Urządzenie typu "zrób to sam" do odzyskiwania próbek kriokonserwowanych przypadkowo wrzuconych do kriogenicznych zbiorników magazynowych
11 maja 2012
Tutaj prezentujemy tanie, trwałe urządzenie kriotolerancyjne do pobierania próbek ze zbiorników Dewara wypełnionych ciekłym azotem. Łatwość budowy i modułowa budowa urządzenia sprawia, że proces pobierania próbek ze zbiorników kriogenicznych jest bezpieczny i łatwy.
Celem tej procedury jest ułatwienie pobierania próbek w kriopojemnikach i fiolkach kriogenicznych z podwójnych zbiorników wypełnionych ciekłym azotem za pomocą łatwego w budowie urządzenia. Osiąga się to poprzez najpierw wyjęcie jednego lub dwóch stojaków zamrażarki z wykonawcy, aby zapewnić miejsce na manewrowanie i włożenie urządzenia pionowo do wykonawcy. Drugim krokiem jest delikatne zeskrobanie urządzenia wzdłuż dna wykonawcy.
Następnie pociągnij urządzenie pionowo wzdłuż ścian wykonawcy Aby zgarnąć pudełko zamrażarki ze zbiornika, ostatnim krokiem jest chwycenie pudełka wyjętego z dna zamrażarki i wymienienie wyjętych stojaków zamrażarki. Główną zaletą tej techniki w porównaniu z istniejącymi metodami, takimi jak dekantacja, pręt pełen ciekłego azotu, jest to, że zapewnia łatwą, bezpieczną i szybką alternatywę, która zachowuje integralność próbki i może być wykonywana przez jednego operatora. Aby rozpocząć montaż urządzenia kriodoksylerancyjnego, użyj szczypiec, aby wyprostować jedną stronę trójstronnego mocnego opaski, aby uzyskać mocne wiązanie LHA.
Jak widać tutaj, wymiary mocnego krawata można dobrać w zależności od średnicy szyi wykonawcy. Należy wykonać dwa takie mocne wiązania, aby umożliwić urządzeniu pobranie pudełek kriogenicznych o wymiarach pięć i pół na pięć i pół cala. Zabezpiecz je mocnym paskiem TST za pomocą koronowej, podkładki nakrętki i, aby utworzyć podstawę czerpaka do krio.
Urządzenie powinno teraz wyglądać tak, jak pokazano tutaj. Teraz za pomocą płytki szczelinowej wyrównaj szczeliny na mocnym trójniku z otworami na jednym końcu płyty szczelinowej. Następnie zabezpiecz je razem za pomocą nakrętek i Hillmana.
Wywierć otwory do mocowania, jeśli płyta szczelinowa i mocne ściągi nie mają wstępnie wywierconych otworów. W razie potrzeby uchwyt można uformować, zginając drugi koniec płytki szczelinowej i owijając pianką. Aby lepiej chwycić urządzenie, należy usunąć pianę przed zanurzeniem w wodzie.
Odporne na krio-wzornictwo urządzenie do samodzielnego pobierania może być również przystosowane do pobierania fiolek kriogenicznych. Polega to na zastąpieniu płaskiej podstawy sitkiem ze stali nierdzewnej zmienionym do nabierania fiolek z płynu. Aby rozpocząć montaż, najpierw odkręć nakrętki koronowe i, mocując mocny trójnik do opony do płytki szczelinowej.
Następnie przed przymocowaniem sitka ze stali nierdzewnej do płytki szczelinowej delikatnie ugnij szyjkę sitka za pomocą szczypiec, aby ustawić podstawę pod kątem przypominającym kadzię. Jeśli używany sitko jest dostarczany z wargą, użyj szczypiec, aby zgiąć wargę w dół. Ułatwi to manewrowanie z urządzeniem.
