Przygotowanie i wykorzystanie fantomowych zmian do ćwiczenia biopsji aspiracyjnej cienką igłą

Aby przygotować fantom zmiany, należy wyciąć z tektury kwadrat o wymiarach sześć na sześć cali, który będzie służył jako płyta bazowa. Płytę bazową należy pokryć warstwą uszczelniacza o grubości pół cala. Następnie należy odciąć kawałek banana o długości dwóch i pół cala i delikatnie wcisnąć go w uszczelniacz.

Banan służy jako rdzeń fantomowej zmiany. Całkowicie zatop rdzeń w masie uszczelniającej, dbając o to, aby nie uwięzić pęcherzyków powietrza. Przykryj rdzeń kawałkiem folii spożywczej i uformuj go w gładki kopczyk. Pozostaw uchwyt z masy uszczelniającej do utwardzenia w ciepłym miejscu, aż stanie się twardy i w pełni utwardzony.

Zdejmij folię plastikową, aby przećwiczyć biegłość w wykonywaniu FNA w celu pobrania próbki z rdzenia banana oraz przećwiczyć przygotowanie rozmazu. Jestem dr Vino z Oddziału Cytopatologii w Katedrze Patologii w Medical College of Wisconsin. A ja jestem dr George Varszegi, rezydent cytopatologii w tym samym oddziale.

W dzisiejszym materiale zaprezentujemy procedurę przygotowania fantomowej zmiany chorobowej w celu ćwiczenia biegłości w wykonywaniu biopsji aspiracyjnej cienkoigłowej (FNAV), przy użyciu łatwo dostępnych i prostych narzędzi oraz materiałów. Technikę tę stosujemy zazwyczaj podczas wprowadzania stażystów cytopatologii i rezydentów patomorfologii w procedurę ostatecznej biopsji aspiracyjnej. W późniejszym etapie szkolenia stażyści i rezydenci będą doskonalić swoje umiejętności, wykonując biopsję aspiracyjną zmian wyczuwalnych klinicznie pod nadzorem kadry naukowej.

Zacznijmy zatem. Przygotuj fantom zmiany na jeden lub dwa dni przed planowaną sesją ćwiczeń z FNAB. Przed rozpoczęciem przygotuj na blacie kawałek tektury, pistolet do silikonu, nieobranego banana oraz folię spożywczą.

Pierwszym krokiem w przygotowaniu fantomu zmiany jest wycięcie z tektury kawałka o wymiarach sześć na sześć cali, który posłuży jako płyta podstawowa. Następnie należy odciąć fragment banana o długości około dwóch cali, który będzie stanowił rdzeń fantomu zmiany. Po przygotowaniu rdzenia fantomu zmiany, za pomocą pistoletu do silikonu, należy nanieść na płytę podstawową warstwę uszczelniacza o grubości około pół cala.

Lekko wciśnij rdzeń sztucznej zmiany w wilgotną masę uszczelniającą. Następnie nałóż więcej masy na rdzeń sztucznej zmiany, aby całkowicie go zatopić. Nosząc rękawiczki, należy uważać, aby w masie uszczelniającej nie powstały pęcherzyki powietrza.

Ręcznie rozprowadź uszczelniacz wokół rdzenia fantomowej zmiany, aby upewnić się, że jest on całkowicie otoczony. Następnie przykryj wypukłość kawałkiem folii spożywczej o wymiarach six by six inch i uformuj ją w gładki, wypukły kształt. Pozostaw wypukłość z uszczelniacza w ciepłym miejscu do utwardzenia na okres od sześciu do ośmiu godzin dłuższy niż czas utwardzania zalecany dla konkretnej marki użytego uszczelniacza.

Uszczelniacz twardnieje w kontakcie z powietrzem. Kopczyk można pozostawić w temperaturze pokojowej powyżej 60 stopni Fahrenheita lub inkubować w 37 °C, aby przyspieszyć utwardzanie. Po utwardzeniu uszczelniacz staje się twardy, co pozwala na łatwe odklejenie folii plastikowej.

Fantomowa zmiana do FNA jest teraz gotowa do ćwiczenia procedury FNA. Po przygotowaniu i utwardzeniu fantomowej zmiany można jej użyć do praktykowania procedury FNAB. W tym przypadku wykorzystujemy pobieracz tkanek z funkcjonalnym zaworem, lecz w zasadzie można zastosować dowolny system FNA.

THFB składa się z igły do nakłucia preparatu, piasty igły do zbierania aspirowanego materiału, strzykawki do kontrolowania ciśnienia wewnątrz urządzenia oraz zaworu służącego do łączenia i rozłączania piasty igły ze strzykawką. Rozpocznij od przygotowania zestawu do FNA z zamkniętym zaworem łączącym piastę igły ze strzykawką. Następnie odciągnij tłok strzykawki, aby wytworzyć próżnię w cylindrze strzykawki.

