Mechaniczne urządzenie do akupunktury do powtarzalnej stymulacji wibracyjnej punktów akupunkturowych u szczurów

Podsumowanie

Niniejszy protokół opisuje zestandaryzowaną metodę mechanicznej akupunktury z wykorzystaniem urządzenia do stymulacji wibracyjnej, które zapewnia powtarzalną stymulację igłą w punkcie akupunktury HT7 u szczurów. Metoda ta, zwalidowana w modelu aktywności lokomotorycznej indukowanej kokainą, stanowi ilościową i powtarzalną platformę do badania obwodowych i centralnych mechanizmów neurofizjologicznych leżących u podstaw efektów wywoływanych przez akupunkturę.

Streszczenie

Choć akupunktura manualna jest szeroko stosowana w badaniach eksperymentalnych i klinicznych, jej zastosowanie jest ograniczone przez niską powtarzalność wynikającą ze zmienności manipulacji igłą zależnej od osoby wykonującej zabieg. Aby pokonać to ograniczenie, opracowano mechaniczny instrument do akupunktury (MAI), który dostarcza kontrolowaną stymulację wibracyjną poprzez wprowadzoną igłę akupunkturową bez użycia prądu elektrycznego. Niniejszy artykuł przedstawia ustandaryzowany protokół stosowania stymulacji MAI w punkcie akupunkturowym HT7 u szczurów, obejmujący przygotowanie zwierząt, lokalizację punktu akupunkturowego, wprowadzenie igły, konfigurację parametrów stymulacji oraz ocenę behawioralną. Reprezentatywne badania walidacyjne wykazały, że stymulacja MAI w punkcie HT7 redukowała wywołaną kokainą aktywność lokomotoryczną i preferencyjnie aktywowała szlaki włókien A związanych z mechanoreceptorami. Dalsze badania potwierdziły udział obwodowych aferentów nerwu łokciowego, szlaku kolumny tylnej oraz mezolimbicznego układu nagrody w pośredniczeniu tych efektów. Reprezentatywne wyniki przedstawione w tym artykule opierają się na wcześniej opublikowanych badaniach walidacyjnych z wykorzystaniem platformy MAI. Protokół ten zapewnia powtarzalną i ilościową metodę badania neurofizjologicznych mechanizmów stymulacji akupunkturowej w eksperymentalnych modelach zwierzęcych.

Wprowadzenie

Manualna akupunktura jest tradycyjną metodą stymulacji z użyciem igieł, która dostarcza dynamiczny bodziec mechaniczny do tkanek obwodowych poprzez bezpośrednią manipulację igłą i jest szeroko stosowana zarówno w warunkach klinicznych, jak i eksperymentalnych^1,2. W przeciwieństwie do elektroakupunktury (EA), akupunktura manualna generuje złożoną stymulację mechaniczną, w tym deformację tkanek i aktywację obwodowych mechanoreceptorów, poprzez fizyczną manipulację wprowadzoną igłą². Komponenty mechaniczne te są uważane za istotny czynnik przyczyniający się do charakterystycznych efektów fizjologicznych akupunktury i uważa się, że angażują one somatosensoryczne drogi doprowadzające w inny sposób niż stymulacja elektryczna^3,4.

Pomimo znaczenia fizjologicznego i szerokiego zastosowania, eksperymentalne wykorzystanie akupunktury manualnej pozostaje ograniczone ze względu na słabą powtarzalność². Efekty terapeutyczne akupunktury manualnej zależą w dużej mierze od czynników zależnych od operatora, w tym od technik manipulacji igłą, intensywności stymulacji, częstotliwości i czasu trwania, które mogą się znacząco różnić w zależności od praktyka i warunków eksperymentalnych¹. Ta zmienność stanowi główną przeszkodę w badaniach mechanistycznych próbujących ustanowić związki przyczynowo-skutkowe między stymulacją akupunkturową a wynikami neurofizjologicznymi.

Aby przezwyciężyć te ograniczenia, często stosuje się elektroakupunkturę (EA) jako metodę alternatywną, ponieważ umożliwia ona precyzyjną kontrolę parametrów stymulacji, takich jak częstotliwość, amplituda i czas trwania. Jednak EA wprowadza impulsy elektryczne, które mogą aktywować szlaki neuronalne odmienne od tych pobudzanych podczas manualnego nakłuwania⁵. W konsekwencji trudno jest wyizolować i ocenić specyficzny wkład stymulacji mechanicznej, która stanowi fundamentalny element tradycyjnej akupunktury manualnej. Dlatego w badaniach nad mechanizmami działania akupunktury niezbędna jest powtarzalna metoda zdolna do dostarczania kontrolowanej stymulacji mechanicznej bez zakłóceń elektrycznych.

Aby wyeliminować to ograniczenie, w 2013 roku opracowano mechaniczny instrument do akupunktury (MAI), który pozwala na odtworzenie mechanicznej stymulacji opartej na wibracjach przy jednoczesnej ilościowej kontroli parametrów stymulacji^3,5. Urządzenie to dostarcza kontrolowaną stymulację wibracyjną bezpośrednio do wprowadzonej igły do akupunktury, standaryzując tym samym bodziec mechaniczny przykładany do tkanki. Stosując to podejście, wcześniejsze badania wykazały, że mechaniczna akupunktura moduluje somatosensoryczne, związane z nagrodą oraz autonomiczne obwody neuronalne w wielu modelach eksperymentalnych^4,6,7,8. Na przykład stymulacja mechaniczna w punktach akupunkturowych HT7 osłabiła reakcje behawioralne wywołane kokainą oraz uzależnienie od alkoholu poprzez modulację mezolimbicznego układu dopaminergicznego, endogennych szlaków opioidowych i somatosensorycznych obwodów przekaźnikowych^6,7. Ponadto połączona stymulacja mechaniczna i elektryczna stosowana w punktach neurogennych hamowała nadciśnienie poprzez mechanizmy zależne od opioidów w centralnych obszarach autonomicznych⁵. Łącznie około 30 badań z wykorzystaniem tej platformy przyczyniło się do zrozumienia mechanizmów działania akupunktury w uzależnieniach, regulacji autonomicznej oraz w innych warunkach eksperymentalnych.

W przeciwieństwie do ogólnych systemów stymulacji opartych wyłącznie na wibracjach, niniejszy protokół zapewnia zintegrowany przebieg pracy dla nieelektrycznej, mechanicznej akupunktury wibracyjnej z wykorzystaniem sprzężenia igły u czuwających szczurów. Łączy on montaż urządzenia, sprzęganie igły z silnikiem, standaryzację głębokości wkłucia, kalibrację opartą na akcelerometrze, lokalizację punktów akupunkturowych oraz reprezentatywną walidację behawioralną z wykorzystaniem stymulacji HT7 w modelu aktywności lokomocyjnej indukowanej kokainą u szczurów. Tym samym artykuł ten dostarcza odtwarzalnego protokołu eksperymentalnego dla kontrolowanej mechanicznej stymulacji akupunkturowej, a nie prezentuje nowego urządzenia terapeutycznego.

Ustandaryzowany i ilościowo kontrolowany sygnał wyjściowy MAI może również stanowić użyteczną platformę dla przyszłej integracji z analitycznymi podejściami opartymi na danych. Ponieważ parametry stymulacji, takie jak częstotliwość wibracji, przyspieszenie, głębokość wprowadzenia i czas trwania stymulacji, mogą być precyzyjnie zdefiniowane i odtworzone, zmienne te mogą służyć jako ustrukturyzowane dane wejściowe dla modelowania obliczeniowego. Niedawne badania wykazały, że podejścia oparte na uczeniu maszynowym, głębokim uczeniu oraz uczeniu transferowym mogą poprawić ekstrakcję cech, klasyfikację sygnałów, rozpoznawanie wzorców i optymalizację w złożonych obrazach biomedycznych oraz zbiorach danych sygnałów wibracyjnych^9,10,11,12. Podobne podejścia mogłyby potencjalnie zostać zastosowane w badaniach nad akupunkturą opartą na MAI poprzez integrację parametrów stymulacji z danymi behawioralnymi, neurofizjologicznymi i sygnałami wyjściowymi wibracji w celu wsparcia analizy sygnałów, klasyfikacji behawioralnej, optymalizacji parametrów stymulacji oraz przewidywania odpowiedzi związanych z akupunkturą. Zatem przyszłe badania łączące stymulację opartą na MAI z metodologiami uczenia maszynowego mogą dodatkowo zwiększyć precyzję, powtarzalność i interpretację mechanistyczną badań nad akupunkturą.

Ważnym aspektem jest fakt, że reprezentatywne dane walidacyjne przedstawione w niniejszym artykule zostały powielone, zaadaptowane lub podsumowane na podstawie wcześniej opublikowanych badań z wykorzystaniem platformy MAI. Głównym celem tego artykułu nie jest raportowanie nowych wyników eksperymentalnych, lecz dostarczenie szczegółowego, krok po kroku protokołu w celu odtwarzalnego zastosowania ustandaryzowanej mechanicznej stymulacji akupunkturowej w eksperymentalnych modelach zwierzęcych.

Protokół

Wszystkie protokoły dotyczące zwierząt opisane w niniejszym artykule zostały zatwierdzone przez Institutional Animal Care and Use Committees (IACUCs) Uniwersytetu Daegu Haany (DHU2012-008, DHU2022-12) oraz College of Medicine Uniwersytetu Yonsei (# 2023-0006) i zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals.

1. Przygotowanie instrumentu do akupunktury mechanicznej

1. Zmontuj instrument do akupunktury mechanicznej (MAI) (Rysunek 1).
   1. Przygotuj instrument do akupunktury mechanicznej (MAI), składający się z wykonanej na zamówienie jednostki sterującej oraz wibratora mechanicznego połączonego z igłą do akupunktury (Rysunek 1D). Użyj jednostki sterującej do regulacji natężenia stymulacji, częstotliwości wibracji oraz czasu trwania stymulacji^3,4,13.
   2. Użyj sterylnej igły do akupunktury o średnicy 0.10 mm, długości trzonu 10 mm i długości uchwytu 10 mm. Zamocuj gumowy ogranicznik na trzonie igły w odległości 3 mm od jej czubka, aby ustandaryzować głębokość wprowadzenia.
   3. Przymocuj silnik wibracyjny do igły do akupunktury za pomocą stabilnego złącza zaciskowego. Upewnij się, że igła nie przesuwa się podczas wibracji, a ogranicznik pozostaje nieruchomy podczas stymulacji.
2. Skonfiguruj parametry stymulacji.
   1. Ustaw warunki stymulacji na wibracje ciągłe o częstotliwości 85 Hz i przyspieszeniu 1.3 m/s² przez 20 s, co generuje stabilne przebiegi przyspieszenia podczas stymulacji (Rysunek 1E).
      ​UWAGA: Wcześniejsze eksperymenty walidacyjne¹³ wykazały, że akupunktura manualna generuje częstotliwości wibracji wynoszące około 70–90 Hz oraz wartości przyspieszenia średnio około 1.3 m/s² (Rysunek 1A,B). Na podstawie tych pomiarów MAI skonfigurowano tak, aby dostarczał stymulację wibracyjną o częstotliwości 85 Hz i przyspieszeniu 1.3 m/s², co ściśle odpowiada charakterystyce mechanicznej akupunktury manualnej, zapewniając jednocześnie stabilny i powtarzalny sygnał wyjściowy. Czas trwania stymulacji wynoszący 20 s przyjęto z wcześniej opublikowanych badań nad optymalizacją parametrów¹³ w szczurzym modelu aktywności lokomotorycznej indukowanej kokainą, w których porównywano różne czasy trwania stymulacji i natężenia przyspieszenia w celu zidentyfikowania skutecznych i dobrze tolerowanych warunków stymulacji. W niniejszym protokole „częstotliwość” odnosi się do dominującej składowej częstotliwości wibracji czubka igły mierzonej z sygnału akcelerometru. Wartość ta odzwierciedla wibracje przekazywane na czubek igły podczas manualnego manipulowania uchwytem (tzw. flicking), a nie wolniejszy rytm powtarzających się ruchów ręką operatora.
   2. Zastosuj warunki 85 Hz i 1.3 m/s², aby wygenerować stabilny i powtarzalny wzorzec wibracji porównywalny z manualną manipulacją igłą (Rysunek 1E).
3. Zwaliduj sygnał wibracyjny.
   1. Aby zwalidować stabilność sygnału wibracyjnego, mocno przymocuj czubek igły do akcelerometru, tak aby wibracje mechaniczne z silnika były bezpośrednio przekazywane z igły na czujnik.
   2. Zarejestruj sygnał przyspieszenia podczas okresu stymulacji za pomocą systemu akwizycji danych i przeanalizuj sygnał w programie LabVIEW lub równoważnym oprogramowaniu.
   3. Zdefiniuj wartość przyspieszenia jako stabilne przyspieszenie czubka igły mierzone w fazie plateau stymulacji po początkowej odpowiedzi przejściowej i oblicz dominującą częstotliwość wibracji z sygnału przyspieszenia.
   4. Przeprowadzaj kalibrację przed każdą sesją eksperymentalną oraz za każdym razem, gdy silnik, złącze, igła lub sprzężenie igła-silnik zostaną wymienione lub wyregulowane.
   5. Przejdź do eksperymentów na zwierzętach tylko wtedy, gdy zmierzona częstotliwość dominująca i przyspieszenie pozostają stabilne w fazie plateau i mieszczą się w dopuszczalnym zakresie docelowych parametrów stymulacji, np. w granicach około ±10% dla 85 Hz i 1.3 m/s².
      UWAGA: Reprezentatywne przebiegi przyspieszenia wygenerowane podczas akupunktury manualnej oraz stymulacji MAI przedstawiono na Rysunku 1B,E.

2. Przygotowanie zwierząt i model aktywności lokomotorycznej indukowanej kokainą

1. Przygotowanie zwierząt doświadczalnych.
   1. Do eksperymentów dotyczących aktywności lokomotorycznej indukowanej kokainą należy wykorzystać samce szczurów Sprague-Dawley o masie 270–320 g^3,4,5. Zwierzęta należy utrzymywać w 12-godzinnym cyklu światło/ciemność z wolnym dostępem do pokarmu i wody.
   2. Do każdej grupy doświadczalnej należy przydzielić od 6 do 8 zwierząt, chyba że określono inaczej.
2. Habituacja zwierząt.
   1. Każdego szczura należy poddać habituacji do procedur eksperymentalnych na 1 dzień przed testami. Należy przeprowadzić delikatną manipulację oraz sham akupunkturę bez wprowadzania igieł przez 2–3 min.
   2. Zwierzęta należy umieścić w komorze do pomiaru aktywności lokomotorycznej na 90 min, aby zredukować behawioralne odpowiedzi związane ze stresem podczas procedur stymulacji w stanie czuwania.
   3. Przed eksperymentem z akupunkturą należy codziennie habituować szczury do chwytania i lekkiego unieruchomienia manualnego przez czas odpowiadający planowanej procedurze akupunktury.
   4. Podczas stymulacji zwierzę należy delikatnie trzymać w dłoni, aby ustabilizować ciało i przednią kończynę, nie wywierając nadmiernego nacisku. Zwierzęta z grupy kontrolnej (bez akupunktury) należy unieruchamiać w ten sam sposób i przez ten sam czas, ale bez wprowadzania igieł, aby kontrolować ogólne efekty stresu związanego z immobilizacją.
      UWAGA: Operatorzy powinni zostać przeszkoleni w celu zapewnienia spójności w przeprowadzaniu unieruchomienia, wprowadzania igieł oraz stymulacji.
   5. W przypadku zaobserwowania uporczywego szamotania się, wokalizacji, prób ucieczki lub innych nadmiernych reakcji stresowych, należy przerwać procedurę i zapewnić dodatkową habituację przed testami.
      UWAGA: Wszystkie procedury stymulacji akupunkturowej należy przeprowadzać u zwierząt w stanie czuwania przy lekkim unieruchomieniu manualnym.

3. Lokalizacja punktów akupunkturowych

1. Zlokalizuj punkty akupunkturowe HT7 oraz LI5.
   1. Zlokalizuj punkty akupunkturowe, stosując metodę transpozycyjną, w której lokalizacja punktu akupunkturowego u człowieka jest przeniesiona na odpowiadający mu obszar anatomiczny u zwierzęcia.
   2. Zidentyfikuj punkt HT7 (Shenmen) w poprzecznej zmarszczce nadgarstka przedniej łapy, po stronie promieniowej względem ścięgna mięśnia zginacza nadgarstka łokciowego^3,4,5,8.
      ​UWAGA: Lokalizacja ta odpowiada anatomicznie obszarowi kanału łokciowego/kanału Guyona w pobliżu nerwu łokciowego. W przeciwieństwie do niego, punkt LI5 znajduje się na promieniowym końcu grzbietowej strony nadgarstka, pomiędzy ścięgnami mięśnia prostownika kciuka długiego i mięśnia prostownika kciuka krótkiego. LI5 jest położony po przeciwnej stronie niż HT7, w odległości około 5 mm (Rycyna 1F). Punkty orientacyjne te zostały wykorzystane w celu zapewnienia powtarzalnej lokalizacji punktów akupunkturowych¹⁴.
2. Zlokalizuj kontrolne punkty akupunkturowe.
   1. Jako pobliski kontrolny punkt nadgarstka wykorzystaj punkt LI5. Zlokalizuj LI5 w odległości około 5 mm od HT7, w pobliżu dystalnego końca kości promieniowej, pomiędzy ścięgnami mięśnia dłoniowego długiego a mięśnia zginacza nadgarstka promieniowego.

4. Procedura stymulacji mechanicznej

1. Przeprowadzenie eksperymentów dotyczących aktywności lokomotorycznej.
   1. Umieścić szczura w komorze otwartego pola i zapewnić 60 min habituacji. Rejestrować bazową aktywność lokomotoryczną przez 30 min.
   2. Wstrzyknąć kokainę dootrzewnowo w dawce 15 mg/kg, aby wywołać aktywację lokomotoryczną^3,4,5. Lekko unieruchomić zwierzę 1 min po wstrzyknięciu kokainy.
   3. Aby ustandaryzować głębokość wprowadzenia, zamontować gumowy korek na trzonie igły w punkcie 3 mm od czubka igły (Rysunek 1D). Upewnić się, że korek jest stabilnie zamocowany, tak aby pozostał nieruchomy podczas wprowadzania i wibracji.
   4. Podczas wprowadzania igły przesuwać ją do momentu, aż korek delikatnie zetknie się z powierzchnią skóry, unikając nadmiernego ucisku skóry, który mógłby zmienić efektywną głębokość wprowadzenia.
2. Zastosowanie stymulacji mechanicznej.
   1. Zastosować ciągłą stymulację wibracyjną o częstotliwości 85 Hz i przyspieszeniu 1,3 m/s² przez 20 s, co stanowi zoptymalizowany warunek stymulacji zidentyfikowany w eksperymentach walidacji parametrów (Rysunek 2A–C). Pozostawić igłę w miejscu przez 1 min po wprowadzeniu, a następnie ją wycofać.
   2. Kontynuować rejestrację aktywności lokomotorycznej do 60 min po wstrzyknięciu kokainy. Analizować aktywność lokomotoryczną w odstępach 10-minutowych lub jako całkowity dystans przebyty w ciągu 60 min (Rysunek 1C).
   3. Stosować 20-sekundową stymulację jako warunek standardowy, ponieważ czas ten wywołał silne hamowanie indukowanej kokainą aktywności lokomotorycznej w poprzednich eksperymentach walidacyjnych (Rysunek 2A–C).
      UWAGA: Ciągła 40-sekundowa stymulacja wywoływała zachowania stresowe, w tym wokalizację i reakcje unikania, dlatego została wykluczona ze standardowych warunków stymulacji.
3. Przeprowadzenie eksperymentów walidacji parametrów bodźca.
   1. Porównać czasy stymulacji wynoszące 0 s, 10 s, 20 s i 40 s lub porównać różne ustawienia przyspieszenia, np. 0,7 i 1,3 m/s², w celu walidacji parametrów stymulacji (Rysunek 2).
   2. Stosować stymulację 50 Hz jako warunek ukierunkowany na ciałka Meissnera oraz stymulację 200 Hz jako warunek ukierunkowany na ciałka Paciniego w eksperymentach związanych z mechanoreceptorami, zgodnie z wcześniejszymi opisami^4,8.

