Organtypowy model hodowli warstw hipokampa do badania uszkodzeń neuronów

Ogólnym celem tej procedury jest wygenerowanie organtypowych kultur warstw hipokampa, które można wykorzystać do modelowania uszkodzenia neuronów w odpowiedzi na różne bodźce, w tym NMDA, ekscytotoksyczność tlenu, deprywację glukozy lub bodźce zapalne, takie jak lipopolisacharyd lub peptyd beta amyloidu. Osiąga się to poprzez najpierw wyizolowanie mózgu po urodzeniu i pocięcie każdej półkuli w celu wygenerowania koronalnych suków. Drugim etapem procedury jest wyizolowanie regionów hipokampa i wyhodowanie ich na wkładkach błonowych w sześciu płytkach dołkowych Po wyhodowaniu skrawków skrawki są barwione jodkiem propidyny i obliczany jest poziom spontanicznej śmierci neuronów.

Na koniec plastry są poddawane działaniu środka neurotoksycznego i poddawane restytucji w celu zmierzenia reakcji toksyczności na zabieg. Ostatecznie można uzyskać wyniki, które pokazują procentową śmierć neuronów w CA jeden, CA trzy i ząbkowanych regionach hipokampa w warunkach eksperymentalnych poprzez ilościowe określenie fluorescencji jodku propidyny za pomocą mikroskopii immunofluorescencyjnej. Główną przewagą najmniejszej techniki nad istniejącymi skąpcami, takimi jak pierwotna hodowla neuronów, jest badanie mechanizmu uszkodzenia neuronów, w którym preparat jest stosunkowo nienaruszony.