Name: Cewnikowanie pętli jelitowych u przeżuwaczy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-06-11T00:00:00.000+00:00
Duration: 17 min 15 s
Description: Naucz się cewnikowania pętli jelitowych u owiec w celu długoterminowych badań immunologicznych jelit. Ta metoda umożliwia wielokrotne podawanie substancji po operacji.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Badania nie mogłyby zostać ukończone bez oddania i wysiłków wielu osób z Agriculture and Agri-Food Canada Research Centre w Lethbridge, Alberta, Kanada. W związku z tym dziękujemy: Tarze Shelton za opiekę przed- i pooperacyjną nad zwierzętami, przygotowanie chirurgiczne, anestezjologię, analizę próbek oraz pomoc w obrazowaniu wideo; Randy'emu Wilde'owi i Esteli Costy za opiekę przed- i pooperacyjną; Jenny Gusse za analizę próbek; Byronowi Lee za obraz trokara; oraz Brianowi Eglandowi za hodowlę owiec. Dziękujemy również Brentowi Selingerowi (Department of Biological Sciences, University of Lethbridge) za udostępnienie sprzętu wideo i udzielenie porad, a także za inną pomoc (tj. produkcję wykonawczą), oraz Curriculum Re-Development Centre, University of Lethbridge za wiedzę z zakresu wideografii. Badanie to było częściowo finansowane z grantów przyznanych przez Advanced Foods and Materials Network (G.D.I.), Canada-Alberta Beef Industry Development Fund (G.D.I.) oraz Agriculture and Agri-Food Canada (G.D.I. i J.P.K.).

Procedura eksperymentalna:
<ol>
<li>Wszystkie instrumenty są autoklawowane; materiały niepodlegające autoklawowaniu są sterylizowane w roztworze do sterylizacji na zimno Germex przez minimum 10 min.</li>
<li>Owce otrzymują premedykację z acepromazyny (0,05 mg/kg), glikopirrolanu (0,005 mg/kg) i tartrę butorfanolu (0,2 mg/kg) w wtrysku domięśniowym (IM), po czym pozostawia się je na 15-20 min.</li>
<li>Szyję ogala się i poddaje chirurgicznemu oczyszczaniu skóry. Po uwidocznieniu żyły szyjnej w miejsce naczynia wstrzykuje się podskórnie (SC) 0,1 ml lidokainy, następnie wprowadza się cewnik do żyły i mocuje go do skóry za pomocą cementu do tagów identyfikacyjnych zwierząt hodowlanych oraz 2-calowej taśmy szpitalnej. W trakcie operacji zwierzęta otrzymują 148 ml/kg/godz Plasmalyte 148 (podawany grawitacyjnie).</li>
<li>Diazepam (0,2 mg/kg) podaje się dożylnie (IV), a znieczulenie wprowadza za pomocą tiopentalu sodu (10 mg/kg). Na fałdy głosowe nakłada się spray endotrachealny z lidokainą, owcę intubuje i utrzymuje w znieczuleniu izofluranem (1,5-2,5% w 100% O2 przy przepływie 4 L/min) przez cały czas trwania operacji.</li>
<li>Zwierzę ułożone jest na plecach na ogrzewanej macie, aby pomóc utrzymać temperaturę ciała podczas operacji. Do rumenu wprowadza się zgłębnik żołądkowy, aby zapobiec nadmiernemu wzdęciu.</li>
<li>Brzuch w części brzusznej jest ogolony, a skórę przygotowuje się do operacji za pomocą trzech zabiegów oczyszczania chirurgicznego preparatem Prepodyne. Następnie brzuch zostaje obłożony sterylnymi obłożeniami, zapewniając odpowiednią ekspozycję pola operacyjnego (od pępka do tylnej części brzucha).</li>
<li>Za pomocą elektroskalpela wykonuje się cięcie pośrodkowe o długości 15-20 cm, ku tyłowi od pępka, i lokalizuje się fałd krzyżowo-jelitowy w prawym dolnym kwadrancie brzucha. Następnie wyrowadzono końcowy odcinek jelita krętego i ślepkę. W trakcie procedury minimalizuje się manipulacje jelitem i dba o to, aby wyewoluowane jelito pozostawało wilgotne dzięki ciepłemu (37-39°C) sterylnemu roztworowi soli fizjologicznej z buforem fosforanowym (PBS; pH 7,2).</li>
<li>Odmierza się odcinek jelita krętego o długości 85 cm (tzw. „odcinek jelitowy”), a następnie zaciska go kleszczykami Doyena (zaciski jelitowe) oraz dużymi kleszczykami Kelly'ego na obu końcach odcinka. W obrębie odcinka jelitowego zostaną utworzone „pętle” i „przestrzenie między pętlami”. Kleszczyki Doyena umieszcza się po stronie jelita krętego, która ma zostać połączona (anastomoza), a kleszczyki Kelly'ego po stronie odcinka jelitowego.</li>
<li>Jelito kręte przecina się pomiędzy każdym kleszczykiem Doyena a Kellym, a odcinek jelitowy przeznaczony na pętle delikatnie płucze się dwukrotnie 60 ml ciepłego PBS w celu usunięcia treści pokarmowej.</li>
<li>Koktajl antybiotyków o szerokim spektrum działania (200 mg enrofloksacyny i 250 mg metronidazolu w ciepłym PBS, całkowita objętość 60 ml) rozprowadza się w całym odcinku jelitowym i pozostawia na 30 min.</li>
<li>Proksymalny i dystalny koniec przeciętego jelita krętego (z wyłączeniem odcinka jelitowego) łączy się, aby utworzyć ciągły i funkcjonalny trakt jelitowy. Najpierw jelito kręte ustawia się za pomocą dwóch szwów stabilizujących, umieszczonych odpowiednio na krawędziach krezkowej i przeciwkrezkowej jelita. Następnie wykonuje się prosty szew ciągły (2-0 Vicryl) po obu stronach jelita, aby je połączyć.</li>
<li>W miejscu anastomozy wstrzykuje się ciepły PBS (3-5 ml), aby sprawdzić szczelność i trwałość szwów. Następnie końcówkę kleszczyków Kelly'ego dociska się do powierzchni surowiczej jelita, blisko miejsca anastomozy, i przesuwa do wewnątrz w miejscu anastomozy, aby upewnić się, że światło jelita jest szerokie i drożne.</li>
<li>Koktajl antybiotykowy usuwa się z odcinka jelitowego. Każdy koniec odcinka zamyka się prostym szwem ciągłym (nici wchłanialne; 2-0 Vicryl), a następnie szwem wywijającym z użyciem nici 2-0 Vicryl.</li>
<li>85-centymetrowy odcinek jelitowy dzieli się na trzy 15-centymetrowe „pętle”, dwie 15-centymetrowe „przestrzenie między pętlami” oraz dwa 5-centymetrowe przedziały z tępym końcem na końcach odcinka jelitowego (Rysunek 1). Pętle tworzy się poprzez nałożenie ligatury wokół jelita przy użyciu jedwabiu 2-0. Należy zauważyć, że podczas tej procedury nie podwiązuje się głównych naczyń krezkowych, ponieważ są one niezbędne do ukrwienia jelita i utrzymania jego żywotności. Ligatury pozostawia się długie, ponieważ będą one służyć do mocowania cewników.</li>
<li>Cewniki (tj. rurki silastykowe) identyfikuje się pojedynczo za pomocą niezmywalnego markera. Silikonową kulkę (o średnicy 5 mm) otaczającą cewnik umieszcza się 4-5 cm od końca cewnika, aby zapobiec jego wysunięciu się z jelita (Rysunek 1). Po sterylizacji w autoklawie do końca cewnika (3-5 mm) aseptycznie wprowadza się maść nieantybiotykową (Orbeseal); zapewnia to drożność cewnika (tj. zapobiega zapchaniu go przez złuszczoną śluzówkę wewnątrz pętli).</li>
<li>W górnej części każdej z trzech pętli wykonuje się niewielkie nacięcie. Każdy otwór powiększa się wprowadzaczem do cewnika (tj. „dylatatorem naczyń”), a następnie wprowadza 6-8 centymetrowy odcinek cewnika w kierunku ogonowym do pętli, aż silikonowa kulka znajdzie się w świetle jelita (Rysunek 1).</li>
<li>Ścianę jelita mocuje się wokół cewnika szwem typu „workowy” (2-0 Vicryl). Cewnik dodatkowo przymocowuje się do jelita, wiążąc go jedwabną ligaturą, która wyznaczała górny koniec pętli.</li>
<li>Do każdej pętli i przestrzeni wstrzykuje się ampicylinę (5 ml; 100 mg/ml w ciepłym PBS), a następnie jelito umieszcza się z powrotem w jamie brzusznej. Do jamy otrzewnowej, przez nacięcie brzuszne, wstrzykuje się cefazolinę (8 ml; 100 mg/ml w ciepłym PBS).</li>
<li>W ścianie brzusznej, obok nacięcia pośrodkowego, wykonuje się pojedyncze małe nacięcie punktowe, przez które wyrowadza się cewniki.</li>
<li>Położenie i napięcie cewników w jamie otrzewnowej zostaje skorygowane. Mięśnie brzucha zszywa się prostym szwem przerywanym (nici wchłanialne; Catgut #3), a skórę szwem materacowym poziomym przerywanym (nici niewchłanialne; Supramid #1).</li>
<li>Zakrzywioną, pustą rurkę ze stali nierdzewnej (średnica wewnętrzna 7 mm; średnica zewnętrzna 10 mm; długość 65 cm) wprowadza się pod skórę w pobliżu nacięcia brzusznego, prowadząc ją podskórnym tunelem do miejsca wyjścia znajdującego się tuż za szyją, między łopatkami. Cewniki wprowadza się do rurki i przesuwa do przodu na co najmniej 50% jej długości. Następnie rurkę z cewnikami wyciąga się ze skóry w miejscu wyjścia, eksponując cewniki.</li>
<li>Napięcie cewników koryguje się w miejscu nacięcia punktowego, a skórę zamyka nicią Supramid #1.</li>
<li>Pojedyncze cewniki są identyfikowane i umieszczane w bandażowej „kieszeni”, która jest przyszyta do skóry nicią Supramid #1. Kieszeń chroni cewniki przed późniejszymi uszkodzeniami.</li>
<li>Po operacji owcom wstrzykuje się domięśniowo (IM) fluniksyn (raz na dobę, s.i.d.) w dawce początkowej 2,2 mg/kg, a następnie w dawce podtrzymującej 1,1 mg/kg s.i.d. przez 3 dni. Owce otrzymują również wstrzyknięcia IM Hemostamu (3 ml) oraz enrofloksacyny (2,5 mg/kg) s.i.d. odpowiednio przez 3 i 5 dni. Zwierzęta otrzymują dożylnie Plasmalyte 148 z 5% roztworem dekstrozy, podawanym w sposób ciągły za pomocą pompy perystaltycznej, aby zapewnić stały przepływ (145 ml/godz) niezależnie od pozycji ciała. Pozwala się im pić ad libitum, jednak podawanie paszy jest ograniczone do czasu przywrócenia normalnych funkcji rumenu i jelit. Ściśle monitoruje się (dwukrotnie na dobę, b.i.d.) pobieranie pokarmu, spożycie wody, temperaturę ciała, oddawanie kału i moczu, odgłosy jelitowe, dyskomfort brzuszny, zachowanie oraz stężenie glukozy we krwi; w razie potrzeby koryguje się stężenie glukozy w płynach dożylnych, aby utrzymać poziom glukozy we krwi w normie. Przed operacją, bezpośrednio po niej oraz co drugi dzień w dalszym czasie monitoruje się biochemię krwi i hematologię (tj. albuminy, fosfatazę alkaliczną, aminotransferazę alaninową, amylazę, wapń, cholesterol, kreatyninę, glukozę, fosfor nieorganiczny, bilirubinę całkowitą, białko całkowite, mocznik, globuliny, sód, potas, chlor, ciśnienie parcjalne tlenu, pH, ciśnienie parcjalne dwutlenku węgla, wodorowęglany i całkowitą zawartość dwutlenku węgla, liczbę krwinek czerwonych i białych, hematokryt, hemoglobinę, różnicowe liczenie białych krwinek oraz liczbę płytek krwi). Po przywróceniu normalnych funkcji jelit kończy się dożylną terapię płynową i przenosi zwierzęta na wybiegi (tj. 5-7 dni po operacji). Zwierzęta utrzymuje się w indywidualnych boksach (w zasięgu wzroku innych zwierząt), co redukuje stres i zmniejsza ryzyko uszkodzenia kieszonek z cewnikami (np. przez pogryzienie przez współlokatora).</li>
<li>W celu wstrzyknięcia leków do poszczególnych pętli, 5 ml preparatu wstrzykuje się do cewnika za pomocą sterylnej strzykawki z igłą tępą o rozmiarze 18G. Aby zapewnić wprowadzenie całego preparatu do pętli, do cewnika wstrzykuje się następnie 3 ml PBS.</li>
</ol>
Kluczowe punkty:
Procedury o kluczowym znaczeniu dla sukcesu tego zabiegu chirurgicznego obejmują: (1) zweryfikowanie, czy jelito nie jest skręcone przed wykonaniem anastomozy; (2) zapewnienie szczelności i drożności anastomozy; (3) odpowiednie przymocowanie cewnika do ściany pętli za pomocą ligatury wyznaczającej koniec kranialny pętli, przy jednoczesnym upewnieniu się, że mocowanie nie wpływa na drożność cewnika; (4) zminimalizowanie manipulacji jelitami oraz zapewnienie utrzymania wilgotności wyewagowanych fragmentów jelita; (5) zapewnienie odpowiedniego naciągu cewnika; (6) upewnienie się, że integralność cewnika nie zostanie naruszona podczas szycia mięśni i skóry; (7) zapobieganie przeżeraniu się owiec po operacji (tj. w okresie pooperacyjnego porażenia jelit), co może spowodować ubicie treści w wymieniu i upośledzenie funkcji żwacza; oraz (8) zapewnienie zwierzętom wystarczającej dożylnej płynoterapii przez pierwsze 3-5 dni po zabiegu, uważne monitorowanie stężenia glukozy we krwi oraz dostosowanie stężenia glukozy w płynach dożylnych w razie potrzeby, aby zapobiec hipoglikemii. <img src="/files/ftp_upload/1301/1301fig1.jpg" alt="Schemat anastomozy jelitowej z umieszczeniem cewnika, wskazujący punkty połączenia chirurgicznego." data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="rycina 1"> Rycina 1. Schematyczne przedstawienie kaniulowanych pętli jelita krętego. Zwróć uwagę na trzy kaniulowane „pętle” o długości 15 cm, dwie niekaniulowane „przestrzenie” o długości 15 cm utworzone między pętlami oraz dwa końcowe segmenty o długości 5 cm, wszystkie utworzone w obrębie „segmentu jelitowego” jelita krętego owcy o długości 85 cm.

