Hydrodynamiczne dostarczanie genów: technika transfekcji in vivo egzogennego DNA w mysich hepatocytach poprzez wstrzyknięcie do żyły ogonowej

Aby przeprowadzić hydrodynamiczny transfer genów, zacznij od pobrania strzykawki wypełnionej roztworem soli fizjologicznej zawierającym rekombinowane plazmidy przenoszące interesujący nas gen. Następnie weź model mysi i szybko wstrzyknij dużą objętość roztworu plazmidu u podstawy ogona, upewniając się, że roztwór plazmidu jest wstrzykiwany dożylnie do żyły ogonowej.

Wstrzyknięcie pod ciśnieniem dużej ilości plazmidów generuje siłę mechaniczną zwaną siłą hydrodynamiczną, która zwiększa ciśnienie wewnątrznaczyniowe w żyle głównej dolnej - żyle, która przenosi odtlenioną krew do serca.

Duża objętość płynu wywołuje przekrwienie w prawej komorze serca, wymuszając odwrócenie w kierunku krwi. Ten krok zmusza roztwór plazmidu do wejścia do żyły wątrobowej, która przenosi go do wątroby.

Plazmidy poruszają się wewnątrz sinusoid wątrobowych - przestrzeni w wątrobie wyściełanych komórkami śródbłonka. Zwiększona objętość krwi pomaga plazmidom przenikać przez warstwę śródbłonka, pomagając im dotrzeć w pobliże otaczających hepatocytów - komórek wątroby.

Szybki napływ roztworu plazmidu indukuje nacisk na błonę komórkową hepatocytów, generując przejściowe pory. Pory te ułatwiają komórkom wychwyt pl