Name: Zarejestrowane bioobrazowanie nanomateriałów do monitorowania diagnostycznego i terapeutycznego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-09T17:00:00.000+00:00
Duration: 17 min 16 s
Description: Poznaj metody bioobrazowania nanocząstek do monitorowania ich rozmieszczenia i skuteczności terapeutycznej w mózgu. Techniki te umożliwiają nieinwazyjne badania longitudinalne w modelach zwierzęcych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Praca została sfinansowana z grantów 1K25MH089851, 1P01DA028555-01A1, 2R01 NS034239, 2R37 NS36126, P01 NS31492, P20RR 15635, P01MH64570 oraz P01 NS43985 przyznanych przez National Institutes of Health. Autorzy dziękują pani Robin Taylor za krytyczne przeczytanie rękopisu oraz wybitne wsparcie graficzne i literackie. Autorzy chcieliby również podziękować Erin McIntyre, Melissie Mellon i Lindsay Rice za wsparcie techniczne.

<ol><li>Nowacek, A., Gendelman, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NanoART+neuroAIDS+and+CNS+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">NanoART neuroAIDS and CNS drug delivery.</a> Nanomedicine (Lond). 4, 557-574 (2009).</li>
<li>Nowacek, A., Kosloski, L. M., Gendelman, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurodegenerative+disorders+and+nanoformulated+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Neurodegenerative disorders and nanoformulated drug development.</a> Nanomedicine (Lond). 4, 541-555 (2009).</li>
<li>Nowacek, A. S., Miller, R. L., McMillan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NanoART+synthesis%2C+characterization%2C+uptake%2C+release+and+toxicology+for+human+monocyte-macrophage+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">NanoART synthesis, characterization, uptake, release and toxicology for human monocyte-macrophage drug delivery.</a> Nanomedicine (Lond). 4, 903-917 (2009).</li>
<li>Herbein, G., Varin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+macrophage+in+HIV-1+infection%3A+from+activation+to+deactivation%5BTitle%5D)+AND+%22Retrovirology%22%5BJournal%5D)">The macrophage in HIV-1 infection: from activation to deactivation.</a> Retrovirology. 7, 33-33 (2010).</li>
<li>Qian, B. Z., Pollard, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+diversity+enhances+tumor+progression+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Macrophage diversity enhances tumor progression and metastasis.</a> Cell. 141, 39-51 (2010).</li>
<li>Nathan, C., Ding, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonresolving+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Nonresolving inflammation.</a> Cell. 140, 871-882 (2010).</li>
<li>McNeill, E., Channon, K. M., Greaves, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+cell+recruitment+in+cardiovascular+disease%3A+murine+models+and+potential+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Sci+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Inflammatory cell recruitment in cardiovascular disease: murine models and potential clinical applications.</a> Clin Sci (Lond). 118, 641-655 (2010).</li>
<li>Bondeson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activated+synovial+macrophages+as+targets+for+osteoarthritis+drug+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Activated synovial macrophages as targets for osteoarthritis drug therapy.</a> Curr Drug Targets. 11, 576-585 (2010).</li>
<li>Benoit, L. A., Holtzman, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+immune+pathways+from+chronic+post-viral+lung+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">New immune pathways from chronic post-viral lung disease.</a> Ann N Y Acad Sci. 1183, 195-210 (2010).</li>
<li>Beduneau, A., Ma, Z., Grotepas, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facilitated+monocyte-macrophage+uptake+and+tissue+distribution+of+superparmagnetic+iron-oxide+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Facilitated monocyte-macrophage uptake and tissue distribution of superparmagnetic iron-oxide nanoparticles.</a> PLoS One. 4, e4343-e4343 (2009).</li>
<li>Dou, H., Grotepas, C. B., McMillan, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+delivery+of+nanoformulated+antiretroviral+drug+to+the+brain+in+a+murine+model+of+neuroAIDS%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Macrophage delivery of nanoformulated antiretroviral drug to the brain in a murine model of neuroAIDS.</a> J Immunol. 183, 661-669 (2009).</li>
<li>Liu, Y., Uberti, M. G., Dou, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ingress+of+blood-borne+macrophages+across+the+blood-brain+barrier+in+murine+HIV-1+encephalitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroimmunol%22%5BJournal%5D)">Ingress of blood-borne macrophages across the blood-brain barrier in murine HIV-1 encephalitis.</a> J Neuroimmunol. 200, 41-52 (2008).</li>
<li>Hetherington, H. P., Chu, W. J., Gonen, O., Pan, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Robust+fully+automated+shimming+of+the+human+brain+for+high-field+1H+spectroscopic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">Robust fully automated shimming of the human brain for high-field 1H spectroscopic imaging.</a> Magn Reson Med. 56, 26-33 (2006).</li>
<li>Hasan, K. M., Parker, D. L., Alexander, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+gradient+encoding+schemes+for+diffusion-tensor+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Comparison of gradient encoding schemes for diffusion-tensor MRI.</a> J Magn Reson Imaging. 13, 769-780 (2001).</li>
<li>Hasan, K. M., Basser, P. J., Parker, D. L., Alexander, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analytical+computation+of+the+eigenvalues+and+eigenvectors+in+DT-MRI%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson%22%5BJournal%5D)">Analytical computation of the eigenvalues and eigenvectors in DT-MRI.</a> J Magn Reson. 152, 41-47 (2001).</li>
<li>Neeman, M., Freyer, J. P., Sillerud, L. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+for+obtaining+cross-term-free+images+for+diffusion+anisotropy+studies+in+NMR+microimaging%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">A simple method for obtaining cross-term-free images for diffusion anisotropy studies in NMR microimaging.</a> Magn Reson Med. 21, 138-143 (1991).</li>
<li>Uberti, M. G., Boska, M. D., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+semi-automatic+image+segmentation+method+for+extraction+of+brain+volume+from+in+vivo+mouse+head+magnetic+resonance+imaging+using+Constraint+Level+Sets%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A semi-automatic image segmentation method for extraction of brain volume from in vivo mouse head magnetic resonance imaging using Constraint Level Sets.</a> J of Neurosci Methods. 179, 338-344 (2009).</li>
<li>Liu, Y., Uberti, M. G., Dou, H., Mosley, R. L., Gendelman, H. E., Boska, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Image+Warping+Technique+for+Rodent+Brain+MRI-Histology+Registration+Based+On+Thin-Plate+Splines+with+Landmark+Optimization%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Soc+Photo+Opt+Instrum+Eng%22%5BJournal%5D)">An Image Warping Technique for Rodent Brain MRI-Histology Registration Based On Thin-Plate Splines with Landmark Optimization.</a> Proc Soc Photo Opt Instrum Eng. 7259, 72592-K-72597-K (2009).</li>
<li>Uberti, M. G., Liu, Y., Dou, H., Mosley, R. L., Gendelman, H. E., Boska, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Registration+of+in+vivo+MR+to+histology+of+rodent+brains+using+blockface+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Soc+Photo+Opt+Instrum+Eng%22%5BJournal%5D)">Registration of in vivo MR to histology of rodent brains using blockface imaging.</a> Proc Soc Photo Opt Instrum Eng. 7262, 726213-726213 (2009).</li>
<li>Basser, P. J., Mattiello, J., LeBihan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+the+effective+self-diffusion+tensor+from+the+NMR+spin+echo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+B%22%5BJournal%5D)">Estimation of the effective self-diffusion tensor from the NMR spin echo.</a> J Magn Reson B. 103, 247-254 (1994).</li>
<li>Hasan, K. M., Narayana, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retrospective+measurement+of+the+diffusion+tensor+eigenvalues+from+diffusion+anisotropy+and+mean+diffusivity+in+DTI%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">Retrospective measurement of the diffusion tensor eigenvalues from diffusion anisotropy and mean diffusivity in DTI.</a> Magn Reson Med. 56, 130-137 (2006).</li>
<li>Ratiney, H., Sdika, M., Coenradie, Y., Cavassila, S., Ormondt, D. van, Graveron-Demilly, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-domain+semi-parametric+estimation+based+on+a+metabolite+basis+set%5BTitle%5D)+AND+%22NMR+Biomed%22%5BJournal%5D)">Time-domain semi-parametric estimation based on a metabolite basis set.</a> NMR Biomed. 18, 1-13 (2005).</li>
<li>Naressi, A., Couturier, C., Castang, I., Beer, R. de, Graveron-Demilly, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Java-based+graphical+user+interface+for+MRUI%2C+a+software+package+for+quantitation+of+in+vivo%2Fmedical+magnetic+resonance+spectroscopy+signals%5BTitle%5D)+AND+%22Comput+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Java-based graphical user interface for MRUI, a software package for quantitation of in vivo/medical magnetic resonance spectroscopy signals.</a> Comput Biol Med. 31, 269-286 (2001).</li>
<li>Boska, L. ewis, Destache, T. B., J, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+1H+magnetic+resonance+spectroscopic+imaging+determines+therapeutic+immunization+efficacy+in+an+animal+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Quantitative 1H magnetic resonance spectroscopic imaging determines therapeutic immunization efficacy in an animal model of Parkinson's disease.</a> J Neurosci. 25, 1691-1700 (2005).</li>
<li>Mosley, R. L., Benner, E. J., Kadiu, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroinflammation%2C+Oxidative+Stress+and+the+Pathogenesis+of+Parkinson%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Neuroinflammation, Oxidative Stress and the Pathogenesis of Parkinson's Disease.</a> Clin Neurosci Res. 6, 261-281 (2006).</li>
<li>Nelson, J. A., Dou, H., Ellison, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coregistration+of+quantitative+proton+magnetic+resonance+spectroscopic+imaging+with+neuropathological+and+neurophysiological+analyses+defines+the+extent+of+neuronal+impairments+in+murine+human+immunodeficiency+virus+type-1+encephalitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Coregistration of quantitative proton magnetic resonance spectroscopic imaging with neuropathological and neurophysiological analyses defines the extent of neuronal impairments in murine human immunodeficiency virus type-1 encephalitis.</a> J Neurosci Res. 80, 562-575 (2005).</li>
<li>Boska, H. asan, Kibuule, K. M., D, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+diffusion+tensor+imaging+detects+dopaminergic+neuronal+degeneration+in+a+murine+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Quantitative diffusion tensor imaging detects dopaminergic neuronal degeneration in a murine model of Parkinson's disease.</a> Neurobiol Dis. 26, 590-596 (2007).</li>
<li>Liu, W., Frank, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+and+quantification+of+magnetically+labeled+cells+by+cellular+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Radiol%22%5BJournal%5D)">Detection and quantification of magnetically labeled cells by cellular MRI.</a> Eur J Radiol. 70, 258-264 (2009).</li>
<li>Balchandani, P., Yamada, M., Pauly, J., Yang, P., Spielman, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-refocused+spatial-spectral+pulse+for+positive+contrast+imaging+of+cells+labeled+with+SPIO+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">Self-refocused spatial-spectral pulse for positive contrast imaging of cells labeled with SPIO nanoparticles.</a> Magn Reson Med. 62, 183-192 (2009).</li>
<li>Stuber, M., Gilson, W. D., Schar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positive+contrast+visualization+of+iron+oxide-labeled+stem+cells+using+inversion-recovery+with+ON-resonant+water+suppression+%28IRON%29%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">Positive contrast visualization of iron oxide-labeled stem cells using inversion-recovery with ON-resonant water suppression (IRON).</a> Magn Reson Med. 58, 1072-1077 (2007).</li>
<li>Suzuki, Y., Cunningham, C. H., Noguchi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+serial+evaluation+of+superparamagnetic+iron-oxide+labeled+stem+cells+by+off-resonance+positive+contrast%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">In vivo serial evaluation of superparamagnetic iron-oxide labeled stem cells by off-resonance positive contrast.</a> Magn Reson Med. 60, 1269-1275 (2008).</li>
<li>Kim, Y. B., Bae, K. H., Yoo, S. S., Park, T. G., H, P. ark <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positive+contrast+visualization+for+cellular+magnetic+resonance+imaging+using+susceptibility-weighted+echo-time+encoding%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Positive contrast visualization for cellular magnetic resonance imaging using susceptibility-weighted echo-time encoding.</a> Magn Reson Imaging. 27, 601-610 (2009).</li>
<li>Zhou, R., Idiyatullin, D., Moeller, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SWIFT+detection+of+SPIO-labeled+stem+cells+grafted+in+the+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">SWIFT detection of SPIO-labeled stem cells grafted in the myocardium.</a> Magn Reson Med. 63, 1154-1161 Forthcoming.</li>
</ol>

Nie zgłoszono żadnych konfliktów interesów.

Dokładna rejestracja histologii z wynikami obrazowania in-vivo jest krytycznym krokiem w opracowywaniu biomarkerów obrazowych służących do wykrywania i określania stadium chorób neuronalnych. Niektóre parametry obrazowania prawdopodobnie korelują z grubymi zmianami morfologicznymi, w tym ze zmianami magnetycznych właściwości relaksacyjnych tkanki, wykorzystywanych do wykrywania chorób istoty białej i nowotworów. Inne, bardziej subtelne metody, takie jak DTI, mogą wykrywać wczesne zmiany komórkowe, które mogą być niewidoczne w badaniu histologicznym, ponieważ zmiany histopatologiczne wywołane chorobą pojawiają się dopiero w późniejszych stadiach. Jeszcze inne wskaźniki, takie jak markery spektroskopowe, mogą być sygnałami wczesnych i odwracalnych zmian, które wyprzedzają nawet najsubtelniejsze przekształcenia komórkowe.
Biodystrybucję można określić nieinwazyjnie, stosując szereg różnych metod. Głównymi metodami nieinwazyjnymi są pozytonowa tomografia emisyjna (PET), jedno- i wielofotonowa tomografia emisyjna (SPECT), obrazowanie optyczne oraz MRI. Metody obrazowania oparte na medycynie nuklearnej (PET i SPECT) były przez lata wykorzystywane w wielu badaniach biodystrybucji, jednak ich zastosowanie jest ograniczone przez czas połowicznego rozpadu radiotracerów używanych do znakowania związków lub nanomateriałów, szczególnie w przypadku tracerów PET. Obrazowanie optyczne może być stosowane u małych gryzoni, ale nie może zostać przeniesione na zastosowania u ludzi, z wyjątkiem obszarów łatwo dostępnych, takich jak guzy powierzchniowe, ze względu na absorpcję i rozpraszanie światła. Ponadto, z tych samych powodów trudna jest kwantyfikacja sygnałów optycznych. MRI wykorzystuje trwałe znaczniki, takie jak SPIO, które mogą być śledzone w organizmie przez okres wielu tygodni. Metodę tę należy jednak stosować z ostrożnością, ponieważ znacznik może zostać przeniesiony do innych komórek lub wchłonięty przez organizm.
Specyficzność detekcji SPIO w MRI może być zapewniona za pomocą różnych metod. Metody detekcji, które dostarczają sygnałów zarówno pozytywnych, jak i negatywnych, są stosowane w celu poprawy specyficzności MRI w wykrywaniu obecności SPIO w tkankach. Metoda subtrakcyjna zastosowana w niniejszej pracy była wykorzystywana również przez innych autorów28. Inne podejścia obejmują detekcję poza rezonansem29-31, obrazowanie z czułością fazową, które generuje charakterystyczny wzorzec w pobliżu obszarów pustki SPIO32, oraz obrazowanie z zerowym czasem echa, wykorzystujące ważenie T1 w celu uzyskania pozytywnej intensywności sygnału w regionie SPIO33. Rozwój tych metod w celu poprawy ilościowego oznaczenia znacznika, czułości i specyficzności jest obecnie obszarem aktywnych badań.

<table><tbody><tr><td>Izofluran</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tlen medyczny</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Waporyzator izofluranu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Maska do znieczulenia gazowego dla gryzoni</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereotaktyczny uchwyt głowy kompatybilny z MRI</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rurka do cewnika polietylenowego</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Igła niemagnetyczna</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Smar do oczu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gaza</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Taśma</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medium perfuzyjne</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Związek OCT do zatapiania tkanek</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>System MRI</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aparat cyfrowy</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kriostat do sekcjonowania tkanek</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

rejestrowane obrazowanie biomedyczne nanomateriałów w monitorowaniu diagnostyki i terapii

Registered Bioimaging of Nanomaterials for Diagnostic and Therapeutic Monitoring 

Nanoleki mogą być transportowane przez krążące we krwi monocyty i makrofagi do układu siateczkowo-śródbłonkowe (RES; śledziona, wątroba, węzły chłonne) oraz do organów docelowych. Do tych ostatnich należą płuca, RES i mózg, które są zaangażowane podczas infekcji wirusemGetService immunodeficytu ludzkiego typu 1 (HIV-1). Przenikanie makrofagów do tkanek jest szczególnie zauważalne w obszarach aktywnej replikacji HIV-1 oraz w miejscach stanu zapalnego. Aby ocenić potencjał makrofagów jako nanonośników, do myszy z encefalitem wywołanym przez HIV-1 wstrzykiwano drogą parenterystyczną nanocząstki superparamagnetycznego tlenku żelaza i/lub cząstki obciążone lekiem, powleczone surfaktantami. Przeprowadzono to w celu ilościowej oceny biodystrybucji cząstek i leku. Wyniki obrazowania metodą rezonansu magnetycznego (MRI) zostały zweryfikowane poprzez korejestrację histologiczną i zaawansowane przetwarzanie obrazu. Chorobę organów docelowych, objawiającą się zmianami w histologii mózgu, oceniono za pomocą MRI. Wykazanie intensywnej migracji nanoformułacji do obszarów ogniskowego zapalenia mózgu stanowi „dowód koncepcji” (proof of concept) dla zastosowania zaawansowanych technik bioobrazowania w monitorowaniu migracji makrofagów. Co istotne, aberracje histopatologiczne w mózgu korelują z parametrami bioobrazowania, co potwierdza użyteczność MRI w badaniach nad dystrybucją komórek w przebiegu chorób. Zakładamy, że stosowanie takich metod może dostarczyć w czasie rzeczywistym wskaźnika obciążenia chorobą oraz skuteczności terapeutycznej z potencjałem translacyjnym na ludzi.

Metody obrazowania biologicznego stosowane do oceny biodystrybucji komórkowej nanocząsteczek znajdują zastosowanie w monitorowaniu terapeutycznym i diagnostycznym związków sformułowanych w nanostruktury. Metody opisane w niniejszym opracowaniu są czułe i swoiste w ocenie za pomocą korejestracji histologicznej. Przedstawione metodologie zapewniają ścieżkę translacyjną od zastosowań na modelach gryzoni do zastosowań u ludzi.

Rejestrowane obrazowanie biomedyczne nanomateriałów w monitorowaniu diagnostyki i terapii

Nanoleki mogą być transportowane przez krążące we krwi monocyty i makrofagi do układu siateczkowo-śródbłonkowego (RES; śledziona, wątroba, węzły chłonne) oraz do końcowych...

