Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł badawczy

Liuwei Dihuang Wan hamuje osteoklastogenezę i utratę kości indukowaną owariektomią poprzez tłumienie sygnałowania NF-κB

101 wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/72270

⸱

28 lipca 2026

 ,  ,  ,  , 
1School of Medicine, Nankai University, 2School of Basic Medical Sciences, Zhejiang Chinese Medical University, 3Emergency Medical Center, Ningbo Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, 4The Second People's Hospital of Changzhou, the Third Affiliated Hospital of Nanjing Medical University

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Badanie to wykazało, że Liuwei Dihuang Wan (LWDHW) hamuje różnicowanie osteoklastów i utratę kości wywołaną owariektomią poprzez inhibicję szlaku sygnałowego NF-κB, jak wynika z analizy LC-MS/MS, farmakologii sieciowej oraz walidacji in vivo i in vitro.

Streszczenie

Liuwei Dihuang Wan (LWDHW), klasyczna formuła medycyny tradycyjnej chińskiej, jest szeroko stosowana w leczeniu różnych chorób związanych z niedoborem czynności nerek i wykazała satysfakcjonującą skuteczność kliniczną w stwardnieniu kości po menopauzie (PMOP). Jednak jej mechanizmy farmakologiczne pozostają niejasne. Aby temu zaradzić, najpierw przeanalizowaliśmy skład chemiczny LWDHW za pomocą LC-MS/MS, co pozwoliło na zidentyfikowanie 1615 składników. Następnie farmakologia sieciowa przewidziała, że stan zapalny i ścieżka sygnałowa NF-κB są potencjalnymi mechanizmami terapeutycznymi leżącymi u podstaw działania LWDHW na PMOP. Następnie 27 żeńskich myszy C57BL/6J zostało losowo przydzielonych do grup: Sham, Model i LWDHW. Myszy w dwóch ostatnich grupach przeszły obustronne wycięcie jajników (OVX), a te z grupy LWDHW otrzymywały doustnie LWDHW w dawce 9,75 g/kg/dzień przez 8 tygodni. Próbki surowicy i kości udowej zostały zebrane do Enzymaticznego Testu Immunopochłaniania (ELISA), Mikro-Tomografii Komputerowej (μCT), badania histologicznego i immunohistochemii (IHC). Pierwotne makrofagi pochodzące z szpiku kostnego (BMMs) były traktowane LWDHW, a następnie poddawane barwieniu TRAP i qRT-PCR. U myszy OVX, LWDHW znacząco łagodził utrata kości i pogorszenie mikrostruktury kości, co towarzyszyło obniżeniu poziomów β-CTX w surowicy i zmniejszeniu liczby osteoklastów w tkankach udowych. Barwienie IHC ujawniło znacznie niższą ekspresję TNF-α, IL-1β i p-P65 w tkankach udowych myszy leczonych LWDHW w porównaniu z grupą modelową. In vitro, barwienie TRAP wykazało, że LWDHW hamuje różnicowanie osteoklastów BMMs indukowanych przez RANKL/M-CSF i obniża ekspresję genów Ctsk, MMP9 i Nfatc1. Analiza Western blot wykazała ponadto, że poziomy białek P65, p-P65, IκBα i p-IκBα były znacząco zmniejszone w BMMs po leczeniu LWDHW. Łącznie, LWDHW łagodzi stwardnienie kości po menopauzie, prawdopodobnie poprzez hamowanie osteoklastogenezy pośredniczonej przez sygnał NF-κB.

