Wykonywanie i przetwarzanie FNA przedniej poduszeczki tłuszczowej pod kątem amyloidu
October 30th, 2010
Aspiracja poduszeczki tłuszczowej jest preferowanym, minimalnie inwazyjnym i tanim podejściem w porównaniu do innych metod wykrywania amyloidu w diagnostyce amyloidozy układowej. W tym artykule wideo przedstawiono zarys proceduralny dotyczący wykonywania aspiracji poduszeczki tłuszczowej z odpowiednim przetwarzaniem próbki w celu uzyskania optymalnego wyniku diagnostycznego.
Ten film przedstawia aspirację cienkoigłową, biopsję przedniej poduszeczki tłuszczowej oraz procedurę przetwarzania próbek biopsyjnych do mikroskopii. Skóra w dolnej ćwiartce brzucha, bocznie do linii środkowej i poniżej pępka, jest oczyszczana, a obszar w kształcie rombu jest oznaczany pisakiem znakującym. Obszar miejscowy jest znieczulony, a biopsja przedniej poduszeczki tłuszczowej jest wykonywana przez aspirację cienkoigłową.
Pięć do sześciu fragmentów włóknistej tkanki tłuszczowej przenosi się ze strzykawki do biopsji do roztworu aldehydu glutarowego, a pozostały materiał pozostawia się do skrzepnięcia w strzykawce. 10% formaliny zasysa się do strzykawki, a tłok jest usuwany w celu przeniesienia skrzepłej tkanki włóknistej do 10% formaliny. Cześć, jestem dr Ham z Wydziału Patologii w Medical College of Wisconsin Milwaukee.
Nazywam się Dr. Parri. Pochodzę z Oddziału Chorób Nowotworowych i Chorób Pokrewnych w Medical College of Wisconsin. Dzisiaj pokazujemy procedurę, jak wykonać biopsję aspiracyjną cienkoigłową w celu uzyskania poduszeczki tłuszczowej, aspiracji w celu zbadania amyloidozy AMY.
Jest to protokół, którego używamy do pobierania próbek tkanki fibrolaglikemicznej z przedniej części tkanki tłuszczowej w jamie brzusznej w celu wykazania i wykluczenia amyloidozy. Więc zacznijmy. Przy prawidłowym wykonaniu biopsja aspiracyjna cienkoigłowa lub procedura FNAB w celu aspiracji przedniej poduszeczki tłuszczowej może zostać zakończona za jednym nakłuciem.
Jednak manewrowanie igłą o rozmiarze 18 tam iz powrotem w podskórnej tkance tłuszczowej jest stosunkowo niepokojące. Opisana tutaj metoda znieczulenia osiąga efekt już po dwóch ukłuciach igłą o rozmiarze 25 i odwraca ból, co skutkuje poprawą tolerancji na zabieg. Przygotuj się do zabiegu, zbierając wszystkie potrzebne materiały, w tym mieszaninę 1% lidokainy i 1% wacików nasączonych wodorowęglanami sodu jeden do jednego, gaziki, długopisy do znakowania, dwie strzykawki o pojemności 10 mililitrów, dwie igły o rozmiarze 18, półtoracalowej, igłę o rozmiarze 25, igłę półtoracalową, uchwyt na strzykawkę FNA lub pistolet, bandaż, fiolkę z aldehydem glutarowym do mikroskopii elektronowej i pojemnik do biopsji 10%Cztery.
Za pomocą wacików nasączonych alkoholem oczyść skórę w dolnej części kwadrantu brzucha, po bokach do linii środkowej i poniżej markera pępka. Obszar w kształcie Roida o wymiarach około dwa na dwa cale za pomocą pisaka do znakowania. Za pomocą igły o rozmiarze 18 G i strzykawki o pojemności 10 mililitrów odessać około 10 mililitrów 1% roztworu lidokainy, 1% wodorowęglanu sodu do użycia jako znieczulenie miejscowe.
