Identyfikacja gryzoni II
Źródło: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Uniwersytet Notre Dame, IN
Rejestry zwierząt muszą być dokładnie prowadzone,…
1. Tatuaż na ogonie
Tatuaże na ogonie są łatwe do odczytania bez konieczności zajmowania się zwierzęciem.
Rysunek 1. Tatuowanie ogona na dorosłych myszach
- Przygotuj sprzęt do tatuażu zgodnie z instrukcjami producenta. Wymagana jest niewielka ilość atramentu. Czarny barwnik powinien być używany dla myszy lub szczurów albinosów, a zielony barwnik dla pigmentowanych myszy lub szczurów.
- Przygotuj zwierzęta do identyfikacji.
UWAGA: Aby zminimalizować niepokój lub niepokój, tatuowanie ogona powinno być wykonywane w sali zabiegowej, a nie w pomieszczeniach dla zwierząt.- Odpowiednio przytrzymuj zwierzę do tatuowania, aby ruch był minimalny.
- Szczury odsadzone od piersi są krępowane za pomocą plastikowego kubka z karbem, przy czym krawędź kubka jest zabezpieczona pod śrubami na platformie do tatuażu, a ogon wystaje przez wcięcie.
- Dorosłe myszy można przytrzymywać za pomocą ogranicznika kubka, z ogonem napiętym z otworu i kołnierzem kubka utrzymywanym na miejscu za pomocą platformy lub innego urządzenia.
- Oczyść ogon niewielką ilością rozcieńczonego środka do czyszczenia tkanek nałożonego wacikiem z bawełnianą końcówką. Dorosłe szczury zazwyczaj mają nagromadzoną łuskę i zanieczyszczenia na ogonie, które należy oczyścić przed wykonaniem tatuażu. Szorowanie ogona mydłem i wodą usunie większość brudu i zanieczyszczeń. Dobrze wysusz ogon przed kontynuowaniem.
- Nałóż olej tkankowy na skórę za pomocą wacika z bawełnianą końcówką tuż przed wykonaniem tatuażu. Olej tkankowy jest niezbędny, aby zminimalizować uszkodzenia tkanek poprzez zmiękczenie skóry i nasmarowanie igły do tatuażu. Ponadto olejek rozpuszcza wszelkie zabrudzenia, które nie zostały usunięte w procesie czyszczenia i zapobiega plamom atramentu na skórze niewytatuowanej.
- Wykonaj tatuaż.
- Zanurz końcówkę igły w pigmentie przy wyłączonej maszynie.
- Przyłóż końcówkę igły do miejsca tatuażu za pomocą pistoletu aktywowanego pedałem nożnym.
- Wykonuj krótkie, równe pociągnięcia w jednym kierunku. Cyfry i litery powinny być tatuowane w taki sposób, aby były zbudowane w segmentach o minimalnych kątach i krzywiznach (jeśli to możliwe).
- Wniknij wystarczająco głęboko w skórę właściwą za pomocą igły, aby uzyskać trwałe osadzenie pigmentu. Zmiana dźwięku aktywowanej igły może pomóc w rozpoznaniu głębokości.
- Zbliżyć się do skóry z igłą pod kątem 90o, aby uzyskać odpowiednie osadzenie pigmentu.
- Oczyszczanie i pielęgnacja po tatuażu
- Osusz (nie wycieraj) gotowy tatuaż z nadmiaru pigmentu ręcznikiem papierowym.
- Obecność krwi na tatuażu lub ręczniku papierowym wskazuje, że tatuaż został wykonany zbyt głęboko, a zatem jest mało prawdopodobne, aby był trwały.
- Wzmocnij cienkie obszary tatuażu za pomocą dodatkowego pigmentu. Znaki są wzmacniane pigmentem osadzonym równolegle do już osadzonego pigmentu, ale nie na nim.
- Aby dodać dodatkowy pigment, zanurz końcówkę igły w zbiorniku barwnika na każde dwa znaki w przypadku myszy i każdy jeden znak w przypadku szczurów.
- Przyczyny blaknięcia tatuaży to niewystarczająca ilość pigmentu, tatuaże wykonane zbyt płytko, tatuaże wykonane zbyt głęboko, nieodpowiedni kąt nachylenia igły do skóry, używanie tępych lub haczykowatych igieł lub zbyt szybkie wykonanie tatuażu.
