JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:20 min. • May 29th, 2025
Umieść tkankę siatkówki wyizolowaną od transgenicznej myszy z fluorescencyjnie znakowanymi komórkami zwojowymi siatkówki lub RGC w komorze rejestracyjnej.
Informacja wzrokowa jest przekazywana do RGC, których aksony przekazują ją do mózgu przez nerw wzrokowy.
Podtypy RGC różnią się rozgałęzionymi wzorami ich dendrytów, które rozwarstwiają się na podwarstwy w wewnętrznej warstwie siatkówki.
Spłaszcz tkankę siatkówki i zabezpiecz ją za pomocą kotwicy tkankowej.
Przenieś komorę na stolik mikroskopu i perfaktoruj natleniony roztwór, aby utrzymać żywotność RGC.
Korzystając z oświetlenia w podczerwieni, zidentyfikuj fluorescencyjne RGC.
Umieścić pipetę zawierającą znacznik fluorescencyjny na RGC.
Zastosuj nadciśnienie, aby zapobiec zatkaniu.
Przełącz na podciśnienie, wciągając membranę do pipety, aby utworzyć uszczelnienie.
Zastosuj ssanie, aby rozerwać membranę, ustanawiając konfigurację całej komórki, która ułatwia dyfuzję znacznika do dendrytów.
Obserwuj morfologię i stratyfikację dendrytyczną, aby zidentyfikować podtypy RGC.
Umyj siatkówkę w natlenionym roztworze zewnątrzkomórkowym i przenieś ją do komory rejestracyjnej ze szklanym dnem za pomocą plastikowej pipety do przenoszenia. Następni
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych