RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
pl_PL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/50438-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Opisujemy protokół produkcji i pomiaru urządzeń dla biosensorów wysokiej częstotliwości opartych na nanorurkach węglowych. Technika wykrywania wysokiej częstotliwości łagodzi podstawowy efekt ekranowania jonowego (Debye) i umożliwia pracę biosensora z nanorurkami w roztworach o wysokiej sile jonowej, w których zawodzą konwencjonalne bioczujniki elektroniczne. Nasza technologia stanowi unikalną platformę dla elektronicznych bioczujników przyłóżkowych (POC) działających w warunkach fizjologicznie istotnych.
Ogólnym celem poniższego eksperymentu jest zademonstrowanie nowej nanoelektrycznej platformy detekcyjnej do wykrywania biomolekularnego w miejscu opieki nad pacjentem w roztworach o wysokiej sile jonowej. Osiąga się to poprzez działanie jednościennych tranzystorów polowych z nanorurek węglowych o wysokiej częstotliwości w celu złagodzenia efektu ekranowania jonowego. Po pierwsze, tranzystory nanorurkowe są wytwarzane i funkcjonalizowane za pomocą cząsteczek receptorowych.
W drugim etapie urządzenia są otoczone mikroprzepływowym kanałem przepływowym, który umożliwia wstrzykiwanie roztworów próbek biomolekuł w celu wykrywania w czasie rzeczywistym. Następnie jednościenne tranzystory paliwowe z nanorurkami węglowymi są eksploatowane jako mieszalniki wysokiej częstotliwości. Aby przezwyciężyć efekt ekranowania jonowego przy wysokiej częstotliwości jazdy, jony i roztwory nie mogą już skutecznie ekranować czujnika nanorurek, co pozwala na wykrywanie oscylujących momentów dipolowych biomolekuł związanych z powierzchnią.
Wyniki wskazują na wykrycie wiązania paciorkowca i biotyny w 100-milimolowym roztworze tła w oparciu o monitorowanie zmian prądu mieszania przy częstotliwości sterowania 10 megahercami. Główną zaletą tej techniki w porównaniu z istniejącymi metodami, takimi jak detekcja prądu stałego, jest to, że przezwycięża ona efekt ekranowania urządzenia, który zasadniczo utrudnia wykrywanie prądu podczas w roztworach o wysokiej sile jonowej. W przeciwieństwie do tradycyjnych czujników opartych na wykrywaniu ładunku, nasza metoda wykrywa momenty dipolowe biomolekuł, badając odpowiedź wysokoczęstotliwościową tranzystorów nanorurkowych.
Najpierw umieść maskę fotograficzną z prostokątnymi wgłębieniami na katalizator na silikonowej płytce pokrytej fotorezystem i wystaw ją na działanie promieniowania UV I o natężeniu 300 milidżuli na centymetr kwadratowy przez 0,3 sekundy. Załaduj wynalezioną płytkę do komory parowania wiązką elektronów i umieść 0,5 nanometra żelaza pod ciśnieniem w komorze od 10 do minus sześć torów. Po pocięciu płytki krzemowej pokrytej katalizatorem z komory na mniejsze barwniki, umieść je na łodzi kwarcowej i załaduj łódź do pieca wzrostowego CVD Zaprogramuj piec tak, aby rozpędził piec do 800 stopni Celsjusza w środku rury, utrzymując przepływ jednego SLM argonu.
Przepływaj 0,2 SLM wodoru przez pięć minut, aby zredukować cząstki katalizatora i przekształcić tlenek żelaza w żelazo. Następnie wprowadza się 5,5 SCCM etylenu na 35 minut, aby wyhodować S wts. Przepływ wodoru na poziomie 0,2 SLM jest utrzymywany przez cały proces.
Po schłodzeniu do temperatury pokojowej przy niewielkim przepływie argonu usuń barwnik z pieca. Po zdefiniowaniu obszaru osadzania metalu dla styków, umieść barwnik w komorze parowania, a następnie osadź 0,5 nanometra tytanu i 50 nanometrów złota jako źródło i odprowadź metale kontaktowe w komorze parowania wiązką elektronów przy tendencji do ujemnych sześciu torów. Po zakończeniu namocz barwnik i aceton przez noc, aby uzyskać metalowy liftoff.