Ogólnym celem niniejszej procedury jest obrazowanie rozkładu oraz ocena skuteczności terapeutycznej nanocząstek znakowanych magnetycznie lub sformułowanych z lekiem. Cel ten osiąga się poprzez najpierw wytworzenie cząstek, przetestowanie ich właściwości biologicznych pod kątem poboru przez komórki w laboratoryjnych systemach modelowych, a następnie wstrzyknięcie sformułowań obciążonych komórkami i ocenę ich rozkładu w tkankach za pomocą obrazowania biologicznego. Dotknięte obszary mózgu zostały zwizualizowane przed i po wstrzyknięciu makrofagów pochodzenia monocytarnego zainfekowanych wirusem.Drugim krokiem procedury jest obrazowanie podregionów mózgu zawierających nanocząstki z obciążeniem komórkowym, znakowane magnetycznie lub terapeutyczne. Jest to wykonywane w różnych odstępach czasu po wstrzyknięciu komórek zawierających nanocząstki znakowane magnetycznie lub leki w formie nanofarmaceutycznej. Trzecim krokiem procedury jest przeprowadzenie końcowej analizy histologicznej w celu oceny biodystrybucji nanocząstek oraz zmian komórkowych.Współrejestracja wyników obrazowania jest przeprowadzana z histologią. Końcowym krokiem procedury jest ilościowe określenie i przedstawienie biodystrybucji nanocząsteczek, ustalenie nieprawidłowości spektroskopowych oraz ocena nieprawidłowości tensora dyfuzji w funkcji czasu po wykonaniu iniekcji komórek. W rezultacie można uzyskać dane obrazujące biodystrybucję oraz wpływ na chemię mózgu i morfologię komórek występujący w konsekwencji terapeutycznego i diagnostycznego zastosowania nanomateriałów, przy wykorzystaniu obrazowania rezonansu magnetycznego i spektroskopii współrejestrowanych z analizami histologicznymi.Witam, jestem dr. Michael Bosca, dyrektor Programu Bioobrazowania na University of Nebraska Medical Center. Niniejsza praca jest częścią trwającej współpracy pomiędzy moim laboratorium a laboratorium dr. Howarda Gendelmana. Główną zaletą obrazowania nieinwazyjnego w porównaniu z powszechnie stosowanymi metodami, takimi jak mikroskopia konfokalna czy nanocząsteczki fluorescencyjne, jest możliwość objęcia całego mózgu podczas jednego badania oraz możliwość prowadzenia badań podłużnych na tym samym zwierzęciu.Ogranicza to zmienność biologiczną, wymaga mniejszej liczby zwierząt i w wielu przypadkach może zostać przełożone na zastosowania u ludzi. Metoda ta może pomóc w rozwiązaniu kluczowych kwestii dotyczących nowo opracowanych nanocząsteczek, w tym profili biodystrybucji, farmakokinetyki oraz skuteczności terapeutycznej. Połączenie solidnych procedur obrazowania z korejestracją histologiczną jest unikalne i niezbędne do przeprowadzenia badań biodystrybucji rozdzielonych w czasie oraz badań skuteczności leków w złożonych zwierzęcych modelach chorób. Procedury te będą demonstrować technicy w moim laboratorium, Lindsey i Melissa, oraz stażysta podoktorski dr P. Są oni odpowiedzialni za pozyskiwanie danych obrazowych od zwierząt w laboratorium.Aaron i Mariano odpowiadają za przetwarzanie obrazów, w tym obrazowanie tensora dyfuzji oraz korejestrację histologiczną. Dzień dobry, nazywam się dr Howard Delman i jestem kierownikiem Carol Schwartz Emerging Neuroscience Laboratory na University of Nebraska Medical Center. Ta interdyscyplinarna współpraca z dr. Bascą i jego laboratorium ma szerokie znaczenie dla terapii i diagnostyki szeregu chorób neurodegeneracyjnych.Nieprawidłowości w spektroskopii rezonansu magnetycznego oraz obrazowaniu tensora dyfuzji są wykorzystywane do monitorowania uszkodzeń neuronów i wypustek neuronalnych w przebiegu choroby. W obecnym projekcie metody te pozwalają na wgląd w skuteczność biodystrybucji nanoleków, takich jak rozkład leku w całym organizmie oraz skuteczność terapeutyczna w obrębie układu nerwowego. Opracowywany jest szereg technik wytwarzania cząstek, które mogłyby poprawić detekcję dystrybucji komórkowej podczas choroby, obejmujący modyfikacje rozmiaru, powłoki i ładunku cząstek.Wszystkie te zagadnienia pozostaną aktywnymi obszarami badań w naszych laboratoriach. Po pierwsze, należy przygotować nanomateriały do dostarczania leków i biodystrybucji, co jest tematem równoległego artykułu w tym numerze. Najpierw odtwórz kandydujące nanoformulacje do zastosowań in vivo, zastępując rdzeń leku lub kroplę cząstką o identycznym rozmiarze bądź zmielonym fragmentem superparamagnetycznego tlenku żelaza przed pokryciem odpowiednim surfaktantem.Następnie należy zmierzyć rozmiar, ładunek, kształt oraz cytotoksyczność, aby ustalić, czy modelowy układ SPIO posiada takie same właściwości jak kandydacki lek w formie nanoformułacji. Na koniec należy przeprowadzić testy ładowania komórkowego poprzez inkubację z kandydacką nanoformułacją modelową SPIO, aby określić aktywność wewnątrz komórek; w tym celu należy przygotować w trzech powtórzeniach fantomy składające się z znakowanych komórek zawieszonych w żelu agarowym, stosując szereg stężeń, aby ilościowo ocenić aktywność wynikającą z poboru SPIO przez komórki. Pozwala to uzyskać wskaźnik czułości i określić, czy nanoformulacje mogą wpływać na stan utlenienia, a tym samym na widoczność SPIO w badaniach obrazowych metodą rezonansu magnetycznego.Przed rozpoczęciem skanowania umieść zwierzę w komorze anestezjologicznej wypełnionej wcześniej gazami anestetycznymi. Przyspieszy to indukcję znieczulenia i zminimalizuje czas potrzebny na