Chociaż 1% lidokainy można stosować samodzielnie, dodany wodorowęglan sodu zapobiegnie początkowemu, krótkiemu uczuciu pieczenia. Po instalacji należy odłączyć strzykawkę wypełnioną lidokainą od igły o rozmiarze 18 znajdującej się jeszcze w fiolce z lidokainą. Podłączyć strzykawkę za pomocą igły o rozmiarze 25 i pół cala, trzymając strzykawkę w pozycji pionowej.
Nacisnąć tłok i postukać w cylinder strzykawki, aby usunąć uwięzione powietrze ze środka znieczulającego strzykawkę wzdłuż granic obszaru roid. Zacznij od wbicia igły o rozmiarze 25 tuż pod skórę w punkcie A. Następnie ostrożnie wepchnij igłę podskórnie i stycznie równolegle do leżącej nad nią powierzchni skóry w kierunku punktu X.At punktu x. Odciągnąć tłok strzykawki, aby upewnić się, że igła nie znajduje się w naczyniu.
Następnie, wycofując igłę, aby wskazać powoli, naciskaj tłok, aby nacieknąć do 2,5 mililitra lidokainy. Nie dopuścić do wydostania się igły ze skóry. Teraz zmień kierunek i wepchnij igłę podskórnie do punktu Y.As przed, upewnij się, że igła nie znajduje się w naczyniu, pociągając do tyłu tłok strzykawki i dozuj do 2,5 mililitra lidokainy, powoli wycofując igłę przez punkt A po wyjęciu igły, zapobiegaj krwawieniu poprzez mocne przyłożenie sterylnej gazy.
Następnie, zaczynając od punktu B, powtórz ten proces, dozując lidokainę podskórnie z punktu X do punktu B. Następnie z punktu B do punktu Y.Ponownie nałóż gazę, aby zapobiec krwawieniu. Teraz sprawdź, czy obszar jest znieczulony, lekko dotykając skóry w rombie rogiem kawałka bawełnianego gore'a i porównując go z sąsiednią nieznieczuloną skórą. Podłącz igłę o rozmiarze 18 i pół cala do strzykawki o pojemności 10 mililitrów.
Zamontuj zespół igły strzykawki w uchwycie strzykawki FNAB, aby pomóc w prawidłowym stosowaniu i uwalnianiu podciśnienia. Wprowadzić końcówkę igły do podskórnej tkanki tłuszczowej w oczyszczonym i znieczulonym obszarze romboidalnym i całkowicie wycofać tłok strzykawki, aby wytworzyć podciśnienie. Utrzymując podciśnienie, manewruj igłą w przód iw tył w podskórnej tkance tłuszczowej.
Każde pociągnięcie powinno być jak najdłuższe, bez wychodzenia igły ze skóry. Maksymalne próbkowanie osiąga się poprzez zmianę kierunku przy każdym pociągnięciu. Ważne jest, aby kierunek igły był styczny do błony surowiczej i równoległy do powierzchni skóry, aby uniknąć nakłucia jamy otrzewnej.
Gdy około jednego mililitra fragmentów tkanki fibrolonkrzewicznej zgromadzi się w strzykawce, zwolnij podciśnienie i wyjmij igłę. Poproś pacjenta, aby mocno docisnął obszar zabiegu za pomocą gazy, aby zminimalizować podskórne pobieranie krwi. Próbka może być teraz przetworzona w celu przekazania do laboratorium.
W celu dalszych badań należy wyjąć igłę strzykawki i przenieść od pięciu do sześciu fragmentów włóknistej tkanki tłuszczowej do 2% roztworu aldehydu glutarowego przez dyszę strzykawki. Dozować dodatkowe małe fragmenty tkanki przez dyszę strzykawki na szklane szkiełko rozprowadzone między dwoma szkiełkami. Aby przygotować rozmazy, pozwól, aby pozostały materiał skrzepł w strzykawce.
Może to potrwać od pięciu do siedmiu minut. Następnie należy odessać 10% formaliny do strzykawki, tak aby zakrzepły materiał włóknistej tkanki tłuszczowej został usunięty ze ścianki strzykawki i swobodnie unosił się. Teraz wyjmij tłok ze strzykawki i przenieś skrzepłą włóknistą tkankę tłuszczową do oznaczonej formuły 10% w pojemniku z otwartego końca strzykawki naprzeciwko końca dyszy.
Pobrane próbki można teraz przekazać do mikroskopii elektronowej, przygotowania bloków komórkowych i zatapiania parafiny lub mikroskopii fluorescencyjnej, uzyskanej i formalnej tkanki tłuszczowej włóknistej oraz przetworzonej metodą Pokazano na tym filmie zatopioną w parafinie barwioną czerwienią Kongo i zbadaną za pomocą mikroskopii światła polaryzacyjnego. Amyloid w ścianie małych naczyń krwionośnych w tkance włóknistej tkanki tłuszczowej. Fragmenty pokazują jabłko na zielono, jak wskazuje żółta strzałka.
Zielone jabłko jest nieobecne w tkankach innego pacjenta bez amyloidozy. Niebieskie przez ence, oznaczone żółtą strzałką z grotem włókien kolagenowych, są zwykle obecne w prawie wszystkich próbkach. Z naszego doświadczenia wynika, że ta dwójłomność niebieskiego związana z kolagenem może być trudna do odróżnienia od dwójłomności amyloidu w kolorze zielonym jabłka.
Jest to istotna pułapka podczas interpretacji Konga. Próbki czerwonych plam pod mikroskopem polaryzacyjnym. Ten mikrograf elektronowy pokazuje proste, nierozgałęzione, losowo rozproszone fibryle o średnicy od 8 do 10 nanomikronów zgodne z amyloidem w ścianie naczynia krwionośnego.
Właśnie pokazaliśmy, jak wykonać aspirację płetw, biopsję przedniej poduszeczki tłuszczowej pod kątem amyloidu. Podczas wykonywania tej i innych podobnych procedur FNAB bardzo ważne jest, aby stosować i uwalniać próżnię w odpowiedniej kolejności. Ponadto, w przypadku bardzo oczywistego strachu przed dostaniem się do jamy otrzewnej, igła nigdy nie powinna być skierowana ukośnie
.Dlatego ważne jest, aby utrzymać kierunek ruchów w przód iw tył równolegle do skóry w płaszczyźnie podskórnej tkanki włóknistej. To są bardzo ważne punkty. Więc to wszystko.
Dzięki za oglądanie. Dziękuję.
Przegląd
Ten artykuł wideo demonstruje minimalnie inwazyjną procedurę aspiracji tkanki tłuszczowej, która jest skuteczną metodą diagnozowania amyloidozy układowej. Opisana technika obejmuje przetwarzanie próbek w celu zapewnienia optymalnych wyników diagnostycznych.
Kluczowe komponenty badania
Obszar nauki
- Neuronauki
- Patologia
- Techniki diagnostyczne
Tło
- Amyloidoza to choroba charakteryzująca się gromadzeniem białek amyloidowych w tkankach.
- Aspiracja tkanki tłuszczowej jest preferowaną metodą pobierania próbek do diagnozy.
- Ta technika jest mniej inwazyjna i bardziej opłacalna w porównaniu z innymi metodami pobierania próbek.
- Właściwe przetwarzanie próbek jest kluczowe dla dokładnej diagnozy.
Cel badania
- Przedstawić procedurę aspiracji tkanki tłuszczowej.
- Opisać przetwarzanie próbek biopsji do mikroskopu.
- Poprawić wyniki diagnostyczne w przypadku amyloidozy układowej.
Zastosowane metody
- Biopsja igłowa przedniego płata tkanki tłuszczowej.
- Zastosowanie środków znieczulających miejscowo, aby zminimalizować dyskomfort podczas zabiegu.
- Przeniesienie próbek tkanki do glutaraldehydu i formaliny w celu przetwarzania.
- Mikroskopowe badanie przetworzonych próbek.
Główne wyniki
- Procedura może być zakończona z minimalnym dyskomfortem przy użyciu skutecznych technik znieczulenia.
- Zebrane próbki mogą być pomyślnie przetworzone do analizy diagnostycznej.
- Opisana metoda pozwala na efektywne pobieranie próbek tkanki włóknisto-tłuszczowej.
- Wyniki potwierdzają zastosowanie aspiracji tkanki tłuszczowej jako niezawodnego narzędzia diagnostycznego.
Wnioski
- Aspiracja tkanki tłuszczowej jest wykonalną metodą diagnozowania amyloidozy układowej.
- Właściwa technika i przetwarzanie próbek są niezbędne do uzyskania dokładnych wyników.
- To podejście oferuje mniej inwazyjną alternatywę dla tradycyjnych metod biopsji.
Często zadawane pytania
Executive Industry Relevance
Fat pad aspiration provides a minimally invasive, cost-effective method for early detection of systemic amyloidosis, addressing the diagnostic gap left by high-risk organ biopsies. By enabling reliable identification of amyloid deposits through standardized specimen processing, this approach supports target validation in preclinical models of protein misfolding diseases. The technique enhances predictive confidence in lead identification by offering a reproducible biomarker-compatible workflow for therapeutic hypothesis interrogation.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of therapeutic hypotheses by detecting amyloid deposits in accessible tissue, supporting biological de-risking of targets involved in protein aggregation pathways.
- Operational Value: Provides a standardized procedure for sample collection that reduces variability and improves reproducibility across discovery campaigns.
- Predictive Value: Facilitates early assessment of target engagement and mechanism-based efficacy in disease-relevant systems prior to lead optimization.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Prepares validated biological specimens suitable for downstream assay development, including Congo red staining and ultrastructural analysis by electron microscopy.
- Operational Value: Ensures consistent tissue preparation for quantitative dependent variable measurements, enhancing assay standardization and reproducibility.
- Scalability: Supports platform reuse in screening campaigns by providing a reliable source of fibro adipose tissue for compound evaluation against amyloidogenic targets.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Bridges discovery and preclinical validation by enabling continuity in amyloid detection from initial target hypothesis to mechanistic de-risking.
- Operational Value: Supports risk-adjusted advancement decisions through ultrastructural confirmation of amyloid deposits, increasing diagnostic sensitivity in early-stage disease models.
- Translational Biomarker Alignment: Generates specimens compatible with biomarker analysis, facilitating correlation between target modulation and pathological readouts.
Pipeline & Workflow Integration
The method integrates into the discovery continuum from early target hypothesis testing through lead identification and preclinical validation, specifically supporting workflows focused on protein misfolding pathologies where amyloid deposition serves as a key pathophysiological readout.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing and pathway clarification by enabling detection of amyloid in disease-relevant systems, reducing mechanistic ambiguity in target validation.
- Screening: Delivers assay-ready specimens with standardized processing, ensuring reproducible compound screening outcomes against amyloidogenic targets.
- Analytics: Provides quantitative outputs via Congo red birefringence and electron microscopy, enabling statistical comparison of treatment effects on amyloid burden.
- Translational Research: Connects early discovery to preclinical continuity through ultrastructural validation, supporting biomarker-aligned progression decisions.
- Enterprise Reuse: Establishes a reusable capability for amyloid detection across multiple projects, reducing redundant protocol development and improving cross-team consistency.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in target validation by reducing false negatives through enhanced sensitivity of amyloid detection via electron microscopy.
- Operational Value: Delivers standardization and reproducibility in specimen handling, minimizing variability in diagnostic readouts across sites and studies.
- Strategic Value: Improves go/no-go decisions by providing early, reliable biomarker data, reducing late-stage biological risk in protein misfolding therapeutics.
- Portfolio Impact: Enables risk-adjusted prioritization of candidates based on target-mediated amyloid modulation, supporting capital efficiency in preclinical pipelines.
Implementation Considerations
- Requires expertise in fine needle aspiration techniques and specimen handling for electron microscopy and histological processing.
- Dependent on access to glutaraldehyde, formalin, polarizing microscopy, and electron microscopy infrastructure.
- Necessitates cross-team standardization between interventional clinicians and pathology laboratories for consistent sample processing.
- Requires adaptation considerations when applying the technique to alternative model systems or tissue sources beyond human anterior fat pad.
- Limited by the technical skill required to distinguish amyloid-specific apple-green birefringence from collagen-related blue birefringence under polarizing light.
