Name: Test wymuszonego pływania jako model zachowania depresyjnego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 42 s
Description: Poznaj test wymuszonego pływania jako model zachowań depresyjnych u gryzoni. Ta metoda pozwala ocenić skuteczność leków przeciwdepresyjnych poprzez analizę bezruchu w wodzie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było wspierane przez Izraelską Fundację Naukową (grant nr 738/11), przez Narodowy Instytut Psychobiologii w Izraelu (NIPI-7-2011-12) oraz przez Fundację Uniwersytetu Otwartego

UWAGA: Wszystkie protokoły eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Międzynarodowy Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt w Izraelu. Dołożono wszelkich starań, aby zminimalizować liczbę wykorzystywanych zwierząt i ich cierpienie.
1. Przygotowanie do testu wymuszonego pływania
<ol>
	<li>Użyj dwóch sąsiadujących ze sobą pomieszczeń. Użyj jednego pomieszczenia jako "poczekalni" do przetrzymywania zwierząt przed testami behawioralnymi, a drugiego do przeprowadzenia procedury.</li>
	<li>Przygotuj przezroczyste cylindryczne szklane pojemniki (jedynym ograniczeniem co do liczby pojemników jest dostępna przestrzeń) o wysokości 50 cm i średnicy 20 cm. 
	UWAGA: Możliwe jest prowadzenie kilku zwierząt jednocześnie w tym samym pomieszczeniu. Jeśli tak, należy oddzielić pojemniki od siebie za pomocą ciemnego ekranu, aby zwierzęta nie widziały się nawzajem podczas zabiegu.</li>
	<li>Przygotuj kamerę (kamery) wideo przed kontenerami, tak aby każda kamera postrzegała jeden lub więcej pojemników w sposób, który pozwoli na wyraźną obserwację zachowania zwierząt w późniejszym czasie podczas oglądania materiału filmowego.</li>
	<li>Przygotuj czyste klatki do suszenia, lampy grzewcze i poduszki grzewcze dla zwierząt, które zakończyły procedurę, aby uniknąć hipotermii. Upewnij się, że spód klatki jest pokryty bibułą i zmień ją, gdy się zamoczy. Nie umieszczaj klatek w pomieszczeniu testowym. 
	UWAGA: Upewnij się, że nie mieszasz zwierząt z różnych klatek domowych, gdy przebywają w tymczasowych klatkach do suszenia.</li>
</ol>
2. Postępowanie ze zwierzętami przed badaniem
<ol>
	<li>Zwierzęta trzymane w pomieszczeniu z 12-godzinnym cyklem światła/ciemności.</li>
	<li>W dniach, w których odbywa się procedura doświadczalna, należy zapewnić zwierzętom swobodny dostęp do jedzenia i wody, z wyjątkiem określonego czasu spędzonego w sali zabiegowej.</li>
	<li>W przypadku wykorzystywania szczurów należy obchodzić się ze zwierzętami przez około 2 minuty dziennie, 5 dni przed rozpoczęciem procedury doświadczalnej.</li>
</ol>
3. Procedura treningowa
Procedura jest przeprowadzana inaczej dla szczurów i myszy.
UWAGA: Zarówno dla myszy, jak i szczurów, obserwuj zwierzęta podczas ich pobytu w wodzie przez cały czas. W przypadku, gdy zwierzę wydaje się być w poważnym niebezpieczeństwie (np. jest bardzo zmęczone, nie może utrzymać się na wodzie), należy usunąć zwierzę z wody i wykluczyć je z eksperymentu.
<ol>
	<li>Dla myszy — Jest to jedna sesja trwająca 6 minut, podzielona na test wstępny (pierwsze 2 minuty) i test (ostatnie 4 minuty).
	<ol>
		<li>Aby myszy mogły zaaklimatyzować się w środowisku testowym, należy przetransportować zwierzęta w ich domowych klatkach co najmniej 30 minut przed testami behawioralnymi do poczekalni.</li>
		<li>Napełnij butle wodą z kranu o temperaturze 25 °C i dostosuj głębokość wody do wielkości myszy, tak aby nie mogła dotykać dna pojemnika tylnymi nogami.</li>
		<li>Oznacz cylinder numerem zwierzęcia w celu późniejszej identyfikacji zwierzęcia podczas oglądania materiału filmowego.</li>
		<li>Włącz kamery/kamery wideo, a następnie umieść każdą mysz w pojemniku cylindrycznym wypełnionym wodą na 6 minut.</li>
		<li>Po upływie 6 minut wyłącz kamerę/aparaty, wyjmij mysz z pojemnika i umieść ją w przejściowej klatce do suszenia z lampą grzewczą nad nią i poduszką grzewczą pod nią. Myszy powinny być ściśle i stale monitorowane podczas rekonwalescencji w tej klatce. W tym celu możliwe jest umieszczenie termometru na poziomie myszy, aby upewnić się, że temperatura w klatce nie przekracza 37 °C. Umieść również klatkę tak, aby nie cała spadła pod lampę lub na podkładkę; Dzięki temu mysz może w razie potrzeby przenieść się w chłodniejsze miejsce.</li>
		<li>Zmieniaj wodę po każdej sesji, aby uniknąć wpływu na następną mysz.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Dla szczurów - Są 2 sesje w odstępie 24 godzin. Pierwsza sesja to etap wstępny (15 min), a druga sesja to etap testowy (5 minut).
