Wprowadzanie czynników eksperymentalnych do myszy
Wiele eksperymentów zależy od podawania środków myszom. Często środki te są wprowadzane w celu sprawdzenia ich wpływu na proces biologiczny. Agenci mogą również odgrywać ważną rolę w przygotowywaniu zwierząt do eksperymentów. W tym filmie omówimy ważne kwestie związane z podawaniem środków eksperymentalnych, narzędzia do dostarczania środków, niektóre konkretne drogi podawania i zastosowania tych podstawowych technik.
Jakie więc czynniki należy wziąć pod uwagę planując podanie środka eksperymentalnego?
Pierwszą z nich jest odpowiednia dawka. Zwykle oblicza się to w odniesieniu do masy ciała zwierzęcia, ale kluczowe znaczenie ma zapewnienie odpowiedniej dawki środka.
Należy również wziąć pod uwagę drogę podawania. Właściwości takie jak smakowitość środka, lepkość, ilość do podania, tkanka docelowa i pożądana szybkość rozsiewu określą, którą z wielu dostępnych dróg podania należy wybrać. W tym filmie skupimy się na iniekcji, która jest jedną z najskuteczniejszych metod dostarczania środka.
Zanim omówimy, jak wykonać zastrzyk, zapoznajmy się z głównymi narzędziami tej techniki.
Zaczniemy od strzykawki. Ciecze są przechowywane w beczce, która jest oznaczona, aby umożliwić dokładne pomiary objętości. Tłok mieści się w lufie i służy do napędzania ruchu jej zawartości. Wreszcie, końcówka strzykawki jest miejscem zamocowania piasty igły. Na przeciwległym końcu trzonka igły znajduje się ścięta końcówka. Uważaj, jest bardzo ostry!
Piasty igieł są oznaczone kolorami, aby odzwierciedlić ich rozmiar lub "grubość", przy czym wyższe numery grubości oznaczają mniejsze igły. Mierniki są wybierane na podstawie pożądanej trasy dostawy: im mniejszy lub bardziej wrażliwy obszar, tym mniejsza wymagana igła.
Po wybraniu odpowiedniej igły i strzykawki do eksperymentu, należy wciągnąć środek do cylindra, pociągając za tłok. Pęcherzyki powietrza wstrzykiwane wraz ze środkiem mogą rozrywać tkanki i szkodzić zwierzęciu doświadczalnemu. Dlatego odwróć strzykawkę i delikatnie przesuń lufę, aby wszelkie pęcherzyki przesunęły się w kierunku końcówki i uciekły. Jeśli to możliwe, usuń nadmiar środka, aby upewnić się, że pęcherzyki zostały całkowicie usunięte.
Teraz, gdy strzykawka jest zablokowana i załadowana, jest prawie gotowy do wykonania wstrzyknięcia!
Przed rozpoczęciem ważne jest, aby wyposażyć się w odpowiednie środki ochrony osobistej, w tym rękawice. Niezbędne jest również właściwe obchodzenie się ze zwierzętami, które różni się nieznacznie w zależności od użytego miejsca wstrzyknięcia.
W przypadku zastrzyków podskórnych, które często są ukierunkowane poniżej skóry właściwej szyi zwierzęcia, myszy są powstrzymywane przez "karkanie". Najpierw chwyć zwierzę za ogon i pozwól mu chwycić pokrywę klatki. Następnie mocno chwyć kark, unosząc namiot ze skóry na ramionach zwierzęcia.
Igłę należy wprowadzić u podstawy skóry namiotu, a środek dozować z mocnym, stałym naciskiem na tłok. Wstrzyknięty płyn będzie powoli wchłaniany do krwiobiegu.
Iniekcje dootrzewnowe do jamy ciała są wchłaniane z szybkością podobną do spożycia. Aby uzyskać dostęp do brzucha, odwróć rozczochrane zwierzę i bezpiecznie wsuń ogon pod mały palec.
Następnie w myślach podziel brzuch zwierzęcia na 4 ćwiartki i włóż igłę do dolnego lewego lub prawego kwadrantu. Wywierać mocny, stały nacisk na tłok, aby dostarczyć do kilkuset mikrolitrów środka. Alternatywnie, wstrzyknięcia dożylne pozwalają na bardziej wydajne, ogólnoustrojowe dostarczanie eksperymentalnego środka.
