Wstrzyknięcie żyły ogonowej: metoda podawania komórek rakowych do badań przerzutowych w modelu mysim

Zacznij od dodania trypsyny do szalki Petriego zawierającej znakowane komórki raka piersi, aby oderwać je od powierzchni. Dodaj pożywkę zawierającą surowicę, aby zatrzymać działanie trypsyny. Przenieś zawiesinę komórek do stożkowej probówki i odwiruj ją do komórki osadu.

Odrzucić supernatant i ponownie zawiesić komórki w roztworze soli fizjologicznej buforowanym fosforanami. Umieść probówkę na lodzie, aby spowolnić metabolizm komórkowy. Zawiesinę zawierającą wymaganą ilość komórek należy umieścić w strzykawce typu Luer lock i przymocować do niej igłę.

Umieść mysz w uwięzi dla gryzoni z ogonem na zewnątrz. Zanurz ogon w ciepłej wodzie, aby rozszerzyć żyły. Po bocznych stronach znajdują się dwie żyły, a po brzusznej stronie ogona tętnica. Przetrzeć ogon alkoholem, wprowadzić igłę i wstrzyknąć zawiesinę komórkową.

Po dostaniu się do krwiobiegu wstrzyknięte komórki rakowe wnikają do narządów, takich jak płuca, i namnażają się. Powoli wyjąć igłę i przyłożyć jałową gazę do miejsca wstrzyknięcia, aby wywrzeć ucisk w celu zatrzymania krwawienia. Umieść mysz z powrotem w klatce i zapewnij pełną regenerację. W poniższym protokole demonstrujemy wstrzyknięcie znakowanych przerzutowych komórek