Name: Zastosowanie światłoutwardzalnej żywicy adhezyjnej do montażu elektrod lub sond do mikrodializy w eksperymentach przewlekłych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-30T00:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 30 s
Description: Poznaj zastosowanie światłoutwardzalnej żywicy dentystycznej do montażu elektrod w eksperymentach przewlekłych. Ta metoda umożliwia bezpośrednie wiązanie z czaszką, eliminując potrzebę stosowania śrub i zmniejszając ryzyko infekcji.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy naszym kolegom z RIKEN-BSI za uprzejme wsparcie i owocne rady podczas realizacji tej pracy. Chciałbym wyrazić szczyre uznanie dla profesora Shigemi Mori, profesora G bor Juh sz, dr Kiyojiego Matsuyamy, Katalin A K kesi oraz rp d Dobolyi, którzy doradzili mi studiowanie metody mikrodializy podczas studiów w Graduate University for Advanced Studies w Japonii. Na koniec dziękujemy panu Chrisowi Sarneckiemu i dr. Akitsugu Takasu za pomoc w nagraniu wideo.

Krok 1. Przygotowanie do implantacji sondy
<ol>
<li>Znieczulenie (nie pokazano w filmie) Znieczul każdego ptaka poprzez dostarczenie domięśniowego wstrzyknięcia mieszaniny ketaminy (12,5 mg/kg masy ciała) i ksylazyny (25 mg/kg), aby uzyskać stabilny poziom znieczulenia chirurgicznego. </li>
<li>Mocowanie głowy w aparacie stereotaktycznym Użyj żelu Xylocaine(TM), aby zmniejszyć lokalny ból wywołany naciskiem prętów usznych. Głowa ptaka jest mocowana w aparacie stereotaktycznym składającym się z prętów usznych i uchwytu dzioba, który utrzymuje głowę pod kątem 45°. Podczas operacji stereotaktycznej w celu implantacji, ogrzewaj ciało ptaka za pomocą podkładki chirurgicznej z kontrolą termiczną (temperatura = 34~36°C). </li>
<li>Dezynfekcja obszaru operacyjnego Przed operacją zdezynfekuj pole chirurgiczne preparatem Isodine(TM). </li>
</ol>
Krok 2. Pozycjonowanie stereotaktyczne
<ol>
<li>Wyrównanie punktów odniesienia Wyrównaj atrapy sondy (szklanej mikropipety) do punktu Lambda (punkt Y) i zaznacz punkt Y za pomocą pipety wypełnionej barwnikiem. W filmie wykorzystano pozostałości Dextran-TMR z ostatniego badania traserów. </li>
<li>Nacięcie skóry Usuń skórę i odsłoń powierzchnię czaszki. Następnie oczyść powierzchnię czaszki za pomocą patyczków bawełnianych. </li>
<li>Pozycjonowanie atrapy kaniuli (w kierunku poziomym) Przesuń atrapę kaniuli do miejsca docelowego (oś A-P oraz współrzędna boczna). </li>
<li>Mała kraniotomia i nacięcie opony twardej. Użyj&nbsp;precyzyjnej pęsety do kraniotomii oraz cienkiej igły wstrzykującej (30 G) do nacięć opony twardej. Następnie oczyść powierzchnię czaszki. </li>
<li>Końcowe pozycjonowanie (implantacja) atrapy kaniuli Ustaw końcówkę kaniuli prowadzącej&nbsp;na wysokość 0,30 mm powyżej zamierzonego obszaru docelowego sondy do mikrodializy. Na koniec ponownie oczyść powierzchnię czaszki, ponieważ do trwałego połączenia wymagana jest czysta i sucha powierzchnia. </li>
</ol>
Krok 3. Obróbka wstępna powierzchni czaszki
(Należy zastosować analogiczną procedurę „bezpośredniego wypełnienia” produktu stomatologicznego.)
<ol>
<li>Obróbka primerem <ol>
<li>Wymieszać płyny PRIMAR A i B w naczyniu.</li>
<li>Nanieść mieszaninę na powierzchnię czaszki za pomocą małego pędzelka.</li>
<li>Pozostawić na 30 sekund.</li>
<li>Osuszyć łagodnym strumieniem powietrza. (Nie płukać.) </li>
</ol></li>
<li>Aplikacja środka wiążącego <ol>
<li>Nanieść środek wiążący na powierzchnię czaszki za pomocą małego pędzelka.</li>
<li>Zastosować łagodny strumień powietrza. (Nie płukać.)</li>
<li>Naświetlać lampą polimeryzacyjną przez 20 sekund. </li>
</ol></li>
</ol>
Krok 4. Osadzanie kompozytu żywicznego
<ol>
<li>Nanieś żywicę za pomocą zwykłego ubijaka Jeśli zwykły ubijak nie jest dostępny, można go zastąpić mikroszatułką. </li>
<li>Fotopolimeryzacja</li>
<li>Warstwowe nakładanie Zaleca się warstwowe nakładanie w celu zapewnienia pełnej polimeryzacji żywicy. W przypadku nakładania warstwowego, przed każdym etapem należy zastosować środek wiążący. </li>
<li>Uformuj żywicę kompozytową i poddaj fotopolimeryzacji w celu ostatecznego utwardzenia.</li>
<li>Zakończenie zabiegu</li>
</ol>
Oczyścić obszar operacyjny, nałożyć antybiotyk (maść z Gentamycyną) i wyjąć zwierzę ze stereotaktycznego uchwytu. Następnie umieścić&nbsp;zwierzę w komorze termostatycznej (temperatura = 33-35° C) w celu wybudzenia z narkozy.
Jak pokazano na filmie, następnego dnia po operacji u żadnego z zwierząt nie zaobserwowano nieprawidłowych zachowań.

<ol><li>Adell, A., Artigas, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+Brain+microdialysis%3A+Principles+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vivo+Neuromethods%3A+Neuromethods%22%5BJournal%5D)">In vivo Brain microdialysis: Principles and applications.</a> In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Boulton, A., Baker, G., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).</li>
<li>Kendrick, K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKendrick%2C+K+%22Microdialysis+in+the+Neuroscience%22">Microdialysis in the Neuroscience</a>. Robinson, T., Justice, J., Bateson, A. 7, Elsevier. Amsterdam. 327-348 (1991).</li>
<li>Oakley, B., Schafer, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOakley%2C+B+%22Experimental+Neurobiology%3A+A+laboratory+Manual%22">Experimental Neurobiology: A laboratory Manual</a>. , University of Michigan Press. Ann Arbor. (1978).</li>
<li>Okumura, T., Yamashita, Y., Okanoya, K., Tani, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Function+of+the+sensori-motor+nucleus+NIf+in+generation+of+complex+syntactical+song+in+the+Bengalese+Finch+I.+A+Biological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Soc.+Neurosci+Abst%22%5BJournal%5D)">Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study.</a> Soc. Neurosci Abst. 33, (2007).</li>
<li>Boulton, A., Baker, G. The relation of brain electrical activity to behavior. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBoulton%2C+A+%22In+Vivo+Neuromethods%3A+Neuromethods%22">In Vivo Neuromethods: Neuromethods</a>. Robinson, T., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).</li>
<li>Yamashita, Y., Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence, , 101-104 (2007).</li>
</ol>

Eksperymenty przeprowadzono zgodnie z wytycznymi dotyczącymi eksperymentów na zwierzętach Instytutu Nauk o Mózgu RIKEN (RIKEN-BSI), a komitet etyki ds. zwierząt tego instytutu zatwierdził ich przebieg.

W porównaniu do zastosowania konwencjonalnych samoutwardzalnych żywic akrylowych, wprowadzona technika wykazuje kilka istotnych zalet:
1. Bezpośrednie wiązanie: 
Samoutwardzalny akryl może przylegać do kości przez pewien czas, ale nie wiąże się z nią trwale. W związku z tym do zamocowania podstawy montażowej wymagane są śruby kotwiczące (patrz Rycina 2A). W przeciwieństwie do niego, żywica utwardzana światłem może wiązać się bezpośrednio z kością, dzięki czemu śruby nie są potrzebne ...

<table><tbody><tr><td>Kondory bengalskie</td><td>Zwierzę</td><td></td><td></td><td>Dwa dorosłe samce, masa ciała: 14,2 g i 14,8 g</td></tr><tr><td>Sonda do mikrodializy</td><td>Narzędzie</td><td>EICOM</td><td></td><td>całkowita masa sondy, kaniuli prowadzącej, nakrętki i żywicy do wypełnień stomatologicznych: od 0,65 do 0,78 g.</td></tr><tr><td>System żywicy do wypełnień stomatologicznych utwardzanej światłem</td><td></td><td>Kuraray Medical Inc</td><td></td><td>+Kompozytowa żywica utwardzana światłem (CLEARFIL AP-X). +System adhesywny do stomatologii o podwójnym utwardzaniu z primerem samotrawiącym i środkiem wiążącym (CLEARFIL Liner Bond II&amp;#931;).</td></tr><tr><td>Instrumenty chirurgiczne</td><td></td><td></td><td></td><td>Rama stereotaktyczna, mikroskop chirurgiczny, podkładka chirurgiczna z kontrolą temperatury i komora rekonwalescencyjna z kontrolą temperatury. Prosty ubijak do aplikacji żywicy kompozytowej. Mikroszpatułka lub ostra kureta do usuwania okostnej i mięśni. Strzykawka i igła (30G) do podawania znieczulenia. Małe nożyczki. Precyzyjne pęsety do wykonywania małej kraniotomii.</td></tr><tr><td>Lampa utwardzająca</td><td></td><td>Rolence Enterprise Inc</td><td>Ultra-Lite 500E</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td></td><td>Konan Medical</td><td>KOM300</td><td>z adapterem C-mount</td></tr><tr><td>Kamera 3-CCD</td><td>Narzędzie</td><td>Hitachi</td><td>HV-D30</td><td></td></tr></tbody></table>

zastosowanie światlutowalnej żywicy do wiązania stomatologicznego do mocowania elektrod lub sond mikrodializacyjnych w eksperymentach przewlekłych

Application of Light-cured Dental Adhesive Resin for Mounting Electrodes or Microdialysis Probes in Chronic Experiments

W eksperymentach z rejestracją chroniczną samoutwardzalne akrylowe żywice stomatologiczne były stosowane jako baza montażowa elektrod lub sond do mikrodializy. Ponieważ żywice te nie wiążą się z kością, w roli kotwic wykorzystywano śruby. Jednakże u małych zwierząt doświadczalnych, takich jak kanarki czy myszy, czaszka jest bardzo krucha i nie jest w stanie stabilnie utrzymać kotwic. W niniejszym raporcie proponujemy nowe zastosowanie światłoutwardzalnych żywic stomatologicznych jako bazy montażowej elektrod lub sond do mikrodializy w eksperymentach chronicznych. Materiał ten umożliwia bezpośrednie wiązanie z czaszką. W związku z tym śruby kotwiące nie są wymagane, a pole operacyjne może zostać znacznie zredukowane. Dotychczasowe doświadczenia wykazują, że efekt wiązania utrzymuje się przez ponad 2 miesiące. Okno czasowe, w którym konwencjonalne żywice są plastyczne i nadają się do obróbki, wynosi kilka minut. W przypadku tych adhezywów stomatologicznych okno czasu pracy jest znacznie szersze i regulowalne.