Następnie wprowadź końcówkę igły do zmiany chorobowej. Otwórz zawór, aby połączyć nasadę igły z próżnią w cylindrze strzykawki. Próżnia zaciągnie materiał ze zmiany chorobowej do igły i jej nasady.

Przesuwaj igłę w przód i w tył w obrębie zmiany, aby aspirać reprezentatywną próbkę komponentów komórkowych. Utrzymując podciśnienie, pobierz próbki z różnych obszarów zmiany, wprowadzając igłę w różnych kierunkach. Po zakończeniu pobierania próbek przekręć zawór, aby odłączyć podciśnienie w cylindrze strzykawki i wyrównać ciśnienie z warunkami zewnętrznymi poprzez otwarcie zaworu.

Następnie przekręć zawór, aby odłączyć go od strony zewnętrznej oraz od korpusu strzykawki. Wyjmij igłę z zmiany chorobowej przy zamkniętym zaworze. Pozostawienie zaworu zamkniętego pozwala utrzymać niewielkie podciśnienie w końcówce piasty, co zapobiega cofaniu się próbki do zmiany chorobowej w wyniku działania kapilarnego.

Podobnie jak w zjawisku pipetowania, próbka tkanki znajduje się teraz bezpiecznie w piastach igły. Po wyjęciu igły z prowadnicy, nanieś aspirat na szkiełko przedmiotowe w celu przygotowania rozmazu bezpośredniego. Po naniosieniu kropli aspiratu na szkiełko, można ją rozprowadzić różnymi metodami, w zależności od charakteru materiału; zazwyczaj rozprowadzamy próbkę między dwoma szkiełkami, stosując metodę przedstawioną tutaj.

Jeśli rzeczywista próbka jest rozcieńczona krwią, należy odprowadzić nadmiar krwi, przechylając szkiełko przed nałożeniem na nie drugiego szkiełka przedmiotowego. Jeśli aspirat jest głównie zawiesiną bez mikrofragmentów, na przykład w przypadku zmian limfoproliferacyjnych, można go rozprzestrzenić metodą prążkowania, w której krawędź jednego szkiełka służy do stworzenia zestawu rozmazów przypominających prążki na innym szkiełku, lub można zastosować metodę rozcierania, w której jedno szkiełko służy do stworzenia filmu na drugim szkiełku. Po przygotowaniu rozmazów można je przetworzyć i utrwalić na różne sposoby.

W przypadku różnych metod barwienia najlepszym podejściem jest szybkie wysuszenie wszystkich rozmazów na powietrzu w czasie od jednej do dwóch minut. Suszenie grubszych i bardziej wilgotnych rozmazów można przyspieszyć, poruszając szkiełkami w powietrzu lub, co jest preferowane, za pomocą suszarki do włosów lub przenośnego, zasilanego bateryjnie wentylatora ręcznego. Podczas korzystania z wentylatora należy zachować ostrożność, aby zapobiec aerozolizacji, szczególnie w przypadku zmian, co do których przypuszcza się, że są zainfekowane; po wyschnięciu rozmazów należy je zabarwić zgodnie z wymogami przeprowadzanych eksperymentów.

W niniejszym materiale demonstrujemy barwienie preparatu rozmazy wysuszonego na powietrzu za pomocą barwnika D quick stain, który jest jednym z barwników typu Romanowskiego stosowanych w badaniach czasowych. Należy postępować zgodnie z instrukcjami producenta. Stwierdzamy, że suszenie na powietrzu znacznie poprawia klarowność barwienia, co pokazano na tym przykładzie rozmazów barwionych metodą Papanicolaou.

Analiza tych wstępnych barwień pozwoli określić dodatkowe testy, które można przeprowadzić, takie jak wybiórcza mikroskopia elektronowa bloku komórkowego, posiewy mikrobiologiczne lub inne. Pomyślne ukończenie procedury na fantomie zmiany umożliwi prawidłową aspirację materiału z zmiany, w tym przypadku pastowatego materiału roślinnego z banana. Materiał ten można rozprzestrzenić na szkiełkach przedmiotowych, aby przećwiczyć rozmaz i barwienie.

Właśnie pokazaliśmy Państwu, jak przygotować fantom zmiany do ćwiczenia biegłości w technice FNAB. Podczas przeprowadzania tego eksperymentu należy pamiętać, że fantom zmiany należy przygotować co najmniej 36 godzin przed sesją testowania biegłości, ponieważ żel uszczelniający wymaga czasu na zestalenie. Kolejną ważną kwestią jest stosowanie próżni oraz jej zwalnianie w odpowiedniej sekwencji, aby uzyskać optymalny materiał aspiratu podczas wykonywania procedury FNAV.

To wszystko. Dziękujemy za oglądanie i życzymy powodzenia w ćwiczeniach. Bardzo dziękujemy.