- Dokładnie wyczyść sprzęt do tatuażu po każdym użyciu zgodnie z instrukcjami producenta.
2. Tatuowanie palców u noworodków
Protokoły eksperymentalne mogą wymagać genotypowania noworodków już pierwszego dnia, co sprawia, że niezbędne jest, aby młode te zostały trwale zidentyfikowane. Stosowanie tatuowania palców u nóg pozwala na identyfikację zwierząt, dopóki nie osiągną one wystarczającej wielkości, aby można było im kolczyć uszy lub uderzać w uszy.
Rysunek 2. Właściwa technika powściągliwości przy tatuowaniu nowonarodzonej myszy. Lancet ma zielony barwnik na końcówce.
- Unieruchomić młode przed odsadzeniem.
- Umieść noworodka w dłoni na gaziku. Umieść stopę między kciukiem a zgięciem palca wskazującego, aby odsłonić wybrany palec lub palce u nóg do tatuowania.
- Trzymaj stopę blisko palców, tak aby palec miał za sobą solidną powierzchnię, zapobiegającą jej zginaniu się.
- Nie skręcaj nadmiernie nogi podczas ustawiania stopy. Szczenięta, które są skrępowane, mogą się poruszać, ale niekoniecznie słychać wokalizację.
- Przygotuj sprzęt.
- Wybierz lancet nawłoci o średnicy 4,5 mm.
- Umieść małą plamkę zielonej pasty do tatuażu na nieporowatej powierzchni; Dobrze sprawdza się folia aluminiowa.
- Zanurz tylko czubek lancetu w paście do tatuażu.
- Używaj tylko niewielkiej ilości pasty.
- Wykonaj tatuaż.
- Szturchnij żądany palec u nogi lancetem nawłoci zgodnie z kodem identyfikacyjnym.
- Nakłuj skórę, aby wprowadzić pastę w skórę, pozostawiając ślad.
- Szturchnij to samo miejsce trzy razy, aby zapewnić odpowiednią penetrację.
- Unikaj szturchania tak głęboko, że palec u nogi krwawi; Może to spowodować słabszy tatuaż.
- Oczyszczanie i pielęgnacja po tatuażu
- Delikatnie osusz miejsce chłonną chusteczką/ręcznikiem, aby usunąć nadmiar pasty.
- Nie próbuj usuwać nadmiaru pasty ze stopy lub ciała.
- Umieść zwierzę z powrotem w klatce.
- Kiedy tatuowane są szczenięta karmione, zaleca się również wytatuowanie matki. Może to zapobiec nadmiernej reakcji na pastę na szczeniętach, co może prowadzić do nadmiernej pielęgnacji tatuażu.
- Użyj nowego lancetu dla każdego miotu.
- Tatuaże powinny zostać zweryfikowane następnego dnia po zabiegu. Powtórz tatuaż, jeśli kropki są słabe lub niewidoczne. Jeśli kropki są widoczne następnego dnia po wykonaniu tatuażu, powinny pozostać widoczne przez całe życie zwierzęcia.
3. Tatuowanie palców u dorosłych szczurów i myszy
Kiedy tatuowany jest miot noworodków, sugeruje się, aby matka również została wytatuowana, aby pasta na jej szczeniętach nie była jej obca.
- Unieruchomienie zwierzęcia.
- Unieruchomić zwierzę za pomocą plastikowego stożka lub krępującego z pleksiglasu, który umożliwia dostęp do tylnych łap.
- Wysunąć stopę z urządzenia przytrzymującego.
- Umieść stopę między kciukiem a zgięciem palca wskazującego, aby odsłonić wybrany palec lub palce u nóg do tatuowania
- Trzymaj stopę blisko palców, tak aby palec miał za sobą solidną powierzchnię, zapobiegającą zginaniu się palca.
- Nie skręcaj nadmiernie nogi podczas ustawiania stopy. Dorośli, którzy są skrępowani, mogą próbować wycofać stopę.
- Przygotuj sprzęt.
- Wybierz lancet dla zwierząt nawłoci o średnicy 5 mm.
