płeć | |
| Kobieta | 18 (62%) |
| Mężczyzna | 12 (38%) |
| Typ skóry według Fitzpatricka | |
| III | 22 (73%) |
| IV | 8 (27%) |
| Czas trwania choroby (miesiące) | 29.80 ± 9.56 |
Tabela 1: Charakterystyka wyjściowa pacjentów z trądzikiem pospolitym. Wartości przedstawiono jako średnia ± SD (zakres) lub n (%). Skróty: n = liczba uczestników; SD = odchylenie standardowe.
| Pomiar | 0 (brak poprawy lub pogorszenie) | 1 (lekka poprawa) | 2 (umiarkowana poprawa) | 3 (wyraźna poprawa) | Średnia ± SD |
| Pacjenci (n) | 0 | 1 | 25 | 4 | 2.10 ± 0.40 |
Tabela 2: Wyniki samooceny pacjentów. Skróty: n = liczba uczestników; SD = odchylenie standardowe.
Dyskusja
Nasze wyniki dostarczają nowych informacji na temat terapeutycznych efektów zabiegu peelingiem z kwasów złożonych w leczeniu umiarkowanego AV. Po zastosowaniu leczenia u pacjentów odnotowano znaczną poprawę w wynikach GAGS. Poprawę zaobserwowano również w wynikach VISIA, w szczególności w zakresie obszaru zaczerwienienia oraz porfiryn. Dodatkowo, w tkance skóry po zabiegu stwierdzono obniżenie poziomów ekspresji kluczowych markerów zapalnych, w tym IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β oraz receptora Toll-podobnego 2. Ponadto odnotowano spadek zarówno bogactwa, jak i wyrównania mikrobiomu skóry, czemu towarzyszyła istotna redukcja proporcji Staphylococcus. Co istotne, w trakcie badania nie zaobserwowano żadnych reakcji niepożądanych. Poprawy te sugerują, że peeling z kwasów złożonych nie tylko skutecznie redukuje widoczne zmiany trądzikowe, ale także niweluje stan zapalny, który często towarzyszy trądzikowi.
Mikrobiom skóry odgrywa kluczową rolę w rozwoju trądziku, a brak równowagi w tej wspólnocie drobnoustrojów może zaostrzać przebieg choroby. Poprzednie badania wykazały, że skóra podatna na trądzik często charakteryzuje się nadmiernym rozrostem C. acnes oraz redukcją pożytecznych bakterii. Ta dysbioza mikrobiologiczna przyczynia się do powstawania stanu zapalnego i zwiększonej produkcji sebum, co dodatkowo przyspiesza progresję trądziku. W literaturze podkreśla się wzrost liczebności Proteobacteria w skórze dotkniętej trądzikiem oraz potencjalny związek z rozwojem tej choroby. Proteobacteria są powiązane z chorobami skóry ze względu na ich zdolność do aktywowania szlaków zapalnych, co zaostrza trądzik12,13. Wzrost liczebności tej grupy bakteryjnej może odzwierciedlać zmianę w mikrobiomie skóry, potencjalnie powiązaną ze zmianami wywołanymi leczeniem ukierunkowanym na bakterie związane z trądzikiem lub z modyfikacjami środowiska skóry po redukcji zmian trądzikowych.
Ponadto spadek indeksów Shannona i Simpsona po zastosowaniu zabiegu wskazuje, że peeling kwasowy złożony może skutecznie uprościć złożoność mikrobiologiczną skóry. Ta zmiana w kierunku bardziej stabilnego środowiska mikrobiologicznego może przyczyniać się do sukcesu terapeutycznego leczenia. Zaobserwowana dominacja niektórych typów bakterii dodatkowo wspiera tezę, że leczenie trądziku może wiązać się z modulacją mikrobiomu14. Wzrost liczebności Proteobacteria może odzwierciedlać zmianę w strukturze społeczności mikrobiologicznej wynikającą z efektów leczenia, co jest zgodne z wcześniejszymi badaniami15,16. Typ ten obejmuje różne bakterie, z których niektóre są znane z powiązań ze stanami skórnymi. Wzrost liczebności tej grupy może wskazywać na odpowiedź na leczenie lub może wiązać się ze zmianami w środowisku skóry po redukcji zmian trądzikowych17.