zapewnienie, że zwierzę nie obudzi się po wyjęciu z komory. Po pełnym znieczuleniu wyjmij zwierzę z komory i umieść je w uchwycie stereotaktycznym wyposażonym w system monitorowania częstości oddechów i temperatury.Umieść głowę zwierzęcia w uchwycie do głowy, zamocuj pręty uszne i przymocuj ciało za pomocą gazy. Uchwyt do zwierzęcia powinien być wyposażony w regulowany pręt zębowy, umożliwiający wyrównanie głowy w pionie i poziomie; upewnij się, że głowa jest prawidłowo ustawiona w kierunku rostralnym i nie jest obrócona. Sprawdź, czy cewka powierzchniowa jest prawidłowo rozmieszczona na głowie, umożliwiając obrót uchwytu do zwierzęcia.Gdy zwierzę znajduje się w magnesie, zapewniona zostanie kompensacja niewielkich obrotów, które mogą występować w zależności od osobnika. Po zabezpieczeniu zwierzęcia w uchwycie, umieść uchwyt w skanerze MRI. Następnie przesuń uchwyt wraz z cewką powierzchniową do centrum skanera.Do przesyłania energii RF w celu wytworzenia sygnału zastosowano aktywno rozsprzęglony rezonator o średnicy 72 mm, natomiast do odbioru sygnału wykorzystano cewkę głowową. Następnie wyznaczono pozycję początkową, stosując jednowymiarowy odczyt w czasie rzeczywistym w kierunku rostralnym. Zastosowanie odbioru za pomocą cewki powierzchniowej ogranicza sygnał do obszaru wokół cewki, co zmniejsza konieczność interpretacji obserwowanych przebiegów falowych.Następnie wykonuje się lokalizator w trzech płaszczyznach, aby określić dokładną pozycję zwierzęcia w skanerze. W dalszej kolejności konieczne jest przeprowadzenie shimowania lub korekty homogeniczności pola magnetycznego. W tym celu stosujemy sekwencję wielokrotnego echa gradientowego oraz oprogramowanie do mapowania opracowane przez dr Hobie Heatheringtona, które dopasowuje obszary homogeniczności do regionu badanego przez każdą z poszczególnych metod obrazowania.Po zakończeniu shimowania można przystąpić do akwizycji interesujących skanów. Biodystrybucję nanocząsteczek zawierających SPIO można wykryć jako obszary utraty sygnału w wysokorozdzielczych obrazach MRI ważonych T2*. Po pierwsze, przed wstrzyknięciem preparatu zwierzęciu, należy określić na podstawie skanów lokalizacyjnych (LOCALIZER) obszar mózgu do obrazowania. Następnie należy zaprogramować wysokorozdzielczą 3D sekwencję gradientową z echem powracającym o izotropowej rozdzielczości 150 mikronów.Wykonaj skan bazowy, następnie podaj preparat zwierzęciu i ponownie wykonaj tę samą sekwencję. Równoległe badania w celu określenia skuteczności terapeutycznej nanoleków można przeprowadzić z wykorzystaniem obrazowania tensora dyfuzji oraz spektroskopii magnetyczno-rezonansowej wodoru. Najpierw wykonaj obrazy zwiadowcze S, a następnie przeprowadź shimowanie obszaru przeznaczonego do skanowania.Następnie wykonano obrazowanie DTI z wykorzystaniem sekwencji obrazowania echo-planarnego z dyfuzją ważoną, z zastosowaniem spinowego echa bramkowanego oddechem w naszych skanach. Do kodowania dyfuzji wykorzystano zrównoważony, rotacyjnie zmienny schemat ISO cathedral z naprzemienną polaryzacją w 12 kierunkach; schemat kodowania został zaprojektowany w celu zredukowania sprzężeń gradientów dyfuzji tła. Całkowity czas akwizycji wynosił od 20 do 40 minut, w zależności od częstotliwości oddychania.Następnie przeprowadź badanie MR-spektroskopowe. Zlokalizuj obszar zainteresowania na wcześniej uzyskanych obrazach, wykonaj shimming w wybranym obszarze, a następnie zoptymalizuj moc impulsów tłumienia sygnału wody. Zmierz częstotliwość wody, aby zapewnić rezonans sygnału wody, i uzyskaj krótkie widmo testowe w celu kontroli jakości, jeśli widma będą niewystarczającej jakości.Sprawdzić ustawienia systemu, w tym częstotliwość radiową, moc oraz ustawienia shima. Na koniec zarejestrować widma w krótkich blokach, resetując częstotliwość systemu pomiędzy akwizycjami w celu wyeliminowania efektów dryftu pola magnetycznego. Po zakończeniu akwizycji.Użyj widma pojedynczego impulsu wody jako zdefiniowanego wzmocnienia przedwzmacniacza w celu uzyskania ilościowego odniesienia amplitudy sygnału. Po ostatnim skanie MRI w serii przeprowadź perfuzję myszy, wyjmij mózg i zatop go w bloku związku OCT, który został przyciemniony za pomocą kropli tuszu indyjskiego. Następnie umieść ten blok w kriosztacie w celu wykonania cięć i analizy histologicznej.Należy wykonać zdjęcia powierzchni bloku za pomocą kamery cyfrowej zamontowanej z przodu kriostatu. Zdjęcia powinny być wykonywane co 50 µm przez całą objętość mózgu, aby umożliwić rejestrację przekrojów w obrębie tej objętości. Po obróbce histologicznej i barwieniu należy dopasować poszczególne przekroje powierzchni bloku w celu rekonstrukcji objętości 3D.Wykorzystując kontury bloków w celu uwzględnienia drgań w pozycji głowicy kriostatu, należy automatycznie przeprowadzić segmentację objętości mózgu przy użyciu algorytmu region growing opartego na ziarnie w pakiecie oprogramowania analyze. Superparamagnetyczny tlenek żelaza powoduje utratę sygnału w obrazowaniu MRI ważonym T2*, w związku z czym ubytek sygnału MRI jest czułym, ale nieswoistym markerem jego obecności. Aby zapewnić zarówno czułość, jak i swoistość w wykrywaniu obecności SPIO w mózgu.Dla potrzeb naszego badania z trójwymiarowych skanów MRI wykonanych przed i po iniekcji należy utworzyć obrazy różnicowe. Skanowanie podregionów (sub-imaging) przeprowadzono przy