Techniki nieterminalnego pobierania próbek krwi u świnek morskich

Ogólnym celem tego filmu jest zilustrowanie metodologii czterech różnych technik pobierania próbek krwi u świnek morskich. Przedstawione procedury nie są ostateczne, chyba że objętość lub liczba próbek przekracza wytyczne dotyczące pobierania krwi. U zwierząt laboratoryjnych widzimy tutaj przyczynę żyły bocznej i żyły stępu.

Żyła krzyżowa biegnie grzbietowo i bocznie nad stawem stępu. Z każdej tylnej nogi należy pobrać maksymalnie trzy próbki, a z jednej próbki można pobrać około 100 do 400 mikrolitrów krwi. Niezbędny sprzęt to golarka elektryczna, kąpiel w ciepłej wodzie, czysty ręcznik, trochę waty, środek dezynfekujący, taki jak 70% alkohol, sterylne igły, 21 wąwozów lub mniejsze tubki do zbierania.

A jeśli celem jest pomiar stężenia glukozy we krwi i próbnik AccuCheck, pobieranie próbek krwi z żyły głowowowej lub stępu można wykonać u świnek morskich bez znieczulenia. Świnka morska jest krępowana przez przeszkolonego asystenta i należy zastosować technikę septyczną. Włosy pokrywające obszar stępu są golone golarką elektryczną, a tylna noga jest myta i ogrzewana w letniej kąpieli wodnej.

Oprócz oczyszczenia nogi sprawia to, że żyły rozszerzają się i stają się bardziej widoczne. Tylna noga jest wyprostowana, a zastój osiąga się poprzez delikatne uciskanie w dół tuż nad kolanem, dzięki czemu żyła staje się widoczna bezpośrednio przed pobraniem próbki. Ogolony obszar przeciera się środkiem dezynfekującym.

Żyłę nakłuwa się igłą lub lancetem, a krew można pobrać do rurki kapilarnej lub mikrotowej. Po pobraniu krwi zastój jest łagodzony i delikatnie uciskany kawałkiem waty Aby ułatwić hemostazę, można tutaj zobaczyć powierzchowne tętnice i żyły na grzbietowej powierzchni ucha świnki morskiej. Naczynia te mogą być używane do pobierania krwi, gdy wymagana jest tylko bardzo mała objętość.

Jednym z przykładów mogą być pomiary stężenia glukozy we krwi. Świnka morska jest delikatnie krępowana, pozostawiając ucho dostępne. Miejsce nakłucia musi być przygotowane septycznie przed pobraniem próbki, ale golenie nie jest konieczne.

Można lekko uciskać u podstawy ucha, aby żyły były bardziej widoczne. Żyłę nakłuwa się igłą lub lancetem, a krew zbiera się w rurce kapilarnej lub natychmiast analizuje pod kątem poziomu glukozy we krwi za pomocą systemu próbek AccuCheck. Po pobraniu krwi należy delikatnie uciskać miejsce nakłucia, aby ułatwić hemostazę.

To zdjęcie ilustruje pozycję świnki morskiej do pobierania krwi szyjnej i przyczynę żyły szyjnej. Zabieg wykonywany jest wyłącznie na znieczulonym zwierzęciu. Niezbędny sprzęt to leki do znieczulenia i golarka elektryczna wata, środek dezynfekujący, taki jak stetoskop 70% alkoholu, neutralna maść do oczu, strzykawki o pojemności jednego mililitra, sterylne igły, zwykle 23 lub 25.

Gorge Heparyna i EDTA mogą być używane do przepłukiwania strzykawek przed pobraniem próbki, aby zapobiec krzepnięciu. Istnieje wiele protokołów znieczulenia dla świnek morskich. W tym przypadku zwierzęta są znieczulane zrównoważoną narkozą mieszaniną solit tile sine i butif wstrzykiwane podskórnie w szyję.

Mieszaninę tę można rozcieńczyć solą fizjologiczną, aby dozowanie było dokładniejsze. Po wstrzyknięciu świnka morska powinna zostać ponownie umieszczona w klatce i pozostawiona w spokoju. Efekt otoczenia jest zwykle widoczny po około 10 minutach i utrzymuje się przez 30 do 40 minut przed pobraniem próbki.

Głębokość znieczulenia ocenia się poprzez sprawdzenie odruchów i podaje się neutralną maść do oczu w celu ochrony oczu. Do żyły szyjnej zbliża się świnka morska umieszczona na grzbiecie, a przednie nogi cofają się co kwartał. Obszar jest golony i przygotowywany aseptycznie, obojczyk jest wyczuwalny, a igła 23 wąwozów zamontowana na jednomililitrowej strzykawce jest wprowadzana około jednego centymetra w bok do linii środkowej, tylko czaszka grzbietowo do obojczyka.

Strzykawkę należy trzymać pod lekkim kątem do góry i przyśrodkowym. Gdy tylko skóra zostanie wniknięta, na strzykawkę wywierane jest lekkie podciśnienie, ponieważ szyja jest położona dość powierzchownie, a głębokość wprowadzenia wynosi około trzech do czterech milimetrów. Po pobraniu próbki zwolnij napięcie przednich nóg i delikatnie dociśnij stronę nakłucia.

Zwierzę może następnie zostać zwrócone do klatki rekonwalescencji, ale musi być monitorowane, aby zapewnić hemostazę i powrót do zdrowia po znieczuleniu. Kiedy świnka morska jest w pełni wyleczona ze znieczulenia, może powrócić do swojego kojca. Cechy anatomiczne świnki morskiej nieznacznie różnią się od cech anatomicznych innych modeli gryzoni, a modulacja technik pobierania próbek jest konieczna w celu uwzględnienia różnic specyficznych dla danego gatunku i uzyskania wystarczającej jakości próbek w jak najkrótszym czasie.

Zarówno długo-, jak i krótkoterminowo. Badania in vivo często wymagają wielokrotnego pobierania próbek krwi. Wybór techniki powinien być starannie przemyślany w celu zmniejszenia stresu i dyskomfortu oraz zapewnienia przetrwania, a także zgodności z wymogami dotyczącymi wielkości próbki i dostępności.

Wszystkie opisane metody zostały dokładnie przetestowane i z powodzeniem stosowane do wielokrotnego pobierania próbek krwi in vivo. W badaniach prowadzonych w naszej placówce badawczej świnka morska stanowi niszę w eksperymentalnych naukach o zwierzętach, ale dostępne są ograniczone dane dotyczące wykonywania podstawowych procedur. W tym artykule wideo przedstawiliśmy cztery różne podejścia do nieterminalnego pobierania próbek krwi in vivo u zwierząt przytomnych lub znieczulonych, pod warunkiem, że objętość i liczba próbek nie przekraczają wytycznych dotyczących pobierania krwi u zwierząt laboratoryjnych.

Procedury te są zalecane do stosowania u świnek morskich, gdy wymagane jest wielokrotne pobieranie krwi. W protokole badania.