- Umieść małą plamkę zielonej pasty do tatuażu na nieporowatej powierzchni; Dobrze sprawdza się folia aluminiowa.
- Zanurz tylko czubek lancetu w paście do tatuażu.
- Używaj tylko niewielkiej ilości pasty.
- Wykonaj tatuaż.
- Szturchnij żądany palec u nogi lancetem nawłoci zgodnie z kodem identyfikacyjnym.
- Nakłuj skórę, aby wprowadzić pastę w skórę, pozostawiając ślad.
- Szturchnij to samo miejsce trzy razy, aby zapewnić odpowiednią penetrację.
- Unikaj szturchania tak głęboko, że palec u nogi krwawi; Może to spowodować słabszy tatuaż.
- Oczyszczanie i pielęgnacja po tatuażu
- Delikatnie osusz miejsce chłonną chusteczką/ręcznikiem, aby usunąć nadmiar pasty.
- Nie próbuj usuwać nadmiaru pasty ze stopy lub ciała.
- Umieść zwierzę z powrotem w klatce.
- Użyj nowego lancetu dla każdego zwierzęcia.
- Tatuaże powinny zostać zweryfikowane następnego dnia po zabiegu. Powtórz tatuaż, jeśli kropki są słabe lub niewidoczne. Jeśli kropki są widoczne następnego dnia po wykonaniu tatuażu, powinny pozostać widoczne przez całe życie zwierzęcia.
4. Mikroczipowanie
Wszczepienie chipa RFID jest powszechnie stosowaną metodą identyfikacji zwierząt.
- Załaduj mikroczip do aplikatora lub wybierz fabrycznie załadowaną strzykawkę.
- Unieruchomić zwierzę za pomocą rurki przytrzymującej z pleksiglasu, która umożliwia chwytanie skóry przez ramiona.
- Rozłóż skórę, tworząc kieszeń.
- Umieść igłę przez skórę, skośnie do góry i równolegle do kręgosłupa i skieruj ją w stronę ogona.
- Wysuń mikroczip podskórnie.
- Wyjąć igłę i ścisnąć skórę w miejscu wstrzyknięcia. Zapobiega to wychodzeniu mikroczipa z igły ze skóry. Kontynuuj wywieranie nacisku, aby zapewnić hemostazę w przypadku krwawienia ze skóry.
- Wyjmij zwierzę z urządzenia przytrzymującego i zeskanuj chip, aby potwierdzić kod identyfikacyjny.
Rysunek 3. Umieszczenie mikroczipa u dorosłych szczurów.
5. Tymczasowa identyfikacja dla myszy
Nietoksyczne barwniki i markery zwierzęce mogą być używane do tymczasowej identyfikacji myszy.
- Unieruchomić mysz tak, aby obszar między łopatkami był dostępny dla oznaczeń na futrze.
- Umieść marker, plamę lub smugę barwnika na futrze w tym obszarze. Ten obszar służy do zapobiegania usuwaniu przez zwierzę oznaczenia podczas pielęgnacji.
- Sprawdzaj oznaczenie okresowo, jeśli używasz go jako jedynego identyfikatora przez więcej niż kilka dni.
- Ogon może być również używany przez krótki czas. Zwierzę może jednak usunąć z niego ślad podczas pielęgnacji.
6. Tymczasowa identyfikacja szczurów
- Unieruchomić szczura tak, aby obszar do nałożenia barwnika lub markera był łatwo dostępny. W niektórych przypadkach, gdy potrzebny jest tylko pasek lub kropka, zwierzę nie będzie musiało być krępowane, ale będzie mogło swobodnie poruszać się w klatce.
- Powszechnie stosuje się ręczne ograniczanie poprzez chwytanie ogona i utrzymywanie go napiętego podczas stosowania identyfikacji.
- Tymczasowe unieruchomienie za pomocą wziewnych środków znieczulających można wykonać w przypadku zwierząt krnąbrnych.
- Sprawdzaj oznaczenie okresowo, jeśli używasz tej metody jako jedynego identyfikatora przez więcej niż kilka dni.
