Echokardiografia przezklatkowa u myszy

Przed wykonaniem pomiarów echokardiograficznych mysz umieszcza się na podgrzewanej tablicy EKG z pauzą przyklejoną do elektrod EKG, które są osadzone w stoliku. Odpowiedni poziom znieczulenia i temperatura ciała są utrzymywane przez cały czas trwania eksperymentu. Korzystanie z trybu krótkiej osi, znanego również jako tryb B.

Prawidłowy obraz uzyskuje się, gdy zarówno mięśnie brodawkowate międzyboczne, jak i przyśrodkowe, a także wszystkie ściany mięśnia sercowego są dobrze widoczne. Tryb wyświetlania można zmienić na tryb M, aby ocenić i określić ilościowo pomiary skurczowej czynności serca. Po wycelowaniu w tylną ścianę lewej komory, tryb obrazowania dopplerowskiego tkanki może być wykorzystany do ilościowego określenia pomiarów funkcji rozkurczowej.

W trybie widoku czterokomorowego można uzyskać prawidłowy obraz zastawki mitralnej i ściany przegrody. Wreszcie, przełączając się w tryb Dopplera fali tętna, można zobrazować wzorzec przepływu krwi w zastawce mitralnej. Cześć, nazywam się Jonathan Repress i pracuję w laboratorium dr Zandera Warsa na Wydziale Fizjologii Molekularnej i Biofizyki w Baylor College of Medicine.

Dzisiaj pokażemy Wam procedurę kardiografii echo przezklatkowe u myszy. Używamy tej techniki w naszym laboratorium do badania funkcji i wymiarów serca w czasie. Zacznijmy.

Dzień przed badaniami obrazowymi znieczul mysz i użyj maszynki do strzyżenia włosów, aby zgolić sierść od linii szyi do połowy klatki piersiowej. Następnie usuń pozostałe włosy na ciele za pomocą kremu do depilacji i nałóż żel Dura Loop na oba oczy, aby zapobiec wysuszeniu twardówki. Umieść znieczuloną mysz w pozycji leżącej na poduszce grzewczej z wbudowanymi przewodami EKG.

W celu utrzymania temperatury ciała należy umieścić pysk w stożku nosowym podłączonym do systemu znieczulającego, aby utrzymać stały poziom sedacji przez cały czas trwania zabiegu. W razie potrzeby poziom znieczulenia można dostosować, aby uzyskać docelowe tętno 450 plus minus 50 uderzeń na minutę. Lub BPM delikatnie włóż sondę doodbytniczą, aby stale monitorować i regulować temperaturę ciała za pomocą poduszki grzewczej.

Ważne jest, aby utrzymywać temperaturę ciała w wąskim zakresie, ponieważ nawet umiarkowane zmiany temperatury i częstości akcji serca wpływają na czynność serca. U myszy. Nałóż elektrożel na cztery łapy i przyklej je do elektrod EKG.

Aby rozpocząć tę procedurę, nałóż warstwę żelu ultradźwiękowego na klatkę piersiową, przede wszystkim obszar leżący nad sercem. Unikaj pęcherzyków powietrza w żelu, które mogą zakłócać obrazowanie ultradźwiękowe. Unieruchamiaj mysz w lekkiej pozycji do góry, głową do góry pod lekkim kątem za pomocą mikromanipulatora.

Unieruchomić sondę ultradźwiękową pod kątem 90 stopni między sondą a sercem. Aby rozpocząć wykonywanie pomiarów echokardiograficznych w krótkiej osi, opuść sondę surowo na klatkę piersiową. Unikaj umieszczania sondy bezpośrednio nad mostkiem, ponieważ zniekształci to sygnał.

Najpierw wykonamy obrazowanie dwuwymiarowe lub tryb B, aby uzyskać widok wzdłuż krótkiej osi mostka, dostosuj obszar widzenia sondy, aby uzyskać pełny obraz. W zależności od wielkości serca zwierzęcia, prawidłowy obraz w tej orientacji będzie obejmował lewą komorę i niewielką część ściany prawej komory. Strzałka wskazuje przednio-boczne i tylne przyśrodkowe mięśnie brodawkowate, tylną i przednią ścianę lewej komory, ścianę przegrody śródkomorowej oraz niewielką część ściany prawej komory.

Następnie użyjemy trybu echokardiografii, który zapewnia jednowymiarowy widok w celu uzyskania precyzyjnych pomiarów wymiarów serca i kurczliwości, przechowując uzyskane obrazy do późniejszej oceny parametrów skurczowej funkcji lewej komory. Nadal obserwując krótką oś przymostkową, możemy wykonać obrazowanie dopplerowskie tkanek lub TDI, aby zmierzyć prędkość ruchu mięśnia sercowego. Obszar zainteresowania jest oznaczony tak, aby zawierał tylną ścianę lewej komory w celu oceny osi promieniowej.

