Name: Śródoperacyjne wykrywanie subtelnej endometriozy: nowy paradygmat wykrywania i leczenia bólu miednicy związanego z utratą integralności otrzewnej (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-21T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: Poznaj metodę wykrywania subtelnej endometriozy u kobiet z przewlekłym bólem miednicy przy użyciu barwnika metylenowego podczas laparoskopii. Technika ta pozwala zidentyfikować i usunąć niewidoczne zmiany, poprawiając skuteczność leczenia.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Chcielibyśmy podziękować za doskonałą pomoc techniczną Angeli Houwing oraz pomoc w zbieraniu danych Grecie Bushnell.

1. Wybór pacjentów
<ol>
	<li>Kobiety z przewlekłym bólem miednicy poddawane są wywiadowi oraz badaniu przedmiotowemu.</li>
	<li>Odnotowuje się i rejestruje lokalizację bólu, jego występowanie w odniesieniu do cyklu menstruacyjnego oraz objawy towarzyszące, w tym dolegliwości związane z zespołem jelita drażliwego lub pęcherzem.</li>
	<li>Kobiety poddawane laparoskopii wyrażają zgodę na ewentualną resekcję endometriozy oraz wykorzystanie pobranych tkanek do celów badawczych.</li>
</ol>
2. Techniki laparoskopowe
<ol>
	<li>Laparoskopię przeprowadza się przy użyciu standardowych technik poprzez pępekowy port 5 mm oraz dodatkowe porty 5 mm w dolnej części brzucha.</li>
	<li>Przeprowadzana jest dokładna inspekcja miednicy, aby powiązać wszelkie znaleziska dotyczące endometriozy z przedoperacyjną lokalizacją bólu wskazaną przez pacjentkę.</li>
	<li>Barwnik błękit metylenowy miesza się w stosunku 1:200 z solą fizjologiczną i wstrzykuje na powierzchnie miednicy za pomocą igły aspiracyjnej.</li>
	<li>Wykonuje się irygację z odsysaniem w celu usunięcia nadmiaru barwnika i przepłukania powierzchni otrzewnej.</li>
	<li>Dokonuje się inspekcji miednicy i rejestruje obszary wchłaniania niebieskiego barwnika.</li>
	<li>W miarę możliwości przeprowadza się resekcję zajętych obszarów otrzewnej.</li>
</ol>
3. Skaningowa mikroskopia elektronowa
<ol>
	<li>Przekroje otrzewnej przyszywa się do sterylnej płytki telfa, aby spłaszczyć preparat i zachować jego orientację (stroną wewnątrzbrzuszną do góry), a następnie umieszcza w utrwalaczu z aldehydem glutarowym (Sigma, St. Louis, MO) w celu przygotowania do SEM.</li>
	<li>Próbki zorientowano i poddano post-fiksacji w 1% buforowanym czwartotlenku osmu przez 1 h, a następnie odwodniono przy użyciu sekwencyjnych stężeń etanolu.</li>
	<li>Próbki wysuszono za pomocą ciekłego dwutlenku węgla i zamontowano na aluminiowych uchwytach do skaningowego mikroskopu elektronowego za pomocą pasty z koloidalnego srebra, a następnie napylono stopem złoto:platyna do grubości 20 nM.</li>
	<li>Skaningową mikroskopię elektronową przeprowadzono przy użyciu mikroskopu skaningowego JEOL Model JSM-6400, a fotomikrografie wykonano z 12 losowo wybranych obszarów.</li>
</ol>

Nie zgłoszono żadnych konfliktów interesów.

Przewlekły ból miednicy u kobiet jest kosztownym i słabo zrozumianym problemem 1. Dysmenorrhea jest najczęstszą postacią bólu miednicy, dotykającą 60% kobiet 2 i 72% nastolatek 3. Endometrioza jest stanem zapalnym, który dotyka 5% zdrowych kobiet, ale występuje u nawet 70% kobiet z bólem miednicy. Choć endometrioza przyczynia się do powstawania przewlekłego bólu miednicy (CPP), mechanizm, w jaki zmiany chorobowe wywołują ból, pozostaje niepewny 4. Paradoksalnie nasilenie bólu n...

