Name: Przygotowanie i wykorzystanie zmian fantomowych do wykonywania biopsji aspiracyjnych cienkoigłowych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-09-29T21:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 26 s
Description: Naucz się przygotowywać fantomowe zmiany do biopsji aspiracyjnych cienkoigłowych. Ta metoda wykorzystuje karton, uszczelniacz i banana, umożliwiając skuteczną naukę technik pobierania próbek dla rezydentów patologii.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol style="list-style-type:upper-alpha;">
<li>Przygotowanie modelu zmiany (przygotować model około 38 do 48 godzin przed właściwą sesją ćwiczeń z biegłości w wykonywaniu BAC (Rycina 1) lub wykorzystać gotowy produkt „AV Phantom” firmy FNA Source, USA. Przygotowany model zmiany (przechowywany w warunkach chłodniczych, bez zamrażania) może być przechowywany nawet przez 3 do 4 dni przed sesją ćwiczeń).</li>
<li>Ćwiczenie biegłości w BAC: Choć procedura została zaprezentowana z użyciem urządzenia THFV firmy Shidham (Tissue Harvester with Functional Valve) (FNA Source, USA), do ćwiczeń można użyć dowolnego innego systemu do BAC (Rycina 2).</li>
<li>Rozprowadzanie i opracowywanie aspiratu na szklanych slajdach (Rycina 3).</li>
</ol>
Wymagane materiały
<ol style="list-style-type:lower-alpha;">
<li>Przezroczysty silikonowy uszczelniacz – dostępny w wielu sklepach budowlanych i z artykułami do domu. Dostępnych jest wiele marek, w tym GETM, DAP, Red Devil, White Lightning oraz marki lokalnych sieci. Użyliśmy Clear Silicone Rubber, White Lightning Products, Cleveland, Ohio, USA, <a href="http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html">http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html</a>)</li>
<li>Pistolet do silikonu</li>
<li>Kawałek folii spożywczej (użyliśmy Saran Cling Plus Wrap, SC Johnson &amp; Son Inc, Racine, WI, USA <a href="http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp">http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp</a></li>
<li>Rękawiczki lateksowe</li>
<li>Banan lub kiełbasa o dużej średnicy.</li>
<li>Sztywna i płaska płyta podstawowa (około 6 inches X 6 inches) wykonana z grubej tektury, płyty akrylowej lub innego materiału.</li>
<li>Sprzęt do wykonywania FNA 
<ul>
<li>Igły hipodermiczne o rozmiarze 25 gauge</li>
<li>THFV Shidhama (lub inne komponenty do wykonywania FNA)</li>
<li>Lamelki szklane</li>
<li>Zestawy do barwienia</li>
</ul>
</li>
</ol>
Szczegółowy opis krok po kroku
A. Przygotowanie fantomowej zmiany (przygotować fantom na 1-2 dni przed ćwiczeniem biegłości w FNA (Rysunek 2) lub wykorzystać gotowy do użycia „AV Phantom” z FNA Source, USA).
<ol>
<li>Wytnij płytę wspierającą o wymiarach 6 X 6 cali.</li>
<li>Wytnij odcinek o długości 2,5 cala z 'rdzenia pozornej zmiany' (banana lub kiełbasy).</li>
<li>Wyciśnij warstwę uszczelniacza o grubości 0,5 cala na płytę podstawową.</li>
<li>Lekko wciśnij 'rdzeń pozornej zmiany' w tę warstwę uszczelniacza.</li>
<li>Nałóż więcej uszczelniacza na 'rdzeń pozornej zmiany', tak aby był on całkowicie zatopiony w masie uszczelniacza, nie dopuszczając do powstania pęcherzyków powietrza.</li>
<li>Uformuj i wyrównaj uszczelniacz wokół 'rdzenia pozornej zmiany' za pomocą ręki w rękawiczce.</li>
<li>Użyj kawałka folii spożywczej o wymiarach 6 X 6 cali, aby przykryć masę uszczelniacza i wyrównaj powierzchnię kopca do gładkiego kształtu wypukłego, używając czystej ręki w rękawiczce.</li>
<li>Pozostaw masę uszczelniacza do utwardzenia w ciepłym miejscu przez 6-8 godzin dłużej niż czas utwardzania podany w instrukcji produktu (zazwyczaj przez 24 godziny).</li>
<li>Po utwardzeniu uszczelniacz powinien być twardy, a folię spożywczą można będzie łatwo zdjąć.</li>
<li>Fantom zmiany do FNA jest gotowy do ćwiczenia procedury FNA po około 8 godzinach, gdy cała masa uszczelniacza całkowicie utwardzi się aż do centrum zawierającego 'rdzeń pozornej zmiany' (banana lub kiełbasę).</li>
</ol>
B. Ćwiczenie biegłości w FNA na zmianie w fantomie AV.
Każde podejście mające na celu uzyskanie wysokiej jakości, odpowiednich aspiratów FNA z dobrej jakości bezpośrednimi rozmazami cytologicznymi powinno uwzględniać następujące krytyczne punkty-
<ol style="list-style-type:upper-roman;">
<li>Średnica igły – jak sugeruje tytuł procedury, cieńsze igły (wyższa wartość gauge) pozwalają uzyskać lepsze aspiraty przy minimalnym rozcieńczeniu krwią. Aby zachować krytyczną równowagę między korzyściami a ograniczeniami, preferowane są igły od 22 do 25 gauge, co zapewnia optymalną stabilność mechaniczną igły bez wpływu na jakość aspiratu FNA.</li>