Uzyskany przebieg będzie miał cztery piki do oceny funkcji rozkurczowej, IVRT ePrime AP prime i I-V-C-T-S prime reprezentują prędkość skurczową. Parametry te zostaną opisane w dalszej części sekcji dotyczącej reprezentatywnych wyników. Doppler fali tętna lub PWD może być używany do pomiaru prędkości przepływu krwi na małym obszarze na określonej głębokości w tkance mięśnia sercowego.

Aby zobrazować wzorzec przepływu przez-mitralnego, przechyl zwierzę do tyłu w pozycji trendelenberga, przechyl sondę w górę tak, aby sonda była prostopadła do wierzchołka serca. Teraz zwiększ poziom fluoru ISO, aby obniżyć tętno do 300 do 350 uderzeń na minutę, co spowolni ruch zastawki mitralnej. W przypadku badań porównawczych ważne jest utrzymanie podobnego tętna u zwierząt.

Wizualizuj ruchy zastawki mitralnej jako punkt odniesienia do pomiaru przepływu przez zastawkę. Zmierz wzorce przepływu przez zastawkę mitralną. Za pomocą PWD charakterystycznie obserwuje się dwie fale, jedną reprezentującą bierne wypełnienie komory wczesnym EWA, a drugą zgodną z aktywnym wypełnieniem skurczem przedsionkowym.

Przedsionek jest falą w zdrowym sercu, prędkość EWA jest nieco większa niż załamek A. Po zakończeniu wszystkich pomiarów pozwól zwierzęciu dojść do siebie na podgrzewanej podkładce EKG i wyłącz znieczulenie. Gdy mysz się obudzi, załóż ją z powrotem do klatki.

Pokazujemy tutaj obraz echokardiograficzny 2D lub tryb B uzyskany wzdłuż krótkiej osi przymostkowej, który pokazuje ściany przednie i tylne lewej komory, ścianę przegrody śródkomorowej i ścianę boczną. Średnicę światła lewej komory można zmierzyć jako średnicę wewnętrzną lewej komory. Gwiazdka wskazuje mięsień brodawkowaty przyśrodkowy

Ten następny obraz echokardiograficzny 2D lub tryb B pokazuje wierzchołkowy widok czterokomorowy z obszarem widzenia nad zastawką mitralną w celu określenia E przy prędkościach szczytowych. MVAL wskazuje płatek przednią zastawki mitralnej. MVPL wskazuje zastawkę mitralną.

Tylny płatek RV wskazuje prawą komorę, a LV wskazuje lewą komorę. W tym reprezentatywnym trybie M, śledzenie dużych strzałek wskazuje końcową średnicę skurczową ESD i końcową średnicę rozkurczową. EDD lewej komory.

LV A WDS wskazuje grubość ściany przedniej lewej komory, a L-V-P-W-D-S wskazuje grubość ściany tylnej lewej komory odpowiednio podczas rozkurczu i skurczu. Przedstawiono tutaj reprezentatywny ślad do tkankowego obrazowania dopplerowskiego tylnej ściany lewej wysokości, gdzie IVRT reprezentuje wolumetryczny czas relaksacji ISO, a IVCT reprezentuje wolumetryczny czas skurczu ISO. Fala ePrime odpowiada ruchowi pierścienia mitralnego podczas wczesnego rozkurczowego wypełnienia lewej komory, a fala APR pochodzi ze skurczu przedsionków podczas późnego napełniania lewej komory S prime reprezentuje prędkość skurczową.

Zapis dopplerowski fali tętna końcówek płatków zastawki mitralnej zapewnia wzorce prędkości napływu zastawki mitralnej, z których można wyprowadzić wczesną prędkość rozkurczową, późną prędkość rozkurczową ze skurczem rozkurczowym i stosunek E nad. IVRT jest również przydatną zmienną do charakteryzowania funkcji rozkurczowej i ciśnienia napełniania. ET w tym śledzeniu wskazuje czas wyrzutu w zdrowym sercu.

Prędkość EWA jest nieco większa niż prędkość fali obserwowanej tutaj. Cześć, właśnie pokazaliśmy Ci, jak wykonać echocardio przezklatkowe u myszy. Pamiętaj, że wykonując tę procedurę, należy pamiętać o odpowiednim obchodzeniu się ze zwierzęciem, a także odpowiednim dostosowaniu poziomu znieczulenia.

Więc to wszystko. Dziękujemy za oglądanie i życzymy powodzenia w eksperymentach.