<table><tbody><tr><td>Błękit metylenowy</td><td>American Reagent</td><td>NDC0517-0310-110</td><td>Wymieszany 1:200 w soli fizjologicznej</td></tr></tbody></table>

Śródoperacyjne wykrywanie subtelnej endometriozy: nowy paradygmat diagnostyki i leczenia bólu miednicy związanego z utratą integralności otrzewnej

Intraoperative Detection of Subtle Endometriosis: A Novel Paradigm for Detection and Treatment of Pelvic Pain Associated with the Loss of Peritoneal Integrity

Endometrioza jest powszechną chorobą dotykającą od 40 do 70% kobiet w wieku rozrodczym z chronicznym bólem miednicy (CPP) i/lub niepłodnością. Celem niniejszego badania była demonstracja zastosowania niebieskiego barwnika (błękitu metylenowego) do barwienia powierzchni otrzewnej podczas laparoskopii (L/S) w celu wykrycia utraty integralności otrzewnej u pacjentek z bólem miednicy i podejrzeniem endometriozy. W tym badaniu pilotażowym oceniono czterdzieści kobiet z CPP oraz 5 kobiet bez bólu. Podczas L/S stężony barwnik był rozpylany na powierzchnie otrzewnej, a następnie odsysany i płukany roztworem Ringera z mleczanem. Obszary miejscowego wchłaniania barwnika oceniano pod kątem obecności widocznych zmian endometriozowych. Obszary intensywnego zabarwienia otrzewnej zostały wycięte, a niektóre utrwalone w 2,5% buforowanym glutaraldehydzie i zbadane za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM). Wchłanianie niebieskiego barwnika występowało częściej u kobiet z endometriozą i chronicznym bólem miednicy niż w grupie kontrolnej (85% vs. 40%). Wycięcie obszarów zabarwionych na niebiesko ujawniło w badaniu SEM endometriozę oraz utratę kontaktu międzykomórkowego w obrębie otrzewnej w porównaniu z normalną, niezabarwioną otrzewną. Zmiany w otrzewnej wiązały się z widocznymi implantami endometriozowymi u większości, choć nie u wszystkich pacjentek. Subiektywną ulgę w bólu zgłosiło 80% badanych. Na podstawie skaningowej mikroskopii elektronowej wyciągnięto wniosek, że komórki endometrium rozprzestrzeniają się daleko poza widoczne implanty endometriozy i wydają się uszkadzać leżące pod nimi mezotelium. Subtelne zmiany endometriozy mogą zatem powodować ból miednicy poprzez zaburzenie integralności otrzewnej, umożliwiając krew menstruacyjną lub owulacyjną oraz powiązane czynniki bólowe dostęp do głębiej położonych nerwów czuciowych. Całkowita resekcja zmienionej otrzewnej może zapewnić lepsze długoterminowe leczenie endometriozy i CPP. Ta prosta technika wydaje się poprawiać wykrywalność subtelnej lub niemal niewidocznej endometriozy u kobiet z CPP i minimalnymi znaleziskami wizualnymi podczas L/S i może służyć do zwiększenia dokładności diagnostycznej endometriozy podczas laparoskopii.

Przykład subtelnej endometriozy, która była niemal niewidoczna, przedstawiono na Rysunku 1A. Przed zastosowaniem niebieskiego barwnika, dzięki odbiciu światła laparoskopowego, zauważono nieregularny obszar punktowatego otrzewnej. Na Rysunku 1B wygląd tego samego obszaru po barwieniu wykazuje ten sam nieregularny wzór nad pęcherzem moczowym (Rysunek 1B). Po wycięciu tej części otrzewnej (Rysunek 1C) poddano ją badaniu SEM, które wykazało obecność nadkłada...

Utrata integralności otrzewnej stanowi nowy paradygmat w rozumieniu i leczeniu przewlekłego bólu miednicy u kobiet z łagodnymi postaciami endometriozy i może być łatwo wykryta poprzez śródoperacyjne podanie barwnika podczas laparoskopii.

Endometrioza to powszechna choroba dotykająca od 40% do 70% kobiet w wieku rozrodczym z chronicznym bólem miednicy (CPP) i/lub niepłodnością. Celem tego...