<ol><li>Vidal, J. E., McClane, B. A., Saputo, J., Parker, J., Uzal, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Clostridium+perfringens+beta-toxin+on+the+rabbit+small+intestine+and+colon%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Effects of Clostridium perfringens beta-toxin on the rabbit small intestine and colon.</a> Infect. Immun. 76, 4396-4404 (2008).</li>
<li>Santos, R. L., Zhang, S., Tsolis, R. M., Baumler, A. J., Adams, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+and+molecular+characterization+of+Salmonella+typhimurium+infection+in+neonatal+calves%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Morphologic and molecular characterization of Salmonella typhimurium infection in neonatal calves.</a> Vet. Pathol. 39, 200-215 (2002).</li>
<li>Uzzau, S., Leori, G. S., Petruzzi, V., Watson, P. R., Schianchi, G., Bacciu, D., Mazzarello, V., Wallis, T. S., Rubino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salmonella+enterica+serovar-host+specificity+does+not+correlate+with+the+magnitude+of+intestinal+invasion+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Salmonella enterica serovar-host specificity does not correlate with the magnitude of intestinal invasion in sheep.</a> Infect. Immun. 69, 3092-3099 (2001).</li>
<li>Gerdts, V., Uwiera, R. R. E., Mutwiri, G. K., Wilson, D. J., Bowersock, T., Kindane, A., Babiuk, L. A., Griebel, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+intestinal+%27loops%27+provide+an+in+vivo+model+to+analyse+multiple+mucosal+immune+responses%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Multiple intestinal 'loops' provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses.</a> J. Immunol. Methods. 256, 19-33 (2001).</li>
<li>Greibel, P. J., Davis, W. C., Reynolds, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+the+growth+and+differentiation+of+b+cells+isolated+from+follicles+from+ileal+Peyer%27s+patch+of+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">An analysis of the growth and differentiation of b cells isolated from follicles from ileal Peyer's patch of sheep.</a> Immunology. 75, 601-607 (1992).</li>
<li>Motyka, G., Greibel, P. J., Reynolds, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agents+that+activate+protein+kinase+C+resue+sheep+ileal+Peyer%27s+patch+B+cells+from+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Agents that activate protein kinase C resue sheep ileal Peyer's patch B cells from apoptosis.</a> Eur. J. Immunol. 23, 1314-1321 (1993).</li>
</ol>

Wszystkie procedury przeprowadzone na zwierzętach doświadczalnych zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet Opieki nad Zwierzętami (Protokół wykorzystania zwierząt nr 0609) i były zgodne z wytycznymi określonymi przez Kanadyjską Radę Opieki nad Zwierzętami. 
Nie mamy nic do ujawnienia.

