Name: Budowa komór parowych używanych do wystawiania myszy na działanie alkoholu w czasie odpowiednika wszystkich trzech trymestrów rozwoju człowieka (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-13T15:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 27 s
Description: Poznaj budowę komór parowych alkoholu do badań nad wpływem alkoholu na rozwój płodowy u myszy. Ta metoda symuluje wszystkie trzy trymestry ciąży ludzkiej, umożliwiając kontrolowane poziomy ekspozycji.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wspierane przez granty National Institutes of Health R01-AA015614, R01-AA014973, T32-AA014127 i K12-GM088021. Autorzy dziękują Samancie L. Blomquist za pomoc techniczną oraz doktorom Kevinowi Caldwellowi i Donaldowi Partridge'owi za krytyczną ocenę manuskryptu i filmu.

Wszystkie procedury dotyczące zwierząt zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet Opieki i Wykorzystania Zwierząt (Institutional Animal Care and Use Committee) Uniwersytetu Nowego Meksyku – Centrum Nauk o Zdrowiu (University of New Mexico-Health Sciences Center).
1. Montaż komory parowej
<ol>
	<li>Dotnij arkusze poliwęglanowe piłą tarczową lub wyrzynarką do wymiarów podanych w filmie dla górnego, dolnego, przedniego i tylnego panelu, paneli bocznych oraz drzwi (Rysunek 1 i Tabela 1).</li>
	<li>Za pomocą piły tarczowej lub wyrzynarki wytnij otwór o wysokości 8 cali i szerokości 16 cali na środku przedniego panelu.</li>
	<li>Wymierz i zaznacz miejsca na otwory pod zawias taśmowy na arkuszu poliwęglanowym o wymiarach 18 cali na 10 cali, który stanie się drzwiami komory.</li>
	<li>W drzwiach wywierć otwory z pogłębieniem za pomocą wiertła 5/16 cala, a następnie wiertłem 3/16 cala wywierć otwory pod śruby. Upewnij się, że otwory z pogłębieniami dla łebków śrub znajdują się od wewnętrznej strony drzwi.</li>
	<li>Przygotuj arkusze poliwęglanowe do spawania.</li>
	<li>Zmontuj przedni, tylny i boczne panele z panelem dolnym, używając kleju Weld-on #16.</li>
	<li>Uszczelnij wszelkie szczeliny między panelami za pomocą kleju Weld-on #16.</li>
	<li>Przymocuj górny panel za pomocą kleju Weld-on #16.</li>
	<li>Użyj ścisków sztangowych lub ciężkich podręczników, aby utrzymać wszystkie elementy na miejscu do czasu utwardzenia spoin.</li>
	<li>Przymocuj kawałek poliwęglanu o wymiarach 1 cal na 12 cali do przedniego panelu, 1 cal poniżej otworu, w celu montażu zawiasu drzwi.</li>
	<li>Odczekaj co najmniej 24 h aż klej Weld-on utwardzi się.</li>
	<li>Dotnij 2 odcinki rurki PEX o długości 12 cali oraz 1 odcinek rurki PEX o długości 1 cala.</li>
	<li>Wiertłem 5/16 cala wywierć otwór w każdej z 12-calowych rurek PEX w odległości około 1 do 2 cali od jednego z końców.</li>
	<li>Przymocuj dwie 12-calowe rurki PEX do trójnika 3/8 cala, tak aby otwory znajdowały się w części oddalonej od złącza.</li>
	<li>Zamknij otwarte końce rurek PEX za pomocą zaślepek 3/8 cala.</li>
	<li>Przymocuj zawias taśmowy do przedniego panelu i drzwi, używając śrub maszynowych i nakrętek 4-40.</li>
	<li>Traktując drzwi jako szablon, zaznacz otwory niezbędne do montażu zawiasu taśmowego na 1-calowym dystansie na przednim panelu komory.</li>
	<li>Wiertłem 3/16 cala wywierć otwory w przednim panelu pod zawias taśmowy.</li>
	<li>Przymocuj drzwi i zawias taśmowy do przedniego panelu za pomocą śrub maszynowych i nakrętek 4-40.</li>
	<li>Zmontuj zaciski szybkomocujące zgodnie z instrukcją w filmie, stosując podkładkę i nakrętkę po obu stronach ramienia bocznego.</li>
	<li>Zaznacz i wywierć otwory 3/16 cala pod zaciski szybkomocujące w przednim panelu, a następnie przymocuj zaciski za pomocą śrub maszynowych i nakrętek 4-40.</li>
	<li>Dodaj gumowe uszczelki profilowe 3/8 cala do wewnętrznej strony drzwi.</li>
	<li>Wiertłem do pogłębiania 5/8 cala wywierć otwór w centrum górnego panelu na wlot.</li>
	<li>Wywierć otwór 1/2 cala w dolnej części środka tylnego panelu na wylot.</li>
	<li>Zmontuj port wylotowy, przesuwając gwintowaną część adapterów przelotowych 3/8 cala przez tylną ściankę komory parowej w otworze wylotowym. Przymocuj nakrętkę od wewnątrz komory, aby utrzymać element na miejscu.</li>
	<li>Zdejmij folie ochronne z arkuszy poliwęglanowych.</li>
	<li>Przymocuj 1-calowy odcinek rurki PEX do trójnika i wprowadź rurkę PEX przez otwór w górnej części komory od wewnątrz.</li>
	<li>Przymocuj kolanko 90° 3/8 cala do górnej części 1-calowej rurki PEX od zewnątrz. 
	UWAGA: Wywierć otwór 1/2 cala w drzwiach i włóż w niego septę uszczelniającą 1/2 cala.</li>
	<li>Powtórz kroki 1-22 dla komory kontrolnej z samym powietrzem.</li>
</ol>
2. Montaż stelaża i układu doprowadzania powietrza
<ol>
	<li>W przypadku umieszczania komór na wózku/stelażu wymienionym w liście materiałów, złożyć wózek zgodnie z instrukcją producenta.</li>
	<li>Używając zapasowych nakrętek i śrub, przymocować do stelaża kawałek poliwęglanu, który będzie służył do utrzymania regulatorów przepływu powietrza.</li>
	<li>W dowolnym miejscu na kawałku poliwęglanu zaznaczyć i wywiercić otwory o średnicy 3/4 cala dla regulatorów przepływu powietrza, a następnie przymocować regulatory za pomocą dołączonych nakrętek.</li>
	<li>Przymocować adaptery przelotowe o średnicy 3/8 cala do portów wlotowych i wylotowych regulatorów przepływu powietrza.</li>