Wprowadzenie

Osteoporoza pouramenopauzalna (PMOP) jest rozpowszechnioną metaboliczną chorobą kości charakteryzującą się utratą masy kostnej i pogorszeniem mikroarchitektury kości1. Wraz ze starzeniem się populacji, rosnąca częstość występowania PMOP stała się globalnym problemem zdrowia publicznego, który poważnie z otoczenia zdrowia kobiet w okresie pouramenopauzalnym2. W Chinach ogólna częstość występowania PMOP wynosi aż 32,1%3. Osoby dotknięte tą chorobą są bardziej podatne na poważne powikłania, takie jak przewlekły ból pleców, deformacje kręgosłupa i łamliwe złamania4,5. Obecnie, leki zatwierdzone przez FDA na osteoporozę obejmują bisfosfonaty6, hormon przytarczyc7 i denosumab8, które są szeroko stosowane w praktyce klinicznej. Jednak ich długotrwała aplikacja jest często ograniczana przez różne działania niepożądane9. Dlatego istnieje pilna potrzeba opracowania bezpieczniejszych i bardziej skutecznych środków terapeutycznych na PMOP. Wśród potencjalnych alternatyw, chińskie leki ziołowe zyskują coraz większą uwagę ze względu na ich uznaną skuteczność i korzystny profil bezpieczeństwa10.

Liuwei Dihuang Wan (LWDHW) to klasyczna formuła w tradycyjnej medycynie chińskiej (TCM), po raz pierwszy udokumentowana w starożytnym tekście Key to Therapeutics of Children's Diseases podczas dynastii Song. Przez tysiące lat LWDHW był szeroko stosowany w praktyce klinicznej w leczeniu różnych chorób związanych z niedoborem nerki11,12,13,14. Zgodnie z teorią TCM dotyczącą "rządzenia kościami przez nerki", utrata masy kostnej i pogorszenie stanu kości u pacjentów z PMOP są głównie spowodowane niewystarczającym odżywieniem z esencji nerki15. W związku z tym, LWDHW jest powszechnie stosowany w klinicznym leczeniu PMOP i wykazał pewną skuteczność terapeutyczną16,17. Jednak, chociaż badania na zwierzętach i kliniczne wykazały, że LWDHW wywiera wielorakie działania farmakologiczne, w tym przeciwutleniające18, przeciwzapalne19 i przeciwfibrotyczne14, jego podstawowy mechanizm działania przeciwko PMOP pozostaje w dużej mierze nieznany.

Homeostaza kości opiera się na równowadze między resorpcją kości przez osteoklasty a formowaniem kości przez osteoblasty20. Ta równowaga jest zakłócana, ponieważ różnicowanie i aktywność osteoklastów są wzmocnione w warunkach zapalnych, co prowadzi do przyspieszonej resorpcji kości21. W tym procesie, ścieżka NF-κB działa jako główny regulator. Czynniki zapalne, takie jak TNF-α i IL-1β, mogą wywołać fosforylację i degradację IκBα, co prowadzi do nuklearnej translokacji fosforylowanego p65 (p-P65)22. W konsekwencji, geny specyficzne dla osteoklastów, takie jak Ctsk, Mmp9 i Nfatc1, są aktywowane, aby promować osteoklastogeneszę23,24.

Farmakologia sieciowa to dziedzina interdyscyplinarna, która integruje informatykę, farmakologię i bioinformatykę25. Wykazuje ona wyraźne zalety w kompleksowym badaniu mechanizmów farmakologicznych leków ziołowych26. W niniejszym badaniu farmakologia sieciowa została zastosowana do przewidywania potencjalnych procesów biologicznych i szlaków sygnałowych zaangażowanych w działanie przeciw osteoporotyczne LWDHW. Równocześnie, składniki chemiczne LWDHW zostały przeanalizowane za pomocą LC-MS/MS. Ponadto, walidacja in vivo przy użyciu modelu mysiego OVX i eksperymenty in vitro z pierwotnymi makrofagami pochodzącymi z szpiku kostnego (BMMs) zostały przeprowadzone w celu dalszego zbadania mechanizmu farmakologicznego LWDHW przeciw PMOP. Schemat badania jest przedstawiony na Rysunku 1.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komitet Etykę dla Zwierząt Uniwersytetu Medycznego Zhejiang (IACUC-202402-07).