W niniejszej procedurze udało nam się pomyślnie wprowadzić cewniki do pętli jelitowych utworzonych w jelicie krętym owiec. Dzięki rygorystycznej opiece pooperacyjnej zwierzęta szybko powróciły do zdrowia i wznowiły normalną aktywność 5-7 dni po zabiegu. Ustaliliśmy, że wprowadzenie cewników do pętli nie wpływa na funkcję błony śluzowej ani funkcję immunologiczną jelit (dane nie pokazane), a zwierzęta mogą żyć przez co najmniej 8 wk po operacji. Procedura ta pozwala nam na wprowadzanie wielu substancji leczniczych do oddz...

<table><tbody><tr><td>Rękawiczki chirurgiczne</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>103091</td><td></td></tr><tr><td>Maseczka chirurgiczna</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>MAX53013</td><td></td></tr><tr><td>Fartuch chirurgiczny</td><td>The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE</td><td>3365</td><td></td></tr><tr><td>fartuch położniczy</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>900062</td><td></td></tr><tr><td>Czepek chirurgiczny</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>903271</td><td></td></tr><tr><td>szczoteczka do szorowania EZ Scrub</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>BDC377479</td><td></td></tr><tr><td>Aparat do znieczulenia</td><td>Boyle</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Sodasorb</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>108638</td><td></td></tr><tr><td>Laryngoskop</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Widełko laryngoskopowe (widełko Millera nr 4)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>902667</td><td></td></tr><tr><td>Rurka endotrachealna (7,0–8,5 mm)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Spray endotrachealny z lidokainą</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>103364</td><td></td></tr><tr><td>Acepromazyna</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>AUS01020</td><td></td></tr><tr><td>Glikopirrolan</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>SAB2880</td><td></td></tr><tr><td>Kwas winianowy butorfanolu</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>AYE304541</td><td></td></tr><tr><td>Diazepam</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>sab790</td><td></td></tr><tr><td>Tiopental sodowy</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>103508</td><td></td></tr><tr><td>Chlorowodorek epinefryny</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>103856</td><td></td></tr><tr><td>Doksapram</td><td>Apteka Strathcona</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>100339</td><td></td></tr><tr><td>Hemostam</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>103857</td><td></td></tr><tr><td>Fluniksyn</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>Poniżej znajduje się tłumaczenie tekstu źródłowego:

**Metoda izolacji i oczyszczania białka z kultur komórkowych**

**Abstrakt**

Izolacja i oczyszczanie białek z kultur komórkowych są kluczowymi etapami w badaniach nad biologią molekularną, biochemią i farmakologią, umożliwiając szczegółową analizę struktury, funkcji oraz oddziaływań białek. Proces ten obejmuje szereg etapów, począwszy od lizy komórek w celu uwolnienia białek wewnątrzkomórkowych, poprzez usuwanie zanieczyszczeń, aż po zastosowanie specyficznych metod chromatograficznych w celu uzyskania białka o wysokiej czystości. W niniejszym protokole przedstawiono systematyczne podejście do izolacji białka, kładąc nacisk na optymalizację warunków lizy, zastosowanie inhibitorów proteaz w celu zapobiegania degradacji oraz wykorzystanie chromatografii powinowactwa do precyzyjnego oczyszczania docelowego białka. Szczegółowy opis obejmuje przygotowanie buforów, procedurę homogenizacji, centryfugację oraz etapy elucji i weryfikacji czystości białka za pomocą elektroforezy SDS-PAGE.

**Słowa kluczowe**

izolacja białka, oczyszczanie białek, kultury komórkowe, liza komórek, chromatografia powinowactwa, SDS-PAGE, bufory lityczne, inhibitor proteaz</td><td></td></tr><tr><td>Enrofloksacyna</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>hll0049</td><td></td></tr><tr><td>Metronidazol</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>101653</td><td></td></tr><tr><td>Ampicylina</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>NOV67185-6</td><td></td></tr><tr><td>Cefazolina</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>Ponieważ nie dostarczono tekstu źródłowego do przetłumaczenia, proszę o przesłanie treści, którą należy przełożyć na język polski zgodnie z wytycznymi.</td><td></td></tr><tr><td>Elektroskalpel</td><td>Macan</td><td>MV8</td><td></td></tr><tr><td>Mata grzewcza</td><td>Kane</td><td>PHMD-48</td><td></td></tr><tr><td>Zonka żołądkowa (rurka Nalgene 5/16)&quot; Identyfikator)</td><td>Fisher Scientific</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Igłotrzymacz</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>108338</td><td></td></tr><tr><td>kleszczyki Addisona-Browna</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>911075</td><td></td></tr><tr><td>Kleszcze do usuwania zębów szczura</td><td>The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE</td><td>5275</td><td></td></tr><tr><td>kleszczyki Kelly'ego</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>901133</td><td></td></tr><tr><td>Kleszczyki hemostatyczne typu mosquito</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>108471</td><td></td></tr><tr><td>pinceta Carmalta</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>901225</td><td></td></tr><tr><td>Rękojeść skalpela</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>900285</td><td></td></tr><tr><td>Głowica skalpela nr 22</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>900511</td><td></td></tr><tr><td>nożyczki Metzenbauma</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>901166</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki bardzo ostre</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>108264</td><td></td></tr><tr><td>Kleszczyki do ręczników</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>901213</td><td></td></tr><tr><td>Kleszczyki Allisa do tkanek</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>901201</td><td></td></tr><tr><td>Doyen&amp;rsquo;pinceta</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>904226</td><td></td></tr><tr><td>Miska ze stali nierdzewnej</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>903601</td><td></td></tr><tr><td>Trokar ze stali nierdzewnej (zakrzywiony)</td><td>Lokalny dostawca</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>wprowadzak cewnika</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>11440</td><td></td></tr><tr><td>Ręcznik chirurgiczny</td><td>The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE</td><td>7972</td><td></td></tr><tr><td>Jednorazowa obłożenie chirurgiczne</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>900035</td><td></td></tr><tr><td>Obłożenie sterylne</td><td>The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE</td><td>2323</td><td></td></tr><tr><td>Pole operacyjne (40 x 40 cm)</td><td>The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE</td><td>8358</td><td></td></tr><tr><td>Pole operacyjne (7&quot; x 11 &amp;#188;&quot; otwarcie</td><td>The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE</td><td>2694</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl (2-0)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>JJMJ333H</td><td></td></tr><tr><td>Jedwab 2-0</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>105248</td><td></td></tr><tr><td>Katgut nr 3</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>CSL547-2070</td><td></td></tr><tr><td>Supramid #1</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>CSL547-3040</td><td></td></tr><tr><td>Igły (tnące i nietnące)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>przewód Silastic (0,040&quot; ID, 0,085&quot; OD)</td><td>Fisher Scientific</td><td>11-189-15D</td><td></td></tr><tr><td>maść Orbeseal</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>106344</td><td></td></tr><tr><td>Przezroczysty silikon (uniwersalny uszczelniacz 732)</td><td>Lokalny dostawca</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Igła z tępym zakończeniem</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>905035</td><td></td></tr><tr><td>Marker (trwały przemysłowy)</td><td>Lokalny dostawca</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Woreczek do cewnika (wykonany z Elastoplast 7,5 cm)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>104094</td><td></td></tr><tr><td>Taśma szpitalna (2&quot;)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>103842</td><td></td></tr><tr><td>Taśma szpitalna (1&quot;)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>VLMRENF20</td><td></td></tr><tr><td>Gaza chirurgiczna 4x4</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>107551</td><td></td></tr><tr><td>Przywieranie gazy</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>107633</td><td></td></tr><tr><td>Elastoplast 7,5 cm</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>104094</td><td></td></tr><tr><td>bandaż odrywany Elastoplast</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>104093</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka (60 ml)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>104004</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka (10 ml)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>Niniejsza procedura opisuje metodę analizy mowy i języka u osób z zaburzeniami neurologicznymi, ze szczególnym uwzględnieniem oceny płynności mowy, nazywania obrazków oraz rozumienia składni. Celem badania jest identyfikacja deficytów językowych, które mogą wskazywać na konkretne uszkodzenia obszarów kory mózgowej odpowiedzialnych za funkcje komunikacyjne.

### Materiały i odczynniki

**Sprzęt i oprogramowanie:**
* Komputer z oprogramowaniem do rejestracji dźwięku (np. Audacity)
* Mikrofon wysokiej jakości
* Zestaw znormalizowanych obrazków do zadań nazywania (np. z zestawu Boston Naming Test)
* Stopery lub program do pomiaru czasu reakcji
* Arkusze ocen i protokoły zapisywania odpowiedzi

### Procedura

**Przygotowanie pacjenta**
1. Umieść pacjenta w cichym pomieszczeniu, aby zminimalizować zakłócenia zewnętrzne.
2. Wyjaśnij cel badania i instrukcje do każdego z zadań, upewniając się, że pacjent rozumie wymagania.
3. Poinformuj pacjenta o rejestracji audio w celu późniejszej analizy.

**Ocena płynności mowy**
1. Poproś pacjenta o wymienienie jak największej liczby słów z określonej kategorii semantycznej (np. „nazwij wszystkie zwierzęta, jakie przyjdą Ci do głowy”) w ciągu 60 sekund.
2. Następnie przeprowadź test płynności fonematycznej, prosząc pacjenta o wymienienie słów zaczynających się na konkretną literę (np. literę „S”) w tym samym przedziale czasowym.
3. Zanotuj całkowitą liczbę poprawnych odpowiedzi, pomijając powtórzenia i słowa niepasujące do kategorii.

**Zadanie nazywania obrazków**
1. Prezentuj pacjentowi pojedyncze obrazki przedstawiające przedmioty codziennego użytku lub pojęcia o różnym stopniu trudności.
2. Poproś pacjenta o podanie nazwy każdego przedstawionego obiektu.
3. Zarejestruj odpowiedzi, klasyfikując je jako poprawne, błędne (np. parafazje semantyczne lub fonematyczne) lub brak odpowiedzi.
4. W przypadku trudności z nazywaniem, zastosuj podpowiedzi (np. fonematyczną – podanie pierwszej litery słowa) i odnotuj ich skuteczność.

**Ocena rozumienia składni**
1. Przedstaw pacjentowi pary zdań: jedno jednoznaczne i jedno niejednoznaczne składniowo (np. zdania z dopełnieniami).
2. Poproś pacjenta o wskazanie na obrazku czynności opisanej w zdaniu.
3. Analizuj poprawność wyboru, zwracając uwagę na to, czy pacjent prawidłowo interpretuje zależności gramatyczne w zdaniach bardziej złożonych.

### Analiza danych

1. Oblicz wskaźniki płynności mowy, porównując wyniki pacjenta z normami dla grupy wiekowej i poziomu wykształcenia.
2. Przeanalizuj błędy w nazywaniu, aby odróżnić afazję nominalną od ogólnych zaburzeń poznawczych.
3. Oceń stopień deficytów w rozumieniu składni, korelując wyniki z obrazem neurologicznym pacjenta.
4. Zintegruj wszystkie dane w celu sformułowania diagnozy funkcjonalnej dotyczącej profilu językowego pacjenta.</td><td></td></tr><tr><td>Igła 25G</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>BDC305122</td><td></td></tr><tr><td>Igła 20G</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>BDC305175</td><td></td></tr><tr><td>igła 18G</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>903353</td><td></td></tr><tr><td>Kaniula do żyły obwodowej Intracath (16G 8&quot;)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>Nie podano tekstu źródłowego do tłumaczenia. Proszę o dostarczenie treści, którą należy przetłumaczyć na język polski.</td><td></td></tr><tr><td>zestaw do infuzji dożylnej (10 kropli/ml)</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>101797</td><td></td></tr><tr><td>0,9% roztwór NaCl</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>BAXJB1322P</td><td></td></tr><tr><td>roztwór Plasmalyte 148</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>BAXJB2534</td><td></td></tr><tr><td>Dekstroza</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>MCT60190</td><td></td></tr><tr><td>Pompa perystaltyczna</td><td>Cole-Parmer</td><td>7524-10</td><td></td></tr><tr><td>Cement do znaczników identyfikacyjnych dla zwierząt hodowlanych</td><td>Lokalny dostawca</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>roztwór Germex</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>mtc60270</td><td></td></tr><tr><td>Alkohol izopropylowy</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>104590</td><td></td></tr><tr><td>środek oczyszczający Stanhexidine</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>109248</td><td></td></tr><tr><td>Roztwór Prepodyne</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>105710</td><td></td></tr><tr><td>Mycie preparatem Prepodyne</td><td>Western Drug Distribution Center, Ltd.</td><td>105711</td><td></td></tr></tbody></table>

