Name: Ogólna metoda oceny inkubacji głodu sacharozy u szczurów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 44 s
Description: Poznaj metodę oceny inkubacji głodu sacharozy u szczurów po okresie abstynencji. Badanie mierzy reakcję na sygnały związane z nagrodą, co pomaga zrozumieć mechanizmy nawrotów w uzależnieniach.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Przygotowanie niniejszego manuskryptu i filmu zostało sfinansowane z grantu R15 DA016285-02 National Institute on Drug Abuse/National Institutes of Health, Western Washington University Biomedical Research Activities in Neuroscience Initiative oraz Western Washington University.

1. Zwierzęta doświadczalne
<ol>
 <li>Samce szczurów Long-Evans mają 3 miesiące w momencie rozpoczęcia badania. Szczury pochodzą z linii Simonsen (Gilroy, Kalifornia, USA), są hodowane w wiriarium Western Washington University i utrzymywane indywidualnie w 12-godzinnym odwróconym cyklu dobowym (światło wygaszone o 07:00), z dostępem do wody i pelletu Mazuri Rodent Pellets od Purina Mills Inc. (Gray Summit, MO, USA) ad libitum.</li>
 <li>Wszystkie treningi i testy odbywają się w godzinach 09:00-13:00, a kohorty szczurów są zawsze trenowane i testowane codziennie o tej samej porze.</li>
 <li>W czasie trwania badania szczury są ważone w każdy poniedziałek, środę i piątek.</li>
 <li>Bezpośrednio przed fazą treningową szczury są pozbawiane wody przez około 20 h, aby zachęcić je do samopodawania sacharozy w pierwszym dniu treningu.</li>
</ol>
2. Procedury behawioralne
Wszystkie procedury behawioralne oparte na warunkowaniu instrumentalnym wykorzystują standardowe komory do warunkowania instrumentalnego (Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA) z pompą infuzyjną (Razel Scientific Instruments, St. Albans, VT, USA) umieszczoną na górze każdej komory. Komory do warunkowania instrumentalnego są zamknięte w wygłuszonych szafach z wentylatorami (Western Washington University, USA). Wszystkie warunki eksperymentalne i gromadzenie danych są kontrolowane przez oprogramowanie Med PC IV (Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA).
Komory warunkowania operacyjnego (30 x 20 x 24 cm) zawierają dwie dźwignie (jedną stacjonarną i jedną chowaną), generator tonów, białą lampkę bodźca nad chowaną dźwignią oraz czerwoną lampkę pokojową na przeciwległej ścianie. Pompa infuzyjna podaje sacharozę do pojemnika z nagrodą po prawej stronie aktywnej dźwigni. Dźwignie znajdują się 10 cm nad kratownicową podłogą. Cztery podczerwone wiązki fotokomórek przecinają każdą komorę. Przednie wiązki znajdują się w odległości 10,5 cm od ścian bocznych, a boczne wiązki w odległości 6 cm od ścian bocznych. Każda wiązka znajduje się 4,5 cm nad podłogą z prętów ze stali nierdzewnej. Wiązki są ustawione tak, aby zliczać liczbę całkowitych przerwań. Całkowita liczba przerwań wiązek jest rejestrowana podczas Treningu oraz Testów głodu.
Z wyjątkiem ograniczenia dostępu do wody przed pierwszą sesją treningową, szczury mają dostęp do pokarmu i wody ad libitum zarówno w klatkach domowych, jak i w komorach warunkowania operacyjnego. Komory znajdują się w dedykowanym pomieszczeniu testowym, które, podobnie jak w wiwarium, funkcjonuje w odwróconym cyklu światła. Szczury są transportowane w klatkach domowych między pomieszczeniami na wózku przykrytym tkaniną blokującą światło. Po zakończeniu każdej sesji szczury są wracane do klatek domowych.
Typowy eksperyment składa się z trzech faz: treningu, wymuszonej abstynencji oraz testowania. Testowanie jest sesją, podczas której ocenia się głód narkotykowy. W zależności od badania, ocenę tę przeprowadzamy w ramach dwóch ogólnych procedur testowych. Obie procedury zostały opisane w rozdziałach 2.3.1 i 2.3.2.
<ol>
 <li>Trening
 <ol>
 <li>W typowym eksperymencie szczury spędzają 2 h/dobę przez 10 kolejnych dni w komorach warunkowania operacyjnego, gdzie mogą naciskać chowaną (aktywną) dźwignię w celu otrzymania 0,2 ml 10% roztworu sacharozy do zbiornika znajdującego się po prawej stronie dźwigni.</li>
 <li>Reakcja ta aktywuje również bodziec złożony składający się z sygnału dźwiękowego (2 kHz, 15 dB powyżej hałasu otoczenia) i białego światła. Bodziec złożony trwa 5 s, po czym następuje 40-s przerwa (time out), podczas której nacisnięcia aktywnej dźwigni są rejestrowane, ale nie wywołują zaprogramowanych skutków.</li>
 <li>Reakcja na nieaktywnej (stacjonarnej) dźwigni nie ma zaprogramowanych skutków, jednak nacisnięcia są rejestrowane. Liczba przerw w wiązce światła jest rejestrowana podczas treningu i testów. Wszystkie miary reakcji i lokomocji są zapisywane jako przebiegi czasowe (interwały 2-minutowe), lecz zazwyczaj raportowane są jako wartości całkowite na sesję.</li>
 </ol>
 </li>
 <li>Wymuszona abstynencja. Szczury pozostają w klatkach domowych przez cały czas trwania wymuszonej abstynencji. Typowe stosowane przez nas okresy wymuszonej abstynencji polegają na testowaniu szczurów w dniu bezpośrednio następującym po ostatnim dniu treningu (dzień 1 wymuszonej abstynencji) lub 30 dni po ostatnim dniu treningu (dzień 30 wymuszonej abstynencji).</li>
 <li>Testowanie
 <ol>
 <li>Wygaszanie bez sygnałów. W tej procedurze testowej szczury mogą najpierw naciskać aktywną dźwignię w warunkach identycznych z treningiem, z wyjątkiem tego, że reakcja nie wywołuje skutków, a czas trwania sesji wynosi 1 h. W dniu testu szczury przechodzą co najmniej sześć takich sesji wygaszania. Każda sesja wygaszania jest oddzielona 5-minutowym okresem, podczas którego aktywna dźwignia jest chowana, a światło w pomieszczeniu zostaje wyłączone. „Wygaszanie” uznaje się za osiągnięte, jeśli liczba reakcji na aktywną dźwignię spadła poniżej 20 nacisnięć/h. Niektóre szczury wymagają siódmej sesji. Kolejna sesja (po kolejnej 5-minutowej przerwie) jest sesją testową, w której szczury mogą naciskać dźwignię w celu uzyskania sygnału dźwiękowego i świetlnego, który był początkowo parowany z każdym podaniem sacharozy podczas treningu.</li>
 <li>Wygaszanie z sygnałami. W tej skróconej procedurze testowej szczury mogą naciskać aktywną dźwignię w warunkach identycznych z treningiem, z wyjątkiem tego, że sacharoza nie jest podawana.</li>
 </ol>
 </li>
 <li>Naciskanie nieaktywnej dźwigni służy jako miara dyskryminacji dźwigni. Jest ono również, wraz z przerwami w wiązce światła, wykorzystywane jako miara nieswoistej aktywacji motorycznej. Zmiany motoryczne w kontraście do motywacyjnych komplikują interpretację zachowań związanych z głodem (craving). Dane dotyczące reakcji na nieaktywną dźwignię oraz przerw w wiązce światła są przydatne w wyjaśnieniu wkładu motoryki i motywacji w głód, podobnie jak grupy porównawcze w badaniach farmakologicznych, w których szczury reagujące z wysoką częstotliwością na sacharozę lub inny pokarm są poddawane działaniu związku potencjalnie wpływającego na głód (np. 7,8).</li>
</ol>
3. Reprezentatywne manipulacje w celu wpłynięcia na głód sacharozy po zmiennych okresach wymuszonej abstynencji
Ogólna metoda opisana w niniejszym materiale umożliwia badanie behawioralnych i neurobiologicznych uwarunkowań głodu po zmiennych okresach wymuszonej abstynencji. Przedstawione tutaj metody odnoszą się do Reprezentatywnych Wyników opisanych w sekcji 4.
<ol>
 <li>Sycenie. Niektóre szczury otrzymały butelki z 10 % sacharozą w swoich klatkach domowych przez 17 h bezpośrednio przed Testowaniem 8. Szczury w tej badaniu były testowane przy użyciu procedury wygaszania bez sygnałów.</li>
 <li>Wzbogacenie środowiskowe. Podczas okresu wymuszonej abstynencji część szczurów pozostała w klatkach indywidualnych (Kontrola), podczas gdy pozostałe przeniesiono do dużej klatki (36 " szerokości x 20 " głębokości x 40 " wysokości; Quality Cage Products, Portland, OR, USA) z trzema kohortami (Wzbogacone). Zwierzęta ze grupy Wzbogaconej miały w swoim środowisku kilka zabawek, w tym rurki PVC, a dodatkowo w każdy poniedziałek, środę i piątek otrzymywały nowe zabawki 10. Szczury w tej badaniu były testowane przy użyciu procedury wygaszania bez sygnałów.</li>
 <li>Wyzwanie farmakologiczne. W dniu testowania szczury zostały poddane wstępnemu traktowaniu dawką antagonisty dopaminowych receptorów D1 SCH 23390. Szczury w tej badaniu były testowane przy użyciu procedury wygaszania z sygnałami.</li>
</ol>
4. Reprezentatywne wyniki:
<img alt="Wykresy liniowe i słupkowe analizy zachowania; dane z treningu i testów z okresu 30 dni; wskaźniki aktywne i nieaktywne." src="/files/ftp_upload/3335/3335fig1.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1 Reprezentatywne dane z treningu i testów dla eksperymentu inkubacji głodu sacharozy.
Punkty danych wskazują średnie ± SEM. Liczebność grupy dla Ryc. 1a wynosi 77 szczurów, a dla Ryc. 1b liczebność grup wynosiła od 11 do 12 osobników na grupę. * istotna różnica w stosunku do grupy z Dnia 1, p &lt; 0.05. Rycina została opracowana na podstawie danych z 8 za zgodą wydawnictwa Springer.
<img alt="Wykres słupkowy odpowiedzi nasycenia; dzień 1 vs dzień 30; wpływ wygaszania i wskazówki; zmiana statystyczna." src="/files/ftp_upload/3335/3335fig2.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="Rycina 2"> 
Rycina 2 Wpływ nasycenia sacharozą na głód sacharozy po 1 lub 30 dniach wymuszonej abstynencji. Wielkość grup wynosi 8-9 osobników na grupę. * istotna różnica w stosunku do grupy z dnia 1, † istotna różnica w stosunku do grupy kontrolnej, p &lt; 0.05. Rycina została zaadaptowana z 9 za zgodą wydawnictwa Elsevier.
<img alt="Wykres wzbogacenia środowiskowego; kontrola vs. wzbogacone wygaszanie i sygnał przez 30 dni." src="/files/ftp_upload/3335/3335fig3.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="Rysunek 3"> 
Rysunek 3 Miesiąc wzbogacenia środowiskowego zmniejszył głód sacharozy. Liczebność grup wynosi 8 szczurów dla każdej z nich. * istotna różnica względem dnia 1, † istotna różnica względem grupy kontrolnej, p &lt; 0.05. Rysunek adapted z 10 za zgodą Wolters Kluwer Health.
<img alt="Wykres słupkowy zależności dawka-odpowiedź dla SCH 23390; porównanie reakcji w czasie; badanie farmakologiczne." src="/files/ftp_upload/3335/3335fig4.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="Rycina 4"> 
Rycina 4 Systemiczne podanie SCH 23390 skuteczniej zmniejszyło głód sacharozy po jednym dniu wymuszonej abstynencji. Liczebność grup wynosi 8-12 osobników na grupę. * istotna różnica w stosunku do grupy z Dnia 1, † istotna różnica w stosunku do grupy z dawką 0, p &lt; 0.05. Rycina opracowana na podstawie 8 za zgodą wydawnictwa Springer.
<ol>
 <li>Rysunek 1 przedstawia reprezentatywne dane z treningu i testów u szczurów samopodających sacharozę (Rysunek 1 GÓRA), a następnie reagujących w fazie wygaszania przy dostępnym sygnale powiązanym z sacharozą (Rysunek 1 DÓŁ). Jak widać, szczury reagują selektywnie na dźwignię aktywną podczas treningu oraz podczas testów. Co ciekawe, reakcje na dźwignię nieaktywną oraz aktywność lokomotoryczna wykazują pewną inkubację, choć efekt ten jest najsilniejszy w przypadku reakcji na dźwignię aktywną.</li>
 <li>Rysunek 2 przedstawia wpływ sytości sacharozą na głód sacharozy po 1 lub 30 dniach wymuszonej abstynencji. Sytość zmniejszyła reakcje w fazie wygaszania bez sygnałów po obu okresach wymuszonej abstynencji, ale zmniejszyła reakcje na sam sygnał sacharozy tylko u szczurów, które przeszły jedynie jeden dzień wymuszonej abstynencji.</li>
 <li>Jak pokazano na Rysunku 3, wzbogacenie środowiskowe zredukowało inkubowane reakcje w fazie wygaszania bez sygnału oraz reakcje na sam sygnał sacharozy do poziomów obserwowanych po zaledwie jednym dniu wymuszonej abstynencji.</li>
 <li>Rysunek 4 obrazuje zależny od czasu abstynencji efekt SCH 23390 na reakcje w fazie wygaszania z sygnałami. SCH 23390 był najskuteczniejszy w redukowaniu głodu sacharozy po 1, a nie po 30 dniach wymuszonej abstynencji.</li>
</ol>

<ol><li>Sobik, L., Hutchison, K., Craighead, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cue-elicited+craving+for+food%3A+a+fresh+approach+to+the+study+of+binge+eating%5BTitle%5D)+AND+%22Appetite%22%5BJournal%5D)">Cue-elicited craving for food: a fresh approach to the study of binge eating.</a> Appetite. 44, 253-2561 (2005).</li>
<li>Geiger, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficits+of+mesolimbic+dopamine+neurotransmission+in+rat+dietary+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Deficits of mesolimbic dopamine neurotransmission in rat dietary obesity.</a> Neuroscience. 159, 1193-1199 (2009).</li>
<li>Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGrimm%2C+JW+%22Craving+In+Animal+Models+of+Drug+Addiction%22">Craving In Animal Models of Drug Addiction</a>. Olmstead, C. , Humana Press. New York. 311-336 (2011).</li>
<li>Grimm, J. W., Kruzich, P. J., See, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contingent+access+to+stimuli+associated+with+cocaine+self-administration+is+required+for+reinstatement+of+drug-seeking+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Psychobiology%22%5BJournal%5D)">Contingent access to stimuli associated with cocaine self-administration is required for reinstatement of drug-seeking behavior.</a> Psychobiology. 28, 383-386 (2000).</li>
<li>Bossert, J. M., Ghitza, U. E., Lu, L., Epstein, D. H., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+relapse+to+heroin+and+cocaine+seeking%3A+an+update+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of relapse to heroin and cocaine seeking: an update and clinical implications.</a> Eur. J. Pharmacol. 526, 36-50 (2005).</li>
<li>Bossert, J. M., Poles, G. C., Wihbey, K. A., Koya, E., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+blockade+of+dopamine+D1-family+receptors+in+nucleus+accumbens+core+or+shell+on+reinstatement+of+heroin+seeking+induced+by+contextual+and+discrete+cues%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Differential effects of blockade of dopamine D1-family receptors in nucleus accumbens core or shell on reinstatement of heroin seeking induced by contextual and discrete cues.</a> J. Neurosci. 27, 12655-12663 (2007).</li>
<li>Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+systemic+or+nucleus+accumbens-directed+dopamine+D1+receptor+antagonism+on+sucrose+seeking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Effects of systemic or nucleus accumbens-directed dopamine D1 receptor antagonism on sucrose seeking in rats.</a> Psychopharmacology (Berl). , (2011).</li>
<li>Grimm, J. W., Fyall, A. M., Osincup, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incubation+of+sucrose+craving%3A+effects+of+reduced+training+and+sucrose+pre-loading%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Incubation of sucrose craving: effects of reduced training and sucrose pre-loading.</a> Physiol Behav. 84, 73-79 (2005).</li>
<li>Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+enrichment+attenuates+cue-induced+reinstatement+of+sucrose+seeking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Environmental enrichment attenuates cue-induced reinstatement of sucrose seeking in rats.</a> Behav Pharmacol. 19, 777-785 (2008).</li>
<li>Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reinstatement+model+of+drug+relapse%3A+history%2C+methodology+and+major+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings.</a> Psychopharmacology (Berl). 168, 3-20 (2003).</li>
<li>Childress, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limbic+activation+during+cue-induced+cocaine+craving%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Limbic activation during cue-induced cocaine craving.</a> Am J Psychiatry. 156, 11-18 (1999).</li>
<li>Gearhardt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+Correlates+of+Food+Addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Gen.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Neural Correlates of Food Addiction.</a> Arch. Gen. Psychiatry. , (2011).</li>
<li>Markou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+drug+craving%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Animal models of drug craving.</a> Psychopharmacology (Berl). 112, 163-182 (1993).</li>
<li>Phillips, R. G., LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+contribution+of+amygdala+and+hippocampus+to+cued+and+contextual+fear+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Differential contribution of amygdala and hippocampus to cued and contextual fear conditioning.</a> Behav. Neurosci. 106, 274-285 (1992).</li>
<li>Holland, P. C., Bouton, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampus+and+context+in+classical+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Hippocampus and context in classical conditioning.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 9, 195-202 (1999).</li>
<li>Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+a+model+of+drug+relapse%3A+an+assessment+of+the+validity+of+the+reinstatement+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure.</a> Psychopharmacology (Berl). 189, 1-16 (2006).</li>
<li>Kupferschmidt, D. A., Brown, Z. J., Erb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Procedure+for+Studying+the+Footshock-Induced+Reinstatement+of+Cocaine+Seeking+in+Laboratory+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats.</a> J. Vis. Exp. (47), (2011).</li>
</ol>

Wszystkie procedury zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi określonymi w „Principles of Laboratory Animal Care” (publikacja NIH nr 86-23) i zostały zatwierdzone przez Institutional Animal Care and Use Committee Uniwersytetu Western Washington.

Procedury opisane w niniejszej pracy można by uznać za procedury przywracania (reinstatement), choć technicznie jest to nieścisłe, ponieważ naciskanie dźwigni w odpowiedzi na sygnał nie zostaje wygaszone przed sesją testową badania głodu (craving). W typowej procedurze przywracania reakcje na sygnały powiązane z nagrodą są wygaszane, a następnie „przywracane” poprzez niekontyngentne podanie nagrody (przywracanie indukowane torowaniem) lub zastosowanie stresora, takiego jak wstrząs stopy (przywracanie indukowane stresem) ...

<table><tbody><tr><td>Klatka do wzbogacania środowiska</td><td>Quality Cage Company</td><td>FH-36&amp;#189;T-N</td><td></td></tr><tr><td>Komora operantowa</td><td>Med Associates, Inc.</td><td>MED-008-CT-B3</td><td></td></tr><tr><td>SCH 23390</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D054</td><td></td></tr></tbody></table>

ogólna metoda oceny inkubacji głodu sacharozy u szczurów

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

W przypadku osób stosujących dietę z ograniczeniem spożycia pokarmów, głód pokarmowy w odpowiedzi na bodźce skojarzone z jedzeniem może stanowić kluczowy punkt przejścia behawioralnego między abstynencją a nawrotem spożywania pokarmów 1. Głód pokarmowy konceptualizowany w ten sposób jest analogiczny do głodu narkotykowego w odpowiedzi na bodźce skojarzone z narkotykami. Powstała obszerna literatura dotycząca determinant behawioralnych i neurobiologicznych głodu narkotykowego; my oraz inni badacze skupiamy się ostatnio na przeniesieniu technik z podstawowych badań nad uzależnieniami, aby lepiej zrozumieć zachowania podobne do uzależnień związane z jedzeniem 2-4.
Podobnie jak w poprzednich badaniach nad głodem narkotykowym, badamy zachowanie związane z głodem sacharozy, wykorzystując szczurzy model nawrotu. W modelu tym szczury w ramach sesji trwających kilka dni samodzielnie podają sobie lek lub pokarm. Podczas sesji naciskanie dźwigni powoduje dostarczenie nagrody wraz z bodźcem dźwiękowym i świetlnym. Zachowanie głodowe jest następnie definiowane operacyjnie jako reagowanie w kolejnej sesji, w której nagroda jest niedostępna. Szczury będą wiarygodnie reagować na bodziec dźwiękowy i świetlny, prawdopodobnie ze względu na jego nabyte uwarunkowane właściwości wzmacniające 5. Zachowanie to jest czasami określane jako poszukiwanie sacharozy lub reaktywność na sygnały. W niniejszej dyskusji będziemy używać terminu „głód sacharozy”, aby objąć oba te konstrukty.
W ciągu ostatniej dekady skupialiśmy się na tym, jak długość czasu następującego po samodzielnej administracji nagrody wpływa na głód nagrody. Co ciekawe, szczury zwiększają reakcję na sygnał powiązany z nagrodą w ciągu kilku tygodni okresu wymuszonej abstynencji. To „inkubowanie głodu” obserwuje się u szczurów, które samodzielnie przyjmowały albo pokarm, albo substancje nadużywane 4,6. Ten zależny od czasu wzrost głodu, który zidentyfikowaliśmy w modelu zwierzęcym, może mieć ogromne znaczenie w kontekście ludzkich zachowań związanych z uzależnieniem od narkotyków i jedzenia.
Przedstawiamy tutaj protokół oceny inkubowania głodu sacharozy u szczurów. Wskazane zostaną warianty procedury, w których głód oceniany jest jako reakcja na pojedynczy sygnał powiązany z sacharozą po wygaszeniu naciskania dźwigni w kontekście samodzielnej administracji sacharozy (Wygaszanie bez sygnałów) lub jako reakcja na sygnały powiązane z sacharozą w ogólnym kontekście wygaszania (Wygaszanie z sygnałami).

Reagowanie na sygnały powiązane z pokarmem lub lekiem nasila się w czasie okresu abstynencji, co może wiązać się ze zwiększoną podatnością na zachowania nawrotowe. W niniejszym materiale szczegółowo opisujemy procedurę oceny tej „inkubacji głodu” (ang. incubation of craving) u szczurów, które podawały sobie samodzielnie sacharozę.

Ogólna metoda oceny inkubacji głodu sacharozy u szczurów

W przypadku osób na diecie z ograniczeniem spożycia pokarmów, głód specyficzny (food craving) w odpowiedzi na wskazówki związane z jedzeniem może stanowić kluczowy punkt przejścia behawioralnego między abstynencją a...

Ogólnym celem niniejszego eksperymentu jest ocena głodu sacharozy u szczurów po krótkim lub przedłużonym okresie wymuszonej abstynencji od samopodawania sacharozy. Cel ten jest realizowany poprzez umożliwienie szczurom samopodawania sacharozy w ciągu 10 codziennych sesji. Następnie szczury zostają poddane okresowi wymuszonej abstynencji od samopodawania sacharozy poprzez pozostawienie ich w klatkach domowych przez jeden lub 30 dni.Ostatnim krokiem procedury jest powrót szczurów do środowiska samopodawania i umożliwienie im reakcji na sygnały, które były wcześniej jednoznacznie powiązane z samopodawaniem sacharozy, ale nie z samą sacharozą. Ostatecznie wyniki pokazują, jak intensywność reakcji na sygnały sprzężone z sacharozą zmienia się w zależności od długości wymuszonej abstynencji. Jak zgłaszaliśmy wcześniej, głód sacharozy zwiększa się lub ulega inkubacji podczas miesiąca wymuszonej abstynencji od sacharozy.W celu zbadania behawioralnych i neurobiologicznych substratów inkubacji głodu narkotykowego można przeprowadzić eksperymenty z samodzielnym podawaniem substancji zgodnie z opisaną procedurą. Główną zaletą tej techniki w porównaniu z istniejącymi metodami jest możliwość zróż

a-general-method-for-evaluating-incubation-of-sucrose-craving-in-rats

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Ogólna metoda oceny inkubacji pożądania sacharozy u szczurów

Obecne badanie ocenia nowatorską procedurę oceny wzmacniających efektów smacznych roztworów u szczurów laboratoryjnych: samodzielne podawanie wewnątrzustne. W tym celu mierzono reakcję instrumentalną (tj. naciskanie dźwignią) na wewnątrzustne wlewy słodkich roztworów o różnych stężeniach na podstawie ciągłych i progresywnych harmonogramów współczynników wzmocnienia.

Nowatorska procedura oceny wzmacniających właściwości degustatorów u szczurów laboratoryjnych: instrumentalne samodzielne podawanie wewnątrzustne

Protokół warunkowania Proboscis Extension Response (PER), opracowany dla pszczół miodnych (Apis mellifera), dostarcza ekologicznie istotnych i łatwo mierzalnych środków do badania kilku różnych mechanizmów uczenia się u wielu gatunków owadów.

Protokół odpowiedzi na wydłużenie trąby do badania plastyczności behawioralnej u owadów: zastosowanie do badań podstawowych, biomedycznych i rolniczych

Ten protokół opisuje nowatorską i efektywną metodę szybkiego inicjowania reakcji instrumentalnej na etanol u szczurów, która, w przeciwieństwie do standardowych metod, nie wymaga pozbawienia wody ani zaniku sacharyny/sacharozy, aby zainicjować odpowiedź.

Metoda oceny wzmacniających właściwości etanolu u szczurów bez niedoboru wody, blaknięcia sacharyny lub szkolenia o przedłużonym dostępie

Celem tego badania jest zidentyfikowanie rozproszonych sieci mózgowych związanych z nagrodą poprzez nakreślenie niezawodnej techniki immunohistologicznej wykorzystującej komórkową aktywację c-fos do pomiaru jednoczesnych zmian w szlakach dopaminy i miejscach końcowych po nowym spożyciu tłuszczu i cukru u szczurów.

Jednoczesne wykrywanie aktywacji c-FOS z mezolimbicznych i mezokortykalnych miejsc nagrody dopaminy po naiwnym spożyciu cukru i tłuszczu u szczurów

Smak jest ważnym procesem sensorycznym, który ułatwia przyciąganie do dobroczynnych substancji i unikanie substancji toksycznych.  Protokół ten opisuje prosty test spożycia w celu określenia preferencji smakowej Drosophila dla danego związku chemicznego.

Test preferencji smakowych dla dorosłych Drosophila

Reaktywność wskazówek jest rozumiana jako wrażliwość na sygnały związane z doświadczeniami związanymi z zażywaniem narkotyków, które przyczyniają się do głodu i nawrotów u abstynentów. Reaktywność sygnału jest modelowana u szczurów poprzez pomiar orientacji uwagi na sygnały związane z narkotykami, co skutkuje zachowaniem podejścia apetytywnego w teście reaktywności sygnału po samodzielnym podaniu i wymuszonej abstynencji.

Protokół pomiaru reaktywności sygnałów w szczurzym modelu zaburzeń związanych z używaniem kokainy

Ten protokół opisuje nowy model, dzięki któremu zdrowe szczury mogą nabawić się depresji w danym okresie czasu poprzez zarażenie przez kontakt z chronicznymi nieprzewidywalnymi szczurami zestresowanymi (CUS).

Nowa metoda wywoływania zachowań podobnych do depresji u szczurów

Tutaj opisany jest protokół preferencji miejsca uwarunkowanego morfiną (CPP) do pomiaru inkubacji głodu u szczurów.

Protokół warunkowej preferencji miejsca do pomiaru inkubacji łaknienia u szczurów

Prezentowany tutaj jest protokół do badania zachowań podobnych do depresji i anhedonów u szczurów. Łączy dwie dobrze znane metody behawioralne, preferencję sacharozy i testy hipofagii wywołanej nowością, z automatycznym systemem monitorowania spożycia żywności i płynów, aby pośrednio badać zachowanie gryzoni przy użyciu parametrów zastępczych.

Testy preferencji sacharozy i hipofagii wywołanej nowością u szczurów przy użyciu zautomatyzowanego systemu monitorowania spożycia pokarmu

Ten protokół opisuje metodę badania hierarchii społecznej w modelu szczurzym. Szczury wykonują złożone zadanie nurkowania w poszukiwaniu pożywienia, w którym tworzą wyraźną hierarchię zgodnie z ich chęcią nurkowania pod wodą i pływania w celu uzyskania granulki pokarmu. Metoda ta służy do zrozumienia procesu podejmowania decyzji i relacji społecznych wśród wysoce towarzyskich zwierząt w małych grupach.

Złożone zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu pożywienia w celu zbadania organizacji społecznej i interakcji u szczurów

W badaniu tym oceniono skuteczność przeciwdepresyjną Qiangzhifang w szczurzym modelu przewlekłej depresji wywołanej stresem ograniczającym i wyjaśniono jego wpływ regulacyjny na szlaki HIF-1 i JAK-STAT za pomocą farmakologii sieciowej i analizy dokowania molekularnego.

Farmakologia sieciowa i walidacja mechanizmów przeciwdepresyjnych Qiangzhifang w modelu szczura depresji wywołanej przewlekłym stresem

Poznaj metodę oceny inkubacji głodu sacharozy u szczurów po okresie abstynencji. Badanie mierzy reakcję na sygnały związane z nagrodą, co pomaga zrozumieć mechanizmy nawrotów w uzależnieniach.

Ogólna metoda oceny inkubacji głodu sacharozy u szczurów

Przeglądaj więcej filmów