Przygotowanie i analiza LWDHW metodą LC-MS/MS

Formuła LWDHW składa się z sześciu chińskich ziół: Rehmannia glutinosa (Gaertn.), Cornus officinalis (Sieb.), Paeonia suffruticosa (Andr.), Dioscoreae opposite (Thunb.), Poria cocos (Schw.) i Alisma orientale (Sam.). Szczegółowe informacje na temat tych ziół są wymienione w Tabeli 1. Wszystkie surowce ziołowe dostarczył Pierwszy Szpital Uniwersytetu Medycznego Zhejiang (Hangzhou, Chiny) i były gotowane w oczyszczonej wodzie w proporcji zioło-woda 0,1 kg/L. Powstały wodny ekstrakt został przefiltrowany i skoncentrowany do roztworu roboczego o stężeniu 0,5 g/mL na potrzeby późniejszej analizy LC-MS/MS i eksperymentów na zwierzętach. Ponadto, roztwór roboczy został przetworzony na liofilizowany proszek do eksperymentów na komórkach.

W analizie LC-MS/MS warunki chromatografii cieczowej były następujące: faza ruchoma A (wodna) i faza ruchoma B (organiczna) składała się z 0,1% kwasu mrówkowego w wodzie i acetonitryl, odpowiednio, w trybie jonów dodatnich, lub 5 mM formianu amonu w wodzie i acetonitryl, odpowiednio, w trybie jonów ujemnych. Całkowity czas trwania wynosił 8 min, z prędkością przepływu 0,3 mL/min, temperaturą kolumny 40 °C i objętością wstrzyknięcia 2 µL. W spektrometrii mas wyniki były zbierane w trybie Full MS-ddMS2, przy ustawieniach napięcia rozpylania +3,50 kV (dodatnie) i –2,50 kV (ujemne).

Przewidywanie składników bioaktywnych i celów LWDHW

Indywidualne nazwy sześciu składników ziołowych zostały wprowadzone do bazy danych Tradycyjnej Farmakologii Systemu Medycyny Chińskiej (TCMSP) w celu uzyskania pełnej listy składników LWDHW. Następnie składniki bioaktywne były selekcjonowane na podstawie parametrów farmakokinetycznych, czyli biodostępności doustnej (OB) ≥ 30% i podobieństwa do leku (DL) ≥ 0,1827,28,29,30. Odpowiednie białka składników bioaktywnych zostały zidentyfikowane i przesłane do UniProt w celu odzyskania ich znormalizowanych nazw genów, które zostały zdefiniowane jako ostateczne cele genów LWDHW.

Nakładające się cele między LWDHW a PMOP

Cel genów związanych z PMOP zostały odzyskane przez wyszukanie słowa kluczowego "postmenopausal osteoporosis" w bazach GeneCards i DisGeNET 2 października 2024 r. Cele zostały przefiltrowane przy użyciu progów punktowych >0,1 w DisGeNET i >10 w GeneCards, a duplikaty zostały usunięte, aby uzyskać niepowtarzalny zestaw genów związanych z PMOP. Następnie, ziołowe cele LWDHW i cele związane z PMOP zostały zaimportowane do narzędzia online Venny, aby wygenerować diagram Venna przedstawiający nakładające się cele między LWDHW a PMOP.

Analiza obogazania w Gene Ontology (GO) i szlaku sygnałowym

Nakładające się cele między LWDHW a PMOP były poddawane analizie obogazania GO za pomocą bazy danych DAVID. Otrzymane terminy GO zostały sklasyfikowane w trzech kategoriach, w tym składnik komórkowy, funkcja molekularna i proces biologiczny (BP). Po przefiltrowaniu FDR < 0,01, top 30 BP zostało wymienione na diagramie bąbelkowym w malejącej kolejności stopnia obogazania.

Następnie, nakładające się cele zostały wprowadzone do bazy danych Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) i Metascape w celu analizy obogazania w szlakach sygnałowych. Obogacone szlaki z baz KEGG i Metascape zostały uporządkowane według liczby odpowiadających im celów w malejącej kolejności, a top 25 ścieżek z każdej bazy zostało wyświetlone jako wykresy słupkowe.

Budowa sieci

Sieci "Formuła-Zioła-Składniki-Cel-Choroba" i "Cel-Ścieżki" zostały zbudowane w Cytoscape w celu wizualizowania wzajemnych związków między komponentami. Sieć interakcji białko-białko (PPI) została wygenerowana poprzez wprowadzenie nakładających się celów do bazy danych STRING. Węzły centralne w sieci zostały zidentyfikowane poprzez przesiewowe na podstawie cech topologicznych, w tym centralności stopnia (DC), centralności międzyościenności (BC) i centralności bliskości (CC).

Grupowanie zwierząt, model osteoporozy indukowany przez OVX i interwencja lekowa

Łącznie 27 żeńskich myszy C57BL/6J (2 miesiące, waga 22 ± 2 g) zostało dostarczonych przez Centrum Eksperymentów na Zwierzętach Uniwersytetu Medycznego Zhejiang (Hangzhou, Zhejiang). Wszystkie zwierzęta były trzymane w warunkach wolnych od specyficznych patogenów (SPF) z cyklem 12 h światło/ciemność, temperaturą otoczenia utrzymywaną na poziomie 25 °C i wilgotnością pomiędzy 40% a 60%, z wolnym dostępem do żywności i wody. Po tygod

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Składniki chemiczne LWDHW analizowane metodą LC-MS/MS

Profil chemiczny wodnego roztworu LWDHW scharakteryzowano za pomocą analizy LC-MS/MS. Zidentyfikowano łącznie 1615 składników, w tym 968 wykrytych w trybie jonizacji dodatniej oraz 647 w trybie jonizacji ujemnej (Rysunek 2A). Szczegóły dotyczące 10 głównych składników dla każdego trybu jonizacji przedstawiono na Rysunku 2B,C.

<...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Wraz z starzeniem się populacji na świecie, PMOP stało się poważnym problemem zdrowotnym na całym świecie, dotyczącym co roku milionów kobiet36. Biorąc pod uwagę działania niepożądane związane z obecnie stosowanymi lekami przeciw osteoporozie, konieczne jest opracowanie bezpieczniejszych i skuteczniejszych strategii terapeutycznych. LWDHW jest klasyczną formułą tonującą nerki w TCM i służy jako alternatywna medycyna w leczeniu różnych chorób kości37,

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Wszyscy autorzy deklarują brak konfliktu interesów, finansowych lub niefinansowych.

Podziękowania

To dzieło zostało wspierane przez Fundację Nauk Przyrodniczych Prowincji Zhejiang (ZCLQN25H2701).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

```html
Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
0.01 M citrate bufferSolarbioC1010Do odbicia antygenów w sekcjach udowych w celu barwienia IHC i IF w krokuszu 10 protokołu
0.2 μm PVDF membranes BioRad1620177Do przenoszenia białek z SDS-PAGE na membranę w krokuszu 13 protokołu
12.5% polyacrylamide gelsEpizyme BiotechPG113Do separacji białek w SDS-PAGE w krokuszu 13 protokołu
ALP antibody ARIGOARG57422Do wykrywania IHC w sekcjach udowych w krokuszu 10 protokołu
Automatic Chemiluminescence Image Analysis System Tanon 5200Do wizualizacji pasków Western blot w krokuszu 13 protokołu
Axial-Torsion Fatigue Testing System Instronmodel 5569R1412Do testów biomechanicznych próbek udowych w krokuszu 9 protokołu
BCA Protein Assay KitBeyotimeP0010SDo liczenia białek przed Western blot w krokuszu 13 protokołu
CCK-8BeyotimeC0039Do pomiaru żywotności komórek BMMs w krokuszu 11 protokołu
CytoscapeNie dotyczyNie dotyczyWersja 3.8.0
Baza danych DAVIDNie dotyczyNie dotyczyWersja 6.8; https://david.ncifcrf.gov/home.jsp
Baza danych DisGeNETNie dotyczyNie dotyczyhttps://www.disgenet.org/
ECL Chemiluminescence Detection KitVazymeE411-04Do chemiluminescencyjnego wykrywania sygnałów Western blot w krokuszu 13 protokołu
ELISA kit of OCNMEIMIANMM-0551M1Do pomiaru stężenia osteokalcyny w surowicy w krokuszu 8 protokołu
ELISA kit of β-CTXMEIMIANMM-44858M1Do pomiaru stężenia β-CTX w surowicy w krokuszu 8 protokołu
Baza danych GeneCardsNie dotyczyNie dotyczyhttps://www.genecards.org/
Green Premix Ex Taq II FASTTakaraCN830ADo amplifikacji qRT-PCR w krokuszu 12 protokołu
Wysokorozdzielcze mikro-tomograficzne (μCT) sprzętBrukerSkyscan 1176Do wysokorozdzielczego μCT obrazowania mikrostruktury kości udowych w krokuszu 9 protokołu
IL-1β antibody BIOSSbs6319RDo wykrywania IHC w sekcjach udowych w krokuszu 10 protokołu
IκBαantibodyCST4812Do wykrywania Western blot w krokuszu 13 protokołu
Baza danych Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) Nie dotyczyNie dotyczyhttps://www.kegg.jp/
M-CSFAMIZONAAMK1001-S1Do indukowania różnicowania BMMs w krokuszu 11 protokołu
Baza danych MetascapeNie dotyczyNie dotyczyhttps://metascape.org/
Orbitrap Exploris 120 Thermo Fisher ScientificBRE725531Do analizy LC-MS/MS LWDHW w krokuszu 2 protokołu
P65 antibodyCST8242Do wykrywania Western blot w krokuszu 13 protokołu
p-IκBα antibodyCST2859Do wykrywania Western blot w krokuszu 13 protokołu
p-P65 antibodyCST3033SDo wykrywania Western blot w krokuszu 13 protokołu
p-P65 antibodySuzhou Ruiying RLP0187Do wykrywania IHC w sekcjach udowych w krokuszu 10 protokołu
PrimeScript RT Reagent Kit TakaraRR047ADo odwrotnej transkrypcji całkowitego RNA w BMMs do analizy qRT-PCR w krokuszu 12 protokołu
QuantStudio 5 systemApplied BiosystemsA28573Do analizy qRT-PCR markerów osteoklastów w krokuszu 12 protokołu
RANKLAMIZONAAMK1001-S1Do indukowania różnicowania BMMs w krokuszu 11 protokołu
RIPA lysis bufferEpizyme BiotechPC101Do ekstrakcji białek z BMMs w krokuszu 13 protokołu
RNA-Quick Purification Kit TransGen BiotechER501-01-V2Do ekstrakcji całkowitego RNA w BMMs w krokuszu 12 protokołu
Oprogramowanie SPSS IBMwersja 26Do analizy statystycznej danych eksperymentalnych w krokuszu 15 protokołu
Baza danych STRING Nie dotyczyNie dotyczyhttps://string-db.org/
Zestaw do barwienia tartratem odpornej kwasowej fosfatazy (TRAP)AMIZONAAMK1001-S1Do barwienia TRAP w celu identyfikacji i ilościowego pomiaru osteoklastów w krokuszu 14 protokołu
System UPLC Thermo VanquishThermo Fisher ScientificTSLC-002Do analizy LC-MS/MS LWDHW w krokuszu 2 protokołu
TNF-αantibodySuzhou Ruiying RLM3472Do wykrywania IHC w sekcjach udowych w krokuszu 10 protokołu
Baza danych Traditional Chinese Medicine System Pharmacology (TCMSP) Nie dotyczyNie dotyczyhttp://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php
Baza danych UniProt Nie dotyczyNie dotyczyhttps://www.uniprot.org/
Kolumna UPLCWatersACQUITY HSS T3Do analizy LC-MS/MS LWDHW w krokuszu 2 protokołu

Bibliografia

  1. Liang H, et al. Global epidemiology and burden of osteoporosis among postmenopausal women: insights from the Global Burden of Disease Study 2021. NPJ Aging. 2025;11(1):78.
  2. Yi YT, Zhao HF, Wang WZ, Li X. Osteosarcopenia: epidemiology, molecular mechanisms, and management. Front Endocrinol (Lausanne). 2025;16:1577758.
  3. Wang J, et al. The prevalence of osteoporosis in China, a community based cohort study of osteoporosis. Front Public Health. 2023;11:1084005.
  4. Peris P, et al. Effect of gender on the evolution of pain and quality of life after treatment of symptomatic vertebral fragility fractures. Osteoporos Int. 2024;35(3):515-21.
  5. McClung MR. Sequential and long-term therapy for osteoporosis. Curr Osteoporos Rep. 2025;23(1):15.
  6. Tamechika S, Ohmura S, Maeda S, Naniwa T. Efficacy of denosumab on bisphosphonate-treated osteoporosis and osteopenia in systemic rheumatic disease patients receiving glucocorticoids. J Bone Miner Metab. 2023;41(2):203-11.
  7. Fuggle N, et al. Parathyroid hormone receptor agonists in the management of osteoporosis. Nat Rev Rheumatol. 2025;21(10):599-611.
  8. Curtis JR, et al. Comparative effectiveness of denosumab vs alendronate among postmenopausal women with osteoporosis. J Bone Miner Res. 2024;39(7):826-34.
  9. Thomasius F, et al. Clinical practice guideline: the diagnosis and treatment of osteoporosis. Dtsch Arztebl Int. 2025;122(1):12-18.
  10. Tan M, Li Q, Yang B, Wang S, Chen Z. Insight of Chinese herbal medicine in treating osteoporosis: achievements from 2013 to 2023. Am J Chin Med. 2024;52(5):1303-28.
  11. Qiu Z, et al. Liuwei Dihuang Pills alleviate the polycystic ovary syndrome with improved insulin sensitivity through PI3K/Akt signaling pathway. J Ethnopharmacol. 2020;250:111965.
  12. Zheng W, Wang G, Zhang Z, Wang Z, Ma K. Research progress on classical traditional Chinese medicine formula Liuwei Dihuang pills in the treatment of type 2 diabetes. Biomed Pharmacother. 2020;121:109564.
  13. Song J, et al. Liuwei Dihuang improved cognitive functions in SAMP8 mice by inhibiting COX-2 expression and subsequent neuroinflammation. J Ethnopharmacol. 2022;296:115491.
  14. Wang H, et al. Liu Wei Di Huang Decoction alleviates renal fibrosis by inhibiting endothelial mesenchymal transitions via upregulating Sirt1 expression and inhibiting the Wnt/β-catenin signaling pathway. Drug Des Devel Ther. 2025;19:6587-603.
  15. Zhou Z, et al. Transcriptional sequencing analysis reveals the potential use of deer antler for "tonifying the kidney and strengthening bone". J Orthop Surg Res. 2022;17(1):419.
  16. Liu Y, et al. Liuwei Dihuang Decoction for primary osteoporosis: a protocol for a systematic review and meta-analysis. Medicine (Baltimore). 2019;98(16):e15282.
  17. Long Z, et al. Research on the mechanism of Liuwei Dihuang Decoction for osteoporosis based on systematic biological strategies. Evid Based Complement Alternat Med. 2022;2022:7017610.
  18. Liu B, et al. Liuwei Dihuang Decoction alleviates cognitive dysfunction in mice with D-galactose-induced aging by regulating lipid metabolism and oxidative stress via the microbiota-gut-brain axis. Front Neurosci. 2022;16:949298.