kaniulacja pętli jelitowych u przeżuwaczy

Catheterization of Intestinal Loops in Ruminants

Jelitami jest złożona struktura, która uczestniczy nie tylko w wchłanianiu składników odżywczych, ale pełni również rolę bariery między organizmem a światem zewnętrznym. W związku z tym jelita odgrywają kluczową rolę w nadzorze immunologicznym i ochronie przed patogenami jelitowymi. W badaniach nad fizjologią i immunologią jelit powszechnie stosuje się „pętle jelitowe” jako model eksperymentalny. Większość tych modeli pętlowych opiera się na procedurach chirurgicznych bez rekonwalescencji, służących do badania krótkotrwałych (<24 h) zmian w jelitach (1-3). Wcześniej opracowaliśmy model pętli jelitowej z rekonwalescencją, aby specyficznie mierzyć długoterminowe (<6 mies.) zmiany immunologiczne w jelitach owiec po ekspozycji na szczepionki, adiuwanty i wirusy (4). Procedura ta pozwoliła na zlokalizowanie zabiegów w konkretnej „pętli”, co umożliwiło pobranie próbek z tego obszaru jelit. Znaczącą wadą tej metody jest jednorazowa możliwość podania preparatów (tj. w czasie operacji). Ponadto próbki zarówno śluzówki jelita, jak i zawartości światła jelita można pobrać jedynie po zakończeniu projektu. Innymi istotnymi ograniczeniami powyższego modelu są manipulacje chirurgiczne oraz niezbędne środki pooperacyjne (np. podawanie antybiotyków i leków przeciwbólowych), które mogą bezpośrednio wpływać na sam zabieg i/lub zmieniać funkcje immunologiczne, co prowadzi do zafałszowania wyników. W związku z tym zmodyfikowaliśmy nasz model pętli jelitowej poprzez wprowadzenie do pętli cewników długoterminowych. Owce w pełni regenerują się po zabiegu i nie wykazują reakcji na zewnętrznie wyprowadzone cewniki. Co istotne, zastosowanie cewników w pętlach pozwala na wprowadzanie wielu preparatów w dłuższych odstępach czasu, po rekonwalescencji pooperacyjnej oraz po wyeliminowaniu leków podanych podczas operacji i w okresie pooperacyjnym.

Opisujemy nową metodę chirurgiczną kaniulacji „pętli jelitowych” w jelicie krętym owiec. Po powrocie zwierząt do zdrowia po operacji oraz całkowitym usunięciu z organizmu antybiotyków i leków przeciwbólowych, za pomocą kaniul można wprowadzać wiele dawek terapeutycznych bezpośrednio do pętli.

Kaniulacja pętli jelitowych u przeżuwaczy

Jelitach jest to złożona struktura, która bierze udział nie tylko w wchłanianiu składników odżywczych, ale pełni również funkcję bariery między organizmem a...

Jelito jest złożoną strukturą, która uczestniczy nie tylko w wchłanianiu składników odżywczych, ale pełni również rolę bariery między organizmem a światem zewnętrznym. W związku z tym jelito odgrywa kluczową rolę w immunosurwailansie i ochronie przed patogenami jelitowymi. Badanie fizjologii i immunologii jelit najczęściej wykorzystuje pętle jelitowe jako model eksperymentalny.Wiele z tych modeli pętli stanowi nieodzyskiwalne procedury chirurgiczne służące do badania krótkotrwałych zmian w jelitach. Wcześniej opracowaliśmy model odzyskiwalnej pętli jelitowej, aby konkretnie mierzyć długoterminowe zmiany immunologiczne w jelitach owiec po ekspozycji na szczepionki, adiuwanty i wirusy. Istotną wadą tej metody jest jednorazowe okno możliwości podania substancji do pętli w czasie operacji.Podobnie, próbki zarówno błony śluzowej jelit, jak i treści jelitowej można pobrać jedynie po zakończeniu projektu. Zmodyfikowaliśmy zatem nasz model jelita, wprowadzając do jelita cewniki długoterminowe. Są to instrumenty stosowane w chirurgii jelit, kleszczyki DO'S, znane również jako kleszczyki jelitowe.Zaciski są istotnymi instrumentami, które zapewniają, że jelito nie zostanie uszkodzone podczas operacji. Cewniki w eksperymencie są oznakowane czarnymi znacznikami za pomocą permanentnego markeru, a następnie poddane sterylizacji. Do końca każdej cewniki wprowadza się maść okulistyczną lub bazylikową, która stanowi nieantybiotykową barierę ochronną.Pasek skóry w obszarze brzusznym zostaje nacięty ostrzem skalpela. Skórę i mięśnie rozsuwa się, w razie potrzeby stosując elektrokoagulację. Do tego samego zabiegu można użyć chirurgicznego ostrza skalpela, jednak krwawienie tkanek staje się wtedy bardziej nasilone.Pojedyncze nacięcie skalpelem tworzy niewielki otwór, umożliwiający rozcięcie otrzewnej nożyczkami Metzenbauma. Ślepa kiszka, znajdująca się w prawym dolnym kwadrancie jamy brzusznej, służy jako punkt orientacyjny. Jelito cienkie (ileum) jest przyłączone do ślepej kiszki w kierunku głowowym; tutaj zaznaczono zarówno jelito cienkie, jak i ślepą kiszkę.Następnie surowicę wprowadza się z powrotem do jamy brzusznej. Do pomiaru długości odcinka jelita, w obrębie którego podczas tej operacji zostaną utworzone pętle o długości 15 cm, wykorzystuje się docięty fragment nici jedwabnej. Odcinek jelita składa się z około 85 cm jelita cienkiego (ileum).Końce segmentu jelita są zaciskane kleszczykami doin po stronie niebędącej pętlą oraz dużymi kleszczykami Kelley po stronie pętli jelita cienkiego (ileum). Następnie jelito cienkie jest przecinane pomiędzy zaciskami. Czynność tę powtarza się po drugiej stronie.Odcinek jelita płucze się dwukrotnie 60 mililitrami sterylnej soli fizjologicznej. Następnie do odcinka jelita wprowadza się 60 mililitrów roztworu antybiotyku o szerokim spektrum działania, rozprowadzając go tak równomiernie, jak to możliwe, na całej długości odcinka i pozostawiając na 30 minut. Nacięte końce jelita krętego łączy się w anastomoza przy użyciu dwóch szwów zatrzymujących.Szwy połączyły końce jelita krętego za pomocą prostego szwu ciągłego. Przy użyciu wchłanialnej nici Vicryl 2-0 połączono boczną stronę jelita z drugą stroną. Następnie odwrócono jelito kręte i powtórzono szycie po drugiej stronie.W miejsce anastomozy wstrzykuje się pięć mililitrów sterylnej soli fizjologicznej w celu sprawdzenia szczelności. Następnie końcówki prowadnic do igieł są delikatnie wprowadzane do jelita krętego w miejscu anastomozy, aby upewnić się, że światło jelita jest szerokie i drożne. Roztwór antybiotyku o szerokim spektrum działania jest delikatnie usunięty z odcinka jelita.Tępe końce odcinka jelita zamyka się dwuwarstwowym szwem. Każdy koniec odcinka jelita zamyka się prostym szwem ciągłym, używając wchłanialnej nici Vicryl 2-0, a następnie wykonuje się szew odwracający. Pętle formuje się poprzez wiązanie odcinka jelita nićmi jedwabnymi 2-0.Pierwszą ligaturę umieszcza się pięć centymetrów od tępego końca segmentu jelita. Segment jelita jest ponownie mierzony, aby upewnić się, że ma wystarczającą długość, by pomieścić wszystkie pętle. W celu utworzenia pierwszej pętli.Jedwabną nicią chirurgiczną wykonuje się podwiązanie w odległości 15 centymetrów od pierwszego szwu, tworząc w ten sposób pętlę. Należy pamiętać, aby końce nici chirurgicznych pozostawić długie, ponieważ posłużą one do przymocowania cewnika do ściany pętli. W ścianie każdej pętli wykonuje się niewielkie nacięcie.Żółty jednorazowy rozszerzacz naczyniowy powiększa otwór, umożliwiając wprowadzenie cewnika do światła pętli. Silikonowy koralik na cewniku zapobiega jego wysunięciu się z pętli. Do szczelnego zamknięcia nacięcia stosuje się szew w kształcie woreczka.Cewnik zostaje dodatkowo przymocowany do ściany pętli poprzez związanie go szwami więzadłowymi użytymi wcześniej. Aby wyznaczyć pętlę, cewnik zostaje mocno zabezpieczony, a kaniulowana pętla jest wyróżniona na tym obrazie. Tutaj wyróżniono wszystkie trzy kaniulowane pętle. Należy zauważyć, że pętle wyglądają na różowe, zdrowe i żywotne, co dowodzi, że przepływ krwi nie został zaburzony przez zabieg chirurgiczny.Ponownie stwierdzono, że pętle wyglądają na zdrowe. W pobliżu pierwotnego nacięcia brzusznego wykonuje się nacięcie punktowe. Cewniki są wyprowadzane na zewnątrz przez nacięcie, a cewnikowane pętle są umieszczane z powrotem w jamie brzusznej.Ścianę brzuszną zszywa się, używając wchłanialnej nici jelitowej o rozmiarze 3, stosując pojedyncze szwy przerywane. Skórę zamyka się za pomocą przerywanych szwów materacowych poziomych, używając niewchłanialnej nici nylonowej o rozmiarze 2-0. Do tunelowania cewników pod skórą wykorzystuje się stalową rurkę).p>Rurkę wprowadza się w pobliżu nacięcia brzusznego, następnie prowadzi się ją pod skórą, aż do miejsca wyjścia w okolicy podstawy szyi, pomiędzy łopatkami. Taka lokalizacja miejsca wyjścia jest niezbędna, aby chronić cewniki przed późniejszymi uszkodzeniami. Cewniki wprowadza się do rurki i przesuwa do przodu na co najmniej 50% długości rurki.Następnie rurkę z cewnikami wyciąga się przez miejsce wyjścia ze skóry. Cięcie skórne zamyka się szwem przy użyciu niewchłonnianej nici nylonowej 2-0. Cewniki zostają oznakowane i umieszczone w woreczku do czasu ich użycia.Na tym zdjęciu widoczna jest owca pięć dni po operacji; zwierzę wydaje się być rześkie, czujne i reaguje na bodźce, a także powróciło do normalnej diety. W ramach tej procedury udało nam się wprowadzić długoterminowe cewniki do pętli jelitowych utworzonych w jelicie cienkim (ileum) owcy. Pozwala nam to mierzyć zmiany fizjologiczne i immunologiczne po różnych zabiegach w tych odrębnych przedziałach jelitowych.Kluczowe etapy tej procedury chirurgicznej obejmują wyznaczenie segmentu jelita w obrębie jelita krętego, usunięcie treści z segmentu jelitowego poprzez płukanie sterylną solą fizjologiczną, wprowadzenie antybiotyków o szerokim spektrum działania do segmentu jelitowego, anastomozę jelita krętego, usunięcie antybiotyków z segmentu jelitowego, tępe zamknięcie segmentu jelitowego, utworzenie pętli terminalnych w obrębie segmentu jelitowego, wprowadzenie cewników do pętli, stabilizację cewników w pętlach oraz wyprowadzenie cewników na zewnątrz. Rysunek ten przedstawia schematyczną reprezentację procedury cewnikowania pętli jelitowych opisanej w tym filmie. Należy zwrócić uwagę na trzy pętle z cewnikami o długości 15 cm, dwie nieucewnikowane przestrzenie między pętlami o długości 15 cm oraz dwa końcowe segmenty o długości 5 cm, a wszystko to utworzone w obrębie 85 cm długiego segmentu jelita krętego owcy.

catheterization-of-intestinal-loops-in-ruminants

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Cewiczne nakłucie pętli jelitowych u przeżuwaczy

Ten film demonstruje generowanie modelu pętli jelita krętego do badania przepuszczalności jelit w modelu mysim. Metoda ta zapewnia żywy model do zrozumienia funkcji bariery nabłonkowej i wynikającej z niej odpowiedzi immunologicznej.

Model pętli jelita krętego myszy: model chirurgiczny do badania przepuszczalności jelit u myszy

W tym filmie opisujemy procedurę chirurgiczną polegającą na generowaniu pętli proksymalnej okrężnicy myszy lub segmentu pcLoop, po której następuje doświetlna iniekcja markerów fluorescencyjnych do segmentu w celu zbadania przepuszczalności nabłonka jelitowego.

Generowanie mysiego modelu pętli proksymalnej jelita grubego: procedura chirurgiczna mająca na celu wygenerowanie pętli proksymalnej jelita grubego i pomiar przepuszczalności jelit poprzez wykrycie markerów fluorescencyjnych w surowicy po wstrzyknięciu doświetlnym

Przedstawiamy zabieg chirurgiczny polegający na cewnikowaniu jelitowego pnia limfatycznego u nowonarodzonych świń w celu pobrania dużych ilości składników metabolizmu lipidów z odprowadzającej limfy.

Długotrwałe cewnikowanie pnia limfatycznego jelit i pobieranie limfy u nowonarodzonych świń

Tutaj prezentujemy protokół oceny funkcji krążeniowo-oddechowej u obudzonych świń, w spoczynku i podczas stopniowanych ćwiczeń na bieżni. Przewlekła aparatura pozwala na wielokrotne pomiary hemodynamiczne bez wpływu kardiodepresyjnych środków znieczulających.

Chirurgiczne umieszczanie cewników do długotrwałych testów wysiłkowych układu sercowo-naczyniowego u świń

Tutaj prezentujemy protokół chirurgicznego tworzenia 'podwiązanych pętli jelitowych' w jelicie cienkim kurczaka. Procedura ta pozwala na porównanie zjadliwości wielu szczepów Clostridium perfringens in situ w jednym żywicielu. Metoda ta znacznie zmniejsza liczbę kurcząt zwykle niezbędnych do podobnych eksperymentów in vivo.

Zligowany model pętli jelitowej u znieczulonych kurczaków wolnych od specyficznych patogenów w celu zbadania zjadliwości Clostridium perfringens

Dostęp składników odżywczych, metabolitów mikrobioty i leków do krążenia jest kontrolowany przez barierę jelitowo-krwionośną (GBB). Opisujemy bezpośrednią metodę pomiaru przepuszczalności GBB in vivo, na którą, w przeciwieństwie do powszechnie stosowanych metod pośrednich, praktycznie nie ma wpływu na funkcje wątroby i nerek.

Metoda in vivo do oceny bariery jelitowo-krwionośnej i metabolizmu wątrobowego produktów mikrobioty

Film szczegółowo opisuje cewnikowanie dystalnej tętnicy ramiennej u świń. Ta procedura dokładnie mierzy ciśnienie tętnicze krwi i jest prostą i szybką metodą pobierania próbek do pomiarów gazometrii krwi tętniczej.

Cewnikowanie tętnicy ramiennej u świń

Rozregulowana funkcja bariery nabłonkowej jelit i reakcje immunologiczne są cechami charakterystycznymi nieswoistego zapalenia jelit, które pozostają słabo zbadane z powodu braku modeli fizjologicznych. W tym miejscu opisujemy model pętli jelitowej myszy, który wykorzystuje dobrze unaczyniony i zewnętrzny odcinek jelita do badania przepuszczalności błony śluzowej i rekrutacji leukocytów in vivo.

Funkcjonalna ocena przepuszczalności jelit i migracji przeznabłonkowej neutrofili u myszy przy użyciu standaryzowanego modelu pętli jelitowej

Opisano niezawodne i powtarzalne podejście do wprowadzania i konserwacji tunelizowanego cewnika Hickmana do długoterminowego dostępu naczyniowego u świń. Umieszczenie centralnego cewnika żylnego pozwala na wygodne codzienne pobieranie próbek krwi pełnej od obudzonych zwierząt oraz dożylne podawanie leków i płynów.

Zastosowanie cewnika Hickmana do długotrwałego dostępu naczyniowego w przedklinicznym modelu trzody chlewnej

Ten protokół pozwala na ilościowe określenie in vivo podatności i rozciągliwości żył za pomocą cewnikowania i angiografii 3D jako procedury przetrwania, co pozwala na różnorodność potencjalnych zastosowań.

Kwantyfikacja podatności i rozciągliwości żyły głównej dolnej w modelu owiec in vivo przy użyciu angiografii 3D

Naucz się cewnikowania pętli jelitowych u owiec w celu długoterminowych badań immunologicznych jelit. Ta metoda umożliwia wielokrotne podawanie substancji po operacji.

Kaniulacja pętli jelitowych u przeżuwaczy

Przeglądaj więcej filmów