Ogólnym celem poniższego eksperymentu jest dostarczenie lekarzom zajmującym się leczeniem kobiet z bólem miednicy łatwej metody uwidaczniania obecności i zakresu subtelnej endometriozy. Osiąga się to najpierw poprzez przeprowadzenie przeglądu widocznej endometriozy w celu zidentyfikowania oczywistych zmian chorobowych. W drugim kroku stosuje się barwnik błękit metylenowy, który uwidacznia obszary subtelnej endometriozy, które mogłyby zostać pominięte podczas standardowej laparoskopii.Następnie wszystkie obszary zabarwione na niebiesko zostają wycięte, aby całkowicie uwolnić pacjentkę od choroby. Wyniki uzyskane za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej wykazują, że podejście to usuwa niewidoczną endometriozę, która wpływa na leżące u podstawy komórki otrzewnej, co z kolei umożliwia dostęp krwi menstruacyjnej lub owulacyjnej do nerwów czuciowych unerwiających miednicę, powodując ból. Znaczenie tej techniki rozciąga się zarówno na diagnostykę, jak i leczenie endometriozy, ponieważ pozwala ona zidentyfikować subtelną, a nawet niewidoczną endometriozę, która może zaburzać powierzchnię otrzewnej i umożliwiać kontakt krwi z nerwami znajdującymi się pod tkankami, co wyjaśnia ból, którego doświadczają te pacjentki.Normalnie podczas owulacji lub menstruacji niewielka ilość krwi przedostaje się do jamy miednicy. Wyściółka miednicy i jamy brzusznej składa się z nienaruszonej warstwy mezotelium, która zapobiega oddziaływaniu tej krwi lub zawartych w niej czynników wywołujących ból na włókna nerwów czuciowych. U kobiet z endometriozą zapalne komórki endometrioidalne mogą powodować utratę kontaktów międzykomórkowych w komórkach otrzewnej, co umożliwia krwi dostęp do leżących poniżej tkanek i włókien nerwowych.Przerwy w komórkach mezohelialnych można zaobserwować za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej, stanowią one również przyczynę barwienia niebieskim barwnikiem leżących poniżej tkanek w miejscach, w których to zachodzi. I. Kobiety cierpiące na przewlekły ból miednicy przechodzą najpierw wywiad w celu ustalenia historii choroby oraz szczegółów dotyczących lokalizacji bólu i jego związku z cyklem menstruacyjnym; odnotowuje się i zapisuje objawy towarzyszące, w tym dolegliwości związane z zespołem jelita drażliwego lub skargi dotyczące pęcherza moczowego. Dodatkowo, po dokonaniu selekcji pacjentek, przeprowadza się badanie fizykalne.Należy pamiętać o uzyskaniu zgody od kobiet poddawanych laparoskopii na ewentualną resekcję endometriozy oraz wykorzystanie ich tkanek do celów badawczych. Laparoskopię należy przeprowadzić przy użyciu standardowych technik poprzez pięciomilimetrowy port pępkowy oraz dodatkowe pięciomilimetrowe porty w dolnej części brzucha. Należy dokładnie zbadać miednicę, aby powiązać wszelkie znaleziska dotyczące endometriozy z przedoperacyjną lokalizacją bólu wskazaną przez pacjentkę.Następnie wymieszaj barwnik błękit metylenowy w proporcji 1:200 z jałową solą fizjologiczną i za pomocą igły aspiracyjnej wstrzyknij roztwór na powierzchnie miednicy. Następnie wykonaj irygację ssącą, aby usunąć nadmiar barwnika i wypłukać powierzchnie otrzewnej. Ponownie dokładnie obejrzyj miednicę i odnotuj wszystkie obszary, w których nastąpiło pobranie błękitnego barwnika.W miarę możliwości przeprowadź resekcję zajętych obszarów otrzewnej. Po zakończeniu resekcji obejrzy miednicę, aby potwierdzić brak krwawienia. Następnie usuń gaz CO2, wyjmij instrumenty i zamknij nacięcia za pomocą kleju tkankowego.Po godzinie odpoczynku w sali wybudzeń pacjent może udać się do domu. Aby udokumentować niewidoczną endometriozę za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej, najpierw należy przyszyć przekroje otrzewnej do sterylnej podkładki Telfa, aby spłaszczyć preparat i utrzymać orientację stroną wewnątrzbrzuszną do góry. Następnie przekroje umieszcza się w fiksatorze z glutaraldehydem do SEM. Po odpowiednim utrwaleniu próbki można poddać obróbce do skaningowej mikroskopii elektronowej u innego pacjenta, u którego wcześniej dokonano resekcji endometriozy z pęcherza moczowego i który nie odczuwa już bólu w tym obszarze.Barwnik nie zabarwił powierzchni otrzewnej, co potwierdza związek między korelacją zabarwienia niebieskim barwnikiem a występowaniem bólu miednicy. To zdjęcie powierzchni otrzewnej wykonano u kobiety z chronicznym bólem miednicy i dolegliwościami pęcherza, które nasilały się w czasie miesiączki. Obraz laparoskopowy został wykonany przed zastosowaniem niebieskiego barwnika; samo odbicie światła laparoskopowego ukazało obszary budzące podejrzenie występowania wyraźnych zmian endometriozy, na co wskazują strzałki na tym zdjęciu wykonanym w tym samym obszarze. Można zauważyć, że niebieski barwnik naniesiony na pęcherz zabarwił wyraźne fragmenty otrzewnej.Na tym obrazie przedstawiono resekcję otrzewnej pokrywającej pęcherz moczowy, a na tym obrazie komórki z tego obszaru widoczne w skaningowej mikroskopii elektronowej. Próbkę przygotowano zgodnie ze standardowymi procedurami i napylono stopem złota i platyny do grubości 20 nanometrów. Można zauważyć, że otrzewna jest pokryta komórkami uznanymi za endometriozę, a komórki mezohelialne otrzewnej wykazują przerwy w kontaktach międzykomórkowych, co odsłania leżącą pod nimi macierz zewnątrzkomórkową.Podczas gdy ten obraz z transmisyjnego mikroskopu elektronowego, wykonany z próbki normalnego otrzewnej przygotowanej w ten sam sposób, pokazuje, że komórki nabłonkowe normalnej otrzewnej są ściśle połączone. Jak widać, jest to dość prosta technika, którą można zastosować podczas zabiegów laparoskopowych, aby pomóc w zidentyfikowaniu subtelnej i niewidocznej endometriozy, która powoduje przepuszczalność powierzchni otrzewnej. Wycinając całą zmianę wraz ze wszystkimi komórkami endometrioidalnymi, dają Państwo pacjentowi największą szansę na uśmierzenie bólu.

intraoperative-detection-subtle-endometriosis-novel-paradigm-for

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Rozpoznanie subtelnej endometriozy w trakcie operacji: Nowy paradygmat wykrywania i leczenia bólu miednicy związanego z utrata integralności otrzewnej

Demonstracja testu przyłóżkowego w kierunku allodynii skórnej oraz jego implikacje kliniczne.

Demonstracja allodynii skórnej powiązanej z przewlekłym bólem miednicy

Obrazowanie fluorescencyjne jest obiecującą, innowacyjną metodą chirurgii sterowanej obrazem w onkologii chirurgicznej. W niniejszym materiale wideo opisujemy procedurę techniczną wykrywania węzła chłonnego wartowniczego z wykorzystaniem obrazowania fluorescencyjnego, zaprezentowaną na przykładzie onkologii ginekologicznej. Zastosowano wielospektralny system kamer fluorescencyjnych wraz z kontrastem fluorescencyjnym w postaci zieleni indocyjaninowej.

Wielospektralne obrazowanie fluorescencyjne w czasie rzeczywistym do śródoperacyjnego wykrywania węzła chłonnego strażnika w onkologii ginekologicznej

Tutaj prezentujemy protokół obrazowania na żywo fluorescencyjnie znakowanych fragmentów ludzkiego endometrium przeszczepionych myszom. Metoda pozwala na badanie wpływu wybranych leków na wielkość zmiany endometriotycznej poprzez monitorowanie i kwantyfikację fluorescencji emitowanej przez reporter fluorescencyjny w czasie...