<li>Kontrolowanie odpowiednich sekwencji przykładania i zwalniania podciśnienia podczas procedury FNA – jest to kluczowe, aby z każdym ruchem igły przesuwać pobrane komórki w kierunku piasty igły. Jednakże nie należy dopuścić, aby aspirowany materiał dotarł do obszaru zestawu aspiracyjnego z strzykawką. Jeśli nie zostanie temu zapobieżone, materiał może być trudny do odzyskania w celu wykonania rozmazów (taki materiał może być jednak wykorzystany do przygotowania bloku komórkowego lub metod koncentracji, takich jak Cytospin, metody filtracyjne lub nowoczesne preparaty cytologii w płynie).</li>
<li>Wypracowanie odpowiednich umiejętności w obróbce aspirowanego materiału, w tym przygotowaniu bezpośredniego rozmazu oraz ocenie adekwatności materiału na miejscu z odpowiednią segregacją do badań pomocniczych, takich jak przygotowanie bloku komórkowego do wybiórczej immunocytochemii, wybiórcza cytometria przepływowa do immunofenotypowania zmian limfoproliferacyjnych, przekazywanie sterylnych próbek do badań mikrobiologicznych oraz materiału do testów molekularnych (cytogenetyka itp.).</li>
</ol>
Ba. Wykonanie procedury FNA (przedstawione z użyciem urządzenia Shidham's THFV [1] (FNA Source, USA); można jednak wykorzystać dowolny inny system FNA do ćwiczeń) (Rysunek 3,4,5).
<ol>
<li>Przygotować zespół FNA z zamkniętym zaworem. </li>
<li>Zlokalizuj zmianę i wprowadź końcówkę igły w obszar zmiany.</li>
<li>Otwórz zawór, aby podłączyć podciśnienie, przechodzące przez igłę aż do jej końcówki, w celu aspiracji reprezentatywnych składników komórkowych zmiany podczas każdego tam i z powrotem udar w obszarze zmiany.</li>
<li>Zachowaj próżnię i pobierz próbki z różnych obszarów zmiany, wprowadzając igłę do zmiany w różnych kierunkach.</li>
<li>Zamknąć zawór, aby odciąć podciśnienie w świetle igły.</li>
<li>Wyrównaj ciśnienie z warunkami otoczenia (np. poprzez krótkotrwałe odłączenie zaworu strzykawki od igły). &amp; ponownie podłączyć. W przypadku użycia specjalnego urządzenia z wbudowanymi krokami, takiego jak „THFV”, krok ten oraz pozostałe kroki od Ba1 do Ba6 są przeprowadzane automatycznie poprzez realizację różnych etapów w systemie zaworowym [1].</li>
<li>Wyjąć igłę z zmiany przy zamkniętym zaworze, aby zapobiec utracie materiału poprzez działanie kapilarne do wnętrza zmiany, chyba że w końcówce złącza występuje lekki podciśnienie.</li>
<li>Przenieść aspirat na szkiełko przedmiotowe w celu przygotowania rozmazu bezpośredniego (patrz poniżej) (rycina 6).</li>
</ol>
Bb. Przetwarzanie aspiratu z odpowiednim triażem 
Rozcieranie aspiratu na szkiełkach przedmiotowych i przygotowanie wysokiej jakości rozmazów bezpośrednich (Rysunek 6), a następnie właściwe barwienie i triaż (Rysunek 7,8).
<ol>
<li>Kroplę aspiratu naniesioną na szkiełko przedmiotowe rozprzestrzenia się różnymi metodami, zgodnie z przedstawionymi na (Rycina 6) [2]. Standardowym podejściem jest metoda „a”. Jednakże, jeśli materiał stanowi krew z domieszką mikrofragmentów, nadmiar krwi usuwa się poprzez pochylenie szkiełka, a następnie mikrofragmenty rozprzestrzenia się między to szkiełko a drugie szkiełko przedmiotowe, podobnie jak w metodzie „a”. Jeśli aspirat jest głównie zawiesiną bez mikrofragmentów, np. z zmian limfoproliferacyjnych, rozprzestrzenia się go podobnie do metod „b” lub „c”.</li>
<li>Rozmazy mogą być przetwarzane i utrwalane na różne sposoby, zależnie od zastosowanych metod barwienia podczas oceny adekwatności materiału na miejscu (on-site). Jednak najlepszym podejściem jest wysuszenie wszystkich rozmazów na powietrzu. Rozmazy wysuszone na powietrzu można barwić barwnikami Romanowskiego (takimi jak barwienie Diff-Quik, barwienie Wrighta) po utrwaleniu w metanolu lub barwić metodą Papanicolaou po rehydratacji w roztworze soli fizjologicznej i post-utrwaleniu (w 95% etanolu lub preferencyjnie w 95% etanolu z 5% kwasem octowym) [3]. Istotną korzyścią jest eliminacja zakłóceń spowodowanych obecnością przesłaniającej krwi [3].</li>
<li>W zależności od wstępnych wyników cytomorfologicznych uzyskanych podczas oceny adekwatności materiału na miejscu, zaleca się przeprowadzenie dodatkowej diagnostyki różnicowej (takiej jak opcjonalny blok komórkowy, mikroskopia elektronowa, posiewy mikrobiologiczne, cytometria przepływowa, testy molekularne, cytogenetyka itp.) zgodnie ze wskazaniami.</li>
</ol>
Reprezentatywne wyniki:
<img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig1tmb.jpg" alt="Eksperyment właściwości materiałowych banana lub kiełbasy z użyciem silikonu uszczelniającego, folii plastikowej i płyty wsporczej." data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="rycina 1"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig1.jpg">Prosimy kliknąć tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję ryciny 1</a>.
 