	<li>Złożyć kolbę z etanolem, montując kamień napowietrzający, korek nr 8 oraz szybkozłączki przelotowe.</li>
	<li>Używając wężyka TYGON o średnicy 3/8 cala, połączyć regulatory przepływu z pompą powietrza i kolbą z etanolem, zgodnie z Rysunkiem 1.</li>
	<li>W przypadku komory z samym powietrzem, połączyć port wylotowy regulatora przepływu powietrza z wlotowym kolankiem 90° o średnicy 3/8 cala za pomocą wężyka TYGON o średnicy 3/8 cala, jak pokazano na Rysunku 1.</li>
</ol>
<img alt="Układ eksperymentalny do odparowywania etanolu z pompą, schemat przedstawiający przepływ powietrza przez komory." fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51839/51839fig1highres.jpg" width="500" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 1"> 
Rycina 1. Schematyczny przedstawienie konfiguracji komór parowych. Do pompy powietrza o niskim poziomie hałasu przymocowany jest łącznik w kształcie litery T. Jedna strona łącznika T jest bezpośrednio podłączona do regulatora przepływu powietrza dla komory zawierającej tylko powietrze. Druga strona jest ponownie rozdzielona i podłączona do dwóch różnych regulatorów przepływu, jednego dla powietrza i jednego dla etanolu. Komora z powietrzem jest podłączona bezpośrednio do regulatora, jak pokazano. W przypadku komory z oparami etanolu, jeden regulator przepływu jest podłączony do kamienia napowietrzającego zanurzonego w ciekłym etanolu w kolbie filtracyjnej. Boczne wyjście kolby filtracyjnej jest połączone z wyjściem regulatora powietrza, zgodnie ze wskazaniem. Połączone opary etanolu i powietrze są następnie kierowane do wlotu komory z oparami etanolu. Rurki wylotowe (niewidoczne na schemacie) są podłączone do wywiewni w pomieszczeniu.
3. Testowanie komór parowych i regulacja poziomów etanolu
<ol>
	<li>Do kolby ssawki wlej 600 ml etanolu o stężeniu 190 proof, włóż kamień napowietrzający i podłącz rurkę wlotową do bocznego wylotu kolby.</li>
	<li>Zamknij drzwi komory i włącz pompę powietrza.</li>
	<li>Ustaw regulatory przepływu powietrza tak, aby przez ciekły alkohol przepływało około połowy objętości powietrza, z którym jest on mieszany. Dostosuj przepływ samego powietrza do całkowitego przepływu mieszaniny alkoholu i powietrza w komorze etanolowej.</li>
	<li>Pozostaw komory do wyrównania stanu na co najmniej 30 min przed pomiarem stężenia etanolu w powietrzu.</li>
	<li>Zmierz stężenie etanolu w powietrzu, pobierając 5 ml powietrza za pomocą igły 18G i strzykawki 60 ml przez septum. Rozcieńcz tę próbkę powietrzem z otoczenia, odciągając tłok do objętości 60 ml (rozcieńczenie 1:12). Zmierz poziom etanolu w powietrzu za pomocą alkometru zgodnie z instrukcją producenta. Rozcieńczenie powietrza z komory jest konieczne, aby uzyskać poziom par alkoholu mieszczący się w zakresie detekcji alkometru. 
	UWAGA: W przypadku stosowania różnych poziomów ekspozycji na alkohol konieczne może być dostosowanie stopnia rozcieńczenia.</li>
	<li>W punkcie wyjścia dostosuj regulatory przepływu powietrza w razie potrzeby, aby uzyskać stężenie alkoholu w powietrzu wynoszące około 4,5-5 g/dl (g odparowanego alkoholu na dl powietrza).</li>
</ol>
4. Hodowla zwierząt
<ol>
	<li>Grupowo utrzymuj samice myszy C578BL/6 (w wieku 2-3 miesięcy) przez co najmniej 1 tydzień w celu synchronizacji cykli jajnikowych.</li>
	<li>Indywidualnie utrzymuj samce myszy C57BL/6 (w wieku 2-5 miesięcy) przez co najmniej 2 tygodnie.</li>
	<li>Po synchronizacji umieść jedną samicę z jednym samcem na 5 dni, aby umożliwić kopulację.</li>
	<li>Po kopulacji usuń samce, a samice przenieś do oddzielnych klatek i umieść w komorach.</li>
</ol>
5. Przed- i ponatalna ekspozycja na opary etanolu
<ol>
	<li>Narażaj ciężarne samice na opary etanolu przez 4 hr dziennie, zaczynając od godziny 10:00 podczas cyklu świetlnego (światło od 6:00 do 18:00), z wyjątkiem dnia narodzin, aby zapobiec śmierci młodych.</li>
	<li>Waż samice w dniach gestacji (G) 5, G13-G14 oraz G18-G20 w celu monitorowania ciąży; ściółkę zmieniano w dniach ważenia samic, aby zminimalizować stres związany z manipulacją.</li>
	<li>Codziennie wymieniaj pokarm w grupach narażonych na etanol, aby uniknąć spożycia granulatów, które mogłyby wchłonąć etanol.</li>
	<li>W dniu narodzin nie poddawaj zwierząt ekspozycji. Po narodzinach narażaj samice i młode przez 4 hr dziennie, zaczynając od godziny 10:00, od P1 do P12.</li>
	<li>Waż młode w dniach P2, P8, P12 i P25 oraz wymieniaj ściółkę w dniach P8 i P12, aby zminimalizować dodatkowe manipulacje.</li>
	<li>Bezpośrednio po ostatniej ekspozycji (P12) przenieś klatki do standardowego pomieszczenia dla zwierząt.</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

W tym miejscu szczegółowo opisujemy metody budowy komór do inhalacji parowej. Materiały i narzędzia potrzebne do budowy komór są łatwo dostępne u wielu komercyjnych dostawców, a etapy budowy komór są stosunkowo proste. System, który tutaj opisujemy, nie zawiera żadnych liniowych zaworów zwrotnych, które zapobiegałyby przepływowi wstecznemu i mieszaniu. Nie byliśmy w stanie zmierzyć żadnego wykrywalnego etanolu w komorach powietrznych, co sugeruje, że nie mamy żadnego mieszania ani cofania się etanolu do komór tylko powie...

