Wykorzystanie przewlekłego stresu społecznego do modelowania depresji poporodowej u gryzoni w okresie laktacji

Ogólnym celem poniższego eksperymentu jest stworzenie ekologicznie istotnego modelu gryzoni do badania poporodowych zaburzeń nastroju. Po pierwsze, młode przechodzą okres separacji matki. Szczenięta są następnie zwracane do klatki domowej, a zachowania matki związane z opieką nad nimi są rejestrowane w celu wywołania stresu społecznego.

Pojawia się nowy męski intruz. Agresja matczyna jest rejestrowana przez 30 minut lub dłużej w celu wywołania przewlekłego stresu społecznego. Nasze wyniki wskazują, że przewlekły stres społeczny jest skutecznym i wiarygodnym paradygmatem depresyjnym opieki nad matką.

Kolejną przewagą tej techniki nad istniejącymi modelami depresji wywołanej stresem, takimi jak paradygmaty powtarzającej się powściągliwości, porażki społecznej lub przewlekłego łagodnego stresu, które wykorzystują losową różnorodność stresorów, jest to, że stres społeczny nie wprowadza poważnych zakłóceń logistycznych i/lub fizjologicznych. Zastosowanie paradygmatów przewlekłego stresu społecznego może prowadzić do identyfikacji ulepszonych środków zapobiegawczych i leczenia zaburzeń nastroju u matek i ich potomstwa. Dorosłe samice dolly chwalą się są hodowane w domu, a testy są przeprowadzane w klatce domowej, znajdującej się w tym samym pomieszczeniu przez cały czas trwania badania.

W 20 lub 21 dniu ciąży w klatce domowej umieszcza się jednocalowe separatory klatkowe wykonane z przezroczystej pleksi. Dzielą one klatkę na cztery ćwiartki, aby zapobiec czołganiu się szczeniąt z powrotem do matki podczas testów. Typowe zachowanie matki potwierdza się u wszystkich matek w dniu porodu.

Poprzez bezpośrednią obserwację pozyskiwania szczeniąt, pielęgnacji, pielęgnacji i samodzielnej pielęgnacji. Samce intruzów użyte w tym badaniu są mniejsze lub podobnej wielkości. Sprague Dolly, mężczyźni i samice nigdy nie są prezentowane z tym samym samcem dwa razy.

Używanie samców, które są podobnej wielkości do matek, pomaga zapobiegać dzieciobójstwu. W pobliżu klatki zamontowana jest kamera wideo, dzięki czemu można rejestrować zachowania podczas testów. Na początek usuń ściółkę z matki, zważ osobno samca i samicę młodego, a następnie umieść je w czystej klatce na 60 minut.

Pod koniec tej 60-minutowej separacji ponownie zważ młode. Przed wprowadzeniem szczeniąt z powrotem do ich domowej klatki rozpocznij nagrywanie wideo, aby upewnić się, że wszystkie zachowania związane z aportowaniem szczeniąt zostały uchwycone. Podziel młode tak równomiernie, jak to możliwe, między trzy nietestowane ćwiartki klatki.

Po tym ponownym wprowadzeniu rejestruj zachowanie matki podczas opieki przez 30 minut. Zachowania związane z opieką nad matką zazwyczaj obejmują aportowanie szczeniąt z powrotem do gniazda, zachowania związane z gniazdowaniem, szczenię lub samodzielną pielęgnację lub karmienie piersią. Gdy matka wejdzie w interakcję z miotem przez łącznie 120 minut, zważ młode jeszcze raz, aby określić spożycie mleka.

W ciągu dwóch godzin jedno młode jest poddawane eutanazji z każdego miotu w dniach testów behawioralnych następujących po tym okresie karmienia. Aby pobrać próbkę mleka z żołądka, odwracamy młode do matki. Po ważeniu, po rozpoczęciu nagrywania wideo, wprowadź mniejszego lub podobnego rozmiaru nowego intruza do klatki na 30 minut, aby przetestować agresję matczyną.

