1. Niechlujny
Myszy są najczęściej krępowane za pomocą techniki scruffing, ale tą metodą można również krępować młode szczury. Dorosłe szczury są trudniejsze do powstrzymania tą techniką ze względu na bardziej umięśnioną szyję, zmniejszoną ilość luźnej skóry i niechęć do tej metody.

Rysunek 1: Metoda krępowania jedną ręką i oburęczną dla myszy
2. Rękawiczki
Dostępnych jest wiele rękawic dla opiekunów, które można nosić w celu ochrony przed ugryzieniami szczurów. Generalnie nie nadają się do pracy z myszami ze względu na utratę zręczności. Często wady wielu rodzajów rękawic przeważają nad zaletami.
3. Unieruchomienie ciała

Rysunek 2: Chwyt T-rexa i metoda krzyżowania kończyn przednich do krępowania szczurów
4. Urządzenia przytrzymujące

Rysunek 3: Urządzenie krępujące typu Broome

Rysunek 4: Płaskodenny środek odstraszający gryzonie

Rysunek 5: Urządzenie przytrzymujące rurkę

Rysunek 6: Elastyczny ogranicznik
5. Metody unieruchamiania dla konkretnych procedur technicznych
Źródło: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Uniwersytet Notre Dame, IN
Wykazano, że nawet minimalne obchodzenie się z mys…
1. Niechlujny
Myszy są najczęściej krępowane za pomocą techniki scruffing, ale tą metodą można również krępować młode szczury. Dorosłe szczury są trudniejsze do powstrzymania tą techniką ze względu na bardziej umięśnioną szyję, zmniejszoną ilość luźnej skóry i niechęć do tej metody.

Rysunek 1: Metoda krępowania jedną ręką i oburęczną dla myszy
2. Rękawiczki
Dostępnych jest wiele rękawic dla opiekunów, które można nosić w celu ochrony przed ugryzieniami szczurów. Generalnie nie nadają się do pracy z myszami ze względu na utratę zręczności. Często wady wielu rodzajów rękawic przeważają nad zaletami.
3. Unieruchomienie ciała

Rysunek 2: Chwyt T-rexa i metoda krzyżowania kończyn przednich do krępowania szczurów
4. Urządzenia przytrzymujące

Rysunek 3: Urządzenie krępujące typu Broome

Rysunek 4: Płaskodenny środek odstraszający gryzonie

Rysunek 5: Urządzenie przytrzymujące rurkę

Rysunek 6: Elastyczny ogranicznik
5. Metody unieruchamiania dla konkretnych procedur technicznych
Zaloguj się lub , aby uzyskać dostęp do pełnej treści. Dowiedz się więcej o dostępie Twojej instytucji do treści JoVE tutaj
Gryzonie są szeroko stosowanymi organizmami modelowymi do badania różnych zagadnień naukowych i wykazano, że nawet minimalne obchodzenie się z nimi jest dla nich stresujące.
Obsługa prostych zadań, takich jak zmiana klatki, może spowodować wzrost częstości akcji serca, ciśnienia krwi i poziomu kortykosteronu w surowicy, a wahania te mogą utrzymywać się przez kilka godzin. Metody krępowania wymagane w powszechnych procedurach wstrzykiwania i pobierania krwi mogą również powodować zmiany fizjologiczne, które mogą potencjalnie wpływać na dane naukowe. Dlatego wymagane jest szkolenie w zakresie prawidłowego obchodzenia się z myszami i szczurami, aby zminimalizować ten wpływ na zwierzęta.
W tym filmie najpierw omówimy podstawowe techniki obchodzenia się z gryzoniami, a następnie omówimy procedury krępowania gryzoni, w tym techniki manualne i metody obejmujące użycie urządzeń krępujących.
Zacznijmy od omówienia podstaw obchodzenia się z gryzoniami. Jedną z najczęstszych metod poruszania się dorosłej myszy lub szczura jest podnoszenie zwierzęcia za ogon. Robiąc to, konieczne jest, aby ogon został chwycony u podstawy w pobliżu zadu. Jeśli zwierzę zostanie podniesione za koniec ogona, skóra może zostać oderwana ze względu na ciężar ciała i może prowadzić do urazu skutkującego amputacją ogona. Co ważne, przemieszczanie zwierzęcia z miejsca na miejsce powinno odbywać się szybko i stabilnie. Zawieszenie zwierzęcia w powietrzu przez dowolny czas nie tylko spowoduje niepokój, ale także spowoduje, że zwierzę będzie się skręcać lub szarpać, co może spowodować uszkodzenie ogona. Opiekun nie powinien również wkładać ręki pod zwierzę, ponieważ może próbować chwycić je dla bezpieczeństwa, co skutkuje ugryzieniem.
Inną metodą obchodzenia się z dorosłymi gryzoniami jest użycie kleszczy. Powszechnie stosowanymi rodzajami kleszczy są kleszcze do długich opatrunków lub kleszcze do języka z gumowymi, plastikowymi lub silikonowymi rurkami umieszczonymi na końcach, aby zapewnić poduszkę. Kleszcze mogą chwycić mysz za kark lub u nasady ogona. Stosowanie kleszczy minimalizuje zanieczyszczenie krzyżowe między zwierzętami i jest szybsze i tańsze niż zmiana rękawiczek między każdą klatką dla zwierząt. Początkujący będą musieli zostać przeszkoleni, jak mocno chwytać myszy kleszczami, zwłaszcza w karku, ponieważ może to przeszkadzać w oddychaniu. Podczas używania kleszczy na ogonie należy uważać, aby umieścić kleszcze w pobliżu podstawy ogona, aby uniknąć obrażeń. Pamiętaj, aby przechowywać je twarzą do dołu w 70% etanolu między kontaktem z różnymi grupami zwierząt.
Do przenoszenia zwierząt można również używać rurek wykonanych z nieporowatego materiału. Rurki te można dodać do klatki jako miejsce, w którym zwierzę może się schronić lub szukać bezpiecznego schronienia. Większość myszy lub szczurów chętnie wchodziłaby do rurek, gdy ich klatka jest otwarta, lub można je łatwo wprowadzić do rurki. Gdy zwierzę znajdzie się w środku, zakryj otwarte końce dłonią i palcami. Następnie, aby zachęcić zwierzę do wyjścia, delikatnie przechyl rurkę do góry w nowej klatce. Zwierzęta łatwo przyzwyczajają się do tej metody zmiany klatki, dzięki czemu jest to szybki i łatwy proces przenoszenia zwierząt z jednego miejsca na drugie.
Niektóre instytucje wolą, aby zwierzęta – zwłaszcza szczury – były podnoszone za ciało, nawet podczas rutynowego obchodzenia się z nimi. Dorosłe szczury są delikatnie chwytane wokół klatki piersiowej, podnoszone i szybko umieszczane w innej klatce. Ważne jest, aby zwierzęta były przyzwyczajone do tej metody obchodzenia się z nimi od najmłodszych lat. Podczas pracy z młodymi szczurami umieszczenie dłoni na grzbiecie szczura spowoduje, że wskoczy on w dłoń przewodnika, umożliwiając jego uchwycenie. Może być potrzebna druga ręka, aby szczur nie wił się z uścisku.
Podczas zmiany klatek z nowonarodzonymi myszami lub szczurami często konieczne jest ich usunięcie, zachowując nienaruszone gniazdo. Użyj dwóch rąk, aby zgarnąć gniazdo i młode z dna klatki do nowej klatki. Trzymaj palce blisko siebie, aby uniknąć upuszczenia szczeniąt. Po przeniesieniu gniazda do nowej klatki ważne jest, aby sprawdzić, czy wszystkie szczenięta są obecne. Alternatywnie plastikowa szufelka może być używana do przenoszenia nowonarodzonych gryzoni w ich gniazdach. Robiąc to, ważne jest, aby położyć rękę na górnej części miarki, aby zapobiec wierceniu się lub wyskakiwaniu noworodków. W porównaniu z indywidualnym obchodzeniem się ze szczeniętami, zgarnianie całego gniazda jest mniej stresujące zarówno dla młodych, jak i matek.
Teraz, gdy omówiliśmy podstawy obchodzenia się z gryzoniami, zagłębmy się w szczegółowe procedury powstrzymywania gryzoni. Najpierw przedstawimy, jak ręcznie krępować te zwierzęta. Myszy i młode szczury można krępować techniką jednoręczną lub dwuręczną. Jednak w przypadku dorosłych szczurów preferowanymi technikami są krępowanie całego ciała za pomocą chwytu T-rex lub metody krzyżowania kończyn przednich.
Zacznijmy od poznania metody krępowania oburęcznego. Najpierw umieść zwierzę na powierzchni, którą może chwycić, takiej jak pokrywa z drucianego pręta. Dominującą ręką przytrzymaj ogon u podstawy i delikatnie pociągnij mysz do tyłu. Powoduje to, że zwierzę trzyma się powierzchni i pozwala na rozciągnięcie ciała. Następnie delikatnie przygwoźdź gryzonia niedominującym palcem wskazującym i kciukiem umieszczonymi u podstawy czaszki i chwyć luźną skórę na szyi, aby podnieść zwierzę. Pozostałymi palcami ustabilizuj zwierzę grzbietem opartym o podstawę kciuka. Możesz zabezpieczyć kończyny tylne, przypinając ogon palcem serdecznym do dłoni.
W przypadku metody krępowania jedną ręką ponownie umieść zwierzę na powierzchni, którą może chwycić. Przytrzymaj ogon między trzecim a czwartym palcem ręki niedominującej i zastosuj delikatną trakcję do tyłu. Palcem wskazującym i kciukiem tej samej ręki przypnij gryzonia do ramion. Delikatnie przesuń kciuk i palec wskazujący do przodu, chwyć luźną skórę na szyi i unieś zwierzę. Użyj środkowego palca, aby ustabilizować zwierzę wzdłuż grzbietu, przytrzymując skórę grzbietową do podstawy kciuka.
Trzecią metodą krępowania, którą omówimy, jest chwyt T-rex - dwuręczna metoda krępowania szczurów. Najpierw umieść szczura na twardej powierzchni, takiej jak mata, którą może chwycić. Trzymając jedną ręką podstawę ogona, drugą rękę połóż na ramieniu szczura z palcem wskazującym i środkowym rozciętym po obu stronach. Ma to na celu ograniczenie ruchów głowy na boki. Gdy głowa się ustabilizuje, obejmij ciało za przednimi kończynami palcami środkowym i serdecznym oraz kciukiem. Unikaj uciskania klatki piersiowej, aby nie utrudniało to oddychania zwierzęcia. Na koniec ustabilizuj ogon i zad, chwytając podstawę ogona BEZ trzymania się tylnych łap, jeśli planujesz podać zgłębnik ustny; lub z trzymaniem się tylnych łap, jeśli zamiarem jest wstrzyknięcie zwierzęciu.
Wreszcie, aby powstrzymać szczura metodą skrzyżowania kończyn przednich, umieść zwierzę na powierzchni, którą może chwycić. Następnie dominującą ręką przytrzymaj ogon u podstawy i zastosuj delikatną trakcję do tyłu, aby ciało zwierzęcia się wydłużyło. Następnie drugą ręką chwyć zwierzę bezpośrednio za ramiona, palcami po jednej stronie i kciukiem po drugiej stronie klatki piersiowej i przesuń rękę do przodu. Ten ruch zmusi przednie nogi zwierzęcia do skrzyżowania się pod brodą, tworząc fizyczną barierę, która uniemożliwi zwierzęciu poruszanie głową w dół. Uważaj, aby nie uciskać klatki piersiowej, co doprowadzi do trudności w oddychaniu.
Teraz, gdy dokonaliśmy przeglądu technik ręcznego krępowania, dowiedzmy się, jak powstrzymywać gryzonie za pomocą specjalistycznych urządzeń.
Pierwszym urządzeniem, o którym się dowiemy, jest urządzenie przytrzymujące w stylu Broome'a. Posiada szczelinę biegnącą przez całą długość urządzenia oraz plastikowy nosek, który jest wkładany, aby utrzymać zwierzę na miejscu. Zacznij od poluzowania śruby, aby wyjąć końcówkę. Następnie ustaw rurkę przytrzymującą tak, aby szczelina była skierowana do góry. Chwyć zwierzę za podstawę ogona i delikatnie wciągnij zwierzę do urządzenia przytrzymującego, najpierw tylnymi kończynami. Gdy zwierzę znajdzie się w środku, wsuń plastikowy nos z powrotem do tuby, aby zapobiec jej otwarciu. Umieść końcówkę w taki sposób, aby nos zwierzęcia był wyśrodkowany w otworze. Nie ustawiaj go tak ciasno, aby zwierzę nie mogło oddychać.
Innym przykładem urządzenia przytrzymującego jest płaskodenny ogranicznik gryzoni, który jest półcylindrem z otworami umożliwiającymi dostęp od góry i od dołu urządzenia. Posiada również szczeliny, w które można włożyć sztywną plastikową bramkę, aby utrzymać zwierzę na miejscu. Aby użyć tego ogranicznika, chwyć gryzonia za podstawę ogona dominującą ręką i połóż go na gładkiej powierzchni. Drugą ręką przytrzymaj rurkę przytrzymującą z płaskim dnem tak, aby otwarty koniec znajdował się przy głowie zwierzęcia pod kątem 45? kąt do powierzchni. Umieść rurkę nad głową zwierzęcia i natychmiast postukaj w zad, aby zapobiec cofaniu się zwierzęcia. Gdy znajdzie się w urządzeniu, wsuń plastikową bramkę w odpowiednie miejsce, aby zabezpieczyć pozycję zwierzęcia.
Trzecim typem urządzenia, które omówimy, są ograniczniki rurowe. Są to cylindry z pleksiglasu z jednym zamkniętym końcem zawierającym otwory do cyrkulacji powietrza i szczeliną na otwartym końcu. Aby użyć krępowania rurki, chwyć zwierzę i połóż je na gładkiej powierzchni. Następnie umieść otwarty koniec rurki na głowie zwierzęcia pod kątem 45? kąt. Gdy tylko gryzoń wejdzie do rury, postukaj w zad, aby zapobiec jego cofnięciu. Na koniec zatkaj otwór, wkładając dużą lateksową rękawicę, która chwyci powierzchnię pleksi i uniemożliwi zwierzęciu wyjście z tuby.
Na koniec omówimy, jak używać elastycznych ograniczników, które są jednorazowymi elastycznymi plastikowymi stożkami dostępnymi w różnych rozmiarach. Wybór stożka zależy od wielkości zwierzęcia. Idealnie byłoby, gdyby był wystarczająco długi, aby wystawał 2-3 cale poza zad zwierzęcia. Podobnie jak w przypadku poprzednich metod, umieść zwierzę na gładkiej powierzchni i umieść stożek krępujący na 45? kąt nad głową zwierzęcia. Gdy tylko zwierzę wejdzie do stożka, chwyć otwarty koniec i uszczelnij go, aby zmusić zwierzę do końca. Zabezpiecz otwór, składając plastik na jedną stronę ogona i przyklejając klips do segregatora do złożonego plastiku, uważając, aby nie zacisnąć ogona lub skóry.
Po omówieniu podstaw obchodzenia się z nimi i różnych technik krępowania, przyjrzyjmy się, dlaczego zrozumienie tych procedur jest niezbędne dla każdego naukowca in vivo.
Wiedza i uzasadnienie stojące za tymi podstawowymi procedurami obchodzenia się z nimi jest podstawą utrzymania zdrowia zwierzęcia. Od momentu narodzin zwierzęta są poddawane prostym, codziennym czynnościom, takim jak ważenie, inspekcja i zmiana klatku, które powinny być wykonywane niezależnie od celu naukowego.
Procedury krępowania są również przydatne do celów znakowania. Na przykład, aby wykonać zabiegi, takie jak uderzanie w uszy, zwierzę musi być skrępowane przez chrupanie. Z drugiej strony, podczas wszczepiania mikroczipa szczurom należy użyć urządzenia przytrzymującego, aby można je było oznakować na stałe.