W niniejszym raporcie proponujemy nowe zastosowanie światłoutwardzalnych żywic stomatologicznych do mocowania podstawy elektrod lub sond do mikrodializy w eksperymentach chronicznych. Materiał ten umożliwia bezpośrednie wiązanie z czaszką.

Zastosowanie światlutowalnej żywicy do wiązania stomatologicznego do mocowania elektrod lub sond mikrodializacyjnych w eksperymentach przewlekłych

W eksperymentach z przewlekłymi rejestracjami stosowano samoutwardzalne akrylowe żywice stomatologiczne jako bazę montażową dla elektrod lub sond do mikrodializy. Ponieważ te...

W przewlekłych eksperymentach z zakresu elektrofizjologii lub mikrodializy, samoutwardzalne żywice dentystyczne są szeroko stosowane jako baza montażowa elektrod lub sond do mikrodializy. Ponieważ akryle te nie wiążą się z powierzchnią kości, w charakterze kotwic stosuje się śruby. Jednak w przypadku małych zwierząt doświadczalnych, takich jak myszy lub szczury, czaszka jest bardzo delikatna i nie może skutecznie utrzymać kotwic.Czasami śruby kostek powodują infekcję i zapalenie tkanek. W niniejszym raporcie proponujemy nowe zastosowanie światłoutwardzalnego kompozytu dentystycznego jako materiału do montażu podstawy. Materiał ten umożliwia bezpośrednie związanie z czaszką.W związku z tym śruby mocujące nie są wymagane, a pole operacyjne może zostać znacznie zredukowane. Całkowita waga sondy, kaniuli prowadzącej, obudowy i podstawy montażowej wynosiła mniej niż jeden gram. Dotychczasowe doświadczenia wskazują, że efekt wiązania utrzymuje się przez ponad dwa miesiące.Technikę tę można również wykorzystać dla innych zwierząt doświadczalnych, takich jak gryzonie, ryby i inne. Nagrano wideo z dwóch implementacji w dwóch grupach. W tej demonstracji wideo wybrano i wykorzystano najlepsze ujęcia dla każdego kroku protokołu.Są to stereotaktyczny aparat i kontrolowana termicznie komora rekonwalescencyjna. Są to instrumenty do operacji. Prime PR po lewej i mikroprob.Akcesoria znajdują się po prawej stronie. Jeśli program przygotowujący (prime) nie jest dostępny, można zamiast niego użyć mikroszpatułki. Jest to zestaw do utwardzania żywicy dentystycznej.W tych buteleczkach przechowywano primer AP oraz środek wiążący. Wybraliśmy ten produkt, ponieważ jest to system samopolimeryzujący i dualny. W przypadku wyboru alternatywnych produktów należy zmodyfikować szczegółową procedurę zgodnie z instrukcją produktu; instrument w kształcie pistoletu po lewej stronie to lampa polimeryzacyjna.Można złożyć ręcznie wykonaną jednostkę oświetlenia LED, jak pokazano po prawej stronie. Szczegóły znajdują się w dokumentacji. Następnie wprowadzono znieczulenie chirurgiczne, usunięto tkanki z obszaru operacyjnego i przymocowano głowę do zestawu stereotaktycznego.Przed wprowadzeniem elektrod EVA, w celu zapobiegania bólowi, końcówki EVAs poddano znieczuleniu miejscowemu. Głowa zwierzęcia została przymocowana do ramy, a kąt nachylenia głowy odpowiednio dostosowany. Powietrze chirurgiczne zdezynfekowano jodyną, a szklaną mikropipetę zamocowano w uchwycie elektrod.Tę mikropipetę wykorzystano do wyznaczenia punktu odniesienia w eksperymencie. Jako punkt odniesienia posłużył punkt Lambda Y. Wykonano niewielkie nacięcie skóry, aby odsłonić punkt odniesienia.Zaznacz miejsce za pomocą mikropipety wypełnionej barwnikiem. Przetnij skórę, aby odsłonić powierzchnię czaszki. Przetrzyj powierzchnię kości patyczkiem z waty, aby usunąć resztki krwi. Do uzyskania trwałego wiązania wymagana jest czysta i sucha powierzchnia.Po wyznaczeniu pozycji docelowej, za pomocą precyzyjnych pęset wykonano niewielką kraniotomię. Do wykonania kraniotomii można również użyć mikrodotu lub kleszczyków kostnych. Następnie grubą mikro rurkę wyjęto z uchwytu, a do uchwytu przymocowano prowadnicę, kaniulę lub elektrodę.Końcówka kaniuli prowadzącej została wyrównana z punktem referencyjnym, a następnie ostrożnie przesunięta do punktu docelowego. Za pomocą igły wstrzykującej o rozmiarze 30 G wykonano najmniejsze możliwe nacięcie w istocie szarej. Kaniulę prowadzącą przesunięto do pozycji docelowej.Przeprowadzono drugą aplikację preparatu Supp na powierzchnię kości. Primer ten składa się z utwardzaczy A i B. Na szalkę nalać po jednej kropli każdego z utwardzaczy, a następnie wymieszać je pędzlem. Nanieść primer na obszar styku. Powierzchnię kaniuli prowadzącej również należy przetrzeć primerem.Użyto łagodnego strumienia powietrza, aby rozprowadzić i osuszyć primer, następnie zmieniono pędzelek i naniesiono środek wiążący na obszar ten. Środek wiążący jest wrażliwy na światło, dlatego w trakcie procedury powinien pozostać zakryty. Przetarto również powierzchnię kaniuli prowadzącej.Zapewniono łagodne powietrze i wyeliminowano widzialne światło niebieskie, aby przyspieszyć reakcję chemiczną środka wiążącego. W celu ochrony oczu operatora należy stosować pomarańczowe przezroczyste okulary ochronne. W razie potrzeby należy unikać bezpośredniego naświetlania oczu zwierząt.Aluminiowa obręcz służy do ochrony oczu zwierząt. Niewielką ilość kompozytu żywicznego nanieśli na powierzchnię czaszki i kaniulę prowadzącą za pomocą zwykłego aplikatora. Następnie wyeliminowano widoczne niebieskie światło, aby utwardzić żywicę w celu stabilizacji mocowania.Przed każdym zamocowaniem zastosowano środek wiążący. Obszar operacyjny był stale korygowany pod kątem widoczności ze względu na rejestrację wideo. Należy jednak unikać zbyt silnej korekty, ponieważ może ona skrócić czas, w którym materiały pozostają plastyczne.Zaleca się stopniowe mocowanie i ustawianie w celu zapewnienia pełnej reakcji reżimu. Można korygować kształt aż do uzyskania widoczności. Podano antybiotyki lub zastosowano środek antyseptyczny w obszarze chirurgicznym w celu zapobiegania infekcjom.Po zakończeniu zabiegu chirurgicznego adapter stereotaktyczny został zwolniony z uchwytu elektrody i usunięty. W jego miejsce wprowadzono pręt stabilizujący (DAMing cane), a następnie zwierzę zostało zwolnione z ramy stereotaktycznej.Na koniec zwierzę przeniesiono do letniej komory kontrolnej w celu wybudzenia z narkozy. Następnego dnia po zabiegu, w porównaniu do zastosowania konwencjonalnego samoutwardzalnego S., wprowadzona technika wykazała kilka istotnych zalet.Po pierwsze, wiąże się ono bezpośrednio z kością. Akryl samo utwardzalny może zostać przymocowany do kości za pomocą drutów, ale nie przylega on do niej. W przeciwieństwie do niego, żywica utwardzana światłem może wiązać się bezpośrednio z kością.Przyczepia się ono również do niektórych materiałów, w tym do tworzyw sztucznych i metali, pod warunkiem zastosowania podkładu do metalu. Ta właściwość wiązania z różnymi materiałami umożliwia szerokie zastosowanie. Po drugie, jest łatwe w obsłudze, ponieważ konwencjonalne okno czasowe obróbki żywicy jest stosunkowo krótkie.W ciągu kilku minut wykazuje ona wysoką płynność, co sprawia, że trudno jest ją szybko operować. Jednak gdy rozpocznie się reakcja chemiczna, przebiega ona szybciej ze względu na egzotermiczność. Ciepło powoduje, że żywica twardnieje w krótkim czasie.Okna czasowe przetwarzania dla żywic utwardzanych światłem są znacznie szersze i regulowalne. Podstawowo żywice utrzymują stały stan od początku aż do momentu właściwego utwardzenia. Trzecia reakcja utwardzania nie generuje ciepła.Reakcja utwardzania żywicy samoutwardzalnej jest egzotermiczna. Gdy podstawa montażowa jest gruba, ciepło to kumuluje się, co może spowodować uszkodzenia. Reakcja utwardzania żywicy światłoutwardzalnej nie generuje ciepła, a materiał jest biokompatybilny.Koszt materiałów i specjalistycznego sprzętu, takiego jak jednostka oświetleniowa, może stanowić problem. W dokumencie uzupełniającym przedstawiamy niskokosztową, własnoręcznie wykonaną jednostkę oświetleniową LED. Szczegóły znajdują się w dołączonym dokumencie.Technika ta ma zastosowanie przy implementacji elektrod lub mikrosond u innych zwierząt doświadczalnych, takich jak ryby, myszy, króliki, koty oraz małpy.

application-light-cured-dental-adhesive-resin-for-mounting-electrodes

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Zastosowanie lepionej światłem żywicy adhezji dentystycznej do montażu elektrod lub sond mikrodializowych w eksperymentach przewlekłych

Film demonstruje procedurę wszczepienia bezprzewodowej dwukierunkowej wielokanałowej elektrody do mózgu szczura w celu nagrywania i stymulowania wielokanałowych sieci neuronowych.

Wszczepienie bezprzewodowego dwukierunkowego systemu mikroelektrod do mózgu szczura

Tradycyjne techniki mocowania głowy wykorzystywały metalowe ramki przymocowane do czaszki jako interfejs dla aparatu do mocowania głowy. Protokół ten demonstruje bezramkową, opartą na żywicy akrylowej technikę mocowania głowy do zadań behawioralnych u gryzoni.

Technika mocowania głowy oparta na żywicy akrylowej u gryzoni

Barwnik ratiometryczny o pH wrażliwym na pH jest używany w połączeniu z konfokalną laserową mikroskopią skaningową i cyfrową analizą obrazu do monitorowania zewnątrzkomórkowego pH w biofilmach zębowych w czasie rzeczywistym.

Obrazowanie ratiometryczne zewnątrzkomórkowego pH w biofilmach zębowych

Prezentujemy metody budowy elektrod do jednoczesnego rejestrowania zewnątrzkomórkowej aktywności neuronalnej i uwalniania wielu substancji neuroaktywnych w pobliżu miejsc rejestracji u obudzonych myszy. Technika ta pozwala na szczegółową analizę przypuszczalnych lokalnych wejść synaptycznych do neuronu będącego przedmiotem zainteresowania.

Zewnątrzkomórkowy zapis aktywności neuronalnej w połączeniu z mikrojonoforowym zastosowaniem substancji neuroaktywnych u obudzonych myszy

Ostre mikroelektrody umożliwiają dokładną elektrofizjologiczną charakterystykę fotoreceptorów i wizualnych interneuronów u żyjących Drosophila. Tutaj pokazujemy, jak wykorzystać tę metodę do rejestrowania wysokiej jakości odpowiedzi napięciowych poszczególnych komórek na kontrolowaną stymulację światłem. Ta metoda jest idealna do badania przetwarzania informacji neuronalnych w oczach złożonych owadów.

Elektrofizjologiczna metoda rejestracji wewnątrzkomórkowych odpowiedzi napięciowych fotoreceptorów i interneuronów Drosophila na bodźce świetlne in vivo

W tym badaniu przedstawiono metodologię wykonywania wielomiejscowych zapisów elektrofizjologicznych in vivo ze szlaku hiperbezpośredniego w znieczuleniu uretanowym.

Ostre zapisy elektrofizjologiczne in vivo lokalnych potencjałów pola i aktywności wielocząsteczkowej ze szlaku hiperbezpośredniego u znieczulonych szczurów

Tutaj opisujemy metodę mikrodializy in vivo do analizy uwalniania asparaginianu i glutaminianu w brzusznym hipokampie u szczurów z padaczką i bez padaczki, w połączeniu z zapisami EEG. Zewnątrzkomórkowe stężenia asparaginianu i glutaminianu mogą być skorelowane z różnymi fazami choroby.

Mikrodializa aminokwasów pobudzających podczas zapisów EEG u swobodnie poruszających się szczurów

Ten protokół opisuje procedurę konstruowania układów mikroelektrod z włókna węglowego do przewlekłych i ostrych zapisów elektrofizjologicznych in vivo u myszy (Mus musculus) i fretki (Mustela putorius furo) z wielu obszarów mózgu. Każdy krok, po zakupie surowych włókien węglowych do implantacji matrycy mikroelektrodowej, jest szczegółowo opisany, z naciskiem na budowę matrycy mikroelektrodowej.

Budowa i implementacja układów mikroelektrod z włókna węglowego do przewlekłych i ostrych nagrań in vivo

Tutaj przedstawiamy lekki, opłacalny system implantacji sond dla przewlekłej elektrofizjologii u gryzoni, zoptymalizowany pod kątem łatwości użycia, odzyskiwania sondy, wszechstronności eksperymentalnej oraz zgodności z zachowaniem.

Implant DREAM: lekki, modułowy i opłacalny system implantów do przewlekłej elektrofizjologii u myszy zamocowanych na głowie i swobodnie zachowujących się

Opracowaliśmy uproszczone i opłacalne podejście do produkcji elektrod i przeprowadziliśmy zapisy sygnałów w wielu regionach u swobodnie poruszających się myszy. Wykorzystanie optogenetyki, wraz z elektrofizjologią wieloregionalną i rejestracją sygnału wapnia, umożliwiło ujawnienie aktywności neuronalnej w różnych regionach w modelu rozpalania napadów.

Zintegrowana metoda tworzenia elastycznych i wygodnych optymór elektrofizjologicznych do wieloregionalnego zapisu in vivo

Protokół ten opisuje dwufazową metodę chirurgiczną mającą na celu stworzenie dużego, ponownie zamykalnego, oszczędzającego dura okno czaszkowe u myszy. Technika ta umożliwia przewlekłe, wielomodalne zapisy elektrofizjologiczne z rozproszonych, głębokich sieci mózgowych, takich jak Sieć Trybu Domyślnego, przez kilka tygodni.

Protokół chirurgiczny dla dużego, zamykalnego okna czaszkowego umożliwiającego podłużne, wielomodalne rejestrowanie elektrofizjologii sieci domyślnej myszy

Poznaj zastosowanie światłoutwardzalnej żywicy dentystycznej do montażu elektrod w eksperymentach przewlekłych. Ta metoda umożliwia bezpośrednie wiązanie z czaszką, eliminując potrzebę stosowania śrub i zmniejszając ryzyko infekcji.

Zastosowanie światlutowalnej żywicy do wiązania stomatologicznego do mocowania elektrod lub sond mikrodializacyjnych w eksperymentach przewlekłych

Przeglądaj więcej filmów