Picie w czasie ciąży może zaszkodzić płodowi, powodując trwałe zmiany w wielu organach i układach, które znacznie obniżają jakość życia osób dotkniętych chorobą i ich rodzin. Szacuje się, że około 10-30% kobiet pije w czasie ciąży w USA, a 1-8% pije w napadach1,2. Zakres skutków wywołanych ekspozycją na etanol podczas rozwoju płodu jest zbiorczo znany jako spektrum płodowych zaburzeń alkoholowych (FASD). Ostatnie szacunki wskazują, że FASD są poważnym problemem zdrowia publicznego, którego częstość występowania w USA wynosi nawet 2-5%3. Cięższym objawem FASD jest alkoholowy zespół płodowy (FAS), który charakteryzuje się opóźnieniem wzrostu, nieprawidłowościami twarzoczaszki i deficytami neurobehawioralnymi, w tym trudnościami w uczeniu się. Częstość występowania FAS szacuje się na 0,2-0,7% w USA3. Obecnie dostępne metody leczenia FASD są tylko częściowo skuteczne, a rozwój skuteczniejszych metod leczenia jest ograniczony przez słabe zrozumienie komórkowych i molekularnych podstaw tego złożonego spektrum zaburzeń.
Dane z National Birth Defects Prevention Study (NBDPS) wskazują, że kobiety w ciąży najczęściej piją wpierwszym trymestrze ciąży, przed wykryciem ciąży, a następnie abstynencją w późniejszych etapach ciąży 2. NBDPS stwierdził również, że drugim najczęstszym wzorcem spożywania etanolu w czasie ciąży jest picie we wszystkich trymestrach ciąży2. Przyczyny tego obejmują brak świadomości na temat potencjalnie szkodliwych skutków ekspozycji płodu na etanol (nawet w niskich dawkach), ograniczony dostęp do opieki prenatalnej, pozytywną historię zaburzeń neuropsychiatrycznych oraz nadużywanie lub uzależnienie od etanolu4. Co ciekawe, NBDPS poinformował, że trzecim najczęstszym wzorcem konsumpcji była abstynencja w 1. i 2. trymestrze, a następnie konsumpcja w 3. trymestrze, kiedy często zakłada się, że picie jest bezpieczne, ponieważ organogeneza została w większości zakończona. Jednak3 trymestr jest okresem dużej podatności na uszkodzenia układu nerwowego wywołane etanolem, ponieważ jest to okres, w którym obwody neuronalne ulegają głębokiemu wyrafinowaniu2. NBDPS zidentyfikował również inne, rzadsze wzorce spożywania alkoholu, które występują w czasie ciąży, w tym spożycie w 1. i 2. trymestrze, a następnie abstynencję w 3. trymestrze2.
W próbie modelowania różnych wzorców konsumpcji etanolu obserwowanych u kobiet w ciąży, ustalono szereg rozwojowych paradygmatów ekspozycji na etanol przy użyciu różnych gatunków zwierząt, z których najczęściej występująszczury i myszy 5,6. Czas trwania ciąży u tych zwierząt trwa zwykle około 3 tygodni, co odpowiada 1. i 2. trymestrze ciąży u człowieka. W wielu badaniach na gryzoniach oceniano wpływ różnych dawek i wzorców narażenia na etanol w tym okresie. Przykłady metod często stosowanych do podawania etanolu ciężarnym myszom i szczurom obejmują podawanie w postaci diety płynnej7,8, dodawanie etanolu do wody pitnej9,10, dobrowolne picie roztworów słodzonych sacharyną11, zgłębnik żołądkowy12, wdychanie oparów13 oraz wstrzyknięcie podskórne lub dootrzewnowe14. Wyniki tych badań podsumowały kilka deficytów obserwowanych u ludzi z FASD, wykazując, że ekspozycja we wczesnych stadiach ciąży jest wystarczająca do uszkodzenia obwodów neuronalnych w mózgu (przegląd w 6,15).
Eksperymenty na gryzoniach wykazały również, że ekspozycja w okresie odpowiadającym3 trymestrze ciąży ludzkiej, co w przybliżeniu odpowiada pierwszym 1-2 tygodniom życia po urodzeniu u szczurów i myszy, może znacząco zaburzyć rozwój mózgu. Narażenie w tym okresie modelowano poprzez podawanie etanolu nowonarodzonym szczurom lub myszom. Etanol podawano tym zwierzętom różnymi metodami, w tym karmieniem przez gastrostomię u zwierząt hodowanych sztucznie wwieku 16-18 lat, intubacją żołądkową19, wstrzyknięciem podskórnym20 i wdychaniem oparów21,22. Badania te przekonująco wykazały, że gwałtowny wzrost mózgu jest okresem dużej podatności na rozwojowe skutki etanolu6.
Jak wspomniano powyżej, picie we wszystkich trymestrach ciąży jest powszechnym wzorcem konsumpcji etanolu u kobiet2. Jednak stosunkowo niewiele badań oceniało wpływ tego wzorca narażenia przy użyciu modeli zwierzęcych. W niektórych z tych badań wykorzystano duże zwierzęta, u których odpowiednik 3. trymestru występuje w okresie życia płodowego, a nie w okresie noworodkowym, jak w przypadku szczurów i myszy. Te modele zwierzęce obejmują naczelne23,24 i owce25-27. Jednak te modele zwierzęce nie były szeroko stosowane w badaniach nad FASD, częściowo ze względu na wysokie koszty i potrzebę specjalistycznych placówek opiekuńczych. Gryzonie są częściej używane do scharakteryzowania wpływu ekspozycji na etanol w całym trymestrze ciąży na rozwój płodu5. Świnki morskie okazały się szczególnie korzystne pod tym względem, biorąc pod uwagę ich rozległy rozwój prenatalny i podobieństwa w dojrzewaniu mózgu do ludzkiego28,29. W przypadku świnek morskich udało się scharakteryzować wpływ ekspozycji na etanol w życiu płodowym, który obejmuje równoważny okres rozwoju człowieka wtrzecim trymestrze ciąży. Stosunkowo wysoki koszt tych zwierząt, a także stosunkowo długi czas trwania ich ciąży (~67 dni), ograniczyły ich wykorzystanie do kilku laboratoriów zajmujących się badaniami nad FASD.
Ze względu na ich opłacalność i szerokie zastosowanie w badaniach biomedycznych, badacze wykorzystali szczury do modelowania ekspozycji na etanol we wszystkich trymestrzech ciąży. We wstępnych badaniach szczury były narażone w czasie ciąży na stosowanie diety płynnej, a następnie podawanie etanolu przez gastrostomię sztucznie hodowanym noworodkom (dni po urodzeniu (P) 1-10), co skutkowało szczytowym poziomem etanolu we krwi (BEC) u matek wynoszącym 0,08 g/dl, a u młodych 0,16 g/dl. Paradygmat ten spowodował długotrwałe zmiany w mielinizacji nerwu wzrokowego i zmniejszył liczbę włókien glejowych Bergmanna w móżdżkuo 30-32. Podobnie, Maier i współpracownicy, stosując sztuczne warunki chowu, podawali etanol ciężarnym samicom szczurów w sposób podobny do objadania się poprzez intubację żołądkową, a następnie podawanie noworodkom podczas części odpowiednika 3. trymestru (P4-9)33,34. Szczytowe BEC u matki i młodego wynosiły 0,3 g/dl zarówno w 20. dniu ciąży, jak i w P6. Ten paradygmat ekspozycji przez cały trymestr spowodował opóźnienie wzrostu, które było znacznie większe niż obserwowane u szczeniąt narażonych w wybranych okresach ciąży33. Ponadto szczury narażone na działanie etanolu w okresie odpowiadającym wszystkim trymestrzom ciąży wykazywały zmniejszenie liczby komórek Purkinjego móżdżku i ziarnistości, które było większe niż obserwowane u zwierząt narażonych w innych okresach34. W przypadku tego paradygmatu odnotowano również zmniejszenie liczby komórek hipokampa, ale efekty te wydają się być przede wszystkim konsekwencją ekspozycji w 3. trymestrze ciąży35. Metoda, która polega na podawaniu etanolu przez zgłębnik dożołądkowy zarówno ciężarnym szczurom, jak i nowonarodzonym myszom, została również wykorzystana do modelowania ekspozycji we wszystkich trymestrach36. Ta metoda, która dała BECs 0,13 g / dl u matek (17 dzień ciąży) i 0,24 g / dl u młodych P6, wywołała długotrwałe zmiany w poziomach neuroprzekaźników monoaminowych w hipokampie i podwzgórzu oraz zwiększoną ekspresję metylotransferaz DNA i metylowego białka wiążącego CpG 2 w hipokampie37,38. Stosując podobny paradygmat ekspozycji (BEC = 0,14-0,2 g/dl u matek i 0,2 g/dl u młodych), Gil-Mohapel i wsp.39 wykryło wzrost liczby nowych niedojrzałych neuronów w zakręcie zębatym dorosłych szczurów, które mogą stanowić mechanizm kompensacyjny w przypadku uszkodzenia neuronów wywołanego etanolem lub zmiany w dojrzewaniu neuronów urodzonych w wieku dorosłym. Badacze próbowali również modelować całe narażenie na etanol w trymestrze ciąży, wystawiając matki za pomocą diety płynnej lub picia wody zarówno w czasieciąży, jak i laktacji. Jednak użyteczność wystawiania młodych poprzez mleko matki jest ograniczona, ponieważ zwykle skutkuje to niskimi BEC szczeniąt (np. 0,002-0,05 g/dl; 41,42).
Myszy były również szeroko wykorzystywane do charakteryzowania skutków rozwojowej ekspozycji na etanol. Ten model zwierzęcy ma wiele zalet opisanych powyżej dla modelu zwierzęcego szczura, z dodatkową zaletą, że dostępnych jest wiele genetycznie zmodyfikowanych szczepów myszy5. Myszy zostały z powodzeniem wykorzystane do scharakteryzowania działania etanolu w1., 2. lub 3. trymestrze ciąży43,44. Jednak wpływ wszystkich trymestrów ekspozycji na te zwierzęta nie został dobrze scharakteryzowany, ponieważ technicznie trudniej jest wystawić myszy w czasie odpowiadającym wszystkim trymestrzom ciąży u ludzi. Na przykład sztuczny chów i zgłębnik żołądkowy, które były z powodzeniem stosowane u szczurów, wymagają bardziej specjalistycznych procedur u myszy45. Zgodnie z naszą najlepszą wiedzą, tylko w jednym badaniu do tej pory podjęto próbę zbadania wpływu całej ekspozycji na etanol w trymestrze ciąży przy użyciu myszy; Zwierzęta te były narażone na działanie roztworu etanolu w wodzie pitnej w czasie ciąży i laktacji46. U matek BEC wynosiły 0,07 g/dl, a BEC u młodych nie określono się, ale spodziewano się, że będą one stanowić ułamek tych u matek.
Tutaj opisujemy nowy model ekspozycji myszy na etanol przez cały trymestr, gdzie alkohol jest podawany zarówno ciężarnym matkom, jak i noworodkom za pomocą komór do inhalacji parowej. Komory parowe zostały zbudowane w oparciu o poprzedni projekt47. Zapewniamy szczegółową instrukcję, jak zbudować komory inhalacyjne i przeprowadzić procedury naświetlania. Dostarczamy również informacji na temat BEC, które można osiągnąć, oraz wpływu ekspozycji na przeżywalność i wzrost młodych.