Rycina 1. Materiały wymagane do przygotowania fantomu AV do ćwiczenia biegłości w FNA (*Użyliśmy folii plastikowej Saran, która nie przywarła do silikonu podczas usuwania po całkowitym utwardzeniu silikonu.)
<hr style="border-bottom:1px dotted #999999;">

<img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig2tmb.jpg" alt="Schemat równowagi statycznej; etapy tworzenia fantoma zmiany przy użyciu uszczelniacza, owijki i płyty wsporczej." data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="rycina 2"> 
<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig2.jpg">Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję ryciny 2.</a>
 
Rycina 2. Przygotowanie fantoma zmiany AV
<hr style="border-bottom:1px dotted #999999;">

<img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig3tmb.jpg" alt="Schemat techniki cienkoigłowej aspiracji (FNA), szczegółowo przedstawiający wykorzystanie próżni oraz etapy wprowadzania igły." data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="rycina 3"> 
<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig3.jpg">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję ryciny 3.</a>
 
Rycina 3. Kluczowe etapy procedury FNA.
<hr style="border-bottom:1px dotted #999999;">

<img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig4tmb.jpg" alt="Schemat procedury cienkoigłowej aspiracji; konfiguracja strzykawki; wyrównywanie ciśnienia; przewodnik krok po kroku." data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="rycina 4"> 
<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig4.jpg">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję ryciny 4.</a>
 
Rycina 4. EUS-FNA – Podsumowanie kluczowych kroków* (patrz Ryc. 3)
<hr style="border-bottom:1px dotted #999999;">

<img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig5tmb.jpg" alt="Schemat pobierania aspiratu z zmiany; przedstawia poprawne i niepoprawne techniki stosowania zaworu krew-powietrze." data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="rycina 5"> 
<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig5.jpg">Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję ryciny 5.</a>
 
Rycina 5. Błędy związane z krytycznymi etapami procedury FNA.
<hr style="border-bottom:1px dotted #999999;">

<img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig6tmb.jpg" alt="Schemat technik cytopatologicznych; metody przygotowania preparatów: między szkiełkami, żebrowanie, rozcieranie." data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="rycina 6"> 
<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig6.jpg">Proszę kliknąć tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję ryciny 6.</a>
 
Rycina 6. Przygotowanie bezpośrednich rozmazów materiału z BACC pomiędzy dwoma szkiełkami.
<hr style="border-bottom:1px dotted #999999;">

<img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig7tmb.jpg" alt="Porównanie cytologiczne rozmazu utrwalonego na mokro i suszonego na powietrzu w diagnostyce zmian trzustkowych, obrazy mikroskopowe." data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="rycina 7"> 
<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig7.jpg">Prosimy kliknąć tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję ryciny 7.</a>
 
Rycina 7. Rozmazy utrwalone na mokro w porównaniu z rozmazami suszonymi na powietrzu.
<hr style="border-bottom:1px dotted #999999;">

<img border="0" src="/files/ftp_upload/1404/1404fig8tmb.jpg" alt="Porównanie rozmazów barwionych Papanicolaou; a: utrwalone w mokrej metodzie, b: wysuszone na powietrzu z wyraźniejszym jądrem, do analizy cytologicznej." data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="rycina 8"> 
<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1404/1404fig8.jpg">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję ryciny 8.</a>
 Rycina 8.Rozmazy utrwalone w mokrej metodzie w porównaniu do rozmazów wysuszonych na powietrzu.

<ol><li>Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+Harvester+with+Functional+Valve+%28THFV%29%3A+Shidham%27s+device+for+reproducibly+higher+specimen+yield+by+fine+needle+aspiration+biopsy+with+easy+to+perform+steps%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Clinical+Pathology%22%5BJournal%5D)">Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps.</a> BMC Clinical Pathology. 7 (2), (2007).</li>
<li>Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. , 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).</li>
<li>Shidham, V., Kampalath, B., England, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Routine+air+drying+of+all+the+smears+prepared+during+fine+needle+aspiration+and+intraoperative+cytology+studies%3A+An+opportunity+to+practice+a+unified+protocol%2C+offering+the+flexibility+of+choosing+variety+of+staining+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cytologica%22%5BJournal%5D)">Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods.</a> Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).</li>
</ol>

Biopsje aspiracyjne cienkoigłowe (FNAB) są powszechnie wykonywane jako ekonomiczna, bezpieczna i szybka technika małoinwazyjna służąca do diagnostyki tkankowej różnych guzów i zmian. W tej procedurze igłę o rozmiarze od 18 do 27 G wprowadza się do zmiany, przemieszczając ją wielokrotnie w przód i w tył w różnych obszarach zmiany pod kontrolowaną próżnią (ssaniem) o zmiennym natężeniu – od minimalnego, w formie samego działania kapilarnego, do próżni rzędu 10 ml w strzykawce – w celu pobrania diagnostycznego materiału tkankowego. W celu uzyskania dobrego materiału cytologicznego do przygotowania bezpośrednich rozmazów preferowana jest igła o mniejszej średnicy (wyższy numer G). Igła o większej średnicy 18G pozwala na pobranie większej ilości próbki odpowiedniej do bloków komórkowych, cytometrii przepływowej, mikroskopii elektronowej, cytogenetyki, posiewów mikrobiologicznych itp. Choć procedura jest prosta, kontrolowanie poszczególnych etapów poprzez odpowiednie przykładanie i zwalnianie próżni w odpowiednich momentach w sposób skoordynowany jest niezwykle istotne dla uzyskania optymalnych wyników.
Ze względu na niedostępność specjalistycznych igieł o wysokiej wydajności, do przeprowadzenia tej procedury stosuje się konwencjonalne igły podskórne lub ich modyfikacje. Igły podskórne mają jednak wiele ograniczeń, co prowadzi do niskiej wydajności pobierania materiału przy zastosowaniu standardowej metody. Konieczność stosowania specjalnych uchwytów do strzykawek zazwyczaj zwiększa stopień skomplikowania procedury. W związku z brakiem dostępnych komercyjnie odpowiednich urządzeń do FNAB, ta niezwykle wszechstronna procedura często wiąże się z problemem niewystarczającego pobrania materiału. Niedawno opisano urządzenie zwiększające wydajność przy zachowaniu powtarzalności wyników [1].
Ponadto obecnie brakuje odpowiedniego modelu do ćwiczenia biegłości w wykonywaniu FNAB przez personel medyczny w trakcie szkolenia, w tym rezydentów i stypendystów. Opracowaliśmy standaryzowany model z kawałkiem świeżej wątroby bydlęcej umieszczonym w rękawiczce lateksowej do ćwiczenia biegłości w FNAB. Jednak model ten jest trudny do przygotowania w krótkim czasie. Pozyskanie świeżej wątroby bydlęcej jest zazwyczaj ograniczającym czynnikiem. Dodatkowo, obchodzenie się z wątrobą może wprowadzić czynniki związane z kontaminacją, co stanowi istotną wadę. Tendencja rękawiczki lateksowej do przeciekania po kilku nakłuciach igłą prowadzi do potencjalnego zanieczyszczenia otoczenia podczas sesji ćwiczeń.
Opisujemy i przedstawiamy nową, lecz prostą metodę osadzania małego kawałka banana (lub kiełbasy) w ogólnodostępnym silikonowym uszczelniaczu oraz innym łatwo dostępnym materiale. Fantom FNAB zachowuje szczelność próżniową, co umożliwia aspirację materiału z osadzonego preparatu, co odpowiada rzeczywistej procedurze FNAB zmiany w warunkach klinicznych. W tym filmie demonstrujemy procedurę tworzenia zmiany w fantomie do FNAB oraz praktyczne wykonywanie procedury FNAB. Przedstawiono w nim również krótko proces obróbki pobranego materiału, w tym przygotowanie rozmazu i barwienie [2,3].
Ponieważ masa uszczelniająca wymaga czasu na utwardzenie, fantomową zmianę należy przygotować z wyprzedzeniem, około 24 do 48 godzin przed sesją ćwiczeń. Gotowe do użycia fantomowe zmiany można nabyć z oferty komercyjnej (FNA Source, USA).
Sztuczna zmiana do ćwiczenia biegłości w technice FNAB może być wykorzystywana do szkolenia rezydentów i stypendystów przed rozpoczęciem wykonywania FNAB u pacjentów w warunkach klinicznych.

przygotowanie i wykorzystanie fantomowych zmian do ćwiczenia biopsji aspiracyjnej cienką igłą

Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies

Obecnie pracownicy ochrony zdrowia, w tym lekarze rezydenci i stażyści, nie dysponują odpowiednim modelem fantomowym do ćwiczenia procedury cienkoigłowej aspiracji biopsyjnej (FNAB). W przeszłości opracowaliśmy ustandaryzowany model składający się z rękawiczki lateksowej zawierającej świeżą wątrobę bydlęcą do nauki FNAB. Model ten jest jednak trudny do zorganizowania i przygotowania w krótkim czasie, a najtrudniejszym aspektem jest pozyskanie świeżej wątroby bydlęcej. Znaczną wadą jest również praca z tkanką wątroby obciążoną ryzykiem zanieczyszczeń. Ponadto materiał rękawiczki przecieka po kilku wprowadzeniach igły, co prowadzi do zabrudzeń.
Opracowaliśmy nową, prostą metodę osadzania niewielkiego kawałka kiełbasy lub banana w komercyjnie dostępnym silikonowym uszczelniaczu. Model ten umożliwia zachowanie szczelności próżniowej oraz aspirację materiału z osadzonego preparatu, co przypomina rzeczywitą procedurę cienkoigłowej aspiracji biopsji (FNAB) zmian guzowatych w warunkach klinicznych.
Materiał aspirowany w piastce igły można przetwarzać w sposób analogiczny do próbek pobranych podczas rzeczywistej procedury cienkoigłowej biopsji aspiracyjnej (FNAB), co pozwala na doskonalenie umiejętności przygotowywania rozmazów i ich barwienia.

Ćwiczenie biopsji aspiracyjnej cienkoigłowej (FNAB) przez stażystów jest stosunkowo trudne ze względu na brak łatwo dostępnych i odpowiednich zmian chorobowych. Przygotowanie fantomu zmiany naczyniowo-żylnej (AV) do ćwiczenia procedury FNAB i opanowania biegłości w jej wykonywaniu jest stosunkowo proste.

Przygotowanie i wykorzystanie fantomowych zmian do ćwiczenia biopsji aspiracyjnej cienką igłą

Obecnie pracownicy służby zdrowia, w tym lekarze w trakcie specjalizacji i rezydenci, nie dysponują odpowiednim modelem fantomowym do ćwiczenia biopsji aspiracyjnej cienkoigłowej (FNAB)...

Aby przygotować fantom zmiany, należy wyciąć z tektury kwadrat o wymiarach sześć na sześć cali, który będzie służył jako płyta bazowa. Płytę bazową należy pokryć warstwą uszczelniacza o grubości pół cala. Następnie należy odciąć kawałek banana o długości dwóch i pół cala i delikatnie wcisnąć go w uszczelniacz.Banan służy jako rdzeń fantomowej zmiany. Całkowicie zatop rdzeń w masie uszczelniającej, dbając o to, aby nie uwięzić pęcherzyków powietrza. Przykryj rdzeń kawałkiem folii spożywczej i uformuj go w gładki kopczyk. Pozostaw uchwyt z masy uszczelniającej do utwardzenia w ciepłym miejscu, aż stanie się twardy i w pełni utwardzony.Zdejmij folię plastikową, aby przećwiczyć biegłość w wykonywaniu FNA w celu pobrania próbki z rdzenia banana oraz przećwiczyć przygotowanie rozmazu. Jestem dr Vino z Oddziału Cytopatologii w Katedrze Patologii w Medical College of Wisconsin. A ja jestem dr George Varszegi, rezydent cytopatologii w tym samym oddziale.W dzisiejszym materiale zaprezentujemy procedurę przygotowania fantomowej zmiany chorobowej w celu ćwiczenia biegłości w wykonywaniu biopsji aspiracyjnej cienkoigłowej (FNAV), przy użyciu łatwo dostępnych i prostych narzędzi oraz materiałów. Technikę tę stosujemy zazwyczaj podczas wprowadzania stażystów cytopatologii i rezydentów patomorfologii w procedurę ostatecznej biopsji aspiracyjnej. W późniejszym etapie szkolenia stażyści i rezydenci będą doskonalić swoje umiejętności, wykonując biopsję aspiracyjną zmian wyczuwalnych klinicznie pod nadzorem kadry naukowej.Zacznijmy zatem. Przygotuj fantom zmiany na jeden lub dwa dni przed planowaną sesją ćwiczeń z FNAB. Przed rozpoczęciem przygotuj na blacie kawałek tektury, pistolet do silikonu, nieobranego banana oraz folię spożywczą.Pierwszym krokiem w przygotowaniu fantomu zmiany jest wycięcie z tektury kawałka o wymiarach sześć na sześć cali, który posłuży jako płyta podstawowa. Następnie należy odciąć fragment banana o długości około dwóch cali, który będzie stanowił rdzeń fantomu zmiany. Po przygotowaniu rdzenia fantomu zmiany, za pomocą pistoletu do silikonu, należy nanieść na płytę podstawową warstwę uszczelniacza o grubości około pół cala.Lekko wciśnij rdzeń sztucznej zmiany w wilgotną masę uszczelniającą. Następnie nałóż więcej masy na rdzeń sztucznej zmiany, aby całkowicie go zatopić. Nosząc rękawiczki, należy uważać, aby w masie uszczelniającej nie powstały pęcherzyki powietrza.Ręcznie rozprowadź uszczelniacz wokół rdzenia fantomowej zmiany, aby upewnić się, że jest on całkowicie otoczony. Następnie przykryj wypukłość kawałkiem folii spożywczej o wymiarach six by six inch i uformuj ją w gładki, wypukły kształt. Pozostaw wypukłość z uszczelniacza w ciepłym miejscu do utwardzenia na okres od sześciu do ośmiu godzin dłuższy niż czas utwardzania zalecany dla konkretnej marki użytego uszczelniacza.Uszczelniacz twardnieje w kontakcie z powietrzem. Kopczyk można pozostawić w temperaturze pokojowej powyżej 60 stopni Fahrenheita lub inkubować w 37 °C, aby przyspieszyć utwardzanie. Po utwardzeniu uszczelniacz staje się twardy, co pozwala na łatwe odklejenie folii plastikowej.Fantomowa zmiana do FNA jest teraz gotowa do ćwiczenia procedury FNA. Po przygotowaniu i utwardzeniu fantomowej zmiany można jej użyć do praktykowania procedury FNAB. W tym przypadku wykorzystujemy pobieracz tkanek z funkcjonalnym zaworem, lecz w zasadzie można zastosować dowolny system FNA.THFB składa się z igły do nakłucia preparatu, piasty igły do zbierania aspirowanego materiału, strzykawki do kontrolowania ciśnienia wewnątrz urządzenia oraz zaworu służącego do łączenia i rozłączania piasty igły ze strzykawką. Rozpocznij od przygotowania zestawu do FNA z zamkniętym zaworem łączącym piastę igły ze strzykawką. Następnie odciągnij tłok strzykawki, aby wytworzyć próżnię w cylindrze strzykawki.Następnie wprowadź końcówkę igły do zmiany chorobowej. Otwórz zawór, aby połączyć nasadę igły z próżnią w cylindrze strzykawki. Próżnia zaciągnie materiał ze zmiany chorobowej do igły i jej nasady.Przesuwaj igłę w przód i w tył w obrębie zmiany, aby aspirać reprezentatywną próbkę komponentów komórkowych. Utrzymując podciśnienie, pobierz próbki z różnych obszarów zmiany, wprowadzając igłę w różnych kierunkach. Po zakończeniu pobierania próbek przekręć zawór, aby odłączyć podciśnienie w cylindrze strzykawki i wyrównać ciśnienie z warunkami zewnętrznymi poprzez otwarcie zaworu.Następnie przekręć zawór, aby odłączyć go od strony zewnętrznej oraz od korpusu strzykawki. Wyjmij igłę z zmiany chorobowej przy zamkniętym zaworze. Pozostawienie zaworu zamkniętego pozwala utrzymać niewielkie podciśnienie w końcówce piasty, co zapobiega cofaniu się próbki do zmiany chorobowej w wyniku działania kapilarnego.Podobnie jak w zjawisku pipetowania, próbka tkanki znajduje się teraz bezpiecznie w piastach igły. Po wyjęciu igły z prowadnicy, nanieś aspirat na szkiełko przedmiotowe w celu przygotowania rozmazu bezpośredniego. Po naniosieniu kropli aspiratu na szkiełko, można ją rozprowadzić różnymi metodami, w zależności od charakteru materiału; zazwyczaj rozprowadzamy próbkę między dwoma szkiełkami, stosując metodę przedstawioną tutaj.Jeśli rzeczywista próbka jest rozcieńczona krwią, należy odprowadzić nadmiar krwi, przechylając szkiełko przed nałożeniem na nie drugiego szkiełka przedmiotowego. Jeśli aspirat jest głównie zawiesiną bez mikrofragmentów, na przykład w przypadku zmian limfoproliferacyjnych, można go rozprzestrzenić metodą prążkowania, w której krawędź jednego szkiełka służy do stworzenia zestawu rozmazów przypominających prążki na innym szkiełku, lub można zastosować metodę rozcierania, w której jedno szkiełko służy do stworzenia filmu na drugim szkiełku. Po przygotowaniu rozmazów można je przetworzyć i utrwalić na różne sposoby.W przypadku różnych metod barwienia najlepszym podejściem jest szybkie wysuszenie wszystkich rozmazów na powietrzu w czasie od jednej do dwóch minut. Suszenie grubszych i bardziej wilgotnych rozmazów można przyspieszyć, poruszając szkiełkami w powietrzu lub, co jest preferowane, za pomocą suszarki do włosów lub przenośnego, zasilanego bateryjnie wentylatora ręcznego. Podczas korzystania z wentylatora należy zachować ostrożność, aby zapobiec aerozolizacji, szczególnie w przypadku zmian, co do których przypuszcza się, że są zainfekowane; po wyschnięciu rozmazów należy je zabarwić zgodnie z wymogami przeprowadzanych eksperymentów.W niniejszym materiale demonstrujemy barwienie preparatu rozmazy wysuszonego na powietrzu za pomocą barwnika D quick stain, który jest jednym z barwników typu Romanowskiego stosowanych w badaniach czasowych. Należy postępować zgodnie z instrukcjami producenta. Stwierdzamy, że suszenie na powietrzu znacznie poprawia klarowność barwienia, co pokazano na tym przykładzie rozmazów barwionych metodą Papanicolaou.Analiza tych wstępnych barwień pozwoli określić dodatkowe testy, które można przeprowadzić, takie jak wybiórcza mikroskopia elektronowa bloku komórkowego, posiewy mikrobiologiczne lub inne. Pomyślne ukończenie procedury na fantomie zmiany umożliwi prawidłową aspirację materiału z zmiany, w tym przypadku pastowatego materiału roślinnego z banana. Materiał ten można rozprzestrzenić na szkiełkach przedmiotowych, aby przećwiczyć rozmaz i barwienie.Właśnie pokazaliśmy Państwu, jak przygotować fantom zmiany do ćwiczenia biegłości w technice FNAB. Podczas przeprowadzania tego eksperymentu należy pamiętać, że fantom zmiany należy przygotować co najmniej 36 godzin przed sesją testowania biegłości, ponieważ żel uszczelniający wymaga czasu na zestalenie. Kolejną ważną kwestią jest stosowanie próżni oraz jej zwalnianie w odpowiedniej sekwencji, aby uzyskać optymalny materiał aspiratu podczas wykonywania procedury FNAV.To wszystko. Dziękujemy za oglądanie i życzymy powodzenia w ćwiczeniach. Bardzo dziękujemy.

preparation-using-phantom-lesions-to-practice-fine-needle-aspiration

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Przygotowanie i stosowanie  Phantom Lesions do ćwiczenia biopsji aspiracyjnych z cienkiej igły

Ten film opisuje technikę pobierania szpiku kostnego z kręgosłupa biodrowego i przygotowania wymazu do biopsji. W tym przykładzie przeprowadzamy aspirację szpiku kostnego od pacjenta z ostrą białaczką szpikową (AML) i badamy komórki, aby sprawdzić, czy nie ma mierzalnej choroby resztkowej (MRD), ważnego biomarkera prognostycznego.

Aspiracja szpiku kostnego: metoda pozyskiwania szpiku kostnego w celu zbadania morfologii komórek

Podmostkowe zmiany w tarczycy są powszechne i muszą być odróżniane od złośliwości. Uzyskanie przezskórnej biopsji cienkoigłowej nie jest możliwe ze względu na jej lokalizację zamostkową. W artykule zaproponowano protokół biopsji podmostkowych zmian tarczycy z wykorzystaniem wewnątrzoskrzelowej aspiracji igłowej pod kontrolą USG (EBUS-TBNA).

Biopsja podmostkowa tarczycy przy użyciu wewnątrzoskrzelowej aspiracji igły przezoskrzelowej pod kontrolą USG

Ten protokół opisuje zastosowanie ultradźwięków o wysokiej częstotliwości (HFUS) do obrazowania węzłów chłonnych szyjnych myszy. Technika ta optymalizuje wizualizację i kwantyfikację morfologii, objętości i przepływu krwi węzłów chłonnych szyjnych. Przedstawiono również biopsję węzłów chłonnych szyjnych pod kontrolą obrazu oraz przetwarzanie tkanki limfatycznej do oceny histologicznej.

Obrazowanie ultrasonograficzne o wysokiej częstotliwości węzłów chłonnych szyjnych myszy

Opisujemy nowatorskie zastosowanie elektromagnetycznej, sterowanej przez klatkę piersiową aspiracji igły do patologicznej oceny ludzkich guzków płuc.

Zastosowanie elektromagnetycznej aspiracji igłowej przez klatkę piersiową (E-TTNA) do pobierania próbek guzków płuc

Ten artykuł przedstawia biopsję gruczołu sutkowego bydła przy użyciu narzędzi do biopsji gruboigłowej i igłowej. Pobraną tkankę można wykorzystać do hodowli komórkowej lub do oceny fizjologii i metabolizmu sutka, w tym ekspresji genów, ekspresji białek, modyfikacji białek, immunohistochemii i stężeń metabolitów.

Techniki biopsji gruczołu sutkowego bydła

Prezentowany tutaj jest protokół do przeprowadzenia celowanej biopsji prostaty za pomocą systemu fuzji MRI-ultrasonograf.

Zastosowanie fuzji MRI-ultrasonografia w celu uzyskania celowanej biopsji gruczołu krokowego

Aspiracja cienkoigłowa to technika, dzięki której komórki są uzyskiwane z uszkodzenia lub narządu za pomocą cienkiej igły. Odessany materiał jest rozmazywany, barwiony i badany pod mikroskopem w celu diagnozy lub wykorzystywany do biologii molekularnej, cytometrii lub analizy in vitro. Jest tani, prosty, szybki i powoduje minimalną traumę.

Wykrywanie pasożytów trypanosoma zewnątrznaczyniowego za pomocą aspiracji cienkoigłowej

W tym artykule przedstawiono szczegółowy protokół pobierania próbek raka piersi, zaprojektowany tak, aby zoptymalizować ich zastosowanie w biobankowaniu, medycynie spersonalizowanej i innych zastosowaniach badawczych. Szczegółowo opisano proces pobierania próbek, w tym biopsję piersi i mastektomii, koncentrując się na minimalizacji uszkodzeń tkanek i maksymalizacji jakości próbki.

Optymalizacja procedur biopsji piersi i pobierania próbek po mastektomii dla biobankowania, medycyny spersonalizowanej i zastosowań badawczych

To badanie przedstawia ulepszoną technikę przezkroczowej biopsji prostaty przy użyciu metody podwójnego otworu w kształcie stożka i dwupłaszczyznowego prowadzenia sondy. Modyfikacje te zmniejszają uraz, przyspieszają rekonwalescencję pacjenta i poprawiają dokładność biopsji, dzięki czemu procedura jest niezawodnym i minimalnie inwazyjnym podejściem do diagnozowania raka prostaty.

Przezkroczowa biopsja gruczołu krokowego metodą podwójnego otworu w kształcie stożka z dwupłaszczyznowym prowadzeniem sondy

Nabłonek sensoryczny ucha wewnętrznego dorosłych danio przebraniego stanowi dobry model badawczy do zrozumienia mechanizmów regeneracji komórek rzęskowych u dorosłych kręgowców. Niniejszy protokół prezentuje precyzyjną dyssekcję nabłonków, która pozwala na pobranie próbek tkanek do badania procesów regeneracyjnych na poziomie komórkowym i subkomórkowym.

Makro- i mikrosekcja nabłonków sensorycznych ucha wewnętrznego u dorosłych danio pręgowanych (Danio rerio)

Naucz się przygotowywać fantomowe zmiany do biopsji aspiracyjnych cienkoigłowych. Ta metoda wykorzystuje karton, uszczelniacz i banana, umożliwiając skuteczną naukę technik pobierania próbek dla rezydentów patologii.

Przygotowanie i wykorzystanie fantomowych zmian do ćwiczenia biopsji aspiracyjnej cienką igłą

Przeglądaj więcej filmów