Następnie zanurz izopropanol na 10 minut i wysusz go azotem. Następnie umieść barwnik z powrotem w komorze parowania i umieść 500 nanometrów odparowanego dwutlenku krzemu wiązką elektronów przy 10 do ujemnych sześciu torów odparowania, 50 nanometrach chromu i 50 nanometrach złota jako elektrodę górnej bramki w parowniku wiązki elektronów. Po ułożeniu mokrego rezystu fotograficznego wytrawiono odparowany dwutlenek krzemu za pomocą buforowanego roztworu kwasu fluorowodorowego od jednego do 20 przez trzy minuty i 30 sekund.
Teraz przygotuj roztwór sześciomilimolowego PBSE w dimetyloformamidzie, inkubuj S-W-N-T-F-E-T-D w roztworze cząsteczki łącznika PBSE przez godzinę w temperaturze pokojowej. Następnie przygotuj 20 miligramów na mililitr roztworu aminy. Przymocuj dwie biotyny do wody dejonizowanej.
Inkubuj barwnik w tym roztworze przez 18 godzin. Następnie dokładnie spłucz barwnik w wodzie dejonizowanej. Powtórz płukanie od ośmiu do 10 razy, a następnie wysusz suszarką.
Umieść nową płytkę krzemową na szalce Petriego i wlej mieszaninę PDMS DGA do naczynia, aż mieszanina znajdzie się pięć milimetrów nad płytką. Następnie umieść szalkę Petriego w piekarniku w temperaturze 70 stopni Celsjusza na godzinę. Wyjmij szalkę Petriego z piekarnika i pozwól wafli ostygnąć do temperatury pokojowej.
Użyj skalpela, aby wyciąć prostokątny kawałek PDMS i wyciągnij go za pomocą pęsety. Następnie umieść prostokątny barwnik do góry nogami i przebij otwór przez płaską stronę za pomocą trzymilimetrowego dziurkacza do biopsji. Po umieszczeniu barwnika pod mikroskopem, ostrożnie umieść komorę PDMS na barwniku, wyrównując ją na powierzchni aktywnej wytworzonych urządzeń S-W-N-T-F-E-T.
Umieść wafel krzemowy z foremką SU ósemkę na szalce Petriego i dodaj dwie do trzech kropli tri Chloro. 3 3 3 tri fluoro propylu soli fizjologicznej. Umieścić szalkę Petriego w komorze próżniowej na godzinę po wyjęciu szalki Petriego z próżni.
Mieszaninę DGAs PDMS wylać na wafel i podgrzewać w piekarniku w temperaturze 70 stopni Celsjusza przez godzinę. Po zakończeniu wyjmij szalkę Petriego z piekarnika i pozwól wafli ostygnąć do temperatury pokojowej. Po wycięciu prostokątnego stempla PDMS umieść go do góry nogami i wybij otwór na każdym końcu kanału przepływowego za pomocą stempla do biopsji o średnicy 0,75 milimetra.
Po umieszczeniu barwnika pod mikroskopem, ostrożnie umieść komorę przepływową PDMS na wierzchu barwnika, wyrównując ją na powierzchni aktywnej wytworzonych urządzeń S-W-N-T-F-E-T. Następnie wepchnij rurkę polietylenową do każdego otworu i podłącz jedną rurkę do cylindra strzykawki ze źródłem płynu, a drugą rurkę do strzykawki drenującej. Podłączyć strzykawkę do pompy strzykawkowej, aby utrzymać kontrolowany przepływ płynu przez kanał.
Aby skonfigurować wyjście modulowanej częstotliwości AM, podłącz sygnał ref out z lockin amplifier do zewnętrznego portu sygnału modulacji w generatorze częstotliwości. Następnie podłącz modulowane AM wyjście RF i napięcie DC do polaryzacji T i podłącz wyjście polaryzacji T do styku źródła SWNT. Następnie podłącz styk bramki do portu napięcia karty DAC, aby odczytać prąd AC przez nano rurkę.
Podłącz styk odpływu do lock-in amplifier. Podłącz porty amplitudy i fazy lock-in amplifier do portów wejściowych przetwornika cyfrowo-analogowego. Utrzymuj źródło napięcia DC na poziomie zero woltów, a częstotliwość sygnału A na poziomie 200 kiloherców.
Przemiataj napięcie bramki i zmierz prąd z odpływu. Napełnij komorę na płyn wodą dejonizowaną za pomocą pipety. Przeprowadzić pomiar elektryczny prądu przemiennego.
Powtórz z jednym milimolowym chlorkiem sodu, 10 milimolowym chlorkiem sodu i 100 milimolowym chlorkiem sodu. I zmierz odpowiedź urządzenia dla każdego rozwiązania. Po umieszczeniu mikroprzepływowego kanału przepływowego na urządzeniu, należy podłączyć jedną rurkę do pustej strzykawki umieszczonej na pompie strzykawkowej, a drugą rurkę podłączyć do cylindra strzykawki i napełnić ją 100 milimolowym roztworem chlorku sodu.
Ustawić pompę strzykawkową w tryb pobierania. Do rurki wciąga się 100-milimolowy roztwór chlorku sodu. Prąd można monitorować na komputerze.
Następnie zmień roztwór na jeden miligram na mililitr streptawidyny w 100 milimolowym chlorku sodu i monitoruj zmianę prądu w czasie rzeczywistym dla wiązania biotyny streptawidyny Pokazano tutaj obraz tranzystora S SW NT ze skaningowym mikroskopem elektronowym z zawieszoną górną bramką. Elektroda składa się z 50 nanometrów chromu i 50 nanometrów złota, a gruba warstwa chromu dodaje wytrzymałości zawieszonej strukturze. Zawieszona konstrukcja jest potwierdzona przez brak prądu upływowego między górną bramą a odpływem.
Aby scharakteryzować sukces funkcjonalizacji ścian bocznych, należy wziąć pod uwagę zmiany w krzywych przenoszenia prądu stałego FET w powietrzu. Po każdym kroku funkcjonalizacji były monitorowane. Krzywa przenoszenia dla nieskazitelnie czystych nanorurek FET przesuwa się w prawo po przedstawieniu bio tacji i wiązania paciorkowca Aden.
Oto sygnał wykrywania prądu mieszanego mierzony w funkcji napięcia chodu dla typowego urządzenia w 100 milimolowym chlorku sodu. Wykres przedstawia krzywe prądu stałego, prądu mieszanego i teoretycznego prądu mieszanego. Dane pokazują, że obecne wyniki mieszania dobrze zgadzają się z modelem teoretycznym.
Poniżej przedstawiono reprezentatywne wyniki pomiarów statycznych i pomiarów przepływu w czasie rzeczywistym. Krzywe prądu mieszania w funkcji napięcia chodu reprezentują biotynylowany i związany ze streptawidyną SWNT w 100-milimolowym chlorku sodu. Prąd mieszania zmienia się po związaniu streptawidyny w eksperymencie przepływu w czasie rzeczywistym.
Zmierzono również zmianę sygnału przed i po związaniu streptawidyny w urządzeniu kontrolnym z krzemem i utlenieniem w wodzie dejonizowanej o różnych częstotliwościach, nie ma zmiany po związaniu, co wskazuje, że mechanizm wykrywania powstaje w wyniku interakcji biomolekuły SWNT przy wysokich częstotliwościach. Ta technika pomiarowa może być ogólnie stosowana do nanorurek, nanodrutów lub elektronicznych bioczujników na bazie grafenu i może być wykonywana bezpośrednio w roztworach tła o wysokiej sile jonowej, bez konieczności wykonywania czasochłonnych etapów, takich jak odsalanie.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
08:17
Related Videos
15.7K Views
13:15
Related Videos
34.5K Views
09:20
Related Videos
8.1K Views
11:25
Related Videos
11.6K Views
09:28
Related Videos
8.5K Views
09:14
Related Videos
8.2K Views
08:31
Related Videos
8K Views
07:34
Related Videos
10K Views
07:14
Related Videos
8.9K Views
10:45
Related Videos
659 Views