Stowarzyszenie polimorfizmu MIR30C rs928508 z wynikami analgezji przetrążykowej w pracy u kobiet po raz pierwszy rodzących: Badanie obserwacyjne

Podsumowanie

To badanie obserwacyjne zbadało związek między polimorfizmem MIR30C rs928508 a wynikami przewodowej analgezji w czasie porodu, wskaźnikami bólu, czasem trwania porodu i niepożądanymi reakcjami u kobiet rodzących pierwsze dziecko podczas porodu pochwodowego.

Streszczenie

Wielopostaciowości genetyczne mogą wpływać na indywidualną zmienność postrzegania bólu porodowego i skuteczności środków przeciwbólowych. MikroRNA-30c (MIR30C) odgrywa rolę w modulacjach bólu, ale jego związek z analgezją porodową pozostaje niejasny. W badaniu tym zbadano związek między polimorfizmem MIR30C rs928508 a analgezją przetrzewiowową w bólu porodowym u pierworodnych kobiet. W badaniu wzięło udział 202 zdrowe pierworodne kobiety chińskiej narodowości Han, które otrzymały zstandardyzowaną analgezję przetrzewiowową z ropiwakainą i sufentanil. Genotypy rs928508 (GG, GA i AA) wykryto za pomocą testów TaqMan, a analizę równowagi Hardy'ego-Weinberga przeprowadzono w celu oceny populacyjnej dystrybucji genetycznej. Intensywność bólu oceniono za pomocą Skalę Analogową Wizualizacji (VAS) w punkcie wyjściowym przed analgezją, 30 minut po analgezji, 1 godzinę po analgezji i po zaprzestaniu analgezji. Czynniki wpływające na wyniki analgezji porodowej oceniano za pomocą wielowymiarowej analizy regresji. Nosicielki genotypu GG wykazywały znacznie wyższe wyniki VAS przed analgezją, 30 minut po analgezji oraz po zaprzestaniu analgezji, a także wydłużoną długość pierwszego etapu porodu w porównaniu z nosicelkami GA i AA. Wielowymiarowa analiza regresji wykazała, że genotyp GG jest niezależnym czynnikiem związanym z wyższymi wynikami VAS po analgezji. Wyniki dla noworodków i większość działań niepożądanych były porównywalne między genotypami, z wyjątkiem wyższej częstości bólu w miejscu nakłucia u nosiczek GG. Allel G MIR30C rs928508 był związany ze zwiększonym bólem wyjściowym, potencjalnie zmniejszoną skutecznością analgezji przetrzewiowową w bólu porodowym i wydłużoną długością pierwszego etapu porodu u pierworodnych kobiet. Wyniki te wspierają dalsze badania nad potencjalnym znaczeniem farmakogenomiki zmian genetycznych MIR30C w analgezji porodowej.

Wprowadzenie

Ból porodowy, uznawany za jedną z najbardziej intensywnych form ludzkiego bólu, nie tylko powoduje poważny stres fizjologiczny u rodzących, ale może również niekorzystnie wpływać na wyniki dla matki i noworodka poprzez mechanizmy neuroendokrynne. Może to prowadzić do powikłań takich jak nieprawidłowe skurcze macicy, uduszenie płodu i depresja poporodowa^1,2. Analgezja porodowa skutecznie łagodzi ból i reakcje stresowe u matek, poprawia doświadczenie porodu i wykazuje korzystny profil bezpieczeństwa zarówno dla matki, jak i dziecka, gdy jest odpowiednio podawany³. Analgezja przeponowa, preferowana metoda analgezji porodowej w praktyce klinicznej, okazała się skutecznie obniżać wskaźniki bólu w skali VAS (Visual Analogue Scale). Ponadto, badania nad połączonymi schematami leków poprawiły skuteczność przeciwbólowych, zmniejszając efekty uboczne⁴.