<table><tbody><tr><td>Poliwęglan 1/4" przezroczysty 48" x 24"</td> <td>McMaster-Carr</td><td>8574K23</td><td>10</td></tr><tr><td>Uszczelka gumowa z pianki 3/8 "szer. x 7/32" wys.</td><td>McMaster-Carr</td><td>93085K67</td><td>10 ft</td></tr><tr><td>Weld-on #16</td><td>McMaster-Carr</td><td>7515A11</td><td>3</td></tr><tr><td>Zawias fortepianowy 12" długi</td><td>McMaster-Carr</td><td>1658A11</td><td>2 x 1 ft</td></tr><tr><td>Docisk dociskowy standard</td><td>McMaster-Carr</td><td>5126A26</td><td>8</td></tr><tr><td>Rurka PEX 1/2"</td> <td>McMaster-Carr</td><td>51275K88</td><td>10 ft</td></tr><tr><td>Łącznik trójnika kolczastego () Pkg 10</td><td>McMaster-Carr</td><td>5463K608</td><td>1</td></tr><tr><td>Złączka z zadziorem () Pkg 10</td><td>McMaster-Carr</td><td>5462K79</td><td>1</td></tr><tr><td>Kolanko kolczaste (czarne) Zestaw 10</td><td>McMaster-Carr</td><td>5463K596</td><td>1</td></tr><tr><td>Adaptery 3/8" Przewlekane, rura do rury gwintowanej</td><td>McMaster-Carr</td><td>5463K851</td><td>1</td></tr><tr><td>Phillips Śruba maszynowa 4-40</td><td>McMaster-Carr</td><td>91772A112</td><td>1</td></tr><tr><td>Śruba maszynowa nakrętka sześciokątna 4-40</td><td>McMaster-Carr</td><td>90480A005</td><td>1</td></tr><tr><td>Przepływomierz panelowy 2-20</td><td>McMaster-Carr</td><td>41945K76</td><td></td></tr><tr><td>3 KOLBA, FILTR 1 000 ml 6/OPAKOWANIE</td><td>VWR</td><td>89001-800</td><td>cyfra arabska</td></tr><tr><td>Precyzyjna uszczelka Septa</td><td>VWR</td><td>89084-490</td><td>1</td></tr><tr><td>VWR gumowy korek #8 1-otworowy</td><td>VWR</td><td>59581-367</td><td>1</td></tr><tr><td>DĘTKA TYGON R3603 3/8X9/16 50'VWR</td><td></td> <td>89068-556</td><td>1</td></tr><tr><td>DĘTKA TYGON R3603 1/4X11/16 50'VWR</td><td></td> <td>89068-502</td><td>1</td></tr><tr><td>Kamień napowietrzający P2120</td><td>VWR</td><td>32573-007</td><td>1</td></tr><tr><td>3/8" Trójniki Pk 20</td><td>VWR</td><td>46600-060</td><td>1</td></tr><tr><td>Rozłączniki VWR stożkowe Pk 10</td><td>VWR</td><td>46600-110</td><td>1</td></tr><tr><td>3/8 Złącze liniowe z zaworem</td> z <td>zaworem do węży Colder Products Company</td><td>HFCD17612</td><td>1</td></tr><tr><td>Pompa powietrza o średniej wydajności</td><td>LMI Producenci</td><td>DB60L</td><td>1</td></tr><tr><td>Regały druciane Nexelate 36"W X 24"D X 63"H</td><td>Globalna T9A990135 przemysłowa</td><td></td><td>1</td></tr><tr><td>Zestaw kółek trzpieniowych (4) 5-calowych kół poliuretanowych</td><td>Global industrial</td><td>T9A500591</td><td>1</td></tr></tbody></table>

budowa komór parowych używanych do wystawiania myszy na działanie alkoholu w czasie odpowiednika wszystkich trzech trymestrów rozwoju człowieka

Construction of Vapor Chambers Used to Expose Mice to Alcohol During the Equivalent of all Three Trimesters of Human Development

Narażenie na alkohol podczas rozwoju może skutkować konstelacją nieprawidłowości morfologicznych i behawioralnych, które są zbiorczo znane jako Spektrum Płodowych Zaburzeń Alkoholowych (FASD). Na najcięższym końcu spektrum znajduje się alkoholowy zespół płodowy (FAS), charakteryzujący się opóźnieniem wzrostu, dysmorfologią twarzoczaszki i deficytami neurobehawioralnymi. Badania na modelach zwierzęcych, w tym gryzoniach, wyjaśniły wiele mechanizmów molekularnych i komórkowych zaangażowanych w patofizjologię FASD. Podawanie etanolu ciężarnym gryzoniom wykorzystano do modelowania narażenia ludzi w pierwszym i drugim trymestrze ciąży. Spożycie etanolu w trzecim trymestrze ciąży u ludzi zostało modelowane na noworodkach gryzoni. Jednak niewiele badań na gryzoniach charakteryzowało wpływ ekspozycji na etanol we wszystkich trzech trymestrze ciąży u ludzi, co jest wzorcem narażenia, który jest powszechny u kobiet w ciąży. Tutaj pokazujemy, jak zbudować komory parowe z łatwo dostępnych materiałów, z których każda może pomieścić do sześciu standardowych klatek dla myszy. Opisujemy paradygmat komory parowej, który można wykorzystać do modelowania narażenia na etanol, przy minimalnym obchodzeniu się z nim, we wszystkich trzech trymestrzech. Nasze badania pokazują, że ciężarne matki rozwinęły znaczną tolerancję metaboliczną na etanol. Jednak nowonarodzone myszy nie rozwinęły tolerancji metabolicznej, a liczba płodów, masa płodu, masa łożyska, liczba młodych/miot, liczba martwych szczeniąt/miot i masa szczeniąt nie miały znaczącego wpływu na ekspozycję na etanol. Ważną zaletą tego paradygmatu jest jego możliwość zastosowania w badaniach na genetycznie zmodyfikowanych myszach. Ponadto paradygmat ten minimalizuje obchodzenie się ze zwierzętami, co jest głównym błędem w badaniach nad alkoholem płodowym.

Rycina 2A pokazuje, że zarówno ciężarne myszy, jak i noworodkowe potomstwo były narażone na stosunkowo stabilne stężenia oparów etanolu w komorach. Stężenia te mieściły się w zakresie 4-6 g/dl. Rycina 2B przedstawia osiągnięte stężenia etanolu we krwi (BEC) u ciężarnych myszy w funkcji czasu. BEC mierzono przy użyciu standardowego testu opartego na dehydrogenazie alkoholowej48. W dniu G5 BEC szybko wzrosły do ~60 mM 2 h po rozpoczęciu ekspozycji i osiągnęły szczyt pod koniec 4...

Pokazujemy budowę komór parowych z użyciem łatwo dostępnych materiałów, które jednocześnie mieszczą 6 klatek dla myszy. Dalej opisujemy ich zastosowanie w mysim modelu ekspozycji płodu na alkohol równoważnej we wszystkich 3 trymestrzech ciąży ludzkiej. Ten paradygmat eksponuje zwierzęta w czasie ciąży i w dniach poporodowych 1-12.

Budowa komór parowych używanych do wystawiania myszy na działanie alkoholu w czasie odpowiednika wszystkich trzech trymestrów rozwoju człowieka

Exposure to alcohol during development can result in a constellation of morphological and behavioral abnormalities that are collectively known as Fetal ...