Iniekcje dożylne najczęściej wykonuje się w żyły ogonowe. Najpierw myszy są ogrzewane pod lampą grzewczą przez kilka minut, co powoduje puchnięcie żył i ułatwia wprowadzanie igły. Aby utrzymać mysz stabilnie podczas wstrzyknięcia, umieść ją w plastikowym ograniczniku, wsuwając ogon przez specjalny otwór z tyłu.
Identyfikacja właściwego naczynia jest niezbędna do udanych wstrzyknięć dożylnych. Upewnij się, że znajdziesz jedną z dwóch żył ogonowych po obu stronach ogona; nie tętnica na spodniej stronie ogona.
Trzymając igłę skośną stroną do góry, włóż ją do żyły. Jeśli igła zostanie prawidłowo umieszczona, wstrzyknięcie spowoduje, że żyła zmieni kolor z ciemnoniebieskiego na bladobiały, gdy środek będzie przemieszczał się przez naczynie.
Po każdym wstrzyknięciu igłę należy wyrzucić do pojemnika na ostre przedmioty niebezpieczne biologicznie bez ponownego zamykania korka. Nigdy nie używaj igły ponownie, ponieważ końcówki mogą się stępić i spowodować obrażenia myszy.
Teraz, gdy znasz już typowe metody wstrzykiwania, przyjrzyjmy się kilku praktycznym zastosowaniom dostarczania środków eksperymentalnych.
W wielu eksperymentach myszy są zarażane określonym patogenem w celu zbadania postępu choroby, a także interakcji gospodarz-patogen. Na przykład podskórne wstrzyknięcia bakterii opornych na antybiotyki powodują zmiany chorobowe, których wielkość jest odczytem dla zjadliwości patogenu. Alternatywnie, zastrzyki w opuszkę stopy mogą być stosowane do obrazowania na żywo rekrutacji komórek odpornościowych do miejsca infekcji.
Modele mysie są również przydatne do badania progresji raka i terapii. Aby wygenerować te modele, zastrzyki mogą być wykorzystywane do szybkiego i skutecznego wywoływania złośliwych narośli u myszy, zarówno poprzez dostarczanie związków rakotwórczych, jak i implantację komórek rakowych w tkankach gospodarza.
Jednak wstrzyknięcie nie zawsze jest wymagane do podania leku. Na przykład inokulacja donosowa może być stosowana do podawania do płuc środka będącego przedmiotem zainteresowania w celu naśladowania i badania postępu choroby układu oddechowego. Inna droga, zgłębnik, umożliwia bezpośrednie podanie środka do żołądka, aby zapewnić precyzyjne i dokładne dawkowanie, które nie jest osiągalne w przypadku leczenia na bazie żywności lub wody.
Właśnie obejrzeliście przegląd JoVE na temat wprowadzania eksperymentalnych środków do myszy. W tym filmie dokonaliśmy przeglądu czynników, które należy wziąć pod uwagę przy wyborze środka eksperymentalnego, narzędzi i strategii wstrzykiwań u myszy oraz niektórych zastosowań tych krytycznych technik. Dzięki za oglądanie!
Wiele badań przeprowadzanych na myszach (Mus musculus) wymaga podania zwierzęciu czynnika doświadczalnego. Na przykład interesujące może być przetesto…
Wiele eksperymentów zależy od podawania środków myszom. Często środki te są wprowadzane w celu sprawdzenia ich wpływu na proces biologiczny. Agenci mogą również odgrywać ważną rolę w przygotowywaniu zwierząt do eksperymentów. W tym filmie omówimy ważne kwestie związane z podawaniem środków eksperymentalnych, narzędzia do dostarczania środków, niektóre konkretne drogi podawania i zastosowania tych podstawowych technik.
Jakie więc czynniki należy wziąć pod uwagę planując podanie środka eksperymentalnego?
Pierwszą z nich jest odpowiednia dawka. Zwykle oblicza się to w odniesieniu do masy ciała zwierzęcia, ale kluczowe znaczenie ma zapewnienie odpowiedniej dawki środka.