Duże dowody wskazują, że polimorfizmy genetyczne, jako główna forma różnorodności genetycznej, mogą wpływać na wyniki analgezji porodowej. Jedno z badań wykazało, że rodzące noszące allel G genu receptora opioidowego µ (OPRM1) polimorfizmu rs1799971 wymagały znacznie wyższych dawek opioidów do analgezji porodowej w porównaniu z osobami z genotypem AA i zgłaszały niższą satysfakcję z działania przeciwbólowego. Mutacje w tym locus mogą zmniejszać ekspresję receptorów na błonach, osłabiając tym samym skuteczność opioidowych środków przeciwbólowych⁵. Ponadto, polimorfizmy w genie katechol-O-metylotransferazy (COMT) mogą wpływać na stopień wrażliwości na ból w centrum, regulując metabolizm dopaminy, zmieniając następnie próg bólu matczynego i reaktywność na leki przeciwbólowe podczas porodu⁶. Polimorfizmy w genie cytochromu P450 3A4 (CYP3A4) również miały wpływ na wyniki przeciwbólowe poprzez wpływ na tempo metabolizmu leków^7,8. Dodatkowo, Zhang i wsp. donieśli, że pacjenci z genotypem MDR1 1236C>T TT wymagały znacznie więcej fentanylu po cesarskim cięciu niż te z genotypem CC lub CT⁹. Wszystkie te odkrycia dostarczają wglądu w genetyczne podstawy leżące u podstaw międzyosobniczej zmienności percepcji bólu¹⁰.

Wraz z postępem badań epigenetycznych, rola polimorfizmów genów RNA niekodującego w modulacji bólu była coraz bardziej rozpoznawana. MikroRNA (miRNA), jako kluczowe czynniki epigenetyczne, modulują ekspresję genów poprzez atakowanie RNA przekaźnikowego (mRNA) w celu represji translacyjnej lub degradacji, odgrywając w ten sposób kluczową rolę w transmisji sygnałów bólowych i rozwoju wrażliwości na ból¹¹. Liczne badania wykazały, że miRNA są różnorodnie eksponowane w bólu neuropatycznym, bólu zapalnym i innych stanach bólowych oraz biorą udział w wrażliwości na ból w centrum poprzez regulację wielu ścieżek sygnałowych^12,13. Polimorfizmy miRNA mogą wpływać na ich poziomy ekspresji lub efektywność wiązania z genami docelowymi, modyfikując w ten sposób kaskady sygnałowe związane z bólem¹⁴. Poprzednie badania kojarzyły polimorfizmy miRNA z fenotypowym zróżnicowaniem zespołu złośliwego bólu regionalnego (CRPS) i bólu patologicznego w raku piersi^15,16. Wśród wielu miRNA związanych z bólem, rodzina miR-30 zyskała coraz większą uwagę ze względu na jej udział w regulacji bólu neuropatycznego^17,18. W szczególności, rolę regulacyjną miR-30c-5p badano intensywnie. Badania na zwierzętach wykazały, że ekspresja miR-30c-5p była znacznie podwyższona w strukturach nerwowych związanych z bólem po urazie nerwu kulszowego, podczas gdy podawanie syntetycznego inhibitora trwale odwracano nadwrażliwość na ból neuropatyczny u szczurów. Dalsze badania mechanistyczne wykazały, że miR-30c-5p atakuje RNA przekaźnikowe DNA metylotransferazy 3a (DNMT3a) i DNMT3b, wpływając na poziomy metylacji DNA w komórkach nerwowych poprzez regulację epigenetyczną i przyczyniając się do długotrwałego utrzymania bólu¹⁹. Badania kliniczne również wskazały korelację między poziomem miR-30c-5p a intensywnością bólu neuropatycznego u pacjentów^20,21. Warto zauważyć, że ostatnie badania doniosły, że allel G w miR-30c rs928508 zwiększa ryzyko bólu u osób narażonych na zachowanie się z drapieżnictwem w miejscu pracy²². Inne badanie wykazało, że allel G zmniejsza ekspresję miR-30c poprzez wpływ na przetwarzanie pierwotnego miR-30c (pri-miR-30

Protokół

Badanie to zostało przeprowadzone zgodnie ze standardami etycznymi Komisji Etyki Medycznej Szpitala Szóstego w Shijiazhuang i zostało zatwierdzone przez komisję pod numerem identyfikacyjnym zatwierdzenia 2022111709. Przed włączeniem do badania od wszystkich uczestników uzyskano pisemną zgodę świadomą. Schematyczny przegląd projektu badania i przebiegu doświadczeń przedstawiono na Rysunku 1.