5. Pozyskiwanie danych i analiza statystyczna

1. Zmierz aktywność lokomotoryczną przy użyciu systemu wideotracingu z kamerą zamontowaną nad obszarem testowym. Umieść zwierzęta w kwadratowej komorze otwartego pola (40 cm × 40 cm × 45 cm) i określ całkowity przebyty dystans za pomocą oprogramowania do śledzenia wideo.
2. Zarejestruj przebiegi przyspieszenia w czasie z wyjścia akcelerometru podczas eksperymentów kalibracyjnych wibracji. Podaj częstotliwość dominującą, amplitudę przyspieszenia oraz czas trwania stabilnych wibracji (Rysunek 1D,E).
3. Oceń rozkład danych pod kątem normalności przed przeprowadzeniem parametrycznej analizy statystycznej. W przypadku spełnienia założeń normalności rozkładu, przeanalizuj różnice między grupami za pomocą jednoczynnikowej lub dwuczynnikowej analizy wariancji, a następnie przeprowadź odpowiednie porównania post hoc.
4. Śledzenie i analiza behawioralna powinny być wykonywane przez badaczy, którzy w miarę możliwości nie znają przydziału zwierząt do grup eksperymentalnych.
5. Dane behawioralne i fizjologiczne przedstaw jako średnią ± SEM. Aktywność lokomotoryczną przeanalizuj za pomocą jednoczynnikowej lub dwuczynnikowej analizy wariancji z powtarzanymi pomiarami (ANOVA), a następnie przeprowadź test post hoc Tukeya.
   UWAGA: Wielkość prób dobrano na podstawie wcześniejszych badań z wykorzystaniem tego samego modelu aktywności lokomotorycznej indukowanej kokainą u szczurów oraz protokołu mechanicznej stymulacji akupunkturowej. Aby zapewnić wystarczającą moc statystyczną, w każdej grupie wykorzystano 6–8 szczurów. Zwierzęta wykluczano z analizy wyłącznie w przypadku wystąpienia zdefiniowanych problemów technicznych lub proceduralnych, takich jak błędna lokalizacja punktów akupunkturowych, awaria urządzenia, niestabilne wyjście wibracji podczas kalibracji lub błąd śledzenia wideo.

Wyniki

Walidacja powtarzalnej stymulacji mechanicznej

Reprezentatywna konfiguracja urządzenia oraz walidacja wyjściowych drgań przedstawione na Rysunku 1 zostały przygotowane na potrzeby niniejszego artykułu, natomiast ilościowe zakresy referencyjne dla parametrów drgań pochodzących z akupunktury manualnej zostały podsumowane na podstawie wcześniejszych badań walidacyjnych.

Urządzenie MAI zostało zwalidowane poprzez porównanie...

Dyskusja

Niniejsze badanie przedstawia zestandaryzowany protokół stosowania akupunktury mechanicznej z wykorzystaniem urządzenia do stymulacji wibracyjnej, które umożliwia powtarzalne dostarczanie mechanicznej stymulacji opartej na wibracjach. Poprzez zapewnienie ilościowej kontroli częstotliwości stymulacji, intensywności przyspieszenia oraz czasu trwania, podejście to eliminuje głównym ograniczenie tradycyjnej akupunktury manualnej, która jest immanentnie zależna od techniki terapeuty i trudna do standaryzacji.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Akcelerometr	PCB Piezotronics	PO-AXA-12-01	Stosowany do pomiaru wibracji
Igła do akupunktury (0,10 mm × 10 mm)	Dongbang Acupuncture Inc.	DB102	Sterylna jednorazowa igła do akupunktury
Złącze z klipsem typu krokodylko	N/A	N/A	Służy do połączenia wibratora z igłą do akupunktury
Bupiwakainy chlorowodorek (0,5%)	Huons Pharm, Korea	HIRA Code (199502333)	Stosowany w eksperymentach z znieczuleniem miejscowym
Kokainy chlorowodorek	Macfarlan Smith Ltd	53-21-4	Stosowany w eksperymentach dotyczących aktywności lokomotorycznej indukowanej kokainą
Jednostka sterująca	Własny wyrób	N/A	Służy do regulacji częstotliwości stymulacji, intensywności przyspieszenia i czasu trwania
Oprogramowanie do akwizycji danych	LabVIEW	LabVIEW 7 Express (7.0)	Stosowane do analizy sygnałów wibracyjnych
System akwizycji danych	National Instruments	DAQ-NI USB-6200	Służy do cyfryzacji sygnału
Mechaniczne urządzenie do akupunktury (MAI)	Własny wyrób	N/A	Urządzenie wykonane na zamówienie, składające się z jednostki sterującej, silnika wibracyjnego, złącza typu klips, igły do akupunktury i gumowego stopera
Komora do testów lokomotorycznych open-field	Własny wyrób	kwadratowe pudełko open field (40 cm × 40 cm× 45cm) wykonane z czarnego akrylu.	Stosowane do analizy aktywności lokomotorycznej
Gumowy stoper	N/A	N/A	Zamontowany 3 mm od czubka igły w celu standaryzacji głębokości wprowadzenia
Szczury Sprague-Dawley	Orient Bio	Crl:CD(SD)IGS	Samce, 270–320 g
Silnik wibracyjny	Motor Bank	MB-0412V	Stosowany do mechanicznej stymulacji wibracyjnej
Oprogramowanie do śledzenia wideo	EthoVision XT	Ethovision 3.1	Stosowane do śledzenia aktywności lokomotorycznej