Dopasuj otwór w uchwycie sitka do otworów w płycie szczelinowej i zabezpiecz sitko za pomocą nakrętek i Hillman. Wywierć otwory, jeśli filtr siatkowy nie jest wyposażony w wstępnie wywiercone otwory. Aby rozpocząć pobieranie pudełek kriogenicznych od wykonawcy, najpierw załóż rękawice kriogeniczne.
Następnie wyjmij jeden lub dwa stojaki zamrażarki z wykonawcy, aby zapewnić miejsce na manewrowanie urządzeniem. Następnie użyj pionowego, odpornego na krio urządzenia do odzyskiwania DIY wyposażonego w mocną podstawę ttra, aby delikatnie zeskrobać dno urządzenia i zebrać pudełko, wpaść na dno zbiornika doer. Następnie pociągnij urządzenie pionowo wzdłuż ścian wykonawcy, aby zgarnąć pudełko zamrażarki ze zbiornika.
Należy pamiętać, że urządzenie powinno być trzymane pionowo i ciągnięte prosto do góry, aby uniknąć ześlizgnięcia się pudełka z powrotem do wykonawcy. Aby pobrać fiolki kriogeniczne, użyj miarki kriogenicznej wyposażonej w sitko, aby delikatnie zeskrobać dno urządzenia podobnego do pobierania kriopudełka, pociągnij urządzenie do pozycji pionowej i chwyć fiolki zebrane w sitku. Głównym wyzwaniem w badaniach nad ekspresją genów jest to, że jakość RNA zależy od warunków przechowywania zarówno zamrożonych próbek tkanek, jak i wyekstrahowanego RNA.
Rysunek ten pokazuje wpływ obchodzenia się z próbką na integralność całkowitego RNA całkowitego RNA z tego samego źródła tkankowego, które zostało poddane różnym obchodzeniu się z próbką przed eksperymentem nienaruszona całkowita, szybkość przygotowania RNA pokazuje wyraźne 28 s i 18 s rybosomalne prążki RNA z 28 s rybosomalnym pasmem RNA, około dwa razy intensywniejsze niż 18 s rybosomalne pasmo RNA. Jest to wskazówka, że RNA jest nienaruszone. Pasy trzeci i czwarty przedstawiają próbki ze znaczną degradacją spowodowaną powtarzającym się częściowym zamrożeniem przez krótkotrwałe pobieranie od wykonawcy, modelując w ten sposób długotrwałe przechowywanie z okresowym dekantowaniem ze względu na konieczność odzyskania upuszczonych fiolek na pudełkach.
Jednak próbki przechowywane w usłudze wykonawczej za pomocą urządzenia do majsterkowania, a zatem bez częściowego rozmrożenia, zawierają nienaruszone RNA na drugim torze. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak pobrać próbki z dvara wypełnionego ciekłym azotem bez konieczności jego dekantacji.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Przegląd
Ten artykuł przedstawia niskobudżetowe, trwałe urządzenie odporne na niskie temperatury, zaprojektowane do bezpiecznego i łatwego pobierania próbek z zbiorników Dewar wypełnionych ciekłym azotem. Modułowa konstrukcja upraszcza proces budowy i poprawia bezpieczeństwo użytkownika podczas obsługi próbek.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neuronauka
- Biotechnologia
- Kriokonserwacja
Tło
- Pobieranie próbek ze zbiorników kriogenicznych może być wyzwaniem i niebezpieczne.
- Istniejące metody mogą narażać na zagrożenie integralność próbek.
- Istnieje potrzeba bezpieczniejszych i bardziej efektywnych technik pobierania.
- Zaproponowane urządzenie ma na celu rozwiązanie tych problemów.
Cel badania
- Opracowanie urządzenia, które upraszcza pobieranie próbek ze zbiorników z ciekłym azotem.
- Zapewnienie integralności próbek podczas procesu pobierania.
- Zezwolenie na użycie przez jednego operatora dla zwiększenia efektywności.