Rycina 1. Schemat przebiegu projektu badania i kluczowe wyniki. Rycina podsumowuje ogólny przebieg badania nad związkiem między polimorfizmem MIR30C rs928508 a efektami znieczulenia zewnątrzoponowego podczas porodu u kobiet pierworódek. Przebieg badania obejmuje rekrutację uczestników, genotypowanie MIR30C rs928508, stratyfikację opartą na genotypie, podanie standaryzowanego znieczulenia zewnątrzoponowego w trakcie porodu, ocenę efektów oraz analizę statystyczną. Oceniające efekty obejmowały wyniki bólu w wizualnej skali analogowej (VAS), czas trwania etapów porodu, wyniki neonatologiczne oraz niepożądane reakcje związane ze znieczuleniem. Schemat wyróżnia również główne wnioski, w tym wyższe wyniki bólu, przedłużony pierwszy etap porodu oraz zwiększoną częstość występowania bólu w miejscu nakłucia u nosicieli genotypu GG. VAS, wizualna skala analogowa; SNP, polimorfizm pojedynczego nukleotydu. Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.

Dane kliniczne
W Szóstym Szpitalu w Shijiazhuang do badania włączono kolejno pierworódki, które urodziły w okresie od stycznia 2022 do stycznia 2025 roku, korzystając z elektronicznego systemu dokumentacji medycznej szpitala; łącznie włączono 202 przypadki. Podczas wizyt przedporodowych między 28. a 36. tygodniem ciąży kwalifikujące się pierworódki zostały zapoznane z badaniem i wyraziły pisemną, świadomą zgodę. Do końcowej analizy włączono pacjentki, które urodziły w 37–41. tygodniu ciąży, miały ciążę pojedynczą i prezentację czołową.

Kryteria włączenia były następujące: 1) zdrowe kobiety rodzące po raz pierwszy w wieku 20–35 lat; 2) etniczność chińska (Han); 3) ciąża pojedyncza z płodem w położeniu głowowym w wieku ciążowym od 37 do 41 tygodni; oraz 4) planowany poród drogami natychmiastowymi, samoistny lub wspomagany, ze wskazaniami do znieczulenia zewnątrzoponowego. Wskazaniami do znieczulenia zewnątrzoponowego były: (a) prośba matki wraz z podpisaną świadomą zgodą; (b) aktywna faza porodu (rozszerzenie szyjki macicy ≥2 cm przy regularnych skurczach macicy); oraz (c) ocena położnicza potwierdzająca możliwość porodu drogami natychmiastowymi.

Kryteria wykluczenia obejmowały: 1) powikłania ciążowe, takie jak nadciśnienie indukowane ciążą, cukrzyca ciążowa lub ciężka choroba sercowo-naczyniowa; 2) ciążę mnogą; 3) konieczność wykonania cięcia cesarskiego po rozpoczęciu analgezji porodowej; 4) wrodzone wady budowy kręgosłupa; oraz 5) przeciwwskazania do analgezji porodowej. Przeciwwskazania do analgezji porodowej obejmowały: (a) odmowę matki lub brak możliwości współpracy; (b) zwiększone ciśnienie wewnątrzczaszkowe, deformacje kręgosłupa lub miejscową infekcję w miejscu nakłucia; (c) zaburzenia krzepnięcia (liczba płytek krwi <70 × 10⁹/L lub znane nieprawidłowości czynników krzepnięcia); (d) nieskorygowaną hipowolemię lub wstrząs; (e) alergię na znieczulenia miejscowe lub opioidy; oraz (f) nagłe przypadki położnicze (np. cierpienie płodu wymagające natychmiastowego cięcia cesarskiego, wypadnięcie pępowiny lub łożysko przodujące z aktywnym krwawieniem).

Moc statystyczna post hoc została obliczona na poziomie 0,91, co wskazuje, że wielkość próby była wystarczająca do wykrycia różnic w częstościach genotypów i alleli między populacją badaną a populacją referencyjną.

