Name: Neurogeneza korowa: przejście od postępów w laboratorium do terapii komórkowych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 38 s
Description: Poznaj technikę in utero electroporation do badania neurogenezy korowej i migracji neuronów. Ta metoda umożliwia analizę funkcji genów w komórkach macierzystych mózgu, wspierając rozwój terapii regeneracyjnych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

neurogeneza korowa: przejście od osiągnięć laboratoryjnych do terapii komórkowych

Cortical Neurogenesis: Transitioning from Advances in the Laboratory to Cell-Based Therapies

Neurogeneza korowa: przejście od osiągnięć laboratoryjnych do terapii komórkowych

Nazywam się Arnold Krickstein. Jestem dyrektorem Instytutu Medycyny Regeneracyjnej tutaj, na UCSF, a moją dziedziną zainteresowań jest neurobiologia rozwoju. W szczególności bardzo interesują nas wczesne etapy rozwoju kory mózgowej; badamy komórki macierzyste i progenitorowe neuronów oraz analizujemy sposób, w jaki generują one neurony, a także to, jak neurony te migrują i zaczynają tworzyć obwody w rozwijającym się mózgu, zwłaszcza w korze.Sądzę, że wprowadzenie elektroporacji in utero było jedną z tych przełomowych technologii opracowanych przez SDO i jego współpracowników w kontekście badania wczesnych etapów rozwoju mózgu, ponieważ pozwala ona na przeprowadzanie eksperymentów z uzyskaniem i utratą funkcji dla szerokiej gamy genów. Można to robić w stosunkowo prosty sposób, wprowadzając te geny bezpośrednio do neuronalnych komórek macierzystych i progenitorowych, z których powstają neurony podczas wczesnego rozwoju kory mózgowej. Technika ta polega po prostu na wstrzyknięciu DNA w formie plazmidu do komór mózgu zwierzęcia w stadium embrionalnym, a następnie przyłożeniu krótkiego impulsu elektrycznego, który wprowadza plazmidy do komórek wyściełających komorę, czyli komórek glejo

cortical-neurogenesis-transitioning-from-advances-laboratory-to-cell

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Neurogeneza korowa: przejście od postępów w laboratorium do terapii komórkowych

Neuronalne komórki macierzyste pobrane z dorosłego mózgu są coraz częściej wykorzystywane w różnych zastosowaniach, począwszy od podstawowych badań nad rozwojem układu nerwowego, a skończywszy na odkrywaniu potencjalnych zastosowań klinicznych w medycynie regeneracyjnej. To sprawia, że rygorystyczna kontrola warunków izolacji i hodowli stosowanych do hodowli tych komórek ma kluczowe znaczenie dla uzyskania solidnych wyników eksperymentalnych.

Hodowla nerwowych komórek macierzystych z konwencjonalnych i niekonwencjonalnych regionów mózgu dorosłego gryzonia

Fenotypowo dzikie astrocyty i nerwowe komórki macierzyste pobrane od myszy zmodyfikowanych za pomocą floksowanych, warunkowo onkogennych alleli i przekształconych za pomocą wirusowej rekombinacji za pośrednictwem Cre mogą być używane do modelowania patogenezy gwiaździaka in vitro i in vivo poprzez ortotopowe wstrzykiwanie przekształconych komórek do mózgów syngenetycznych, immunologicznie kompetentnych rodzeństwa z miotu.

Modelowanie patogenezy gwiaździaka in vitro i in vivo przy użyciu astrocytów korowych lub nerwowych komórek macierzystych od warunkowych, genetycznie zmodyfikowanych myszy

To badanie opisuje eksperymentalną platformę do szybkiego charakteryzowania zmodyfikowanych komórek macierzystych i ich zachowań przed ich zastosowaniem w długoterminowych badaniach nad przeszczepami in vivo w celu ratowania i naprawy układu nerwowego.