Zaloguj się lub , aby uzyskać dostęp do pełnej treści. Dowiedz się więcej o dostępie Twojej instytucji do treści JoVE tutaj
Zdolność do identyfikacji poszczególnych zwierząt badawczych jest istotnym aspektem prowadzenia dokumentacji naukowej i gromadzenia danych. Rozróżnienie zwierząt gwarantuje, że do zamierzonej procedury eksperymentalnej wykorzystany zostanie właściwy obiekt.
Istnieje kilka stałych i tymczasowych metod, których naukowcy używają do identyfikacji poszczególnych zwierząt laboratoryjnych. W tym filmie omówimy metody tatuowania ogona dorosłego gryzonia, noworodków u nóg i palców u nóg dorosłych. Następnie zajmiemy się techniką umieszczania mikroczipów powszechnie stosowaną u dorosłych szczurów, a następnie uniwersalną metodą tymczasowej identyfikacji, która wykorzystuje nietoksyczne barwniki.
Zanim zagłębimy się w protokoły tych metod, przyjrzyjmy się rozważaniom, korzyściom i wadom każdej z tych technik. Tatuowanie ogona jest korzystne w wielu protokołach badawczych, takich jak eksperymenty obejmujące obrazowanie MRI lub te, w których zwierzęta są genetycznie predysponowane do chorób skóry, w tym wrzodziejącego zapalenia skóry. Kolejną zaletą tatuaży na ogonie jest to, że można je łatwo zwizualizować bez konieczności ręcznego krępowania zwierzęcia.
Niektóre protokoły eksperymentalne wymagają genotypowania noworodków już pierwszego dnia, co sprawia, że konieczne jest, aby te młode zostały trwale zidentyfikowane. Stosowanie tatuażu u nóg pozwala na identyfikację takich zwierząt, dopóki nie osiągną one wystarczającej wielkości do kolczykowania uszu lub uderzania w uszy. Dobrym pomysłem jest wykonanie podobnego tatuażu u nogi dorosłej matki, aby zapobiec nadmiernej reakcji i nadmiernej pielęgnacji nowego tatuażu jej szczeniaka. Chociaż korzystanie z tej metody ma kilka zalet, wadą jest to, że procedura wymaga umiejętności, praktyki, pewnej ręki i specjalistycznego sprzętu.
Kolejną rozważaną metodą trwałej identyfikacji jest mikroczipowanie. Chociaż wszczepianie mikroczipów jest stosunkowo łatwym procesem, istnieje kilka czynników, które ograniczają jego użyteczność. Po pierwsze, chipsy te są w przybliżeniu wielkości dużego ziarna ryżu i wymagają igły o rozmiarze 10-12 do implantacji, która jest zbyt duża dla myszy, ograniczając w ten sposób metodę do dorosłych szczurów. Po drugie, mikroczipy są drogie i dlatego nie nadają się idealnie do identyfikacji dużej liczby zwierząt. Wreszcie, mikroczipy nie mogą być używane w eksperymentach z wykorzystaniem rezonansu magnetycznego. Jeśli jednak istnieje grupa cennych zwierząt, takich jak zwierzęta hodowlane o unikalnej genetyce, która musi zostać trwale zidentyfikowana, można zastosować mikroczipy.
Ostatnią metodą, którą omówimy, jest tymczasowa identyfikacja za pomocą nietoksycznych markerów. Nietoksyczne markery przeznaczone są do barwienia futra zwierząt badawczych. Ta metoda jest idealna do badań krótkoterminowych, które wymagają identyfikacji zwierząt tylko przez kilka godzin lub dni, chociaż barwniki mogą pozostać widoczne przez kilka tygodni. Niektórzy badacze używają tych markerów w połączeniu z innymi metodami identyfikacji, aby łatwo dostrzec określone zwierzęta w grupie.
Teraz, gdy omówiliśmy już tło, nauczmy się procedur, zaczynając od tatuowania ogona. Tutaj zademonstrujemy procedurę na dorosłych myszach, ale to samo można zastosować do szczurów odsadzonych od piersi i dorosłych.
Aby zminimalizować niepokój lub niepokój zwierząt, tatuowanie ogona powinno być wykonywane w sali zabiegowej, a nie w pomieszczeniach dla zwierząt. Przed wykonaniem tatuażu należy unieruchomić mysz za pomocą ogranicznika do kubka, tak aby ogon był napięty od otworu. Kołnierz kubka jest utrzymywany na miejscu za pomocą specjalistycznej szklanej platformy. Następnie wyczyść ogon niewielką ilością rozcieńczonego środka do czyszczenia tkanek na waciku z bawełnianą końcówką. Ten krok jest ważny, aby usunąć wszelkie nagromadzone kamienie i zanieczyszczenia, które mogą zakłócać działanie tatuażu. Następnie nałóż olej tkankowy na skórę ogona za pomocą innego wacika. Minimalizuje to uszkodzenia tkanek poprzez zmiękczenie skóry i zapewnienie smarowania igły do tatuażu. Ponadto olejek rozpuszcza brudy, które nie zostały usunięte w procesie czyszczenia i zapobiega plamom tuszu na skórze niewytatuowanej. Teraz jesteś gotowy do wykonania tatuażu.
Gdy maszyna jest wyłączona, zanurz końcówkę igły do tatuażu, która jest lancetem lub igłą podskórną, w pigmentie. Następnie aktywuj pistolet za pomocą pedału nożnego, umieść narzędzie do tatuażu na ogonie i przyłóż końcówkę igły do miejsca tatuażu. Zbliżyć się do skóry z igłą w wieku 90 lat? kąt i wnikać wystarczająco głęboko w skórę właściwą, aby pigment został trwale osadzony. Zmiana dźwięku aktywowanej igły może pomóc w rozpoznaniu głębokości. Wykonuj krótkie, równe pociągnięcia w jednym kierunku, tworząc cyfry i litery. Staraj się używać minimalnych krzywizn i kątów podczas wykonywania tatuażu.
Aby dodać dodatkowy pigment, zanurz końcówkę igły w zbiorniku barwnika dla każdego jednego-dwóch znaków dla myszy i każdego jednego znaku dla szczurów. Zetrzyj wykonany tatuaż ręcznikiem papierowym, aby usunąć nadmiar pigmentu. Obecność krwi na tatuażu lub ręczniku papierowym wskazuje, że tatuaż został wykonany zbyt głęboko, a zatem jest mało prawdopodobne, aby był trwały. Wzmocnij cienkie znaki dodatkowym pigmentem, umieszczając igłę równolegle do już osadzonego pigmentu, a nie na nim. Dokładnie wyczyść sprzęt do tatuażu po każdym użyciu, a między klatkami należy użyć nowej lub wysterylizowanej igły i świeżego zapasu tuszu, aby zapobiec przenoszeniu chorób.
Następnie dowiemy się, jak wykonywać tatuaże na palcach u noworodków i dorosłych. Tutaj zademonstrujemy procedurę na myszach, ale te same kroki mają zastosowanie do szczurów.
Noworodki są tatuowane na palcach u stóp, ponieważ kości ogonowe nie są skostniałe, a długość ogona jest zbyt mała. Również w miarę wzrostu ogona skóra będzie się rozciągać, a liczby mogą stać się zniekształcone, słabe i nieczytelne. Zacznij od umieszczenia plamy zielonej pasty do tatuażu na nieporowatej powierzchni, takiej jak folia aluminiowa. Następnie chwyć odsadzonego szczeniaka w dłoń za pomocą gazika. Umieść stopę między kciukiem a zgięciem palca wskazującego, aby odsłonić wybrane palce u nóg do tatuowania. Trzymaj stopę blisko palców, tak aby wybrany palec u nogi miał za sobą solidną powierzchnię, aby zapobiec jego zginaniu się.
Teraz zanurz końcówkę lancetu o średnicy 4,5 mm w paście do tatuażu. Następnie szturchnij żądany palec u nogi zgodnie z wcześniej ustalonym kodem. Aby zapewnić prawidłowe przenikanie, szturchnij to samo miejsce trzy razy. Wniknij w skórę na tyle, aby pasta pozostawiła ślad, ale unikaj szturchania tak głęboko, aby palec u nogi krwawił. Delikatnie osusz nowy tatuaż gazą, aby usunąć nadmiar pasty do tatuażu i włóż zwierzę z powrotem do klatki. Użyj nowego lancetu do następnego miotu. Dzień po zabiegu sprawdź, czy tatuaż jest widoczny.