Należy również wziąć pod uwagę drogę podawania. Właściwości takie jak smakowitość środka, lepkość, ilość do podania, tkanka docelowa i pożądana szybkość rozsiewu określą, którą z wielu dostępnych dróg podania należy wybrać. W tym filmie skupimy się na iniekcji, która jest jedną z najskuteczniejszych metod dostarczania środka.
Zanim omówimy, jak wykonać zastrzyk, zapoznajmy się z głównymi narzędziami tej techniki.
Zaczniemy od strzykawki. Ciecze są przechowywane w beczce, która jest oznaczona, aby umożliwić dokładne pomiary objętości. Tłok mieści się w lufie i służy do napędzania ruchu jej zawartości. Wreszcie, końcówka strzykawki jest miejscem zamocowania piasty igły. Na przeciwległym końcu trzonka igły znajduje się ścięta końcówka. Uważaj, jest bardzo ostry!
Piasty igieł są oznaczone kolorami, aby odzwierciedlić ich rozmiar lub "grubość", przy czym wyższe numery grubości oznaczają mniejsze igły. Mierniki są wybierane na podstawie pożądanej trasy dostawy: im mniejszy lub bardziej wrażliwy obszar, tym mniejsza wymagana igła.
Po wybraniu odpowiedniej igły i strzykawki do eksperymentu, należy wciągnąć środek do cylindra, pociągając za tłok. Pęcherzyki powietrza wstrzykiwane wraz ze środkiem mogą rozrywać tkanki i szkodzić zwierzęciu doświadczalnemu. Dlatego odwróć strzykawkę i delikatnie przesuń lufę, aby wszelkie pęcherzyki przesunęły się w kierunku końcówki i uciekły. Jeśli to możliwe, usuń nadmiar środka, aby upewnić się, że pęcherzyki zostały całkowicie usunięte.
Teraz, gdy strzykawka jest zablokowana i załadowana, jest prawie gotowy do wykonania wstrzyknięcia!
Przed rozpoczęciem ważne jest, aby wyposażyć się w odpowiednie środki ochrony osobistej, w tym rękawice. Niezbędne jest również właściwe obchodzenie się ze zwierzętami, które różni się nieznacznie w zależności od użytego miejsca wstrzyknięcia.
W przypadku zastrzyków podskórnych, które często są ukierunkowane poniżej skóry właściwej szyi zwierzęcia, myszy są powstrzymywane przez "karkanie". Najpierw chwyć zwierzę za ogon i pozwól mu chwycić pokrywę klatki. Następnie mocno chwyć kark, unosząc namiot ze skóry na ramionach zwierzęcia.
Igłę należy wprowadzić u podstawy skóry namiotu, a środek dozować z mocnym, stałym naciskiem na tłok. Wstrzyknięty płyn będzie powoli wchłaniany do krwiobiegu.
Iniekcje dootrzewnowe do jamy ciała są wchłaniane z szybkością podobną do spożycia. Aby uzyskać dostęp do brzucha, odwróć rozczochrane zwierzę i bezpiecznie wsuń ogon pod mały palec.
Następnie w myślach podziel brzuch zwierzęcia na 4 ćwiartki i włóż igłę do dolnego lewego lub prawego kwadrantu. Wywierać mocny, stały nacisk na tłok, aby dostarczyć do kilkuset mikrolitrów środka. Alternatywnie, wstrzyknięcia dożylne pozwalają na bardziej wydajne, ogólnoustrojowe dostarczanie eksperymentalnego środka.
Iniekcje dożylne najczęściej wykonuje się w żyły ogonowe. Najpierw myszy są ogrzewane pod lampą grzewczą przez kilka minut, co powoduje puchnięcie żył i ułatwia wprowadzanie igły. Aby utrzymać mysz stabilnie podczas wstrzyknięcia, umieść ją w plastikowym ograniczniku, wsuwając ogon przez specjalny otwór z tyłu.
Identyfikacja właściwego naczynia jest niezbędna do udanych wstrzyknięć dożylnych. Upewnij się, że znajdziesz jedną z dwóch żył ogonowych po obu stronach ogona; nie tętnica na spodniej stronie ogona.
