Zakażenie bakteryjne Wolbachia u Drosophila

Nazywam się Voia Friedman. Jestem pracownikiem naukowym na Uniwersytecie Princeton. A dzisiaj opowiem wam o kilku protokołach, które opracowałem w celu zakażenia trans, do początkowej izolacji, powrotu z helikoptera zarażonych much, a później do wstrzyknięcia paszy heli do samolotów, które nie zostały dotknięte chorobą.

Zasadniczo jest to bardzo prosty protokół, aby odizolować go od podstaw. I będziesz używać tego urządzenia z, od mepo, który zawiera filtr, który znajduje się na wierzchu E.So, który w zasadzie musisz umieścić, zaczynamy od około stu much. Anyżujesz muchy, wkładasz je do urządzenia filtrującego, możesz po prostu użyć lejka, a to bardzo łatwo doda nasze inne dopasowanie do tego urządzenia i umyje je 70% etanolem.

Po prostu zabierasz przyszłość, możesz wyrzucić etanol, a następnie po trzykrotnym ostatnim myciu robisz to wodą cząsteczkową, ponieważ nie chcesz mieć bakterii ze śladowymi ilościami etanolu. No cóż, a potem po prostu idziesz do drzwi nowej broni, a potem kręcisz się na mikro, prawdziwym mikro przez dwie minuty, a później zastanawiasz się, jak możesz to wstrzyknąć. On żywi się tylko zdrowymi muchami.

Więc w zasadzie weź podwójną taśmę klejącą i zwykle te podwójne taśmy mają dwie strony, jedna strona jest naklejką niż druga. Więc zostaw naklejkę stroną do góry, ponieważ jest to strona, którą zamierzasz przykleić, która leci na niej. I w zasadzie, aparat gazowy, jeśli masz to światło na górze, nie będziesz miał przepływu gazu, a muchy, które budzisz, jeśli są na szczycie zjeżdżalni.

Więc możesz po prostu kierować przepływem, tworząc mały kaptur, małą komorę za pomocą taśmy. Następnie kierujesz gaz na muchy. Więc wtedy kładziecie swoje, to światło tutaj z taśmą i wy, macie swoje muchy.

Przyklej muchy na górze taśmy, wszystkie w tej samej orientacji i skieruj ich głowę w kierunku, z którego będziesz przynosić igłę. Bo wtedy możesz przelecieć tuż nad skrzydłem, upewniając się, że skoro latają, to nie chcesz lecieć. Jeśli obudziły się podczas zabiegu, nie chcą, aby odeszły.

Upewnij się więc, że bierzesz małą końcówkę i naciskasz na skrzydła muchy na ogonie. I nie ma nic złego w tym, że ich skrzydła zostaną uszkodzone. A kiedy się ich pozbędziesz, kiedy weźmiesz muchy do zastrzyku, najprawdopodobniej i tak stracą skrzydła, więc przeżyją.

To może, to może być przydatne, ponieważ nie stracisz much, które więc, nakłada olej mineralny na mikrometr na tył igły, następnie biegun iniekcji igły, a następnie, możesz po prostu dostosować ciśnienie, aby doprowadzić materiał do końcówki igły. I, zrobiłem wstrzyknąć gdzieś między 10 do 15 nanolitrów, ale tak długo, jak jestem konsekwentny. Okej, więc jednym z ważnych szczegółów tego eksperymentu jest to, że mucha, po wstrzyknięciu aplikacji, gdy zobaczyłeś, że igła musi przejść tak daleko, jak to możliwe, przez górną część brzucha.

Ponieważ tutaj, w zasadzie, kiedy igła się wnika, masz a, a, a, a, większą przestrzeń do poruszania się w górę i w dół. I zasadniczo, jeśli jest blisko, bliżej naskórka, jest mniej prawdopodobne, że przenikną do ważnych narządów podczas lotu. Jest bardzo prawdopodobne, że na przykład wybijesz dziurę w jelitach, jeśli to zabije lot, w którym wykonujesz operację.

Nazywam się Voia Friedman. Jestem pracownikiem naukowym na Uniwersytecie Princeton w laboratorium Erica Helsa. A dzisiaj chciałbym opowiedzieć wam o tym protokole, który właśnie widzieliście, o demonstracji.

Ten protokół został opracowany, ponieważ chcieliśmy udowodnić, że UBA jest zdolna do przenikania przez tkanki. Tak więc UBA jest jednym z najbardziej udanych paras wewnątrzkomórkowych na powierzchni ziemi. Infekuje od 20 do 70% owadów i wielu cząstek.

Jest to również bardzo ważne z punktu widzenia chorób ludzkich, ponieważ infekują również nicienie, które przenoszą choroby takie jak ślepota rzeczna lub s i ssis. I tak, a CCA jest naszym obowiązkowym endo in, w tych robakach. Jest też ogromne, bardzo duże zainteresowanie wykorzystaniem CCA jako środka do zwalczania chorób pasożytniczych przenoszonych przez komary i Danny'ego, a także przez komary, takie jak malaria i denga.

Ten protokół został opracowany, aby pokazać, że po dostaniu się CCA do jamy brzusznej muchy, mogą one przenikać przez tkanki i docierać do zarodka. Więc w zasadzie to, co możesz tutaj zobaczyć, to oph jajnika Drosophila i wrócić do niego po jego pojawieniu się, może przekroczyć różowy pachończy. Ona, która jest wokół jajnika.

A potem przechodzą przez warstwę mięśni. Jednym z pierwszych miejsc, w których dostają się do wnętrza jajnika, jest obraz somatycznych komórek macierzystych. A potem mogą dotrzeć do linii zarodkowej.

I ta bakteria jest przenoszona w ten sam sposób, w jaki mitochondria są przenoszone, jest przenoszone przez matkę, przez rośliny mateczne obecne w jaju. Więc oczywiście muszą być obecne w linii zarodkowej. Dlatego właśnie opracowano ten protokół.

A ten protokół może być bardzo przydatny w zasadzie tradycyjnie sposób, w jaki ludzie próbują zarazić trans wbaa, w zasadzie biorą wbaa i wprowadzają nowy gatunek owadów. Byłoby to poprzez wykonanie mikro iniekcji do zarodka. Ale te są o wiele bardziej skomplikowane.

I w zasadzie tutaj po prostu korzystamy z biologii, ponieważ są one zdolne do przenikania tkanek i przemieszczania się do tkanek komórek macierzystych, mogą przejść do linii zarodkowej. Ułatwia to przyjmowanie UBA od niektórych, z, od niektórych gatunków owadów, które są zakażone i mogą być przenoszone na gatunki niezakażone. Prawdopodobnie, myślę, że to sam wtrysk.

Zasadniczo musisz być ostrożny, aby zmobilizować muchę tak dobrze, jak tylko możesz. Używamy dwustronnej taśmy klejącej i musisz wbić się w igłę w zasadzie jak najbliżej, jak to tylko możliwe, równolegle do rozporka, aby nie wchodzić zbyt głęboko. I jest mniej prawdopodobne, że zabijemy muchę po tym, jak przeprowadzą operację.