Nieinwazyjne monitorowanie wielkości zmiany w heterologicznym mysim modelu endometriozy

Ten protokół przedstawia techniki laparoskopowego wycinania endometrioma jajnika, wykonywania adhezjolizy z oszczędnym zastosowaniem elektrochirurgicznym oraz stosowania śródoperacyjnej chromopertubacji do oceny drożności dróg rodnych. To systematyczne podejście ułatwi optymalne leczenie endometriozy, pokieruje towarzyszącymi operacjami przydatków i poprawi wyniki płodności pooperacyjnej.

Techniki chirurgiczne optymalizujące rezerwę jajnikową podczas laparoskopowej cystektomii z powodu endometrioma jajnika

Ten protokół opisuje identyfikację i resekcję wartowniczych węzłów chłonnych, aby operacja była jak najłatwiejsza i jak najmniej inwazyjna.

Mapowanie węzłów wartowniczych i biopsja raka endometrium we wczesnym stadium za pomocą laparoskopii

Ten protokół opisuje metodę monitorowania postępu zmian morfologicznych w czasie w macicy w indukowalnym mysim modelu raka endometrium za pomocą obrazowania ultrasonograficznego z korelacją zmian ogólnych i histologicznych.

Nieinwazyjna ocena ultrasonograficzna progresji raka endometrium w kierowanej przez Pax8 delecji supresorów guza Arid1a i Pten u myszy

Tutaj opracowano i zweryfikowano cyfrową platformę do analizy obrazów immunohistochemicznych w celu ilościowej analizy komórek odpornościowych endometrium pacjentek z nawracającymi poronieniami w oknie implantacji.

Platforma do ilościowej detekcji komórek odpornościowych endometrium w oparciu o immunohistochemię i cyfrową analizę obrazu

Badanie to wprowadza nowy model mysi zaprojektowany specjalnie do symulacji endometriozy, klinicznie istotnego podtypu endometriozy. Wykorzystując myszy C57BL/6J, model ma na celu wyjaśnienie patofizjologicznych mechanizmów leżących u podstaw niepłodności związanej z endometrioma, oferując wyrafinowane narzędzie do wypełnienia obecnej luki w wiedzy w medycynie reprodukcyjnej.

Stworzenie eksperymentalnego mysiego modelu endometrioma w celu zbadania związanej z nim niepłodności

Przedstawiono testy rozlanego hamującego kontroli nocyceptywnej, sumowania czasowego oraz hiperalgezji ran u pacjentek położniczych. Testy te oceniają hamujące i pobudzające mechanizmy przetwarzania bólu i są tutaj wykorzystywane do oceny endogennej analizji w różnych momentach ciąży oraz w okresie okołoporodowym, aby pomóc w określeniu indywidualnego ryzyka wystąpienia bólu przewlekłego.

Paradygmat eksperymentalny do przewidywania bólu pooperacyjnego (PPOP)

Wykazaliśmy, że złośliwe zmiany barwnikowe o zwiększonej aktywności metabolicznej generują mierzalne ilości ciepła, a pomiar przejściowej odpowiedzi termicznej skóry na pobudzenie chłodzące pozwala na ilościową identyfikację czerniaka oraz innych nowotworów skóry (w przeciwieństwie do zniewów nieproliferacyjnych) we wczesnym stadium choroby.

Ilościowa wizualizacja i detekcja raka skóry z wykorzystaniem dynamicznej obrazowania termowizyjnego

Poznaj metodę wykrywania subtelnej endometriozy u kobiet z przewlekłym bólem miednicy przy użyciu barwnika metylenowego podczas laparoskopii. Technika ta pozwala zidentyfikować i usunąć niewidoczne zmiany, poprawiając skuteczność leczenia.

Śródoperacyjne wykrywanie subtelnej endometriozy: nowy paradygmat wykrywania i leczenia bólu miednicy związanego z utratą integralności otrzewnej (Wideo) | JoVE Journal

Śródoperacyjne wykrywanie subtelnej endometriozy: nowy paradygmat diagnostyki i leczenia bólu miednicy związanego z utratą integralności otrzewnej

Przeglądaj więcej filmów