Przeciwbólowanie i znieczulenie
Przed znieczuleniem zewnątrzoponowym u wszystkich kobiet rodzących po raz pierwszy przeprowadzono ciągły monitoring funkcji życiowych. Depresję oddechową zdefiniowano jako częstość oddechów <10 oddechów/min lub saturację tlenową (SpO₂) <90%, hipotensję jako skurczowe ciśnienie tętnicze <90 mmHg lub spadek o >20% względem wartości wyjściowej, a zatrzymanie moczu jako niezdolność do spontanicznego oddania moczu w ciągu 6 h po porodzie wymagającą cewnikowania. Rozszerzenie szyjki macicy oceniano podczas badania palpacyjnego pochwy, wykonywanego przez prowadzącego położnika lub dyżurną certyfikowaną położną. Wszyscy badacze przeszli standaryzowane szkolenie z oceny rozszerzenia szyjki macicy z wykorzystaniem symulatora badania szyjki, a w celu zapewnienia spójności między oceniającymi przeprowadzano regularne kontrole jakości. Badania szyjki macicy wykonywano rutynowo co 2 h podczas aktywnej fazy porodu lub częściej w przypadku podejrzenia nieprawidłowości w postępach porodu. Analgezję zewnątrzoponową rozpoczynano, gdy udokumentowane rozszerzenie szyjki macicy osiągnęło ≥2 cm, zgodnie z zapisem prowadzącego personelu położniczego.

Zastosowano znormalizowany protokół znieczulenia zewnątrzoponowego. Przy położeniu rodzącej kobiety w lewej pozycji bocznej, do przestrzeni zewnątrzoponowej uzyskano dostęp poprzez przestrzeń międzykręgową L3–L4, stosując technikę utraty oporu dla soli fizjologicznej. Cewnik zewnątrzoponowy wprowadzono na głębokość 3–4 cm do przestrzeni zewnątrzoponowej. Przed podaniem jakiegokolwiek leku wykonano delikatną aspirację przez cewnik. Brak płynu mózgowo-rdzeniowego lub krwi potwierdził prawidłowe umiejscowienie cewnika i wykluczył jego położenie w przestrzeni podpajęczynówkowej lub wewnątrz naczynia. Następnie podano zewnątrzoponowo dawkę testową 5 mL 1% chlorowodorku lidokainy.

Następnie przeprowadzono 10 min okres obserwacji, podczas którego stan rodzącej była ściśle monitorowana zgodnie z predefiniowanymi kryteriami bezpieczeństwa. Kryteria te obejmowały brak oznak ogólnoustrojowej toksyczności znieczulenia miejscowego (np. drętwienia okolicy ust, metalicznego posmaku, szumów usznych lub pobudzenia), brak oznak wysokiej lub całkowitej blokady znieczulenia podpajęczynówkowego (np. szybkiej progresji blokady motorycznej, duszności, dyzfonii lub zaburzeń stanu psychicznego) oraz utrzymanie stabilności hemodynamicznej, zdefiniowanej jako utrzymanie częstości akcji serca i ciśnienia tętniczego w granicach 20% wartości wyjściowych. Po potwierdzeniu spełnienia wszystkich kryteriów bezpieczeństwa podano dawkę nasycającą 10 mL zawierającą 0,1% chlorowodorku ropiwakainy i 0,4 µg/mL cytrynianu sufentanilu.

Mierniki wyników
Odnotowano podstawowe dane demograficzne i charakterystykę położniczą pierworódek, w tym wiek, wskaźnik masy ciała (BMI), wiek ciążowy, temperaturę ciała w momencie zaprzestania znieczulenia, czas trwania pierwszego, drugiego i trzeciego okresu porodu oraz całkowity czas trwania porodu. Temperaturę ciała mierzono za pomocą zestandaryzowanego cyfrowego termometru pachowego, umieszczonego w prawej pachowej jamie na 5 min przez przeszkolony personel pielęgniarski w momencie zaprzestania znieczulenia. Czas trwania poszczególnych okresów porodu był rejestrowany prospektywnie przez prowadzącą położną lub lekarza położnika zgodnie z wcześniej zdefiniowanymi, zestandaryzowanymi kryteriami położniczymi. Pierwszy okres porodu zdefiniowano jako odstęp czasu od wystąpienia regularnych skurczów macicy z rozwarciem szyjki macicy ≥4 cm do pełnego rozwarcia szyjki macicy (10 cm); drugi okres trwał od pełnego rozwarcia szyjki macicy do urodzenia płodu; natomiast trzeci okres trwał od urodzenia płodu do całkowitego wydalenia łożyska. Całkowity czas trwania porodu obliczono jako sumę trzech okresów. Wszystkie pomiary były rejestrowane w czasie rzeczywistym w partogramie i elektronicznej dokumentacji medycznej. Cały personel kliniczny zaangażowany w prowadzenie porodu przeszedł jednolite szkolenie z zakresu powyższych definicji przed rozpoczęciem badania.

Intensywność bólu oceniano za pomocą wizualnej skali analogowej (VAS). Każda rodząca samodzielnie oceniała poziom bólu, zaznaczając punkt na linii o długości 10 cm, po czym przeszkolony personel badawczy mierzył i zapisywał uzyskany wynik. Osoby oceniające nie znały informacji o genotypie, ponieważ genotypowanie przeprowadzono po zebraniu wszystkich danych dotyczących wyników klinicznych, w tym wyników VAS. Wyniki oceny bólu zapisywano w czterech punktach czasowych: przed rozpoczęciem analgezji (gdy rozszerzenie szyjki macicy osiągnęło 2 cm), 30 min po rozpoczęciu analgezji, 1 h po rozpoczęciu analgezji oraz 30 min po porodzie (co odpowiadało momentowi przerwania analgezji). Aby uwzględnić korelacje wewnątrzpacjentowe wynikające z wielokrotnych pomiarów VAS, przeprowadzono dwuczynnikową analizę wariancji (ANOVA) z powtarzanymi pomiarami dla czterech punktów czasowych oceny. Wyniki VAS mieściły się w zakresie od 0 do 10, przy czym wyniki 0–3 oznaczały ból łagodny, 4–6 ból umiarkowany, a 7–10 ból silny²³.

Główny wynik przeciwbólowy oceniono 30 min po rozpoczęciu analgezji. Intensywność bólu mierzono za pomocą skali VAS, w której 0 oznaczało brak bólu, a 10 najsilniejszy możliwy do wyobrażenia ból. Zgodnie z definicją a priori, wynik VAS >3 sklasyfikowano jako słaby efekt przeciwbólowy (binarna zmienna zależna zakodowana jako 1), natomiast wynik VAS ≤3 sklasyfikowano jako odpowiedni efekt przeciwbólowy (zakodowany jako 0). Definicję tę stosowano konsekwentnie w całej analizie, a główny model regresji logistycznej wykorzystywał ten binarny wynik jako zmienną zależną.

Wyniki noworodkowe oceniano za pomocą skali Apgar w 1. i 5. minucie po urodzeniu. Wyniki w przedziale 8–10 uznano za prawidłowe, wyniki 5–7 wskazywały na lekkie niedotlenienie, a wyniki 0–4 na ciężkie niedotlenienie²⁴. Oceny w skali Apgar przeprowadzano zgodnie z programem Neonatal Resuscitation Program (7. wydanie), opublikowanym wspólnie przez American Academy of Pediatrics oraz American College of Obstetricians and Gynecologists, a także według znormalizowanych wytycznych oceny opracowanych przez oddział neonatologii szpitala. Wszystkie oceny były wykonywane przez przeszkolonych pielęgniarki neonatologiczne lub lekarzy rezydentów, którzy nie znali przydziału pacjentów do grup badawczych.

Odnotowano częstość występowania działań niepożądanych po rozpoczęciu leczenia przeciwbólowego. Reakcje niepożądane obejmowały depresję oddechową, hipotensję, zatrzymanie moczu, ból w miejscu nakłucia, zawroty głowy, nudności lub wymioty oraz świąd. Depresję oddechową zdefiniowano jako częstość oddechów <10 oddechów/min lub SpO₂ <90%; hipotensję jako skurczowe ciśnienie tętnicze <90 mmHg lub spadek o >20% względem wartości wyjściowej; zatrzymanie moczu jako brak możliwości spontanicznego oddania moczu w ciągu 6 h po porodzie wymagający cewnikowania; ból w miejscu nakłucia jako zgłaszany przez pacjentkę ból w miejscu nakłucia z wynikiem ≥4 w numerycznej skali oceny bólu (NRS); nudności i wymioty jako obecność nudności lub co najmniej jeden epizod wymiotów; oraz świąd jako zgłaszany przez pacjentkę świąd skóry bez innej możliwej do zidentyfikowania przyczyny. Zdarzenia niepożądane monitorowano od momentu rozpoczęcia znieczulenia zewnątrzoponowego aż do wypisu ze szpitala; były one rejestrowane prospektywnie przez prowadzący zespół kliniczny.

Pobieranie próbek krwi i genotypowanie
Podczas badań prenatalnych u każdej zakwalifikowanej kobiety pierworódki pobrano krew żylną obwodową (2 mL) na czczo (minimalny okres postu 8 h) w ustandaryzowanym czasie między 08:00 a 10:00 do probówek z antykoagulantem w postaci kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA) w celu późniejszej ekstrakcji kwasów nukleinowych. Wszystkie próbki natychmiast przechowywano w temperaturze −80°C do czasu analizy. Okres przechowywania przed ekstrakcją DNA wynosił od 1 do 6 miesięcy. Aby zminimalizować degradację DNA, przed przechowywaniem próbki podzielono na alikwoty, a w trakcie całego badania ograniczono liczbę cykli zamrażania i rozmrażania. Zamrożone próbki rozmrażano powoli na lodzie przed przetworzeniem.

DNA wyekstrahowano z krwi pełnej przy użyciu zestawu do oczyszczania genomowego DNA. Przed genotypowaniem oceniono stężenie i czystość DNA metodą spektrofotometrii nadfioletowej, korzystając z pomiaru stosunku A260/A280, a integralność DNA oceniono za pomocą elektroforezy w żelu agarozowym. Do dalszych analiz włączono wyłącznie próbki spełniające zdefiniowane kryteria kontroli jakości.

Genotypowanie polimorfizmu rs928508 przeprowadzono przy użyciu testów genotypowania polimorfizmu pojedynczego nukleotydu (SNP) TaqMan (nr kat. 4351379). Do detekcji allelu A użyto sond znakowanych VIC (5′-CAGGCCTGAGAGGCATGATGTTTGG-3′), a do detekcji allelu G sond znakowanych FAM (5′-TAGCATCTTCCCAACACTTGCAATT-3′). Całkowita objętość reakcji polimerazy łańcuchowej (PCR) wynosiła 10 µL i składała się z 5,0 µL 2× TaqMan Genotyping Master Mix, 0,25 µL gotowego testu TaqMan SNP Genotyping Assay (mieszanina starterów i sond), 10–20 ng matrycy genomowego DNA oraz wody wolnej od nukleaz do uzyskania końcowej objętości reakcji.

Amplifikację przeprowadzono przy użyciu urządzenia do ilościowej PCR zgodnie ze standardowymi procedurami testów TaqMan. Warunki cyklicznych zmian temperatury obejmowały wstępny etap aktywacji enzymu w 95°C przez 10 min, a następnie 40 cykli denaturacji w 95°C przez 15 s oraz przyłączania/elongacji w 60°C przez 60 s. Po amplifikacji automatycznie przeprowadzono akwizycję sygnału fluorescencyjnego oraz analizę różnicowania allelicznego za pomocą oprogramowania urządzenia w celu wyznaczenia genotypów próbek.

Wszystkie próbki analizowano w dwóch powtórzeniach. W przypadku rozbieżnych wyników przeprowadzano trzecią niezależną analizę i przyjmowano wynik zgodny. Współczynnik wyznaczania SNP (SNP call rate) wynosił ≥95%, a 10% losowo wybranych próbek wykazało 100% zgodności w testach powtórnych. Na każdej płytce testowej umieszczono kontrole dodatnie, kontrole ujemne oraz kontrole bez matrycy. Przypisanie genotypów przeprowadzono w sposób zaślepiony, a cały personel laboratoryjny zaangażowany w genotypowanie pozostawał zaślepiony w odniesieniu do danych dotyczących wyników klinicznych przez cały okres trwania badania.

Analiza statystyczna
W badanej populacji oceniono równowagę Hardy’ego–Weinberga (HWE) dla allela rs928508. Normalność rozkładu zmiennych ciągłych oceniono za pomocą testu Shapiro–Wilka. Dane o rozkładzie normalnym przedstawiono jako średnia ± odchylenie standardowe (SD), natomiast dane o rozkładzie nienormalnym jako mediana i rozstęp międzykwartylowy (IQR).

W przypadku porównań między trzema grupami, przy spełnieniu założeń o normalności rozkładu, zastosowano jednoczynnikową analizę wariancji (ANOVA) lub dwuczynnikową analizę wariancji z powtarzanymi pomiarami, a następnie test Tukey’s honestly significant difference (HSD) do wielokrotnych porównań post hoc. W sytuacjach, gdy założenia o normalności nie zostały spełnione, wykorzystano test H Kruskala-Wallisa, a następnie post hoc test Dunna z poprawką Bonferroniego. Zmienne kategoryczne przedstawiono w postaci liczebności i procentów, a następnie poddano analizie za pomocą testu chi-kwadrat (χ²). Przed analizą oceniono oczekiwaną liczebność komórek, a w przypadku, gdy którakolwiek z oczekiwanych liczebności była <5, zastosowano dokładny test Fishera.

Powtarzane pomiary VAS, zebrane w wielu punktach czasowych, przeanalizowano za pomocą dwukierunkowej analizy wariancji (ANOVA) z powtarzanymi pomiarami, aby uwzględnić korelacje wewnątrzpodmiotowe. Porównania post hoc przeprowadzono przy użyciu testów z poprawką Bonferroniego w celu kontroli wielokrotnych porównań.

Przeprowadzono analizę regresji logistycznej binarnej w celu zidentyfikowania czynników związanych ze słabymi efektami analgezji w pracy porodowej. Główną zmienną wynikową określono jako skuteczność analgetyczną w 30 min po rozpoczęciu analgezji epiduralnej. Wyniki VAS poddano dychotomizacji przy użyciu zdefiniowanego progu wynoszącego 3, gdzie VAS >3 zakwalifikowano jako słaby efekt analgetyczny, a VAS ≤3 jako odpowiedni efekt analgetyczny. Zmienne wprowadzono do modelu wieloczynnikowego na podstawie istotności klinicznej. Multikolinearność oceniono za pomocą czynnika inflacji wariancji (VIF) i zbadano potencjalne interakcje między zmiennymi. Wartości VIF dla wszystkich zmiennych ujętych w modelu wieloczynnikowym podano w Tabeli uzupełniającej 1. Kalibrację modelu oceniono za pomocą testu dobroci dopasowania Hosmera–Lemeshowa.

Dwustronną wartość P <0,05 uznano za istotną statystycznie. Analizy statystyczne wykonano przy użyciu oprogramowania SPSS (wersja 23.0).

Wyniki

Dane kliniczne

Analiza polimorfizmu MIR30C rs928508 wśród 202 zarejestrowanych kobiet pierworodnych wykazała, że genotyp GA był najbardziej rozpowszechniony (49,51%, n = 100), za nim znajdował się genotyp GG (26,73%, n = 54) i AA (23,76%, n = 48). Odpowiednie częstości alleli wynosiły 51,49% dla G i 48,51% dla A. Jak pokazano w Tabeli 1, rozkład genotypów i alleli był ogólnie zgodny z podanymi częstościami dla populacji wschodnioazja...

Dyskusja

Badanie to zbadano związek między polimorfizmem miR-30c rs928508 a wynikami przewodowej analgezji w porodzie w grupie 202 zdrowych chińskich kobiet Han, będących w ciąży po raz pierwszy. Wyniki wykazały, że genotyp rs928508 matki był związany z różnicami w percepcji bólu podczas analgezji w porodzie oraz z długością pierwszego etapu porodu. Ponadto stosowany w tym badaniu schemat przewodowej analgezji wykazywał ogólnie porównywalny profil bezpieczeństwa w różnych grupach genotypowych w odniesieniu do wyników neonatalnych...

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Agarose	Sigma-Aldrich	A2929-250G	Ocenian integralności DNA
Symulator badania szyjki macicy	Erler-Zimmer	R16160	Trening badacza i kontrola jakości
Cyfrowy termometr pachwinowy	Terumo	ETC207S	Pomiar temperatury ciała
Barwnik do żeli DNA	Biotium	41020	Wizualizacja kwasów nukleinowych
Rury do pobierania krwi z EDTA	Greiner Bio-One	22040161	Pobranie krwi z żyły obwodowej
Elektroniczny system dokumentacji medycznej	Shijiazhuang Sixth Hospital	N/D	Zbieranie danych klinicznych
Zestaw do cewnikowania do kanału nadtwardówkowego	Teleflex (Arrow)	FlexTip Plus	Wdrożenie cewnika do kanału nadtwardówkowego
Urządzenie do wlewu do kanału nadtwardówkowego / Pompa PCEA	Eitan Medical	17000-031-0035	Podawanie środków znieczulających do kanału nadtwardówkowego
Igła do cewnika nadtwardówkowego (Tuohy)	Medline	N/D	Igła Tuohy 17G × 3,5 cala stosowana do dostępu do kanału nadtwardówkowego na poziomie L3-L4
System do obrazowania żeli	Thermo Fisher Scientific	iBright FL1500	Wizualizacja pasm DNA
Zestaw do oczyszczania DNA genomowego	Thermo Fisher Scientific	K0512	Wyodrębnianie DNA z próbek krwi obwodowej
Poziomy system elektroforetyczny do żeli	Labmate	LMHES-A201	Kontrola jakości DNA
Kubełki z lodem i kruszonem	Corning	N/D	Rozmrażanie i przechowywanie próbek
Wstrzykiwalka chlorowodorku lidokainy (1%)	Pfizer	0409-4713-65	Testowa dawka do kanału nadtwardówkowego
Probówki do mikrocentryfug (1,5 mL / 2 mL)	Corning	430909 (1,5 mL); 430915 (2 mL)	Przechowywanie i przetwarzanie próbek
Mikropipety (o zmiennej objętości)	Eppendorf	3125000044	PCR i przygotowanie próbki
Wieloparametrowy monitor pacjenta	Lepu Creative Medical	PC-3000	Monitorowanie ciśnienia krwi, tętna i nasycenia tlenem
Woda bez nukleaz	Promega	P1195	Przygotowanie reagentów do PCR
Blankiety do partogramu lub system elektronicznego partogramu	GrowthXP (PC PAL)	N/D	Dokumentacja etapów porodu
Stanowisko komputera osobistego	Lenovo (ThinkStation)	P2	Przechowywanie i analiza danych
Oprogramowanie PLINK	Purcell Laboratory	Wersja 1.9	Analiza równowagi Hardy-Weinberga
Oksymetr	Microlife	OXY 500 BT	Monitorowanie nasycenia tlenem
Instrument do ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy	Thermo Fisher Scientific (Applied Biosystems)	QuantStudio Dx (4470660)	Rozróżnianie alleli i wykrywanie fluorescencji
Mikrocentrum chłodnicze	Thermo Fisher Scientific (Heraeus)	Fresco 21 (75002425)	Przygotowanie próbki
Wstrzykiwalka chlorowodorku ropiwakainy	Hikma Pharmaceuticals (Naropin)	0143-9265-10	Środek znieczulający do kanału nadtwardówkowego
Oprogramowanie statystyczne SPSS	IBM Corp.	Wersja 23.0	Analiza statystyczna
Sterylne końcówki do pipet odpornych na aerozol	Thermo Fisher Scientific (ART)	2149P-05	Zastosowania w biologii molekularnej
Sterylny roztwór soli fizjologicznej	Baxter Healthcare Corporation	2B1301X	Technika utraty oporu
Sterylne strzykawki (5 mL, 10 mL)	Becton, Dickinson and Company (BD)	309646; 309695	Przygotowanie i podawanie leków
Wstrzykiwalka cytrynianu sufentanil (Pfizer)	Hospira, Inc.	0409-3382-11	Opioidalny składnik znieczulający
Mieszanka Master Mix TaqMan do genotypowania (2×)	Thermo Fisher Scientific (Applied Biosystems)	4371353	Reagent do amplifikacji PCR
Test TaqMan SNP do genotypowania (rs928508)	Thermo Fisher Scientific	4351379	Genotypowani polimorfizmu MIR30C rs928508
Ultraniskotemperaturowa zamrażarka (-80 °C)	Thermo Fisher Scientific	FDE30086FV	Długotrwałe przechowywanie próbek
Spektrofotometr UV / Spektrofotometr NanoDrop	Thermo Fisher Scientific (NanoDrop)	ND-1000	Ocena stężenia i czystości DNA
Formularz oceny wizualnej skali analogowej (VAS)	N/D	N/D	Standardowa 10-centymetrowa forma wizualnej skali analogowej używana do oceny bólu