Wpływ akupunktury skóry głowy typu ruchowego na mikrostrukturę kapsuły zewnętrznej i pobudliwość odruchu kręgowego w modelu szczurów pourazowego spastyczności

Podsumowanie

Ten protokół opisuje akupunkturę ruchomą skóry głowy w szczurzym modelu spastyczności pourazowej i pokazuje jej ocenę za pomocą behawioralnych, obrazowania rezonansem magnetycznym, histologicznych i elektrofizjologicznych ocen w celu zbadania zmian w mikrostrukturze kapsuły zewnętrznej i pobudliwości odruchu rdzeniowego.

Streszczenie

Spastyka pourazkowa (PSS) poważnie upośledza funkcje motoryczne i jakość życia po udarze. Zakłócenie ścieżki kortyko-rdzeniowo-rdzeniowej i upośledzona supraspinalna inhibicja zstępująca są uważane za ważne mechanizmy patologiczne; jednakże nerwowe i mikrostrukturalne mechanizmy leżące u podstaw efektów terapeutycznych akupunktury skóry głowy w stylu ruchowym (MSSA) pozostają niedostatecznie poznane. Niniejsze badanie miało na celu zbadanie wpływu MSSA na PSS za pomocą multimodalnej oceny integrującej obrazowanie neuroobrazowe, elektrofizjologię i histologię w modelu szczurzym zamknięcia środkowej tętnicy mózgowej. Przeprowadzono obrazowanie rezonansu magnetycznego T2 w celu określenia objętości odcinka mózgu i stosowano obrazowanie tensora dyfuzji do oceny integralności mikrostruktury białej substancji zewnętrznej otoczki. Barwienie Luxol Fast Blue (LFB) oceniło integralność mieliny w otoczce zewnętrznej, podczas gdy rejestracje odruchów H oceniły pobudliwość odruchów rdzeniowych. Przeprowadzono analizy korelacyjne w celu zbadania związków między objętością odcinka, mikrostrukturą substancji białej, pobudliwością odruchów rdzeniowych a ciężkością spastyczności. MSSA zmniejszyło objętość odcinka mózgu, złagodziło uszkodzenie mikrostrukturalne otoczek zewnętrznych i osłabiło demyelinizację. Ponadto MSSA poprawiło nieprawidłowe parametry odruchów H, znormalizowało pobudliwość odruchów rdzeniowych i zmniejszyło spastyczność. Analizy korelacyjne wykazały, że większe odciągi były związane z większymi uszkodzeniami otoczek zewnętrznych, podczas gdy lepiej zachowana integralność substancji białej była związana z lepszą regulacją odruchów rdzeniowych i mniej ciężką spastycznością. Te wyniki sugerują, że MSSA może łagodzić PSS poprzez zmniejszenie niedokrwiennego uszkodzenia mózgu, zachowanie integralności mikrostrukturalnej otoczek zewnętrznych i poprawę zstępującej funkcji hamującej związanej ze ścieżką kortyko-rdzeniowo-rdzeniową, dostarczając przedklinicznych dowodów na poparcie jej zastosowania terapeutycznego.

Wprowadzenie

Spastyka po udarze (PSS) jest częstym i niepełnosprawnym następstwem wysiłkowego udaru niedokrwiennego, klinicznie definiowanym przez zależne od prędkości i długości wzrosty napięcia mięśniowego. Stan ten często prowadzi do nieprawidłowej postawy kończyn i dysfunkcyjnych wzorców ruchowych, poważnie ograniczając niezależność motoryczną pacjentów i jakość życia, a jednocześnie nakładając znaczne obciążenia ekonomiczne i dla opiekunów na całym świecie^1,2. Jako typowe objawienie zespołu górnego neuronu, patogeneza PSS jest przede wszystkim przypisywana nadmiernej nadpobudliwości odruchów rozciągania rdzenia kręgowego. Gromadzące się badania neuroanatomiczne i neurofizjologiczne wykazały, że utrata zstępującej modulacyjnej inhibicji z systemu pozapiramidowego do obwodów odruchów rdzeniowych jest kluczowym mechanizmem patologicznym leżącym u podstaw inicjacji i postępu PSS, przy czym droga kortyko-rdzeniowo-móżdżkowa pełni rolę głównego obwodu nerwowego pośredniczącego w tej zstępującej regulacji^3,4,5.

