Wytwarzanie i odzyskiwanie sferoid β-komórkowych z hydrożeli peptydowych PEG o skokowym wzroście

Ogólnym celem tej procedury jest zademonstrowanie technik kapsułkowania komórek w fotopolimeryzowanych hydrożelach, a także późniejsze odzyskanie naturalnie powstałego pH komórek beta z wrażliwych na enzymy hydrożeli z charakterystyki biologicznej. Osiąga się to poprzez najpierw zmieszanie sześciu komórek beta z kołkiem przedramienia, macerem norbertyny i wrażliwym na enzymy środkiem sieciującym peptydy. Komórki są następnie otaczane za pomocą polimeryzacji za pośrednictwem wolnych rodników, a następnie fotopolimeryzacji w celu utworzenia hydrożelu.

Drugim krokiem jest hodowla zamkniętych komórek w hydrożelach w inkubatorze dwutlenku węgla w temperaturze 37 stopni Celsjusza. Po tym, jak komórki rozmnożą się w celu utworzenia agregatów, hydrożele obciążone komórkami są płukane roztworem buforowym, a następnie inkubowane w roztworze trypsyny chia. Pod delikatnym wstrząsaniem w celu erozji żelu, odzyskane kruszywa są starannie myte w celu usunięcia roztworu enzymatycznego i zerodowanego polimeru.