użyciu metody ograniczonego zbioru poziomów (constrained level set method) opracowanej w naszym laboratorium. Objętości podregionów mózgu zostały następnie zarejestrowane wspólnie, a intensywność sygnału znormalizowana; następnie wykonano odejmowanie objętości w celu wykrycia obszarów w mózgu z utratą sygnału, z wyłączeniem obszarów przy krawędziach, aby wyeliminować fałszywie dodatnie sygnały wynikające z błędów rejestracji na poziomie subpikselowym.Następnie przeprowadza się korejestrację obrazów histologicznych i MRI, wykorzystując obraz powierzchni bloku jako wspólny punkt odniesienia. Dokładna kolokalizacja tych dwóch sygnałów stanowi miarę precyzji korejestracji oraz deformacji obrazów histologicznych do oryginalnych kształtów przekrojów. Skanowania DTI można analizować, rozpoczynając od wyboru anatomicznego obszaru zainteresowania (ROI), aby określić średnie właściwości dyfuzyjne tkanki w konkretnej podstrukturze anatomicznej.W naszych badaniach analizy danych obrazowania dyfuzyjnego są następnie przeprowadzane przy użyciu specjalistycznych programów napisanych w języku IDL (interactive data language), udostępnionych przez dr Cada Hassana. Analizy te pozwalają na wygenerowanie map dyfuzyjności tensorowej, średniej dyfuzyjności oraz frakcyjnej anizotropii. Po utworzeniu map można również uzyskać komponenty poprzeczne i podłużne tensora dyfuzji.Wyznacz obszary zainteresowania (ROI) na obrazach MRI ważonych czasowo T2 z nałożonymi kolorowymi mapami kierunkowości. Przedstawiono tutaj przykłady obszarów wybranych w naszych eksperymentach do analizy w mysim modelu HIV. Dane z każdego obszaru zainteresowania są pobierane w formie pliku tekstowego, aby w późniejszym czasie wprowadzić je do bazy danych.Tutaj przedstawiono przykład wyniku dopasowania krzywej MRS z pojedynczego widma, uzyskanego w naszym laboratorium. Stosujemy metodę dopasowania w dziedzinie czasu zwaną Quest, zawartą w pakiecie do przetwarzania sygnałów J-M-R-U-I.Program Quest dopasowuje widma, wykorzystując liniową kombinację widm poszczególnych metabolitów, aby przeprowadzić minimalizację metodą najmniejszych kwadratów pomiędzy widmem stymulowanym a rzeczywistym. Jako potencjalne czynniki wkładające wykorzystujemy zestaw bazy składającej się z 22 poszczególnych metabolitów. Widma bazowe są symulowane i walidowane z wykorzystaniem widm roztworów poszczególnych metabolitów.Przykłady biodystrybucji makrofagów znakowanych SPIO z wykorzystaniem tych metod przedstawiono tutaj, gdzie nałożono na siebie lokalizację komórek znakowanych wykrytą za pomocą MRI (kolor czerwony), lokalizację komórek znakowanych przy użyciu zarejestrowanej histologii (kolor niebieski) oraz obszary pokrywania się obu metod (kolor żółty). Myszy wstrzyknięto do żyły ogonowej znakowane makrofagi pochodzące z monocytów. Pięć dni później wykonano obrazowanie MRI T2* i przetworzono dane zgodnie z opisem.Myszy przygotowano poprzez wstrzyknięcie zainfekowanych HIV ludzkich makrofagów do mózgu, co widoczne jest jako linia wykrytych makrofagów pochodzenia monocytowego myszy. Dalsze przykłady zarówno detekcji znakowanych komórek, jak i korejestracji z badaniami histologicznymi można znaleźć w naszych poprzednich publikacjach. Producent cząsteczek oraz testowanie ich właściwości biologicznych w zakresie wychwytu przez komórki w laboratoryjnych systemach modelowych jest wymagane i musi być przeprowadzone zgodnie z procedurami sterylnymi w celu zastosowania w tych badaniach na zwierzętach.Iniekcje formulacji zawierających komórki muszą być wykonane bez naruszenia dostępu do żyły, ponieważ wpłynie to na obszary mózgu i innych tkanek wizualizowanych w celu oceny integracji produktu biologicznego z wykorzystaniem technik obrazowania biomedycznego, a szeroka współpraca międzyzespołowa okazała się kluczowa dla sukcesu całego projektu. Po opanowaniu techniki procedury można ukończyć w ciągu dwóch godzin, zależnie od dostępności przeszkolonego personelu do przygotowania stanowiska i kalibracji systemów podczas wykonywania zabiegu. Ważne jest zachowanie sterylności, aby kruche myszy z niedoborami odporności pozostały żywe przez cały czas trwania badań seryjnych, z których niektóre mogą trwać wiele miesięcy.Metody te stworzyły podstawy do badania związku między zmianami komórkowymi uwidocznionymi w badaniu histologicznym a wykrytymi nieprawidłowościami morfologicznymi, fizjologicznymi i biochemicznymi. Wykorzystanie metod neuroobrazowania w korejestracji histologii mózgu jest zadaniem trudnym i zostało zrealizowane jedynie przez kilka grup badawczych. Po obejrzeniu tego filmu.Należy zrozumieć, w jaki sposób przeprowadza się eksperymenty obrazowania mózgu oraz jak dokonuje się ich korejestracji z badaniami histologicznymi na gryzoniu w modelu choroby. Metoda ta może być wykorzystana do pomiaru biodystrybucji superparamagnetycznych cząsteczek tlenku żelaza. Alternatywnie, MRI oraz lokalna spektroskopia MR mogą być stosowane do śledzenia neurodegeneracji występującej w przebiegu procesów chorobowych.Następnie można seryjnie oceniać efekty terapeutyczne w celu złagodzenia uszkodzeń mózgu. Obrazowanie można stosować wraz z histologią w celu walidacji wyników eksperymentalnych. Ogólnie rzecz biorąc, metody te zapewnią dynamiczny i precyzyjny zestaw pomiarów dotyczących biodystrybucji nanocząstek oraz ich skuteczności terapeutycznej.

registered-bioimaging-nanomaterials-for-diagnostic-therapeutic

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioinżynieria

Zarejestrowane Bioobrazowanie Nanomateriałów dla Monitorowania Diagnostycznego i Terapeutycznego

Nanocząstki wirusowe pochodzenia roślinnego (VNPs) stanowią obiecujące platformy do zastosowań w biomedycynie. W niniejszym materiale opisujemy procedury propagacji, oczyszczania, charakteryzacji oraz biokoniugacji roślinnych VNP. Na koniec przedstawiamy zastosowanie VNP w celowanym dostarczaniu do guzów oraz obrazowaniu z wykorzystaniem modelu ksenoprzeszczepu u myszy i obrazowania fluorescencyjnego.

Nanocząsteczki wirusowe do obrazowania guzów in vivo

Laserowa spektroskopia rozpadu przeprowadzona na cienkich narządach i tkankach nowotworowych skutecznie wykryła naturalne pierwiastki i sztucznie wstrzyknięty gadolin (Gd), emitowany z nanocząstek opartych na Gd. Obrazy pierwiastków chemicznych osiągnęły rozdzielczość 100 μm i czułość ilościową poniżej mM. Kompatybilność zestawu ze standardową mikroskopią optyczną podkreśla jego potencjał do dostarczania wielu obrazów tej samej tkanki biologicznej.

Spektroskopia rozpadu indukowanego laserem: nowe podejście do mapowania i kwantyfikacji nanocząstek w tkance narządowej

Ten protokół opisuje syntezę biofunkcjonalizowanych pruskich niebieskich nanocząstek i ich zastosowanie jako multimodalnych, molekularnych środków obrazowania. Nanocząstki mają konstrukcję rdzeń-powłoka, w której jony gadolinu lub manganu w rdzeniu nanocząstki generują kontrast MRI. Otoczka biofunkcjonalna zawiera fluorofory do obrazowania fluorescencyjnego i ligandy celujące do celowania molekularnego.

Biofunkcjonalizowane nanocząstki błękitu pruskiego do zastosowań w multimodalnym obrazowaniu molekularnym

Opisujemy procedurę wykrywania pierwiastków chemicznych obecnych in situ w komórkach ludzkich, jak również ich kwantyfikację in vitro. Metoda ta jest odpowiednia dla każdego typu komórek i jest szczególnie przydatna do ilościowych analiz chemicznych w pojedynczych komórkach po ekspozycji na nanocząstki tlenku metalu in vitro.

In Situ Wykrywanie i kwantyfikacja pojedynczych komórek nanocząstek tlenków metali za pomocą analizy mikrosondy jądrowej

Słabe zrozumienie skuteczności nanoleków in vivo utrudnia ich kliniczne tłumaczenie. Opisano tutaj procedury oceny zachowania in vivo nanoleków przeciwnowotworowych na poziomie ogólnoustrojowym, tkankowym, jednokomórkowym i subkomórkowym u myszy immunokompetentnych z nowotworem. Podejście to może pomóc naukowcom w zidentyfikowaniu obiecujących nanoleków przeciwnowotworowych do zastosowania klinicznego.

Kompleksowa procedura oceny skuteczności in vivo nanoleków przeciwnowotworowych

W tej pracy dostarczamy protokół do biofunkcjonalizacji magnetycznych nanomateriałów z przeciwciałami do określonego celowania w komórki. Na przykład wykorzystujemy nanodruty żelaza do celowania w komórki rakowe.

Biofunkcjonalizacja nanomateriałów magnetycznych

Ten artykuł przedstawia integrację modułu spektralnego ogniskowania i lasera impulsowego o podwójnym wyjściu, umożliwiającego szybkie obrazowanie hiperspektralne nanocząsteczek złota i komórek rakowych. Praca ta ma na celu zademonstrowanie szczegółów multimodalnych nieliniowych technik optycznych na standardowym laserowym mikroskopie skaningowym.

Obrazowanie biomolekularne wychwytu komórkowego nanocząstek przy użyciu multimodalnej nieliniowej mikroskopii optycznej

Przedstawiono protokół syntezy trwałych nanomateriałów luminescencyjnych (PLNP) i ich potencjalnych zastosowań w wyświetlaczach wielokrotnego zapisu i przetwarzaniu artystycznym wykorzystującym efekt poświaty pod wpływem promieniowania ultrafioletowego (365 nm).

Synteza trwałych nanocząstek luminescencyjnych do wyświetlaczy wielokrotnego zapisu i zastosowań oświetleniowych

Tutaj opisujemy protokół dostarczania in vivo magnetycznych nanocząstek tlenku żelaza przenoszących oligomery RNA do przerzutowego raka piersi w modelach zwierzęcych, zapewniając klinicznie realne podejście do terapeutycznego wyciszania onkogennych kwasów nukleinowych.

Monitorowanie akumulacji nanoleków w przerzutach mysiego raka piersi

Bariera krew-mózg jest znaczącą przeszkodą w dostarczaniu terapii glejaka, choroby, na którą nie ma lekarstwa. W tym miejscu przedstawiamy sterowaną obrazem in vivo terapeutyczną platformę nano tlenku żelaza, która może ominąć tę fizjologiczną barierę ze względu na rozmiar i gromadzić się w guzie.

Dostarczanie nanocząstek ładunku oligonukleotydowego w modelu zwierzęcym glejaka wielopostaciowego

Poznaj metody bioobrazowania nanocząstek do monitorowania ich rozmieszczenia i skuteczności terapeutycznej w mózgu. Techniki te umożliwiają nieinwazyjne badania longitudinalne w modelach zwierzęcych.

Rejestrowane obrazowanie biomedyczne nanomateriałów w monitorowaniu diagnostyki i terapii

Przeglądaj więcej filmów