Technika igłowa jest kluczowym czynnikiem decydującym o skuteczności akupunktury i zajmuje centralne miejsce w praktyce klinicznej akupunktury. Technika akupunktury skóry głowy z ruchem (MSSA) jest charakterystyczną techniką igłową specjalnie opracowaną do interwencji w PSS, która łączy akupunkturę skóry głowy z jednoczesnym aktywnym lub pasywnym ćwiczeniem kończyn³. Liczne badania kliniczne wykazały, że MSSA przynosi lepsze wyniki w porównaniu z samą akupunkturą skóry głowy lub rehabilitacją ruchowo-ćwiczebną w zmniejszaniu nasilenia spastyczności, przywracaniu funkcji lokomocyjnych i poprawianiu codziennej aktywności u osób po udarze^6,7,8,9. Nasze poprzednie badania na zwierzętach wykazały ponadto, że MSSA wywiera bardziej wyraźne działanie przeciwspastyczne niż konwencjonalna akupunktura skóry głowy w szczurzych modelach PSS. Mechanistycznie, te działania terapeutyczne były związane z poprawioną perfuzją mózgu w obszarze niedokrwienia przejściowego, zmniejszoną pobudliwością odruchów rozciągania rdzenia kręgowego oraz zwiększoną ekspresją kotransportera potasowo-chlorkowego 2 (KCC2) w motoneuronach przedniego rogu rdzenia kręgowego. Ta modulacja molekularna może dodatkowo wzmacniać inhibitorne przekazywanie GABAergiczne w rdzeniu kręgowym, przyczyniając się tym samym do łagodzenia spastyczności^10,11.

Istniejące badania mechanistyczne MSSA pozostają ograniczone, bez wcześniejszych badań specjalnie badających, jak górny biały otok w drogach zstępujących pozapiramidowych przyczynia się do PSS. Torebkę zewnętrzną tworzy krytyczny segment białego otóku szlaku kortyko-rdzeniowo-móżdżkowego; zawiera włókna kortyko-tegmentalne, które przenoszą sygnały kortykalne do formacyjnej siatki rdzenia kręgowego, przyczyniając się tym samym do supraspinalnej inhibicji obwodów odruchów rdzeniowych^12,13. Zgodnie z tą rolą anatomiczną, wiele badań opartych na mapowaniu objawów z uszkodzeniem woluminu wskazało, że uszkodzenie torebki zewnętrznej wiąże się z spastycznością kończyn górnych i dolnych po udarze^12,13,14. Te anatomiczne i kliniczne obserwacje wspierają wybór torebki zewnętrznej jako podstawowego regionu zainteresowania (ROI). Do tej pory żadne badania in vivo nie wykazały, czy MSSA zachowuje integralność mikrostruktury torebki zewnętrznej czy też czy takie zmiany są związane ze zmianami w pobudliwości odruchów rdzeniowych. Ocena kliniczna oparta na ocenach behawioralnych, konwencjonalnym badaniu rezonansu magnetycznego (MRI) i badaniu elektrofizjologicznym pozwala tylko na analizy korelacyjne i może być wpłynięty przez niejednorodność pacjentów, czas trwania choroby i inne czynniki kliniczne. W przeciwieństwie do tego, standaryzowane szczurze modele PSS umożliwiają rygorystyczną kontrolę zmiennych eksperymentalnych i jednolite protokoły interwencji, zapewniając tym samym uzupełniającą platformę dla badań mechanistycznych.

Koncentrując się na mikrostrukturze białej substancji mózgu i funkcji neurofizjologicznych, niniejsze badanie zintegrowało podejście multimodalne, obejmujące obrazowanie T2-ważone (T2WI), dyfuzyjne obrazowanie tensorowe (DTI), rejestrację elektrofizjologiczną odruchu H, ukierunkowane barwienie Luxol Fast Blue (LFB) torebki zewnętrznej oraz oceny behawioralne. Poprzez ustanowienie zintegrowanej ramy korelacji struktura-funkcja-behawioralna, badanie to miało na celu zbadanie relacji między zawałem mózgu, mikrostrukturą torebki zewnętrznej, pobudliwością odruchów rdzeniowych i spastycznością po leczeniu MSSA w szczurzym modelu PSS. Wyniki mają na celu dostarczenie dowodów przedklinicznych na poparcie związku między zachowaną integralnością torebki zewnęt

Protokół

Czterdziestu dorosłych samców szczurów Sprague–Dawley (SD) bez specyficznych patogenów (SPF), o wadze 240–280 g, zakupiono od Beijing Vital River Laboratory Animal Technology [Numer licencji: SCXK (Jing) 2021-0011]. Wszystkie szczury były przetrzymywane w Laboratorium Zwierząt Doświadczalnych Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Pekinie w kontrolowanych warunkach, z temperaturą pokojową 23°C ± 1°C, wilgotnością względną 50% ± 5%, oraz cyklem 12 h światła/12 h ciemności, z wolnym dostępem do żywności i wody. Szczury były przyzwyczajone przez 5 dni, podczas których jednocześnie wykonywano przyzwyczajenie do bieżni. Zwierzęta wykonywały przyzwyczajenie do bieżni raz dziennie z prędkością 10 m/min przez 15 min na sesję bez stymulacji elektrycznej, aby zmniejszyć stres związany z obsługą.

Na podstawie naszego poprzedniego badania, wskaźnik sukcesu indukcji PSS metodą okluzji tętnicy środkowej mózgu (MCAO) wynosi około 60%¹⁵. Używając losowej tabeli liczb, 9 szczurów zostało losowo wybranych z wyprzedzeniem jako grupa szamoperacyjna; pozostałe 31 szczurów zostało użytych do ustanowienia modelu. Po udanym modelowaniu te szczury zostały losowo podzielone na grupę modelu i grupę MSSA. Ostatecznie, dziewięć szczurów zostało włączonych do każdej grupy. To eksperyment został przeprowadzony zgodnie z zasadami 3R dotyczącymi opieki nad zwierzętami laboratoryjnymi i został zatwierdzony przez Komitet Etykę dla Zwierząt Doświadczalnych Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Pekinie (BUCM 20250915-008).

Ustanowienie modelu

Model MCAO został ustanowiony u szczurów za pomocą zmodyfikowanej techniki wlaniaczowej z wykorzystaniem włókna. Szczury były znieczulone za pomocą 3% izofluranu w celu indukcji, a znieczulenie było utrzymywane za pomocą 1,5% izofluranu dostarczanego w tlenie z ciągłą prędkością przepływu 1 L/min przez cały czas trwania zabiegu chirurgicznego. Wykonano pośrodkowe cięcie szyi, po którym nastąpiło stępienie w celu ekspozycji prawej wspólnej tętnicy szyjnej (CCA), zewnętrznej tętnicy szyjnej (ECA) oraz wewnętrznej tętnicy szyjnej (ICA). Włókno nylonowe (średnica 0,36 ± 0,02 mm) zostało wprowadzone do ICA przez ECA i zaawansowane około 18–20 mm do miejsca pochodzenia tętnicy środkowej mózgu (MCA) w celu uzyskania okluzji tętniczej. Naczynia zostały związane, a rana została zamknięta. Szczury zostały następnie umieszczone na podgrzewanej poduszce aż do wybudzenia się z znieczulenia. Szczury z grupy szamoperacyjnej przeszły identyczne chirurgiczne ekspozycje CCA, ICA i ECA bez wstawienia włókna wlaniaczowego.

Po zabiegu, wszystkie szczury z MCAO otrzymały standaryzowaną opiekę pooperacyjną. Zwierzęta były utrzymywane na podgrzewanej poduszce o temperaturze 37°C przez pierwsze 12 godzin, aby zapobiec hipotermii. Rany chirurgiczne były czyszczone codziennie przez trzy kolejne dni, penicylina (100 mg/kg) była podawany dożylnie w celu zapobiegania infekcjom, a zmiękczona żywność była dostarczana w celu utrzymania odpowiedniej żywienia. Ogólna aktywność, spożycie pokarmu, stan rany i funkcja motoryczna kończyn były monitorowane codziennie od 1 do 10 dnia pooperacyjnego.

Deficyty neurologiczne były oceniane przez badaczy, którzy nie wiedzieli o przydziale do grup, za pomocą wskaźnika Zea Longa deficytów neurologicznych, a napięcie mięśniowe było oceniane za pomocą Modyfikowanej Skali Ashwortha (MAS). Oceny były wykonywane 1 dzień przed zabiegiem (dzień -1), w dniu zabiegu przed MCAO (dzień 0) oraz w dniach 1, 3, 5, 7 i 10 po operacji. Szczury z wynikami Zea Longa i MAS ≥1 w 3. dniu po operacji były uważane za szczury z ustanowionym sukcesywnym modelem PSS.

Leczenie MSSA

Interwencje rozpoczęły się w 3. dniu pooperacyjnym. Miejscem stymulacji igłowej skóry głowy była linii MS 6 po stronie zmian (przednia skośna linia parieto-temporalna). Zgodnie z Krajowym Standardem Znormalizowanych Manipulacji Igłowymi na Skórze Głowy (GB/T 21709.2-2021), linia MS 6 rozciąga się od GV 21 (Qianding) do GB 6 (Xuanli).

Sterylne igły akupunkturowe jednorazowego użytku (0,25 x 13 mm) były wstawiane pod galea aponeurotica w punkcie GV 21 pod kątem około 15° względem powierzchni skóry głowy i zaawansowane w kierunku GB 6 wzdłuż przedniej skośnej linii parieto-temporalnej do głębokości około 10 mm. Szybka manipulacja wirująca (200 obrotów/min) była stosowana ciągle przez 1 min. Po 15 min zatrzymania igieł, ta sama manipulacja wirująca była powtarzana raz jeszcze, co dawało łączny czas zatrzy

Wyniki

MSSA poprawia niedobory funkcji neurologicznych

Dwukierunkowa wielokrotnie powtarzana ANOVA wykazała istotne efekty główne czasu (F[2.613, 62.71] = 315.3, p < 0.001) oraz grupy (F[2, 24] = 142.9, p < 0.001), a także istotną interakcję czas × grupa (F[12, 144] = 99.94, p < 0.001) w przypadku wyników neurologicznych Zea Longa. Dzień przed operacją wszystkie szczury z grupy sham-operated, modelowej oraz MSSA miały wynik Zea Longa wynoszący 0, co oznaczało niezaburzoną podstawową funkcję neurologiczną bez niedoborów neurologicznych. Począwszy od pierwszego dnia pooperacyjnego, wyniki Zea Longa stopniowo rosły zarówno w grupie modelowej, jak i MSSA. Brak istotnych różnic między tymi grupami od pierwszego do piątego dnia pooperacyjnego (p > 0.05). Przy dalszej interwencji wyniki Zea Longa w grupie MSSA były znacząco niższe niż w grupie modelowej w 7. i 10. dniu pooperacyjnym (p < 0.001), co wskazuje na poprawę funkcji neurologicznych (Rysunek 1A).

Rysunek 1. Akupunktura szyjna w stylu ruchowym poprawia niedobory neurologiczne i zmniejsza napięcie mięśni u szczurów z spastycznością po udarze. (A) Wynik neurologiczny Zea Longa mierzony przed zamknięciem środkowej tętnicy mózgu (MCAO; dzień −1), natychmiast przed MCAO (dzień 0) i w dniach 1, 3, 5, 7 i 10 po operacji. (B) Wynik Modyfikowanej Skali Ashwortha mierzony w odpowiadających punktach czasowych. Przerywana pionowa linia wskazuje MCAO w dniu 0. Dane są przedstawione jako średnia ± odchylenie standardowe (SD). Paski błędów reprezentują SD. ***p < 0.001 dla porównań wskazanych przez nawiasy. Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

MSSA zmniejsza objętość zawału mózgu

Szczury sham-operated wykazywały normalne wyniki T2WI, z jednorodną intensywnością sygnału parenchymalnego w całym mózgu. Nie obserwowano patologicznej hiperintensywności, zawału mózgu, nieprawidłowości morfologicznych ani rozdęcia komór mózgu (Rysunek 2A). Natomiast grupa modelowa wykazywała wyraźną hiperintensywność T2 w półkuli mózgu po stronie zawału, odpowiadającą obszarowi niedokrwienia izawałowego, wraz z wyraźnym powiększeniem komór mózgu (Rysunek 2A). Ilościowa analiza morfometryczna wykazała, że objętość zawału mózgu była znacząco mniejsza w grupie MSSA w porównaniu z grupą modelową (p < 0.001; Rysunek 2B). Interwencja MSSA jest przedstawiona na Rysunku 2C.

Rysunek 2. Akupunktura szyjna w stylu ruchowym zmniejsza objętość zawału mózgu u szczurów z spastycznością po udarze. (A) Reprezentatywne obrazy mózgu T2-weighted imaging (T2WI) z grup sham-operated, modelowych i akupunktury szyjnej w stylu ruchowym (MSSA) w odległości 1,00, 0,20, −0,92 i −1,88 mm względem bregma. (B) Ilościowa analiza objętości zawału mózgu z T2WI. Pojedyncze symbole reprezentują pojedyncze zwierzęta. (C) Zdjęcie interwencji MSSA przeprowadzonej jednocześnie z ćwiczeniami na bieżni. Dane są przedstawione jako średnia ± SD. Paski błędów reprezentują SD. ***p < 0.001 w porównaniu z grupą modelową. Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

MSSA łagodzi spastyczność mięśni po udarze

W przypadku wyników MAS, dwukierunkowa wielokrotnie powtarzana ANOVA wykazała istotne efekty główne czasu (F[2.158, 51.79] = 183.7, p < 0.001) oraz grupy (F[2, 24] = 57.68, p < 0.001), wraz z istotną interakcją czas × grupa (F[10, 120] = 58.70, p < 0.001). Wszystkie szczury wykazywały wynik MAS 0 jeden dzień przed operacją oraz w pierwszym dniu pooperacyjnym, co oznaczało normalne podstawowe napięcie mięśni bez spastyczności. Od trzeciego dnia poopera

Dyskusja

Z perspektywy tradycyjnej medycyny chińskiej, PSS zalicza się do kategorii zaburzeń mięśniowo-ścięgnistego układu, a jego główną patogenezę opisuje się jako uraz mózgu jako pierwotną przyczynę i spastyczność kończyn jako objaw powierzchowny²⁰. Strategie terapeutyczne powinny zatem uwzględniać zarówno pierwotne uszkodzenie mózgu, jak i wtórne objawy obwodowe²¹. Podstawą MSSA jest nacisk na całościową regulację od otoczenia niedokrwienia mózgu do spastycznych kończyn, z celami terapeutycznymi polegającymi na poprawie krążenia krwi, rozluźnieniu ścięgien i zmniejszeniu spastyczności. Technika akupunktury jest kluczowym elementem skuteczności akupunktury, a wybór odpowiedniej techniki dostosowanej do wzorca choroby jest kluczowy dla osiągnięcia korzystnych efektów klinicznych. MSSA jest charakterystyczną modalnością akupunktury skroniową dla PSS, która łączy akupunkturę skroniową z aktywnym lub pasywnym ruchem kończyn podczas zatrzymywania igieł³. Niedawny przegląd systematyczny i metaanaliza wykazały, że MSSA przynosi lepsze efekty w zmniejszaniu spastyczności mięśni, poprawie funkcji motorycznych i poprawie aktywności w życiu codziennym pacjentów z PSS w porównaniu z konwencjonalną akupunkturą skroniową lub rehabilitacją ruchomą samą w sobie⁹. Należy zauważyć, że jednoczesne stosowanie akupunktury skroniowej i rehabilitacji ruchowej, jak jest zaimplementowane w MSSA, przynosi lepsze wyniki niż interwencja asynkroniczna, co potwierdzają umiarkowanie jakościowe dowody kliniczne⁹. MS 6, zdefiniowany w GB/T 21709.2-2021, jest przednią parieto-skroniowo ukośną linią akupunktury skroniowej wybraną ze względu na jej anatomiczną istotność i ugruntowaną przydatność kliniczną⁹. Przebiega ona nad pierwotnym i wtórym korowo-ruchowym korą, które są głównymi źródłami zstępujących projekcji kortykofugalnych kształtujących wyjście rdzenia przedłużonego i modyfikujących pobudliwość odruchu rdzeniowego. Klinicznie, MS 6 jest najczęściej stosowaną linią akupunktury skroniowej w PSS, jak potwierdziła wspomniana metaanaliza, co sprawia, że jest ona optymalnym celem do modyfikacji ścieżek ruchowych w niniejszym badaniu. Te wyniki podkreślają unikalne cechy proceduralne i potencjalne zalety kliniczne MSSA w leczeniu PSS. Badania przedkliniczne wykazały ponadto, że MSSA poprawia perfuzję mózgu w niedokrwiennym półcieniu i modyfikuje pobudliwość przednich rogów rdzenia kręgowego, zapewniając wstępne wsparcie mechanistyczne dla jego zastosowania terapeutycznego^10,11.

Według współczesnej teorii neurologicznej, patogeneza PSS jest przede wszystkim przypisywana trzem wzajemnie powiązanym procesam patologicznym: upośledzenie zstępującej inhibicji nadrdzeniowej, nienormalne przetwarzanie sygnałów wewnątrzoponowych i zmienione właściwości właściwe mięśni. Wśród tych, mechanizmy, za pomocą których ścieżki zstępujące nadrdzeniowe regulują pobudliwość odruchu rdzeniowego, pozostają niedostatecznie poznane². Drąg retykulo-rdzeniowy (RST) odgrywa istotną rolę w utrzymaniu równowagi łuku odruchu naciągowego. Boczny RST odbiera pobudzenie z przeciwbocznej kory przedruchowej i obszaru uzupełniającego ruchowego przez ścieżkę kortyko-retykularną, zstępuje w obrębie grzbietowo-bocznego pęczka rdzenia kręgowego i wywiera kontrolę hamującą nad aktywnością odruchu naciągowego rdzenia. W przeciwieństwie do tego, boczny RST nie jest regulowany przez przeciwboczną korę, zstępuje w obrębie brzuszno-pobocznego pęczka i faworyzuje aktywność odruchu naciągowego. Udar kory mózgu odbija ścieżkę kortyko-retykularną, zmniejsza pobudzenie do formacyjnego rdzenia retykularnego i prowadzi do przewagi aktywności medialnego RST. Ta brak równowagi przyczynia się do nadmiernej pobudliwości odruchu naciągowego rdzenia i klinicznego objawu spastyczności kończyn³. Kliniczne badania obrazowania neuroobrazowego łączyły PSS z uszkodzeniami obejmującymi korę przedruchową, ciało migdałowate, tylne ramię kapsuły wewnętrznej i kapsułę zewnętrzną^12,14,22. Wśród tych, kapsuła zewnętrzna reprezentuje kluczowy przewód substancji białej w ścieżce kortyko-retykulo-rdzeniowej, głównym pozapiramidowym pniu łączącym wejścia korowe, synapsującym w rdzeniowych jądrach retykularnych i rzucającym rzut na rdzeń kręgowy, aby wywierać zstępującą kontrolę hamującą nad motoneuronami α i interneuronami²³. Ta anatomiczna ramka jest wspierana przez badania śledzenia neuronów i DTI, które konsekwentnie identyfikują kapsułę zewnętrzną jako główne połączenie między korą mózgu, jądrami podstawy i rdzeniem przedłużonym^23,24. Należy zauważyć, że spastyczność jest coraz częściej rozpoznawana jako zaburzenie na poziomie sieci wynikające z zaburzenia równowagi między wieloma zstępującymi układami ruchowymi, w tym zarówno ścieżkami korty

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
α-Chloralose	GoldBio	C-118-250	Znieczulający do rejestracji H-reflexu
Absolute Ethanol	Beijing Tong Guang Fine Chemicals Co., Ltd.	VS104021-500 mL	Środek histologiczny
Igły akupunkturowe (0,25 × 13 mm)	Beijing Zhongyan Taihe Acupuncture Needle Co., Ltd.	NA	Jednorazowe sterylne igły do akupUNKTURY
Ampicillin	Beijing Rui Da Heng Hui Technology Development Co., Ltd.	HD-3018-500g	Antybiotyk do zapobiegania zakażeniom pooperacyjnym
System eksperymentów z funkcją biologiczną (BL420N)	Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd.	NA	System rejestracji elektrofizjologicznej
Oprogramowanie do analizy obrazów tensora dyfuzji (ParaVision 360)	Bruker	NA	Rejestracja MRI i rekonstrukcja DTI
Ekologiczny roztwór do odwoskowania i czyszczenia	Servicebio	G1128-500ML	Środek histologiczny
W pełni automatyczny mikroton skrętny	Leica Microsystems	RM2255	Cięcie tkanki
Podgrzewana podkładka	Suzhou Caiyang Electric Heating Technology Co., Ltd.	TT180×150-1XD	Kontrola temperatury po operacji
ImageJ 6.0	National Institutes of Health	NA	Ilościowa analiza obrazów
Isoflurane	Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.	I8000-25g	Znieczulający do inhalacji
ITK-SNAP 4.4.0	University of Pennsylvania	NA	Segmentacja zawału mózgu
Roztwór Luxol Fast Blue	Servicebio	G1030-100ML	Barwienie na mielinę
Monofilamentowa sznurówka nylonowa (0,36 ± 0,02 mm)	Beijing Cinontech Co., Ltd.	NA	Wprowadzenie MCAO
Paraformaldehyd (4% w PBS)	Servicebio	TBAB0102	Fiksacja tkanki
Skaner magnetyczny PharmaScan 7.0 T	Bruker	NA	Rejestracja MRI
SPSS Statistics 20.0	IBM	NA	Analiza statystyczna
Świnki morskie Sprague–Dawley (SPF, samce)	Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.	NA	Zwierzęta doświadczalne
Termostatyczny system kąpieli wodnej	Shanghai Zhixin Experimental Instrument Technology Co., Ltd.	ZX-5A	Kontrola temperatury podczas MRI
Biegownia dla gryzoni	Clever	TreadScan	Trening wysiłkowy podczas aklimatyzacji i MSSA