Stan zapalny odgrywa centralną rolę w patogenezie trądziku. Gdy Cutibacterium acnes (dawniej Propionibacterium acnes) nadmiernie namnaża się w mieszkach włosowych, wywołuje odpowiedź immunologiczną, która prowadzi do uwalniania cytokin prozapalnych, takich jak IL-1α, IL-6 i IL-177,18. Stan zapalny ten przyczynia się do powstawania zmian trądzikowych, takich jak grudki, krosty i cysty. Przewlekły stan zapalny może prowadzić również do bliznowacenia i uszkodzenia skóry, co czyni go kluczowym celem w leczeniu trądziku. TGF-β bierze udział w różnych procesach naprawczych skóry19, natomiast TLR-2 wiąże się z odpowiedzią immunologiczną na patogeny skóry20. Analiza wykazała, że po leczeniu intensywność barwienia tych czynników zapalnych była znacznie niższa, co wskazuje na redukcję poziomów ich ekspresji21. Ten efekt przeciwzapalny może usprawnić reakcję gojenia skóry i mógłby być kluczowym mechanizmem, dzięki któremu peeling kwasowy złożony wywiera swoje korzyści terapeutyczne22,23.
Patogeneza trądziku pospolitego jest ściśle powiązana z zaburzonymi interakcjami pomiędzy C. acnes or odpowiedzi immunologiczne gospodarza. Warto zaznaczyć, że wirulentne szczepy C. acnepełnią funkcję kluczowych drobnoustrojowych czynników zapalnych poprzez aktywację szlaków sygnałowych TLR-2/4 w keratynocytach i sebocytach24,25, co wyzwala kaskady prozapalne w dalszym etapie, charakteryzujące się podwyższonym poziomem IL-1α, IL-6, IL-17 i TGF-βZgodnie z tym mechanizmem, nasze wyniki wykazały istotny spadek liczebności C. acnes po zastosowaniu chemicznego peelingu złożonego. Co istotne, tej zmianie mikrobiologicznej towarzyszył spadek ekspresji TLR-2 w tkance oraz związanych z nim cytokin (IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β) w biopsjach skóry okoł confirms, co sugeruje, że skuteczność terapeutyczna peelingów chemicznych złożonych może być częściowo przypisywana supresji C. acnesnadmierna aktywacja TLR-2/4 zależna od [brak danych]. Wyniki te wskazują, że zmiany mikrobiologiczne i zapalne wystąpiły równolegle po zastosowaniu leczenia; związki przyczynowo-skutkowe wymagają dalszych badań.
Niższy wynik w skali GAGS wskazuje na zmniejszenie nasilenia trądziku u pacjentów. Wyniki te potwierdzają skuteczność leczenia w opanowaniu AV i sugerują, że jest ono dobrze przyjmowane przez pacjentów. Zgodność między samooceną a oceną kliniczną może wskazywać na to, że miernik ten jest poprawny i wiarygodny w przyszłych badaniach.
W odniesieniu do mechanizmu działania zabiegów peelingów kwasowych złożonych, terapie te oferują wieloaspektowe podejście do leczenia trądziku. Preparaty z kwasami złożonymi, których składniki aktywne obejmują α-hydroksykwas, kwas salicylowy i kwas azelainowy, mogą wywierać komplementarne działanie przeciwtrądzikowe poprzez oddziaływanie na wiele czynników patogennych. α-hydroksykwas może promować złuszczanie naskórka, zmniejszać adhezję korneocytów i poprawiać nieprawidłową keratynizację mieszkową, co pomaga zniwelować niedrożność mieszków i powstawanie zaskórników24. Kwas salicylowy jest lipofilnym beta-hydroksykwasem, który może wnikać do jednostki mieszkowej i wywierać działanie keratolityczne, komedolityczne oraz przeciwzapalne. Kwas azelainowy może dodatkowo wspomagać proces leczenia poprzez wpływ na keratynizację, wzrost drobnoustrojów i stan zapalny skóry. W przypadku AV nieprawidłowe złuszczanie keratynocytów prowadzi do niedrożności mieszków, tworząc środowisko sprzyjające powstawaniu komedonów i zmian zapalnych. Poprzez promowanie złuszczania i redukcję nadmiernej produkcji sebum, terapie kwasami złożonymi mogą pomóc w udrożnieniu tych zatorów. Ponadto przeciwzapalne właściwości tych kwasów redukują ekspresję cytokin i hamują szlaki zapalne, w tym te z udziałem TLR2 i TGF-β25. Skutkuje to zmniejszeniem stanu zapalnego i poprawą wyglądu skóry. Dodatkowo kwasy złożone stymulują odnowę komórkową naskórka, pomagając w eliminacji martwych komórek skóry i regeneracji tkanki skórnej. Proces ten poprawia ogólną teksturę i gładkość skóry, pomagając zredukować potrądzikowe przebarwienia, będące częstym następstwem zmian trądzikowych. Leczenie wydaje się również pomagać w przywróceniu równowagi mikrobiologicznej poprzez ograniczenie nadmiernego wzrostu C. acnes, przeciwdziałając dysbiozie mikrobiologicznej i jej efektom zapalnym.