Zachowania agresji matczynej zazwyczaj obejmują atakowanie, gryzienie, kopanie lub przygwożdżanie samca intruza przez samicę matki. W przypadku osób z grupy kontrolnej samiec jest usuwany po 30-minutowym nagraniu wideo agresji matki w drugim, dziewiątym i szesnastym dniu laktacji w przypadku osób z przewlekłym stresem społecznym, samce pozostawia się z matkami na 60 minut każdego dnia. W ciągu 15 dni między drugim a szesnastym dniem laktacji w drugim, dziewiątym i szesnastym dniu, pierwsze 30 minut jest rejestrowane podobnie jak u osób kontrolnych w drugim, dziewiątym i szesnastym dniu testowania, butelka z 0,02% sacharyną jest dodawana do klatki domowej matki o godzinie 15:00 na przemian po prawej i lewej stronie.

Butelki są później ważone w celu określenia preferencji sacharyny. Młode są odsadzane od piersi w 23 dniu, a matki są poddawane eutanazji w celu pobrania próbek do dalszej analizy. Dorosłe potomstwo płci żeńskiej matek cierpiących na chroniczny stres społeczny rodzi później własne młode.

Do dalszych badań wykorzystuje się oprogramowanie do analizy behawioralnej logarytmu nieparzystego do oceny zachowania matki zarejestrowanego podczas badania. Zarówno agresja matczyna, jak i opieka nad matką są oceniane dla wszystkich filmów z agresją matczyną. Ten program tworzy zarówno kompletny plik danych z pięciosekundowymi przedziałami ze znacznikiem czasu, jak i tabelę podsumowującą z łącznymi częstotliwościami i czasami trwania wybranych zachowań w ciągu 30-minutowego nagrania.

Przewlekły stres społeczny spowodowany wystawieniem matki laktacyjnej na kontakt z samcem intruza przez godzinę dziennie przez 15 dni spowodował skrócenie czasu pielęgnacji szczeniąt i całkowitą opiekę matczyną. W dziewiątym dniu laktacji do 16 dnia laktacji matka wykazała wzrost samopielęgnacji, co jest miarą lęku i agresywnych zachowań. Odpowiednio, spożycie mleka przez młode zmniejszyło się w porównaniu z grupą kontrolną w dziewiątym i szesnastym dniu laktacji, wzrost młodych był znacznie osłabiony w obu tych dniach.

Stres społeczny zmniejszył również preferencję sacharyny i wskaźnik hedonii przez smak 16 testowania spożycia mleka przez młode dorosłej samicy. Potomstwo matek ze stresem społecznym było zmniejszone w drugim dniu laktacji, a preferencja 16 sacharyny we wczesnym okresie życia matek F1 z przewlekłym stresem społecznym była również niższa. W drugim i szesnastym dniu laktacji ekspresja mRNA oksytocyny została osłabiona w jądrze nadwzrokowym matek F1 zestresowanych we wczesnym okresie życia, a podobne efekty stwierdzono w jądrze przykomorowym.

Podczas ustanawiania protokołu przewlekłego stresu społecznego ważne jest, aby zminimalizować narażenie na dodatkowe czynniki stresogenne, takie jak transport matek w ich ściółkach, nadmierne zakłócenia ze strony ludzi, zabrudzone klatki i inne awersyjne bodźce akustyczne w fabryce jamy ustnej. Stabilny obiekt mieszkalny i konsekwentna hodowla zwierząt zapewnią najbardziej spójne dane. Po tej procedurze można pobrać próbki z wielu różnych tkanek w wielu punktach czasowych w celu zbadania wpływu przewlekłego stresu społecznego na inne układy narządów.

Ponadto stresory społeczne mogą być stosowane na wielu etapach historii życia w celu zbadania zarówno podatności, jak i odporności na zaburzenia wywołane stresem.