Name: Tworzenie odwracalnego modelu szczura Cholestatic (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-21T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: Poznaj technikę tworzenia odwracalnego modelu cholestatycznego u szczurów z wykorzystaniem mikrochirurgii i rurki poliestrowej. Metoda umożliwia badanie fizjologii i patologii układu żółciowego.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Anatomia dróg żółciowych szczura
Średnica i długość przewodu żółciowego wynosiły odpowiednio 1 mm i 29 mm. Średnia odległość między odźwiernikiem a brodawką dwunastniczą wynosiła 28 mm. Wyróżnia się dwa główne przewody trzustkowe uchodzące do przewodu żółciowego – przewód przedni otwiera się po lewej stronie, a przewód tylny po prawej stronie. Oprócz tych głównych przewodów, do przewodu żółciowego uchodzi szereg mniejszych przewodów odprowadzających treści ze wszystkich trzech części trzustki.6 

2. Technika
Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi Narodowych Instytutów Zdrowia (National Institutes of Health) dotyczącymi etyki badań i zostały zatwierdzone przez Komisję Badawczą oraz Komisję ds. Opieki nad Zwierzętami danej instytucji. Do prezentacji wykorzystano samce szczurów rasy Sprague-Dawley w wieku 8 tygodni. Szczury pochodziły z laboratorium Charles River Laboratories w Wilmington, MA i wszystkie ważyły ponad 300 g. Szczury miały dostęp do standardowej diety laboratoryjnej i były utrzymywane razem w standardowych warunkach laboratoryjnych.
Szczury zostały wstępnie znieczulone izofluranem, a podczas operacji utrzymywano znieczulenie za pomocą maski z izofluranem. Wykonano cięcie w linii środkowej o długości 2 cm, zaczynając od wyrostka mieczykowatego. Po otwarciu powięzi płaty wątroby odsunięto kranialnie za pomocą rozwieraka Sena, a dwunastnicę odsunięto kaudalnie za pomocą patyczków higienicznych. Przewód żółciowy zidentyfikowano jako strukturę rurkowatą wchodzącą do dwunastnicy. Przewód żółciowy napięto i częściowo rozcięto. Użyto sterylnej rurki polietylenowej o długości 5 cm, średnicy wewnętrznej 0,6 mm i średnicy zewnętrznej 0,9 mm. Jeden koniec rurki został zgrzany na gorąco, a drugi delikatnie ścięty pod skosem. Ścięty koniec wprowadzono do przewodu żółciowego. Zabezpieczono go w miejscu montażu za pomocą szwów Nylon 8-0, zarówno proksymalnie, jak i dystalnie względem otworu w przewodzie żółciowym. Pozostałą część rurki wraz z zamkniętym końcem umieszczono w jamie otrzewnowej. Pole operacyjne przemyto solą fizjologiczną. Brzuch zamknięto dwuwarstwowo szwem Polyglactin 4-0. Brzuchy (linea alba) zamknięto szwem ciągłym, a następnie wykonano przerwane szwy skórne. Na skórę nałożono klej tkankowy. Szczurom pozwolono na rekonwalescencję w standardowych warunkach laboratoryjnych przy codziennym monitorowaniu masy ciała w celu zapewnienia prawidłowego nawodnienia.
W celu przeprowadzenia operacji cofnięcia cholestazy szczury zanestezjowano izofluranem zgodnie z wcześniejszym opisem. Brzuch otwarto w miejscu poprzedniego cięcia. Zidentyfikowano rurkę i wyjęto ją z jamy otrzewnej. Zrosty sieciowe wokół rurki usunięto za pomocą tępej i ostrej dyssekcji. Następnie wyznaczono miejsce w dwunastnicy, które pozwoli na wygodne umieszczenie rurki do duodenostomii. W miejscu tym wykonano szew przetokowy o średnicy 2-3 mm, używając nici Nylon 8-0. Następnie dwunastnicę otwarto w obrębie tego szwu. Zamknięty koniec rurki przycięto do odpowiedniej długości. Upewniono się, że żółć przepływa swobodnie. Koniec rurki wprowadzono do dwunastnicy, a następnie zaciśnięto szew przetokowy. Jamę brzuszną przepłukano i zszyto warstwowo.
W poprzednim badaniu, w którym przeprowadzono choledochoduodenostomię z zastosowaniem innej techniki, szczury przeżyły 12 tygodni i w tym okresie pozostawały zdrowe. Badanie to potwierdziło również odwrócenie zmian biochemicznych i histologicznych po choledochoduodenostomii u szczurów poddanych niedrożności przewodu żółciowego przez okres 2 tygodni.7

<ol><li>Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+nutritional+status+associated+with+obstructive+jaundice+and+biliary+drainage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats.</a> Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).</li>
<li>Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-mediated+sinusoidal+endothelial+cell+injury+after+extensive+hepatectomy+in+cholestatic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats.</a> Hepatology. 25, 636-641 (1997).</li>
<li>Abe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kupffer+cell-derived+interleukin+10+is+responsible+for+impaired+bacterial+clearance+in+bile+duct-ligated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice.</a> Hepatology. 40, 414-423 (2004).</li>
<li>Saiki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preoperative+internal+biliary+drainage+is+superior+to+external+biliary+drainage+in+liver+regeneration+and+function+after+hepatectomy+in+obstructive+jaundiced+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats.</a> Ann Surg. 230, 655-662 (1999).</li>
<li>Subhas, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+methylprednisolone+on+warm+ischemia-reperfusion+injury+in+a+cholestatic+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver.</a> Am J Surg. 199, 377-380 (2010).</li>
<li>Kara, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomical+study+on+the+rat+pancreas+and+its+ducts+with+emphasis+on+the+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Anat%22%5BJournal%5D)">The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach.</a> Ann Anat. 187, 105-112 (2005).</li>
<li>Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choledochoduodenostomy+in+the+rat+with+obstructive+jaundice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice.</a> J Surg Res. 23, 321-331 (1977).</li>
</ol>

Nie zadeklarowano żadnych konfliktów interesów.

Cholestaza prowadzi do szeregu zmian w układzie pokarmowym. Przeprowadzono badania analizujące zmiany w układzie odpornościowym oraz stanie odżywienia organizmu.1-3 Cholestaza może wpływać na wyniki operacji wątroby. Wykonano badania mające na celu poprawę wyników zabiegów chirurgicznych wątroby w obecności cholestazy.4-5 Wraz z postępem medycyny i badań zostaną przeprowadzone dalsze analizy nad cholestazą. Dlatego konieczne jest posiadanie dobrego modelu cholestatycznego. Szczur jest preferowanym z...

tworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczura

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestaza jest stanem klinicznym często spotykanym zarówno w praktyce chirurgów, jak i gastroenterologów. Cholestaza może powodować różnorodne zmiany fizjologiczne oraz wpływać na stan odżywienia i wyniki chirurgiczne. Badanie zmian patofizjologicznych zachodzących w wątrobie i innych narządach jest istotne. W tym celu przeprowadzono liczne badania na szczurzych modelach cholestazy.
W naszym ostatnim badaniu dotyczącym roli metyloprednizolonu w uszkodzeniu reperfuzyjnym wykorzystaliśmy odwracalny model cholestazy u szczurów. Opisano różne techniki tworzenia odwracalnego modelu cholestazy. Stworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczurów może być trudne ze względu na ich mniejszy rozmiar oraz specyficzną anatomię układu wątrobowo-trzustkowo-żółciowego. Niniejszy artykuł wideo demonstruje sposób tworzenia odwracalnego modelu cholestazy.
Model ten może być wykorzystywany w różnorodnych badaniach, takich jak analiza zmian żywieniowych, fizjologicznych, patologicznych, histologicznych i immunologicznych w przewodzie pokarmowym. Model ten może również służyć do badania skutków cholestazy oraz różnych interwencji terapeutycznych przy głównych operacjach wątroby.

Cholestaza jest stanem klinicznym często spotykanym zarówno w praktyce chirurgów, jak i gastroenterologów. Stworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczura może być trudne ze względu na niewielki rozmiar oraz specyficzną anatomię hepatopankreatobiliarnej tych zwierząt. Niniejszy artykuł wideo prezentuje sposób stworzenia odwracalnego modelu cholestazy.

Tworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczura

Cholestaza jest stanem klinicznym często spotykanym zarówno w praktyce chirurgów, jak i gastroenterologów. Cholestaza może powodować różne zmiany fizjologiczne oraz ...

Tworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczura. Witam wszystkich. Jestem Goulash, rezydent chirurgii ogólnej z Providence Hospital and Medical Centers w Southfield w stanie Michigan.Dzisiaj zaprezentuję sposób tworzenia odwracalnego modelu cholestazy u szczura. Szczur zostaje znieczulony izofluranem w komorze, a następnie za pomocą maski. Podczas procedury stosuje się rurkę poliestrową o średnicy zewnętrznej 0,9 mm i średnicy wewnętrznej 0,6 mm, z jednym końcem otwartym, a drugim uszczelnionym. Wykorzystane narzędzia obejmują standardowy zestaw do operacji na szczurach, instrumenty mikrochirurgiczne, kleszczyki okulistyczne, patyczki bawełniane oraz nić nylonową 8-0. Procedura jest wykonywana przy użyciu mikroskopu operacyjnego.Alternatywnie można to wykonać przy użyciu pętli chirurgicznych. W tym przypadku zastosowano stabilne pole operacyjne. Procedurę tę przeprowadza się przy zachowaniu pełnych środków ostrożności sterylnych.Kroki operacyjne: wykonuje się nacięcie w linii środkowej o długości dwóch centymetrów, zaczynając od mostka. Tkankę podskórną i powięź rozcina się za pomocą nożyczek. Następnie rozcina się otrzewną, odsłaniając wątrobę.Hemostazę zapewnia się za pomocą r

creation-of-reversible-cholestatic-rat-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Stworzenie odwracalnego modelu cholestatycznego szczura

Zakłócenie przepływu żółci powoduje ciężkie zapalne cholestatyczne uszkodzenie wątroby z charakterystyczną, zależną od czasu sekwencją zmian morfologicznych. W tym miejscu przedstawiamy protokół chirurgicznego podwiązania przewodu żółciowego wspólnego u myszy, który pozwala na wywołanie silnej odpowiedzi zwłóknieniowej po 21 do 28 dniach.

Podwiązanie dróg żółciowych u myszy: indukcja zapalnego uszkodzenia wątroby i zwłóknienia przez chalestazę obturacyjną

Wywołanie szybkiego przerostu wątroby za pomocą Kojarzenia Partycji Wątroby i Podwiązania Żyły Wrotnej dla etapowej hepatektomii (ALPPS) zostało zaproponowane do resekcji granicznych resekcyjnych guzów wątroby. Model ten może wyjaśnić mechanizmy związane z szybką hipertrofią i umożliwia testowanie leków, które promują lub blokują przyspieszenie regeneracji.

Szczurzy model skojarzenia partycji wątroby i podwiązania żyły wrotnej do etapowej procedury hepatektomii (ALPPS)

Tutaj opisujemy powszechną metodę wywoływania przewlekłego uszkodzenia wątroby u myszy poprzez karmienie dietą ubogą w cholinę i uzupełnioną etyoniną (CDE). Pokazujemy monitorowanie stanu zdrowia, perfuzję wątroby, izolację i konserwację. Sześciotygodniowy przebieg może informować o uszkodzeniu wątroby, patohistologii, zwłóknieniu, zapaleniu i odpowiedziach komórek progenitorowych wątroby.

Model przewlekłego uszkodzenia wątroby z niedoborem choliny i etyoniną (CDE)

Tutaj prezentujemy częściowe podwiązanie dróg żółciowych jako chirurgiczny model uszkodzenia i regeneracji wątroby u gryzoni.

Częściowe podwiązanie dróg żółciowych u myszy: kontrolowany model zlokalizowanej cholestazy obturacyjnej

Tutaj opisujemy szczegółowy protokół inwazyjnych pomiarów parametrów hemodynamicznych, w tym ciśnienia wrotnego, splanchnicznego przepływu krwi i hemodynamiki ogólnoustrojowej, aby scharakteryzować zespół nadciśnienia wrotnego u szczurów.

Inwazyjna charakterystyka hemodynamiczna zespołu wrotno-nadciśnieniowego u szczurów z marskością wątroby

Model zwierzęcy ostrej niewydolności wątroby, opracowany w obecnym badaniu, stanowi realną alternatywę dla badania potencjalnych terapii. Obecny model wykorzystuje łączny efekt fizycznego i polekowego uszkodzenia wątroby i zapewnia odpowiednie okno czasowe do zbadania potencjału nowych terapii.

Opracowanie szczurzego modelu ostrej niewydolności wątroby poprzez połączenie 70% częściowej hepatektomii i paracetamolu

Ten protokół opisuje powszechną i wykonalną metodę wywoływania ostrego uszkodzenia wątroby (ALI) poprzez ekspozycję na CCl4 przez sondę ustno-żołądkową. Ekspozycja naCCl 4 indukuje ALI poprzez tworzenie reaktywnych form tlenu podczas jego biotransformacji w wątrobie. Metoda ta służy do analizy patofizjologii ALI i badania różnych strategii hepatoprotekcyjnych.

Wywoływanie ostrego uszkodzenia wątroby u szczurów poprzez ekspozycję na czterochlorek węgla (CCl4) przez sondę ustno-żołądkową

Modele zwierzęce dla ciężkiego ostrego zapalenia trzustki umożliwiają badanie zmian patofizjologicznych na początkowym etapie, ułatwiając obserwację ewolucji zdarzeń zapalnych. Tutaj przedstawiamy protokół indukcji ciężkiego ostrego żółciowego zapalenia trzustki poprzez wsteczny wlew taurocholanu sodu do przewodu trzustkowego znieczulonych myszy C57BL / 6.

Taurocholan sodu wywołał ciężkie ostre zapalenie trzustki u myszy C57BL/6

Przewlekłe zapalenie trzustki (CP) to choroba charakteryzująca się stanem zapalnym i zwłóknieniem trzustki, często związana z nieuleczalnym bólem brzucha. Ten artykuł koncentruje się na udoskonaleniu techniki generowania mysiego modelu CP poprzez infuzję dróg żółciowych z kwasem 2,4,6-trinitrobenzenosulfonowym (TNBS).

Mysi model przewlekłego zapalenia trzustki poprzez infuzję TNBS z dróg żółciowych

Mysi model ciężkiego ostrego zapalenia trzustki jest opisany tutaj. Przedstawiona tutaj procedura jest bardzo szybka, prosta i dostępna, co potencjalnie pozwala na badanie mechanizmów molekularnych i różnych interwencji terapeutycznych w ostrym zapaleniu trzustki w wygodny sposób.

Ustanowienie mysiego modelu ciężkiego ostrego zapalenia trzustki przy użyciu wstecznego wstrzyknięcia taurocholanu sodu do przewodu żółciowo-trzustkowego

Stworzyliśmy mysi model przewlekłego zwłóknienia wątroby, który dostarcza odpowiedniego modelu zwierzęcego do mechanistycznego badania atrezji dróg żółciowych (BA) wywołanego przez wirusa i platformy dla przyszłych terapii BA.

Mysi model przewlekłego zwłóknienia wątroby do badania atrezji dróg żółciowych

Poznaj technikę tworzenia odwracalnego modelu cholestatycznego u szczurów z wykorzystaniem mikrochirurgii i rurki poliestrowej. Metoda umożliwia badanie fizjologii i patologii układu żółciowego.

Tworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczura

Przeglądaj więcej filmów