W tym filmie pokażemy, jak konstruować i montować komory parowe na alkohol. Opiszemy również paradygmat inhalacji alkoholowej, który ujawnia maas w czasie odpowiadającym wszystkim trzem trymestrzom rozwoju człowieka. Komory można w dużym stopniu dostosować do pożądanych poziomów alkoholu we krwi lub paradygmatów ekspozycji.Nasza konstrukcja komory może pomieścić do sześciu standardowych klatek dla myszy, w których myszy mają dostęp do pożywienia i wody oraz lipidów. Ten paradygmat powoduje stosunkowo wysoki poziom alkoholu we krwi zarówno u ciężarnych myszy, jak i młodych bez użycia rozolu. Dowiadujemy się o tym z laboratorium Fernando Valenzueli na Uniwersytecie Nowego Meksyku.W tym filmie zademonstrujemy montaż komór parowych na etanol z poliwęglanu i opiszemy ich zastosowanie w mysim modelu ekspozycji płodu na alkohol we wszystkich trzech trymestrach. Każdy, kto posiada podstawowe umiejętności stolarskie, będzie w stanie skonstruować komory, a ich wymiary mogą być modyfikowane w zależności od indywidualnych potrzeb. Komory mogą być umieszczone w pomieszczeniu dla zwierząt przez cały czas ekspozycji i minimalizują stres związany z transportem i obchodzeniem się ze zwierzętami.Ze względu na różnice w etapach rozwoju, podawanie etanolu ciężarnym gryzoniom stosuje się do modelowania narażenia ludzi w pierwszym i drugim trymestrze ciąży, natomiast podawanie etanolu noworodkom wykorzystuje się do modelowania narażenia w trzecim trymestrze ciąży. Komory te są zaprojektowane tak, aby pomieścić wiele klatek myszy jednocześnie i wystawić ciężarne matki, a także noworodki trzymane z matką. Niektóre z zalet korzystania z tego paradygmatu ekspozycji na alkohol obejmują możliwość naśladowania wszystkich trzech trymestrów rozwoju, zmniejszenie stresu u ciężarnych matek i młodych, a także elastyczność w kontroli nad poziomem ekspozycji na etanol.Na pięciu pojedynczych kawałkach o wymiarach 24 na 48 cali o grubości jednej czwartej cala, przezroczyste arkusze poliwęglanu mierzą i zaznaczają podane wymiary dla góry, dołu, przodu, tyłu, boków i drzwi. Te wymiary zbudują jedną komorę o szerokości 32 cali, głębokości 22 cali i wysokości 14 cali. Komora tej wielkości odpowiednio pomieści sześć standardowych klatek dla myszy o wymiarach 11 i pół cala na siedem i pół cala na pięć i pół cala wysokości.Ważne jest, aby pamiętać, że zapewnia to tylko jedną komorę, a proces ten będzie musiał zostać powtórzony, aby uzyskać dwie identyczne komory, jedną komorę do ekspozycji na alkohol i jedną komorę do kontrolowanej ekspozycji tylko powietrzem. Arkusze poliwęglanu można ciąć za pomocą piły tarczowej wyposażonej w ostrze o 80 zębach lub wyrzynarki wyposażonej w ostrze z tworzywa sztucznego lub pleksi. Przytnij arkusze poliwęglanu do zmierzonych wymiarów, uważając, jak to możliwe, aby zapewnić proste cięcia.Zmniejszy to szczeliny podczas procesu montażu po wycięciu wszystkich elementów. Odmierz prostokąt o wymiarach osiem cali na 16 cali na środku panelu przedniego, aby utworzyć otwór na drzwi. Za pomocą trzyośmiocalowego wiertła wywierć otwór po wewnętrznej stronie każdego rogu.Otwory służą do włożenia ostrza przyrządu przez arkusz poliwęglanu i odcięcia otworu. W przypadku korzystania z piły tarczowej można wykonać cięcie wgłębne. Może być konieczne wykonanie kilku cięć wstecznych, aby oczyścić krawędzie w pobliżu rogów.Po wycięciu wszystkich krawędzi centralny element można zdjąć i pozostać z otworem w przednim panelu. Aby rozpocząć montaż drzwi, należy zaznaczyć otwory potrzebne do przymocowania zawiasu pianina do drzwi. Używając pięciu 16-calowych wierteł do wiercenia otworów w stożku w znakach, te otwory z stożkowym zaakceptują i powinny być wiercone tylko w połowie arkusza poliwęglanu.Za pomocą trzech wierteł 16-calowych wykonaj otwory w arkuszu, używając otworów do zlewu jako przewodnika przed montażem. Usuń około dwóch cali powłoki ochronnej arkuszy poliwęglanu, aby umożliwić spawanie elementów. Proces montażu może przebiegać szybko, dlatego pomocne może być ułożenie spodu, tyłu, przodu i boków przed zespawaniem elementów.Do spawania poliwęglanu należy użyć szybkowiążącej spoiny na cemencie rozpuszczalnikowym 16. Aby rozpocząć montaż, dodaj obszerny ścieg spawu na dolnej krawędzi elementu bocznego. Natychmiast zetrzyj wszelkie krople spawu ręcznikiem papierowym.Z pomocą przyłóż bok do dolnej części. Zamontuj resztę ścian na dnie komory. Pamiętaj, że przy podanych wymiarach boczne elementy zmieszczą się między przednim a tylnym panelem.Po zmontowaniu ścian wypełnij wszelkie szczeliny między złączami od wewnątrz za pomocą Weldon. Aby przymocować górną część komory, dodaj dużą ilość Weldona na szczycie każdej ściany. Umieść górny panel na ścianach i wyrównaj krawędzie.Użyj pręta clamps, aby utrzymać wszystko na miejscu podczas utwardzania spoiny. Alternatywnie, podczas procesu utwardzania można użyć ciężkich podręczników, aby zapewnić, że drzwi będą spoczywać równo na zewnątrz komory. Kawałek poliwęglanu o wymiarach jeden cal na 12 cali należy przyspawać do panelu przedniego jeden cal poniżej otworu.Zawias przymocuje się do tej przekładki i pozwoli drzwiom uszczelnić komorę. Aby skonstruować rurkę wlotową, wytnij dwa kawałki półcalowej rurki polietylenowej o długości 12 cali. Wytnij również jednocalowy kawałek półcalowej rurki polietylenowej, aby dostarczyć odparowany alkohol lub wiertło pneumatyczne.Pięć 16-calowych otworów około jednego cala od końca każdego z 12-calowych kawałków rurki polietylenowej. Zamontuj system dostarczania powietrza za pomocą dwóch trzech ośmiocalowych wtyczek i jednego trójnika o średnicy trzech ósmych cala. Upewnij się, że otwory wywiercone w rurki polietylenowej znajdują się najdalej od złącza T.Przymocuj zawias pianina do drzwi, upewniając się, że otwory w zlewie są skierowane do góry. Za pomocą czterech 40 maszynowych i nakrętek przymocuj zawias pianina do drzwi. Użyj drzwi jako prowadnicy i zaznacz otwory na zawias pianina na jednocalowej przekładce na panelu przednim za pomocą trzech 16-calowych wierteł.Wywierć otwory w panelu przednim, aby przymocować drzwi za pomocą czterech 40 maszynowych i nakrętek. Przymocuj drzwi i zawias fortepianu do panelu przedniego. Dokręć kluczem.Zamontuj przytrzym. Przełącz clamp, jak pokazano. Zaznacz otwory szybkomocowanego zacisku na panelu przednim, używając drzwi jako prowadnicy.Powtórz to dla dwóch szybkomocpeków wzdłuż góry i po jednym z każdej strony drzwi za pomocą trzech 16-calowych wierteł. Wywierć otwory na szybkozłączki clamps. Przymocuj szybkomocpy za pomocą czterech 40 maszynowych i nakrętek.Trzymając nakrętki po wewnętrznej stronie komory, dokręć kluczem, aby zapewnić szczelność komory. Wytnij i przymocuj gumową uszczelkę o szerokości trzech ósmych cala wzdłuż krawędzi drzwi. Gdy drzwi są zamknięte, żarówka utworzy hermetyczne uszczelnienie między drzwiami a przednim panelem komory.Zaznacz środek górnego panelu, aby utworzyć otwór wlotowy do komory za pomocą pięciocalowego ośmiocalowego wiertła do wytaczania. Wywierć otwór w porcie wlotowym. Utwórz port wylotowy, wiercąc półcalowy otwór w dolnej środkowej części tylnego panelu.Włóż trzyośmiocalowy adapter ścienny do portu wyjściowego i przymocuj od wewnątrz komory. Na tym etapie można zdjąć osłonę ochronną. Zamontuj system doprowadzania powietrza przez otwór w górnym panelu od zewnątrz.Włóż trzy ośmiocalowe kolanko 90 stopni Wywierć półcalowy otwór z przodu drzwi. Następnie włóż półcalową przegrodę uszczelniającą do otworu. Będzie on służył jako port do pomiaru oparów etanolu.W tym momencie cięcie i wiercenie jest zakończone, a komory można wyczyścić. Zmontuj stojak i umieść dwie komory i pub powietrzny na stojaku. Aby pomóc w organizacji systemu przepływu powietrza, przymocuj kawałek poliwęglanu do dolnej skorupy, który można wykorzystać do zamontowania regulatorów przepływu powietrza, oznaczenia i wywiercenia trzy-calowego uchwytu wiertła dla trzech regulatorów przepływu powietrza w kawałku złomu poliwęglanu.Przymocuj regulatory przepływu powietrza do poliwęglanu za pomocą dostarczonych nakrętek. Podłącz trzyośmiocalowy adapter ścienny do każdego portu regulatora komory parowej etanolu. Jeden regulator przepływu powietrza będzie kontrolował ilość powietrza przepuszczanego przez ciekły alkohol, a drugi będzie kontrolował ilość powietrza mieszanego z odparowanym alkoholem.Ten ostatni będzie kontrolował ilość powietrza w drugiej komorze tylko powietrznej. Zmontuj kolbę nasączoną alkoholem, jak pokazano. Za pomocą trzech ośmiocalowych rurek.Zmontuj system dostarczania powietrza, jak pokazano na schemacie, za pomocą złączy T lub Y, aby rozdzielić przewody. Pojedyncza pompa zapewnia wystarczający przepływ powietrza zarówno dla komór kontrolnych z samym powietrzem, jak i komór alkoholowych. Podłącz trzy ośmiocalowe rurki do portów wylotowych.Dodaj 600 milicali jednego 90-procentowego etanolu do kolby i podłącz do systemu. Aby sprawdzić poziom pary etanolu, użyj strzykawki i igły, aby pobrać pięć milicali powietrza przez septynę. Wyjąć igłę i rozcieńczyć próbkę powietrza od 1 do 12, pociągając strzykawkę do 60 ml.Z powietrzem w pomieszczeniu powoli przepychaj powietrze przez alkomat, aby zmierzyć opary etanolu. Poziomy odparowanego etanolu powinny być skorelowane z poziomem alkoholu we krwi zwierząt dla każdego indywidualnego układu. Po umieszczeniu komór w pomieszczeniu dla zwierząt należy pamiętać o wyprowadzeniu komór bezpośrednio do systemu wentylacji pomieszczenia.Dwu- do trzymiesięcznych samic myszy trzymano w grupach przez co najmniej tydzień, podczas gdy dwu- do pięciomiesięcznych samców trzymano indywidualnie przez dwa tygodnie. Samice myszy były łączone w pary z indywidualnie trzymanymi samcami przez pięć dni, aby umożliwić krycie. Po kryciu samice były usuwane z samców trzymanych pojedynczo w nowej klatce i umieszczane w komorach parowych.Zwierzęta były wystawione na działanie etanolu przez cztery godziny dziennie. Podczas cyklu świetlnego od G 5 do G 20. Samice były okresowo ważone w celu monitorowania ciąży.Zwierzęta nie były wystawiane w dniu urodzenia, aby uniknąć śmierci młodych. W pierwszym dniu po porodzie młode i matki wracają do komór i są wystawione aż do poporodu. Młode dnia 12 były okresowo ważone w celu monitorowania wzrostu.Aby rozpocząć miejsce inhalacji pary. Indywidualnie trzymano ciężarne matki zarówno w alkoholu, jak i w powietrzu. Komory zamykają i uszczelniają drzwi.Dodaj kolbę z ciekłym etanolem, podłącz do systemu i włącz pompę. Regulatory przepływu powietrza kontrolują ilość powietrza, które trafia do ciekłego etanolu i ile powietrza miesza się z parami etanolu. Stosunek pary etanolu do powietrza kontroluje końcowe poziomy par etanolu w komorach.Powietrze steruje tylko przepływem powietrza, jest ustawione na połączony przepływ powietrza zarówno etanolu, jak i powietrza. Po ekspozycji na opary etanolu żywność jest zmieniana w celu wyeliminowania karmy, która mogła wchłonąć odparowany etanol. Drzwi komory zarówno w komorze alkoholowej, jak i powietrznej są popękane, aby umożliwić wymianę powietrza z pomieszczeniem.W tym filmie pokazaliśmy, jak montować komory parowe etanolu i opisaliśmy paradygmat inhalacji parami alkoholu u myszy, który naraża zwierzęta we wszystkich trzech równoważnych ludzkich trymestrzech. Poziom oparów alkoholu można łatwo dostosować do modelu niskiego lub wysokiego poziomu alkoholu we krwi. Jedną z zalet tych komór jest to, że komory są wystarczająco duże, aby pomieścić wiele klatek w dowolnym momencie.Pozwala to na trzymanie zwierząt w komorach przez cały czas ekspozycji. Minimalizuje to stres powodowany u zwierzęcia podczas obsługi lub transportu. Co więcej, paradygmat ten można dostosować do dowolnego trymestru zainteresowania i/lub poziomu ekspozycji podczas budowy.Bardzo ważne jest, aby wszystkie cięcia były proste i kwadratowe, aby zapewnić szczelną komorę podczas spawania kawałków poliwęglanu. Ważne jest, aby poruszać się szybko i wydajnie, ponieważ spoiny szybko schną. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś być w stanie skonstruować własne komory do inhalacji parowej.

