Test agregacji PolyQ w celu identyfikacji neuroprotekcyjnego działania związku u robaków

W niektórych zaburzeniach neurodegeneracyjnych białko związane z chorobą składa się ze spienionego poliglutaminy, polyQ, tract – ciągu kolejnych reszt glutaminy – i jest nieprawidłowo dopasowane. Upośledzona konformacja destabilizuje homeostazę białek, powodując akumulację białek i tworzenie toksycznych agregatów, co prowadzi do dysfunkcji neuronów i śmierci.

W celu zbadania zdolności ochronnej badanego związku w łagodzeniu proteotoksyczności związanej z agregacją poliQ, należy uzyskać zawiesinę transgenicznych larw Caenorhabditis elegans wykazujących ekspresję fluorescencyjnie znakowanych białek polyQ w komórkach mięśniowych ściany ciała.

Weź płytkę wielodołkową zawierającą pożywkę uzupełnioną pokarmem bakteryjnym. Dodać badany związek do jednego zestawu studzienek. Przenieś larwy na płytkę wielodołkową. Uszczelnij płytkę, aby zapobiec odwodnieniu podłoża i zanieczyszczeniu mikrobiologicznemu. Wysiaduj, pozwalając larwom wyrosnąć na dorosłe osobniki.

Podczas rozwoju, gdy nicienie się starzeją, białka polyQ stopniowo gromadzą się w komórkach mięśniowych i tworzą agregaty.

Jeśli badany związek jest obecny w pożywce, dostaje się do komórek mięśniowych i, w zależności od jego zdolnośc