Niniejsze badanie posiada jednak ograniczenia, do których należą mała liczebność próby, krótki okres obserwacji oraz możliwy wpływ „efektu czasu” na uzyskane wyniki. Grupa kontrolna, która nie otrzymywała leczenia w ciągu pierwszych 3 tygodni, mogła wykazać naturalną poprawę w czasie, co potencjalnie wpłynęło na wyniki. Przed przejściem do fazy crossover nie zarejestrowano danych dotyczących stopnia nasilenia objawów klinicznych specyficznych dla połowy twarzy; w związku z tym wyniki GAGS dla całej twarzy nie mogą być interpretowane jako bezpośrednie porównanie połowy twarzy leczonej z połową kontrolną. Aby potwierdzić długoterminową skuteczność i bezpieczeństwo tej metody leczenia, niezbędne są dalsze badania z dłuższym okresem obserwacji i bardziej kompleksywnymi grupami kontrolnymi.
Oświadczenia
Autorzy nie deklarują żadnych konfliktów interesów.
Podziękowania
Badania te były wspierane przez National Natural Science Foundation of China (nr 82573987).
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Agilent 2100 Bioanalyzer | Agilent, USA | ||
| Kuleczki AMPure XP | Beckman Coulter Genomics, Danvers, MA, USA | ||
| Wyciśnik do biopsji | 2 mm | ||
| Złożony peeling kwasowy | XIMEIEN | A363 | Kwas alfa-hydroksylowy 4%, kwas salicylowy 2% i kwas azelainowy 1,5%; całkowite nominalne stężenie kwasów aktywnych około 7,5%; pH: 3,6, 12 g |
| cutadapt (v1.9) | usuwanie primerów sekwencjonujących | ||
| DADA2 | odszumianie i generowanie wariantów sekwencji amplikonów | ||
| Kuleczki do oczyszczania DNA | Vazyme | VAHTS DNA Clean Beads; używane do oczyszczania produktów PCR | |
| Zestaw do ekstrakcji DNA | TIANGEN | DP302-02 | Zestaw DNA do tkanki skóry |
| Zestaw do ilościowego oznaczania DNA | Invitrogen | Quant-iT PicoGreen dsDNA Assay Kit | |
| System obrazowania twarzy | system VISIA; model/wersja niepodano | ||
| FLASH (v1.2.8) | łączenie odczytów typu paired-end | ||
| fqtrim (v0.94) | przycinanie odczytów zawierających >5% rekordów N | ||
| Zestawy ilościowe do bibliotek Illumina | Kapa Biosciences, Woburn, MA, USA | ||
| Przeciwciała do immunohistochemii | Proteintech; Youpin Biology | 66148-1-Ig; YP-Ab-01185; YP-Ab-04780; YP-Ab-16022; YP-Ab-01522; YP-Ab-15931 | Opisy producenta: przeciwciało monoklonalne IL-17A; przeciwciało poliklonalne TLR2; mysie przeciwciało monoklonalne TGF-β (1F12); przeciwciało poliklonalne IL-6; przeciwciało poliklonalne IL-1α |
| Jodofor | Lierkang, Shandong, China | Używany do dezynfekcji miejsc biopsji | |
| Skaner cyfrowy KF-PRO-120 | Jiangfeng Bio | ||
| Mikroskop świetlny | Używany do badania skrawków immunohistochemicznych | ||
| nsegata-lefse | wielkość efektu LDA | ||
| NT-16S | baza danych do dopasowań | ||
| Platforma sekwencjonowania paired-end | Illumina (LC-Bio Technology Co., Ltd., Hangzhou, China) | NovaSeq 6000 SP Reagent Kit | Sekwencjonowanie paired-end 250-bp |
| Parafina | Używana do zatapiania próbek z biopsji | ||
| Paraformaldehyd | 4% roztwór używany do utrwalania próbek z biopsji | ||
| Primery PCR 338F i 806R | 338F: 5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3′; 806R: 5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′ | ||
| Maska po peelingu | XIMEIEN | C85Y | Maska łagodząca i nawilżająca; 28 mL × 6 sztuk |
| QIIME2 | dopasowanie sekwencji do adnotacji gatunków | ||
| Qubit | Invitrogen, USA | ilościowe oznaczanie DNA | |
| Zestaw odczynników do sekwencjonowania | Illumina | NovaSeq 6000 SP Reagent Kit | Używany do sekwencjonowania paired-end |
| SILV A | baza danych do dopasowań | ||
| Oprogramowanie do wykresów | Origin Software Inc. | Origin 2021 | Oprogramowanie do tworzenia wykresów |
| Oprogramowanie statystyczne | IBM | SPSS 27.0 | Oprogramowanie do analizy statystycznej |
| Oprogramowanie Vsearch (v2.3.4) | filtrowanie sekwencji chimerycznych |
Bibliografia
- Machiwala AN, Kamath G, Vaidya TP. Knowledge, belief, and perception among youths with acne vulgaris. Indian J Dermatol. 2019;64(5):389-91.
- Tayel K, Attia M, Agamia N, Fadl N. Acne vulgaris: prevalence, severity, and impact on quality of life and self-esteem among Egyptian adolescents. J Egypt Public Health Assoc. 2020;95(1):30.
- Cong TX, et al. From pathogenesis of acne vulgaris to anti-acne agents. Arch Dermatol Res. 2019;311(5):337-49.
- Erdei L, et al. TNIP1 regulates Cutibacterium acnes-induced innate immune functions in epidermal keratinocytes. Front Immunol. 2018;9:2155.
- Grech I. Susceptibility profiles of Propionibacterium acnes isolated from patients with acne vulgaris. J Glob Antimicrob Resist. 2014;2(1):35-8.
- Podwojniak A, et al. Acne and the cutaneous microbiome: a systematic review of mechanisms and implications for treatments. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2025;39(4):793-805.
- Argenziano G, et al. Review: expert opinion on antibiotics and antibiotic resistance in dermatology. Dermatol Pract Concept. 2024;14(4):e2024282.
- Li Y, et al. Acne treatment: research progress and new perspectives. Front Med (Lausanne). 2024;11:1425675.
- Măgerușan ȘE, Hancu G, Rusu A. A comprehensive bibliographic review concerning the efficacy of organic acids for chemical peels treating acne vulgaris. Molecules. 2023;28(20):7219.
- Calvisi L. Efficacy of a combined chemical peel and topical salicylic acid-based gel combination in the treatment of active acne. J Cosmet Dermatol. 2021;20 Suppl 2:2-6.
- Shao X, et al. Effect of 30% supramolecular salicylic acid peel on skin microbiota and inflammation in patients with moderate-to-severe acne vulgaris. Dermatol Ther (Heidelb). 2023;13(1):155-68.
- Kistowska M, et al. Propionibacterium acnes promotes Th17 and Th17/Th1 responses in acne patients. J Invest Dermatol. 2015;135(1):110-8.
- Jahns AC, et al. An increased incidence of Propionibacterium acnes biofilms in acne vulgaris: a case-control study. Br J Dermatol. 2012;167(1):50-8.
- Thompson KG, et al. Comparison of the skin microbiota in acne and rosacea. Exp Dermatol. 2021;30(10):1375-80.
- Li CX, et al. Skin microbiome differences relate to the grade of acne vulgaris. J Dermatol. 2019;46(9):787-90.
- Guo Z, et al. New insights into the characteristic skin microorganisms in different grades of acne and different acne sites. Front Microbiol. 2023;14:1167923.
- Boyanova L. Cutibacterium acnes, formerly Propionibacterium acnes: friend or foe? Future Microbiol. 2023;18:235-44.
- ElAttar Y, et al. Study of interleukin-1 beta expression in acne vulgaris and acne scars. J Cosmet Dermatol. 2022;21(10):4864-70.
- Tan JKL, Stein Gold LF, Alexis AF, Harper JC. Current concepts in acne pathogenesis: pathways to inflammation. Semin Cutan Med Surg. 2018;37(3S):S60-2.
- Rodighiero E, et al. Do acne treatments affect insulin-like growth factor-1 serum levels? A clinical and laboratory study on patients with acne vulgaris. Dermatol Ther. 2020;33(3):e13439.
- Huang L, et al. Association of different cell types and inflammation in early acne vulgaris. Front Immunol. 2024;15:1275269.
- Platsidaki E, Dessinioti C. Recent advances in understanding Propionibacterium acnes (Cutibacterium acnes) in acne. F1000Res. 2018;7:1953.
- Esen M. Effect of isotretinoin treatment on inflammatory and hematological parameters in patients with acne vulgaris. Cutan Ocul Toxicol. 2024;43(1):27-32.
- Handog EB, Datuin MS, Singzon IA. Chemical peels for acne and acne scars in Asians: evidence-based review. J Cutan Aesthet Surg. 2012;5(4):239-46.
- Lekakh O, et al. Treatment of acne vulgaris with salicylic acid chemical peel and pulsed dye laser: a split-face, rater-blinded, randomized controlled trial. J Lasers Med Sci. 2015;6(4):167-70.