Technika oczyszczania białek pozwalająca na wykrycie sumoilacji i ubikwitynacji pączkujących białek kinetochoru drożdży Ndc10 i Ndc80

Ogólnym celem tej procedury jest wykrycie symulacji i ubikwitynacji pączkujących białek kinetycznych rdzenia drożdży, NDC 10 i NDC 80. Osiąga się to poprzez pierwsze zebranie komórek drożdży, które wyrażają flagę syku oznaczoną SMT trzy i MT oznaczoną NDC 10 lub NDC 80, i wytworzenie ekstraktów białkowych z tych komórek. Drugim krokiem jest oczyszczenie trzech koniugatów SMT oznaczonych flagą syczącą w celu wykrycia sumowania lub immunowytrącenia białek rdzenia kinetycznego mik tagg w celu wykrycia ubikwitynacji.

Następnie sumowanie lub ubikwitynacja jest wykrywana za pomocą analizy western blot. Ostatecznie obecność wzorca drabinkowego dla NDC 10 i NDC 80 potwierdza, że białka te są symulowane i ubikwitynowane. Opisana metoda oczyszczania białek pozwala na wykrycie zarówno symulacji, jak i ubikwitynacji białek connico ND C 10 i NDC 80 w pączkujących drożdżach.