  19. Perry B, Zhang J, Saleh T, Wang Y. Liuwei Dihuang, a traditional Chinese herbal formula, suppresses chronic inflammation and oxidative stress in obese rats. J Integr Med. 2014;12(5):447-54.
  20. Wang L, You X, Zhang L, Zhang C, Zou W. Mechanical regulation of bone remodeling. Bone Res. 2022;10(1):16.
  21. Luo J, et al. Oxidative stress and inflammation: roles in osteoporosis. Front Immunol. 2025;16:1611932.
  22. Jing R, et al. Toll-like receptor 7 promotes periodontal inflammation and alveolar bone resorption through the NF-κB signaling pathway. J Periodontal Res. 2025;60(8):823-34.
  23. Tao H, et al. Urolithin A suppresses RANKL-induced osteoclastogenesis and postmenopausal osteoporosis by suppressing inflammation and downstream NF-κB-activated pyroptosis pathways. Pharmacol Res. 2021;174:105967.
  24. Xue C, et al. Aconine attenuates osteoclast-mediated bone resorption and ferroptosis to improve osteoporosis via inhibiting NF-κB signaling. Front Endocrinol (Lausanne). 2023;14:1234563.
  25. Zhang P, et al. Network pharmacology: towards the artificial intelligence-based precision traditional Chinese medicine. Brief Bioinform. 2023;25(1).
  26. Zhao L, et al. Network pharmacology, a promising approach to reveal the pharmacology mechanism of Chinese medicine formula. J Ethnopharmacol. 2023;309:116306.
  27. Xia C, Zhu H, Li J, Jin H, Fu D. Network pharmacology-based mechanism prediction and pharmacological validation of Bushenhuoxue formula attenuating postmenopausal osteoporosis in ovariectomized mice. J Orthop Surg Res. 2023;18(1):200.
  28. Gu Y, et al. Exploring the efficacious constituents and underlying mechanisms of Sini Decoction for sepsis treatment through network pharmacology and multi-omics. Phytomedicine. 2024;123:155212.
  29. Tian M, Wang K, Chen D. Efficacy and mechanisms of Xiangsha Liujunzi Decoction for gastroesophageal reflux disease: a study integrating meta-analysis, network pharmacology and molecular docking. Phytomedicine. 2026;151:157766.
  30. Ma Y, et al. Multi-omics and experimental validation reveal the mechanism of Danxia Tiaoban Decoction in treating atherosclerosis. Phytomedicine. 2025;147:157216.
  31. Xia C, et al. β-catenin inhibition disrupts the homeostasis of osteogenic/adipogenic differentiation leading to the development of glucocorticoid-induced osteonecrosis of the femoral head. Elife. 2024;12.
  32. He Q, et al. Amlexanox enforces osteogenic differentiation and bone homeostasis through inhibiting ubiquitin-dependent degradation of β-catenin. Int J Biol Sci. 2024;20(13):5254-71.
  33. Feng X, et al. CX3CL1 promotes M1 macrophage polarization and osteoclast differentiation through NF-κB signaling pathway in ankylosing spondylitis in vitro. J Transl Med. 2023;21(1):573.
  34. Wang X, et al. Isoliquiritigenin alleviates periodontitis by suppressing inflammation via NF-κB signaling pathway of immune cell. J Inflamm Res. 2025;18:6133-48.
  35. Guo Q, et al. NF-κB in biology and targeted therapy: new insights and translational implications. Signal Transduct Target Ther. 2024;9(1):53.
  36. Walker MD, Shane E. Postmenopausal osteoporosis. N Engl J Med. 2023;389(21):1979-91.
  37. Liang B, et al. Liuwei Dihuang pills attenuate ovariectomy-induced bone loss by alleviating bone marrow mesenchymal stem cell senescence via the Yes-associated protein-autophagy axis. Pharm Biol. 2024;62(1):42-52.
  38. Liu MM, et al. Therapeutic potential of Liuwei Dihuang pill against KDM7A and Wnt/β-catenin signaling pathway in diabetic nephropathy-related osteoporosis. Biosci Rep. 2020;40(9).
  39. Xie Y, et al. Clinical practice guideline for postmenopausal osteoporosis with traditional Chinese medicine. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2021;46(22):5992-8.