Wysokoprzepustowa charakterystyka dorosłych komórek macierzystych zmodyfikowanych pod kątem dostarczania czynników terapeutycznych w strategiach neuroprotekcyjnych

Obrazowanie na żywo to potężne narzędzie do badania zachowań komórkowych w czasie rzeczywistym. W tym miejscu opisujemy protokół wideomikroskopii poklatkowej pierwotnych komórek kory mózgowej, który umożliwia szczegółowe badanie faz odgrywanych podczas progresji linii od pierwotnych nerwowych komórek macierzystych do zróżnicowanych neuronów i gleju.

Obrazowanie na żywo pierwotnych komórek kory mózgowej za pomocą systemu hodowli 2D

Bezpośrednie przeprogramowanie neuronów generuje neurony, które utrzymują wiek początkowej komórki somatycznej. W tym miejscu opisujemy pojedynczą metodę opartą na wektorach do generowania indukowanych neuronów z fibroblastów skóry uzyskanych od dorosłych dawców ludzkich.

Proste generowanie wysokowydajnej kultury indukowanych neuronów z dorosłych fibroblastów skóry człowieka

Celem tego protokołu jest opisanie podejścia do analizy zachowania dorosłych nerwowych komórek macierzystych/progenitorowych w odpowiedzi na manipulację chemogenetyczną specyficznego lokalnego obwodu neuronowego.

Regulacja specyficzna dla obwodu testowego dorosłych nerwowych komórek prekursorowych hipokampa

Tutaj prezentujemy protokół, zaprojektowany do wykorzystania narzędzi chemogenetycznych do manipulowania aktywnością komórek progenitorowych interneuronów korowych przeszczepionych do kory mózgowej myszy po urodzeniu.

Przeszczepienie chemogenetycznie zmodyfikowanych progenitorów interneuronów korowych do wczesnych postnatalnych mózgów myszy

Opisujemy protokół przeprogramowania fibroblastów pochodzących z ludzkiej skóry w indukowane neuronalne komórki progenitorowe (iNPC), a następnie ich różnicowanie w indukowane astrocyty (iAs). Metoda ta prowadzi do szybkiego i powtarzalnego generowania iNPC i iA w dużych ilościach.

Modelowanie in vitro chorób neurologicznych z wykorzystaniem bezpośredniej konwersji z fibroblastów do neuronalnych komórek progenitorowych i różnicowania w astrocyty

W tym badaniu przedstawiamy szczegółową technikę prostego, ale solidnego systemu hodowli organoidów korowych przy użyciu standardowych kultur hPSC bez karmienia. Jest to szybki, wydajny i powtarzalny protokół generowania organoidów, które modelują aspekty starzenia się mózgu in vitro.

Solidna i wysoce odtwarzalna generacja organoidów korowych mózgu do modelowania starzenia się neuronów mózgu in vitro

Ten protokół opisuje długoterminowe hodowle organotypowe dorosłej ludzkiej kory mózgowej w połączeniu z dokorowym przeszczepem ex vivo indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych pochodzących z komórek macierzystych, które prezentują nowatorską metodologię do dalszego testowania terapii opartych na komórkach macierzystych dla ludzkich zaburzeń neurodegeneracyjnych.

Hodowle organotypowe kory mózgowej dorosłego człowieka jako model ex vivo do przeszczepiania i walidacji ludzkich komórek macierzystych

Tutaj opisujemy protokół przeszczepu i śledzenia oznakowanych komórek nerwowych do ludzkich organoidów mózgowych.

Ludzki model organoidowy przeszczepu komórek nerwowych

Poznaj technikę in utero electroporation do badania neurogenezy korowej i migracji neuronów. Ta metoda umożliwia analizę funkcji genów w komórkach macierzystych mózgu, wspierając rozwój terapii regeneracyjnych.

Neurogeneza korowa: przejście od osiągnięć laboratoryjnych do terapii komórkowych

Przeglądaj więcej filmów