Wreszcie, ręczne metody krępowania są stosowane w typowych procedurach iniekcji, takich jak podawanie podskórne i dootrzewnowe. Wiedza na temat urządzeń krępujących jest przydatna podczas wykonywania podawania dożylnego, które wymaga minimalnego ruchu zwierzęcia podczas wstrzykiwania.
Właśnie obejrzałeś wprowadzenie JoVE do podstawowych technik obchodzenia się i krępowania gryzoni. Zabiegi te wymagają pewnego i stanowczego, ale delikatnego dotyku. Nieśmiałe podejście może skutkować ugryzieniami przewodnika, podczas gdy agresywne obchodzenie się może spowodować obrażenia gryzonia. Dlatego ważne jest, aby dokładnie nauczyć się tych technik i znaleźć równowagę między asertywnym, ale delikatnym chwytem. Jak zawsze, dziękujemy za oglądanie!
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Q1: Why is proper rodent handling training important for research?
Even minimal handling of mice and rats causes stress, increasing heart rate, blood pressure, and serum corticosterone levels for several hours. Restraint procedures for injections and blood withdrawals also cause physiological changes that can affect scientific data. Proper training minimizes these effects, ensuring animal welfare and data integrity in research.
Q2: What is the correct way to lift a rodent by its tail?
Grasp the tail at the base near the rump, never at the end, to prevent skin from being pulled off and causing tail amputation. Move the animal quickly and steadily without suspending it in air for extended periods, as this causes distress and struggling. Never place a hand under the animal, as it may bite while seeking security.
Q3: How do forceps compare to other methods for handling multiple rodents?
Forceps minimize cross-contamination between animals and are quicker and less expensive than changing gloves between cages. Long-dressing or tongue forceps with rubber, plastic, or silicone tubing cushioning can grasp mice at the scruff or tail base. Handlers must be trained on proper grip pressure to avoid interfering with breathing.
Q4: What is the two-handed restraint method for mice?
Place the mouse on a grippable surface like a wire bar lid. Hold the tail base with your dominant hand and gently tug backward to stretch the body. With your other hand, pin the skull base with index and thumb, grasp neck skin to lift, and stabilize the back against your thumb base. Secure hindquarters by pinning the tail with your ring finger.
Q5: How does the T-rex grip restrain adult rats?
Place the rat on a grippable surface and hold the tail base with one hand. Position your other hand over the shoulder with index and middle fingers split on either side to restrict head movement. Encircle the body behind forelegs with middle and ring fingers and thumb, avoiding chest compression. Grasp the tail base with or without hind feet depending on the procedure.
Q6: What are the key features of a Broome-style restraint device?
The Broome-style device has a slot running its full length and a plastic nosepiece for holding animals. Insert the animal hindquarters first by gently pulling at the tail base. Slide the nosepiece back to secure the animal with its nose centered in the opening, ensuring it can still breathe freely.
Q7: When should manual restraint methods be used versus restraint devices?
Manual restraint methods like scruffing are used for marking procedures such as ear punching and for common injection procedures including subcutaneous and intraperitoneal administration. Restraint devices should be used for procedures requiring minimal animal movement, such as intravenous administration and microchip insertion, where compound administration rodents injection techniques demand precise positioning.
Rozdziały w tym filmie
0:00
Overview
1:27
Basics of Rodent Handling
6:30
Manual Restraining Methods
9:58
Rodent Restraint Devices
14:08
Applications
15:27
Summary