Trzymając igłę skośną stroną do góry, włóż ją do żyły. Jeśli igła zostanie prawidłowo umieszczona, wstrzyknięcie spowoduje, że żyła zmieni kolor z ciemnoniebieskiego na bladobiały, gdy środek będzie przemieszczał się przez naczynie.
Po każdym wstrzyknięciu igłę należy wyrzucić do pojemnika na ostre przedmioty niebezpieczne biologicznie bez ponownego zamykania korka. Nigdy nie używaj igły ponownie, ponieważ końcówki mogą się stępić i spowodować obrażenia myszy.
Teraz, gdy znasz już typowe metody wstrzykiwania, przyjrzyjmy się kilku praktycznym zastosowaniom dostarczania środków eksperymentalnych.
W wielu eksperymentach myszy są zarażane określonym patogenem w celu zbadania postępu choroby, a także interakcji gospodarz-patogen. Na przykład podskórne wstrzyknięcia bakterii opornych na antybiotyki powodują zmiany chorobowe, których wielkość jest odczytem dla zjadliwości patogenu. Alternatywnie, zastrzyki w opuszkę stopy mogą być stosowane do obrazowania na żywo rekrutacji komórek odpornościowych do miejsca infekcji.
Modele mysie są również przydatne do badania progresji raka i terapii. Aby wygenerować te modele, zastrzyki mogą być wykorzystywane do szybkiego i skutecznego wywoływania złośliwych narośli u myszy, zarówno poprzez dostarczanie związków rakotwórczych, jak i implantację komórek rakowych w tkankach gospodarza.
Jednak wstrzyknięcie nie zawsze jest wymagane do podania leku. Na przykład inokulacja donosowa może być stosowana do podawania do płuc środka będącego przedmiotem zainteresowania w celu naśladowania i badania postępu choroby układu oddechowego. Inna droga, zgłębnik, umożliwia bezpośrednie podanie środka do żołądka, aby zapewnić precyzyjne i dokładne dawkowanie, które nie jest osiągalne w przypadku leczenia na bazie żywności lub wody.
Właśnie obejrzeliście przegląd JoVE na temat wprowadzania eksperymentalnych środków do myszy. W tym filmie dokonaliśmy przeglądu czynników, które należy wziąć pod uwagę przy wyborze środka eksperymentalnego, narzędzi i strategii wstrzykiwań u myszy oraz niektórych zastosowań tych krytycznych technik. Dzięki za oglądanie!
Wiele eksperymentów zależy od podawania środków myszom. Często środki te są wprowadzane w celu sprawdzenia ich wpływu na proces biologiczny. Agenci mogą również odgrywać ważną rolę w przygotowywaniu zwierząt do eksperymentów. W tym filmie omówimy ważne kwestie związane z podawaniem środków eksperymentalnych, narzędzia do dostarczania środków, niektóre konkretne drogi podawania i zastosowania tych podstawowych technik.
Jakie więc czynniki należy wziąć pod uwagę planując podanie środka eksperymentalnego?
Pierwszą z nich jest odpowiednia dawka. Zwykle oblicza się to w odniesieniu do masy ciała zwierzęcia, ale kluczowe znaczenie ma zapewnienie odpowiedniej dawki środka.
Należy również wziąć pod uwagę drogę podawania. Właściwości takie jak smakowitość środka, lepkość, ilość do podania, tkanka docelowa i pożądana szybkość rozsiewu określą, którą z wielu dostępnych dróg podania należy wybrać. W tym filmie skupimy się na iniekcji, która jest jedną z najskuteczniejszych metod dostarczania środka.
Zanim omówimy, jak wykonać zastrzyk, zapoznajmy się z głównymi narzędziami tej techniki.
Zaczniemy od strzykawki. Ciecze są przechowywane w beczce, która jest oznaczona, aby umożliwić dokładne pomiary objętości. Tłok mieści się w lufie i służy do napędzania ruchu jej zawartości. Wreszcie, końcówka strzykawki jest miejscem zamocowania piasty igły. Na przeciwległym końcu trzonka igły znajduje się ścięta końcówka. Uważaj, jest bardzo ostry!
Piasty igieł są oznaczone kolorami, aby odzwierciedlić ich rozmiar lub "grubość", przy czym wyższe numery grubości oznaczają mniejsze igły. Mierniki są wybierane na podstawie pożądanej trasy dostawy: im mniejszy lub bardziej wrażliwy obszar, tym mniejsza wymagana igła.
Po wybraniu odpowiedniej igły i strzykawki do eksperymentu, należy wciągnąć środek do cylindra, pociągając za tłok. Pęcherzyki powietrza wstrzykiwane wraz ze środkiem mogą rozrywać tkanki i szkodzić zwierzęciu doświadczalnemu. Dlatego odwróć strzykawkę i delikatnie przesuń lufę, aby wszelkie pęcherzyki przesunęły się w kierunku końcówki i uciekły. Jeśli to możliwe, usuń nadmiar środka, aby upewnić się, że pęcherzyki zostały całkowicie usunięte.
Teraz, gdy strzykawka jest zablokowana i załadowana, jest prawie gotowy do wykonania wstrzyknięcia!
Przed rozpoczęciem ważne jest, aby wyposażyć się w odpowiednie środki ochrony osobistej, w tym rękawice. Niezbędne jest również właściwe obchodzenie się ze zwierzętami, które różni się nieznacznie w zależności od użytego miejsca wstrzyknięcia.
W przypadku zastrzyków podskórnych, które często są ukierunkowane poniżej skóry właściwej szyi zwierzęcia, myszy są powstrzymywane przez "karkanie". Najpierw chwyć zwierzę za ogon i pozwól mu chwycić pokrywę klatki. Następnie mocno chwyć kark, unosząc namiot ze skóry na ramionach zwierzęcia.
Igłę należy wprowadzić u podstawy skóry namiotu, a środek dozować z mocnym, stałym naciskiem na tłok. Wstrzyknięty płyn będzie powoli wchłaniany do krwiobiegu.
Iniekcje dootrzewnowe do jamy ciała są wchłaniane z szybkością podobną do spożycia. Aby uzyskać dostęp do brzucha, odwróć rozczochrane zwierzę i bezpiecznie wsuń ogon pod mały palec.
Następnie w myślach podziel brzuch zwierzęcia na 4 ćwiartki i włóż igłę do dolnego lewego lub prawego kwadrantu. Wywierać mocny, stały nacisk na tłok, aby dostarczyć do kilkuset mikrolitrów środka. Alternatywnie, wstrzyknięcia dożylne pozwalają na bardziej wydajne, ogólnoustrojowe dostarczanie eksperymentalnego środka.
Iniekcje dożylne najczęściej wykonuje się w żyły ogonowe. Najpierw myszy są ogrzewane pod lampą grzewczą przez kilka minut, co powoduje puchnięcie żył i ułatwia wprowadzanie igły. Aby utrzymać mysz stabilnie podczas wstrzyknięcia, umieść ją w plastikowym ograniczniku, wsuwając ogon przez specjalny otwór z tyłu.
Identyfikacja właściwego naczynia jest niezbędna do udanych wstrzyknięć dożylnych. Upewnij się, że znajdziesz jedną z dwóch żył ogonowych po obu stronach ogona; nie tętnica na spodniej stronie ogona.
Trzymając igłę skośną stroną do góry, włóż ją do żyły. Jeśli igła zostanie prawidłowo umieszczona, wstrzyknięcie spowoduje, że żyła zmieni kolor z ciemnoniebieskiego na bladobiały, gdy środek będzie przemieszczał się przez naczynie.
Po każdym wstrzyknięciu igłę należy wyrzucić do pojemnika na ostre przedmioty niebezpieczne biologicznie bez ponownego zamykania korka. Nigdy nie używaj igły ponownie, ponieważ końcówki mogą się stępić i spowodować obrażenia myszy.
Teraz, gdy znasz już typowe metody wstrzykiwania, przyjrzyjmy się kilku praktycznym zastosowaniom dostarczania środków eksperymentalnych.
W wielu eksperymentach myszy są zarażane określonym patogenem w celu zbadania postępu choroby, a także interakcji gospodarz-patogen. Na przykład podskórne wstrzyknięcia bakterii opornych na antybiotyki powodują zmiany chorobowe, których wielkość jest odczytem dla zjadliwości patogenu. Alternatywnie, zastrzyki w opuszkę stopy mogą być stosowane do obrazowania na żywo rekrutacji komórek odpornościowych do miejsca infekcji.
Modele mysie są również przydatne do badania progresji raka i terapii. Aby wygenerować te modele, zastrzyki mogą być wykorzystywane do szybkiego i skutecznego wywoływania złośliwych narośli u myszy, zarówno poprzez dostarczanie związków rakotwórczych, jak i implantację komórek rakowych w tkankach gospodarza.
Jednak wstrzyknięcie nie zawsze jest wymagane do podania leku. Na przykład inokulacja donosowa może być stosowana do podawania do płuc środka będącego przedmiotem zainteresowania w celu naśladowania i badania postępu choroby układu oddechowego. Inna droga, zgłębnik, umożliwia bezpośrednie podanie środka do żołądka, aby zapewnić precyzyjne i dokładne dawkowanie, które nie jest osiągalne w przypadku leczenia na bazie żywności lub wody.
Właśnie obejrzeliście przegląd JoVE na temat wprowadzania eksperymentalnych środków do myszy. W tym filmie dokonaliśmy przeglądu czynników, które należy wziąć pod uwagę przy wyborze środka eksperymentalnego, narzędzi i strategii wstrzykiwań u myszy oraz niektórych zastosowań tych krytycznych technik. Dzięki za oglądanie!
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Q1: What factors should be considered when planning to administer an experimental agent to a mouse?
Key factors include the appropriate dose, calculated relative to the animal's weight, and the route of administration. The agent's properties—such as palatability, viscosity, and the amount to be administered—along with the target tissue and desired rate of dissemination, determine which administration route is most suitable for your experiment.
Q2: How do you prepare a syringe to remove air bubbles before injection?
After drawing the agent into the barrel by pulling back the plunger, invert the syringe and gently flick the barrel so bubbles move toward the tip and escape. If possible, expel some excess agent to ensure all bubbles are completely removed, since air bubbles injected with the agent can disrupt tissues and harm the animal.
Q3: What is the proper restraint technique for performing a subcutaneous injection in mice?
Hold the mouse by the tail and allow it to grip the cage lid. Then firmly grasp the scruff, raising a tent of skin across the animal's shoulders. Insert the needle at the base of the tented skin and apply firm, consistent pressure to the plunger to dispense the agent, which will be slowly absorbed into the bloodstream.
Q4: Why is warming mice under a heat lamp important before performing intravenous injections?
Warming mice under a heat lamp for a few minutes causes the veins to swell, making needle insertion easier and more successful. This preparation step is essential for identifying and accessing the correct tail veins, which are the most common sites for intravenous injections in mice.
Q5: How can you confirm that an intravenous injection has been placed correctly in the tail vein?
If the needle is correctly placed in the vein, injection will cause the vein to change from dark blue to pale white in color as the agent moves through the vessel. This color change indicates successful delivery and proper needle positioning in the caudal vein, not the artery on the underside of the tail.
Q6: What are some practical applications of subcutaneous and intraperitoneal injections in mouse research?
Subcutaneous injections of antibiotic-resistant bacteria can cause lesions whose size indicates pathogen virulence, while footpad injections enable live imaging of immune cell recruitment. Intraperitoneal injections are absorbed at a rate similar to ingestion and can deliver several hundred microliters of agent for studying disease progression and host-pathogen interactions.
Q7: What alternative routes of agent administration exist besides injection in mice?
Intranasal inoculation delivers agents directly to the lungs to mimic and study respiratory disease progression. Gavage allows direct administration of agent to the stomach, ensuring precise and accurate dosing not achievable through food- or water-based treatment, making it useful when exact dosing is critical.
Chapters in this video
0:00
Overview
0:41
Planning the Administration of an Agent
1:28
Tools for Injection
2:53
Mouse Injection Methods
5:40
Applications
7:12
Summary
Videos from this collection: