JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:21 min. • July 8th, 2025
Zacznij od umieszczenia gąbki nasączonej solą fizjologiczną na kręgu piersiowym-12 szczura przygotowanego do zabiegu.
Umieść na nim elektrodę do przezrdzeniowej stymulacji prądem stałym lub tsDCS, która polega na zastosowaniu prądu stałego przez rdzeń kręgowy.
Aby zmierzyć wewnątrzkomórkowy zapis docelowego neuronu ruchowego podczas tsDCS, wprowadź mikroelektrodę do rdzenia kręgowego w miejscu jego pochodzenia.
Oceń podstawowy potencjał błonowy motoneuronu i częstotliwość impulsów elektrycznych, aby upewnić się, że mikroelektroda jest bezpiecznie umieszczona w celu dokładnych pomiarów podczas tsDCS.
Zastosuj anodowy tsDCS, w którym dodatnio naładowane jony dostają się do neuronu, gdy prąd przepływa z anody przez tkankę do katody.
Zastosuj katodowy tsDCS, w którym ujemnie naładowane jony dostają się do neuronu, gdy prąd przepływa w odwrotnym kierunku.
Rejestruj zmiany właściwości elektrycznych motoneuronu podczas anodowego i katodowego tsDCS.
Aby umieścić przezrdzeniowe elektrody stymulujące prądem stałym, umieść gąbkę nasączoną solą fizjologiczną po grzbietowej stronie kręgu TH-12 i użyj precyzyjnej manipulacji, aby docisnąć gąbkę aktywną przezrdzeniową elektrodą do stymulacji prądem stałym. Następnie zamontuj specjalnie wyciągniętą mikroelektrodę na mikromanipulatorze, umożliwiając ruch krokowy od 1 do 2 mikronów i kalibrację stereotaktyczną, a następnie wprowadź końcówkę mikropipety do wybranego plastra w PR pod kątem 15 do 20 stopni przyśrodkowo-bocznym
.Aby zarejestrować błonę neuronu ruchowego i właściwości wypalania, w trybie mostkowym wzmacniacza wewnątrzkomórkowego, stymuluj odpowiednie gałęzie nerwowe do identyfikacji neuronu ruchowego na podstawie wyglądu "wszystko albo nic" antydromicznego potencjału czynnościowego.
W trybie cęgów nieciągłego prądu wzmacniacza wewnątrzkomórkowego z trybem przełączania prądu od 4 do 8 kiloherców, użyj 0,5-milisekundowych wewnątrzkomórkowych depolaryzujących impulsów prądu, aby wywołać ortodromiczny, funkcjonalny potencjał czynnościowy w neuronie ruchowym.
Aby obliczyć rezystancję wejściową komórki, stymuluj neuron ruchowy 40 krótkimi, 100-milisekundowymi impulsami hiperpolaryzującego prądu o natężeniu 1 nanoampera. Aby określić wartość reozasady jako minimalną amplitudę prądu depolaryzacyjnego wymaganego do wywołania pojedynczego skoku, stymuluj neuron ruchowy za pomocą 50-milisekundowych impulsów fali prostokątnej o rosnących amplitudach.
Następnie wstrzyknij 500-milisekundowe impulsy fali prostokątnej prądu depolaryzującego o rosnących amplitudach w krokach co 0,122 nanoampera, aby wywołać rytmiczne wyładowania neuronów ruchowych. W przypadku przezrdzeniowej stymulacji prądem stałym należy rozpocząć procedury polaryzacji od przezrdzeniowego zastosowania prądu stałego, przy jednoczesnym utrzymaniu stabilnej penetracji neuronu ruchowego.