  40. Li YQ, et al. Astragaloside IV modulates oxidative stress and osteoimmune-Wnt signaling in ovariectomized rats: an integrated study of RNA sequencing, molecular docking, and experimental validation. Front Nutr. 2026;13:1785452.
  41. Zhao J, et al. Yishen Qianggu Mixture formulation suppresses osteometabolic inflammation by modulating the IL-17/NF-κB/MAPK signaling axis. J Ethnopharmacol. 2026;358:121011.
  42. Chen C, et al. Hydrolyzed egg yolk peptide prevented osteoporosis by regulating Wnt/β-catenin signaling pathway in ovariectomized rats. Sci Rep. 2024;14(1):10227.
  43. Yang Y, et al. Nrf2 mitigates RANKL and M-CSF induced osteoclast differentiation via ROS-dependent mechanisms. Antioxidants (Basel). 2023;12(12).
  44. Wang Y, et al. Xian Huang Fang inhibits the PKCδ/MAPK signaling pathway to attenuate renal tubular epithelial cell senescence and thereby delay renal interstitial fibrosis. Drug Des Devel Ther. 2025;19:6991-7004.
  45. Niu MY, et al. Fanlian Huazhuo Formula alleviates high-fat diet-induced non-alcoholic fatty liver disease by modulating autophagy and lipid synthesis signaling pathway. World J Gastroenterol. 2024;30(30):3584-608.
  46. Huang G, et al. Artemisia capillaris Thunb. water extract attenuates adriamycin-induced renal injury by regulating apoptosis through the ROS/MAPK axis. J Food Biochem. 2022;46(2):e14065.
  47. Zhao J, et al. Liuwei Dihuang Pills enhance osteogenic differentiation in MC3T3-E1 cells through the activation of the Wnt/β-catenin signaling pathway. Pharmaceuticals (Basel). 2024;17(1).
  48. Zhang X, Xu D, Zhang R, Wang H, Yang G. Interaction between diabetes and osteoporosis: imbalance between inflammation and bone remodeling. Osteoporos Int. 2025;36(12):2401-9.
  49. Zhao W, et al. Osteoclast activation and inflammatory bone diseases: focusing on receptors in osteoclasts. J Inflamm Res. 2025;18:3201-13.
  50. Zeng J, et al. Comparison of donepezil, memantine, melatonin, and Liuwei Dihuang Decoction on behavioral and immune endocrine responses of aged senescence-accelerated mouse resistant 1 mice. Front Pharmacol. 2020;11:350.
  51. Wu Y, et al. Effect of Bifidobacterium on osteoclasts: TNF-α/NF-κB inflammatory signal pathway-mediated mechanism. Front Endocrinol (Lausanne). 2023;14:1109296.
  52. Zulfiqar Z, et al. Zn glycine attenuates LPS-induced inflammatory bone loss in geese through suppression of osteoclastogenesis via reducing TLR-4/NFκB signaling. Ecotoxicol Environ Saf. 2026;309:119655.
  53. Kingeter LM, Lin X. C-type lectin receptor-induced NF-κB activation in innate immune and inflammatory responses. Cell Mol Immunol. 2012;9(2):105-12.
  54. Zhao Y, et al. Trimethylamine-N-oxide promotes osteoclast differentiation and oxidative stress by activating NF-κB pathway. Aging (Albany NY). 2024;16(10):9251-63.
  55. Zhang Q, et al. Activation of Nrf2/HO-1 signaling: an important molecular mechanism of herbal medicine in the treatment of atherosclerosis via the protection of vascular endothelial cells from oxidative stress. J Adv Res. 2021;34:43-63.
  56. Tseng YT, Chang FR, Lo YC. The Chinese herbal formula Liuwei Dihuang protects dopaminergic neurons against Parkinson's toxin through enhancing antioxidative defense and preventing apoptotic death. Phytomedicine. 2014;21(5):724-33.
  57. Xu Y, et al. Pharmacology-based molecular docking of 4-methylcatechol and its role in RANKL-mediated ROS/Keap1/Nrf2 signalling axis and osteoclastogenesis. Biomed Pharmacother. 2023;159:114101.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

BiologiaNumer 233Osteoporoza pomenopauzalnaSzlak sygnalizacyjny NF-κBstan zapalny
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.