construction-vapor-chambers-used-to-expose-mice-to-alcohol-during

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Proponowane tutaj projekty eksperymentalne koncentrują się na badaniu wpływu ekspozycji na alkohol w apoptozie i zastosowaniu peptydu neurotroficznego podczas ciąży w mózgu płodu.  Opisano szczegółowy opis od hodowli do zbioru mózgów płodów.  Szczegółowo opisano również techniki oznaczania apoptozy.

Eksperymentalne metody testowania wpływu peptydu neurotroficznego, ADNF-9, przeciwko apoptozie wywołanej alkoholem podczas ciąży u myszy C57BL/6

Celem przedstawionego tutaj protokołu jest opisanie procedur wystawiania szczurów na umiarkowane poziomy alkoholu podczas prenatalnej ewolucji mózgu oraz ilościowe określenie wynikających z tego zmian w zachowaniach społecznych w wieku dorosłym.

Umiarkowana prenatalna ekspozycja na alkohol i kwantyfikacja zachowań społecznych u dorosłych szczurów

Klasyczne warunkowanie (ECC) zostało użyte do oceny zależnego od hipokampa uczenia się asocjacyjnego u dorosłych szczurów, którym podawano wysokie stężenie (11,9% v/v) alkoholu podczas wczesnego rozwoju mózgu noworodka. Ogólnie rzecz biorąc, procedury ECC są solidnymi narzędziami diagnostycznymi do wykrywania dysfunkcji mózgu w wielu środowiskach psychologicznych i biomedycznych.

Zastosowanie klasycznego warunkowania śladowego mrugnięcia okiem do oceny dysfunkcji hipokampa w szczurzym modelu zaburzeń ze spektrum alkoholowych płodów

Zaburzenie związane z używaniem alkoholu (AUD) jest poważnym problemem zdrowotnym w kraju i konieczne jest opracowanie bardziej skutecznych metod leczenia, aby zrównoważyć potrzeby tej populacji pacjentów. W tym celu poniższy protokół wykorzystuje dwa proste modele picia gryzoni do oceny przedklinicznej skuteczności ołowiowych związków przeciwalkoholowych.

Mysie modele picia w rozwoju farmakoterapii alkoholizmu: picie w ciemności i wybór dwóch butelek

Prezentowany tutaj jest protokół dla modelu 2BC/CIE uzależnienia od alkoholu u myszy do badania zaburzeń związanych z używaniem alkoholu.

Przewlekła przerywana ekspozycja na opary etanolu w połączeniu z wyborem dwóch butelek w celu modelowania zaburzeń związanych z używaniem alkoholu

Ten artykuł opisuje zestaw metod do mierzenia zdolności tłumienia picia napojów alkoholowych na uczucie pieczenia wywołanego przez wasabi.

Integracja oceny behawioralnej zwierząt i konwolucyjnej sieci neuronowej w celu zbadania interakcji smak-zapach między wasabi a alkoholem

Ten protokół opisuje standardowy paradygmat picia w domowej klatce z przerywanym dostępem do dwóch butelek do modelowania spożycia alkoholu u szczurów. Ponadto zawiera instrukcje krok po kroku, aby rozszerzyć standardowy protokół o system wykrywania lizawek DIY, który umożliwia analizę mikrostrukturalną zachowań związanych z piciem.

Modelowanie spożycia alkoholu u gryzoni przy użyciu dwóch butelek do wyboru w klatce domowej i analizy mikrostrukturalnej

Wkłady do waporyzacji destylatów z konopi indyjskich to urządzenia zasilane bateryjnie, które aerozolują ekstrakty zawierające wysokie stężenia kannabinoidów. Brak ustalonych modeli przedklinicznych dla tych produktów stwarza wyzwania w badaniu ich skutków fizjologicznych. Aby wypełnić tę lukę, opracowano standaryzowany przedkliniczny mysi model inhalacji dla waporyzowanych destylatów konopi.

Opracowanie przedklinicznego modelu inhalacji do testowania waporyzowanych destylatów z konopi indyjskich

Niniejszy film przedstawia model służący do badania rozwoju hiperplazji intimy po implantacji stentu z wykorzystaniem ludzkiego naczynia (IMA) w modelu szczura z niedoborem odporności.

Przeszczepianie i stentowanie ludzkiej tętnicy piersiowej wewnętrznej (IMA): model ludzki do badania rozwoju restenozy wewnątrzstentowej

Lezkość jest zaburzeniem rozwojowym kory wzrokowej, któremu często towarzyszy silna supresja jednego oka. Przedstawiamy nową technikę pomiaru i leczenia supresji międzypocznej u pacjentów z amblyopią, którą można wdrożyć przy użyciu gogli wirtualnej rzeczywistości lub przenośnego urządzenia iPod Touch.

Pomiar i leczenie supresji w amblyopii

Poznaj budowę komór parowych alkoholu do badań nad wpływem alkoholu na rozwój płodowy u myszy. Ta metoda symuluje wszystkie trzy trymestry ciąży ludzkiej, umożliwiając kontrolowane poziomy ekspozycji.

Budowa komór parowych używanych do wystawiania myszy na działanie alkoholu w czasie odpowiednika wszystkich trzech trymestrów rozwoju człowieka (Wideo) | JoVE Journal

Budowa komór parowych używanych do wystawiania myszy na działanie alkoholu w czasie odpowiednika wszystkich trzech trymestrów rozwoju człowieka

Przeglądaj więcej filmów