Zastosowane metody
- Usuwanie regałów zamrażalni z zbiornika Dewar dla lepszej zwrotności.
- Pionowe włożenie urządzenia do zbiornika.
- Delikatne zdrapywanie po dnie zbiornika w celu pobrania próbek.
- Pionowe wyciąganie urządzenia wzdłuż ścianek zbiornika w celu pobrania próbek.
Główne wyniki
- Urządzenie zapewnia szybką i bezpieczną alternatywę dla tradycyjnych metod.
- Integralność próbek jest zachowana podczas procesu pobierania.
- Funkcjonalność dla jednego operatora poprawia użyteczność.
- Konstrukcja urządzenia jest prosta i opłacalna.
Wnioski
- Urządzenie odporne na niskie temperatury znacznie poprawia pobieranie próbek ze zbiorników kriogenicznych.
- Oferuje praktyczne rozwiązanie dla badaczy pracujących z krioprzechowywanymi próbkami.
- Przyszłe zastosowania mogą rozszerzyć się na różne warunki laboratoryjne.
Często zadawane pytania
Executive Industry Relevance
Reliable recovery of cryopreserved biological samples is critical for maintaining sample integrity and ensuring continuity in biopharma R&D workflows. Accidental loss of vials or boxes into cryogenic storage tanks can compromise high-value assets and disrupt discovery or translational programs. A safe, rapid, and standardized retrieval solution directly supports operational resilience and portfolio risk management.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Preserves integrity of primary samples essential for target validation studies.
- Reduces risk of sample degradation that could confound mechanistic or pathway analyses.
- Supports reproducible access to archived biospecimens for hypothesis-driven research.
Screening & Assay Development
- Enables consistent retrieval of reference materials for assay calibration and validation.
- Minimizes freeze-thaw cycles that can impact assay reproducibility and quantitative outputs.
- Facilitates reliable preparation of biological systems for downstream screening workflows.
Translational & Preclinical Research
- Maintains sample quality for biomarker studies and preclinical model development.
- Ensures continuity of biospecimen resources across discovery and translational phases.
- Reduces operational risk in long-term biobanking and sample management.
Pipeline & Workflow Integration
This device integrates into the biopharma pipeline at the biobanking, sample management, and pre-analytical stages, supporting workflows from early discovery through preclinical research.
- Discovery Biology: Enables reliable hypothesis testing by safeguarding sample integrity during retrieval.
- Screening: Supports assay readiness by preventing sample degradation from repeated decanting or exposure.
- Analytics: Preserves quantitative measurement fidelity by minimizing RNA or protein degradation.
- Translational Research: Aligns with biomarker continuity and preclinical sample quality requirements.
- Enterprise Reuse: Provides a reusable, adaptable tool for ongoing sample management across programs.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Enhances predictive confidence by maintaining sample quality for downstream analyses.
- Operational Value: Standardizes retrieval, reduces safety risks, and enables single-operator workflows.
- Strategic Value: Improves go/no-go decision reliability by ensuring sample integrity is uncompromised.
- Portfolio Impact: Reduces risk of lost or degraded samples, supporting risk-adjusted advancement decisions.
Implementation Considerations
- Requires basic technical skills for device assembly and adaptation to tank dimensions.
- Needs access to standard laboratory tools and materials for construction.
- Operators must use appropriate cryogenic PPE and follow safety protocols.
- Device can be adapted for different sample formats (boxes or vials) as needed.
- Visibility and maneuverability within Dewar tanks may still present practical limitations.
Biopharma FAQs
Chapters in this video
0:05
Title
1:02
Assembly of Cryotolerant Device for Retrieval of Cryoboxes
2:15
Assembly of Cryotolerant Device for Retrieval of Cryovials
3:12
Retrieving Cryoboxes and Cryovials from Dewar
4:12
Results: RNA Sample Quality from Retrieved Samples
5:27
Conclusion