Kiedy tatuowane są szczenięta karmione, zaleca się również wytatuowanie matki. Może to zapobiec przesadnym reakcjom i nadmiernej pielęgnacji tatuaży swojego szczeniaka. Aby wykonać tatuaż na palcu u nogi u osoby dorosłej, najpierw umieść małą plamkę zielonej pasty do tatuażu na folii aluminiowej. Następnie unieruchomij zwierzę za pomocą plastikowego stożka lub krępującego z pleksiglasu, który umożliwia dostęp do tylnych łap. Wysuń stopę z urządzenia przytrzymującego i umieść stopę między kciukiem a zgięciem palca wskazującego, aby odsłonić wybrane palce u nóg do tatuowania.
Teraz zanurz końcówkę lancetu o średnicy 5 mm w paście do tatuażu. I, tak jak poprzednio, wykonaj tatuaż, nakłuwając i nakłuwając skórę pożądanego palca u nogi co najmniej trzy razy, aby zapewnić odpowiednią penetrację. Następnie delikatnie osusz tatuaż, aby usunąć nadmiar pasty i włóż zwierzę z powrotem do klatki. Podobnie jak w przypadku noworodków, tatuaż należy wykonać dzień po zabiegu. Jeśli znamię jest widoczne następnego dnia po wykonaniu tatuażu, powinno pozostać widoczne przez całe życie zwierzęcia. Jeśli jest słaby lub niewidoczny, należy ponownie wykonać tatuaż zgodnie z wcześniejszym opisem.
Następna metoda identyfikacji, którą omówimy, polega na wszczepianiu gryzoniom mikroczipów. Chipem powszechnie używanym do etykietowania zwierząt laboratoryjnych jest chip identyfikacji radiowej (RFID). Zazwyczaj chip jest wstępnie załadowany w igły, które można następnie umieścić w aplikatorze. Do wprowadzenia chipa użyj rurki z pleksi, aby przytrzymać zwierzę, upewniając się, że nadal możesz chwycić skórę przez ramiona. Najpierw rozłóż skórę, aby utworzyć kieszeń. Następnie umieść igłę przez skórę, skośnie do góry, równolegle do kręgosłupa i skieruj w stronę ogona. Wysunąć mikroczip podskórnie i wyjąć igłę. Ścisnąć skórę w miejscu wstrzyknięcia, aby zapobiec wydostawaniu się wióra z igły poza skórę. Kontynuuj wywieranie nacisku, aby zapewnić hemostazę w przypadku krwawienia ze skóry. Wyjąć zwierzę z urządzenia przytrzymującego i zeskanować chip za pomocą czytnika dostarczonego przez producenta, aby potwierdzić kod identyfikacyjny.
Na koniec dowiedzmy się, jak nakładać tymczasowe barwniki na gryzonie w celu identyfikacji. Zacznijmy od myszy. Po pierwsze, unieruchomić zwierzę w taki sposób, aby obszar między łopatkami był dostępny. Ta część ciała jest bezpieczna przed samodzielną pielęgnacją. Umieść plamę lub smugę barwnika na futrze w tym obszarze i umieść zwierzę z powrotem w klatce.
W przypadku szczurów należy przytrzymać zwierzę ręcznie, chwytając za ogon i trzymając go napiętym. Dzięki temu obszar do nakładania barwnika jest łatwo dostępny, może to być głowa, ramiona lub zad. Umieść plamę lub smugę barwnika na futrze. Czasami możliwe jest nałożenie nietoksycznego barwnika bez krępowania zwierzęcia. Od czasu do czasu sprawdzaj oznaczenia na tych zwierzętach, zwłaszcza jeśli używasz ich jako jedynego identyfikatora przez więcej niż kilka dni.
Teraz, gdy dokonaliśmy przeglądu procedur tych różnych metod identyfikacji, zobaczmy, jak naukowcy wykorzystują je obecnie w różnych badaniach naukowych.
Wykorzystanie gryzoni w eksperymentach behawioralnych jest dość powszechne. W tym przypadku naukowcy wykorzystali tatuaż na ogonie, aby oznaczyć zwierzęta na stałe, a następnie obserwowali je przez kilka dni w sztucznie skonstruowanym środowisku domowej klatki. Zebrane dane ujawniły różnice w zachowaniach, takich jak przebyta odległość, między zwierzętami kontrolnymi a eksperymentalnymi, w ciągu 10 dni po operacji.
W innym eksperymencie behawioralnym badacze wykonali tatuaż u nóg u noworodków i umieścili je w pudełku z nagraniami ze specjalnymi mikrofonami do nagrywania wokalizacji ultradźwiękowych. Celem tego eksperymentu było przyjrzenie się różnicom w częstotliwości połączeń, czyli liczbie wokalizacji na minutę, u myszy typu dzikiego i myszy z niedoborem Shank2 - model autyzmu - w ciągu 12-dniowego okresu noworodkowego i wieku dorosłego.
Wreszcie, jak wspomniano wcześniej, użycie nietoksycznego barwnika jest skutecznym sposobem oznaczania zwierząt do krótkoterminowych eksperymentów. W tym przypadku naukowcy byli zainteresowani przejściową ekspresją białka osocza. Oznaczyli więc zwierzęta tymczasowymi markerami, wstrzyknęli plazmidowe DNA dożylnie i pobrali próbkę krwi dwa dni później, aby określić ekspresję białka za pomocą techniki western blot.
Właśnie obejrzałeś wprowadzenie JoVE do tatuowania, umieszczania mikroczipów i tymczasowych metod identyfikacji myszy laboratoryjnych i szczurów. Identyfikacja zwierząt jest podstawowym elementem prowadzenia dokumentacji w badaniach naukowych. Dlatego przy wyborze odpowiedniej metody identyfikacji należy wziąć pod uwagę wiele czynników. Obejmuje to poziom dyskomfortu zwierzęcia, łatwość techniki, potrzeby eksperymentalne i wreszcie koszt związany z metodą. Jak zawsze, dziękujemy za oglądanie!
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Q1: Why is individual animal identification important in laboratory research?
Individual identification ensures accurate scientific recordkeeping and correct data collection. Distinguishing between animals guarantees that the correct subject is used for the intended experimental procedure, which is essential for maintaining research integrity and preventing errors in data attribution across multiple subjects in studies.
Q2: What are the advantages of tail tattooing for rodent identification?
Tail tattoos are easily visualized without manually restraining the animal, making monitoring convenient. They are beneficial for experiments involving MRI imaging or animals genetically predisposed to skin conditions like ulcerative dermatitis, since the tattoo avoids problematic body areas and remains permanently visible.
Q3: Why is toe tattooing preferred for identifying neonatal rodents?
Neonates require early permanent identification for genotyping as early as day one. Toe tattooing allows identification until pups are large enough for rodent identification ear punching and tagging. The tail is unsuitable because tailbones are not ossified and tail skin stretches as the animal grows, causing tattoo marks to become distorted and unreadable.
Q4: What are the limitations of microchip identification in laboratory rodents?
Microchips require a 10-12 gauge needle for implantation, which is too large for mice, limiting use to adult rats. They are expensive and unsuitable for identifying large numbers of animals. Additionally, microchips cannot be used in MRI experiments, though they remain useful for identifying valuable breeder animals with unique genetics.
Q5: When should researchers use non-toxic dyes for rodent identification?
Non-toxic dyes are ideal for short-term studies requiring identification for only a few hours or days, though dyes can remain visible for several weeks. Some researchers use markers in conjunction with other identification methods to easily spot specific animals in a group during temporary monitoring periods.
Q6: What preparation steps are necessary before applying a tail tattoo to a rodent?
Restrain the mouse using a cup restrainer with the tail pulled taut. Clean the tail with diluted tissue cleaner on a cotton-tipped swab to remove scale and debris. Apply tissue oil with another swab to soften skin, provide lubrication, and prevent ink staining on non-tattooed areas.
Q7: How should proper handling and restraining techniques be applied during toe tattooing procedures?
For neonates, cup the pup in your hand using gauze and position the foot between your thumb and index finger crook to expose toes. For adults, use a plastic cone or Plexiglass restrainer allowing hind foot access. Proper handling and restraining techniques ensure safe, accurate tattoo placement while minimizing animal stress.