	<ol>
		<li>Aby szczury mogły zaaklimatyzować się w środowisku testowym, należy przetransportować zwierzęta w ich domowych klatkach co najmniej 30 minut przed testami behawioralnymi do poczekalni.</li>
		<li>Napełnić butle wodą z kranu o temperaturze 23 ± 1 °C i dostosować głębokość wody do wielkości szczura, tak aby nie mógł dotknąć dna pojemnika tylnymi nogami.</li>
		<li>Oznacz cylinder numerem zwierzęcia w celu późniejszej identyfikacji zwierzęcia podczas oglądania materiału filmowego.</li>
		<li>Umieść każdego szczura w wypełnionym wodą pojemniku butli na 15 minut.</li>
		<li>Po upływie 15 minut wyjmij szczura z pojemnika i umieść go w tymczasowej klatce do suszenia, z lampą grzewczą nad nią i poduszką grzewczą pod nią. Szczur powinien być ściśle i stale monitorowany podczas rekonwalescencji w tej klatce. W tym celu możliwe jest umieszczenie termometru na poziomie szczura, aby upewnić się, że temperatura w klatce nie przekracza 37 °C. Umieść również klatkę tak, aby nie cała spadła pod lampę lub na podkładkę; Dzięki temu szczur może w razie potrzeby przenieść się w chłodniejsze miejsce.</li>
		<li>Zmieniaj wodę po każdej sesji, aby uniknąć wpływu na następnego szczura. 
		UWAGA: To jest koniec etapu pretestu.</li>
		<li>Dwadzieścia cztery godziny później, aby szczury mogły zaaklimatyzować się w środowisku testowym, przetransportuj zwierzęta w ich domowych klatkach co najmniej 30 minut przed testami behawioralnymi do poczekalni.</li>
		<li>Napełnić butle wodą z kranu o temperaturze 23 ± 1 °C i dostosować głębokość wody do wielkości szczura, tak aby nie mógł dotknąć dna pojemnika tylnymi nogami.</li>
		<li>Oznacz cylinder numerem zwierzęcia w celu późniejszej identyfikacji zwierzęcia podczas oglądania materiału filmowego.</li>
		<li>Włącz kamerę wideo, a następnie umieść szczura w wypełnionym wodą pojemniku na butlę na 5 minut. Upewnij się, że każdy szczur jest badany w tym samym pojemniku i miejscu w pomieszczeniu, co poprzedniego dnia.</li>
		<li>Po upływie 5 minut wyłącz kamerę/kamery, wyjmij szczura z pojemnika i umieść go w tymczasowej klatce suszenia z lampą grzewczą nad nią i poduszką grzewczą pod nią. Szczur powinien być ściśle i stale monitorowany podczas rekonwalescencji w tej klatce. W tym celu możliwe jest umieszczenie termometru na poziomie szczura, aby upewnić się, że temperatura w klatce nie przekracza 37 °C. Umieść również klatkę tak, aby nie cała spadła pod lampę lub na podkładkę; Dzięki temu szczur może w razie potrzeby przenieść się w chłodniejsze miejsce.</li>
		<li>Zmieniaj wodę po każdej sesji, aby uniknąć wpływu na następnego szczura. 
		UWAGA: To jest koniec etapu testowego.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Kodowanie behawioralne
Dla myszy, zakoduj ostatnie 4 minuty zdefiniowane jako etap testu. W przypadku szczurów należy oznaczyć 5 minut etapu badania.
<ol>
	<li>Oznacz czas spędzony jako "Nieruchomy", jeśli mysz unosi się w powietrzu bez żadnego ruchu, z wyjątkiem tych, które są niezbędne do utrzymania nosa nad wodą.</li>
	<li>Zakoduj czas spędzony jako "Walka/wspinaczka", jeśli obserwuje się szybkie ruchy kończyn przednich, tak że przednie łapy rozbijają się o powierzchnię wody.</li>
	<li>Oznacz czas spędzony jako "Pływanie", jeśli zaobserwowany jest ruch kończyn przednich lub tylnych w sposób wiosłowania. 
	UWAGA: Możliwe jest użycie alternatywnego sposobu kodowania tych zachowań, w tym metody próbkowania w czasie. Oceń pływanie, zmaganie się lub unieruchomienie jako częstotliwość epizodów w odstępach 5 sekund podczas sesji testowej.</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

FST służy do monitorowania zachowań podobnych do depresyjnych i opiera się na założeniu, że bezruch odzwierciedla miarę rozpaczy behawioralnej 3. Główne zalety tej procedury polegają na jej stosunkowo łatwej obsłudze i szybkich wynikach. Co więcej, jego wrażliwość na szeroką gamę leków przeciwdepresyjnych, która sprawia, że jest to odpowiedni test przesiewowy, jest jedną z najważniejszych cech prowadzących do jego wysokiej trafności predykcyjnej 29. Co ważne, test ten może również rozróżniać leki, k...

Depresja jest zagrażającym życiu zaburzeniem psychicznym i poważnym problemem zdrowia publicznego na całym świecie, z częstością występowania 5% i częstością występowania w ciągu całego życia 15-20%. Co więcej, szacuje się, że do 2020 r. depresja znajdzie się w pierwszej trójce czynników przyczyniających się do obciążenia chorobą1,2. Depresja wiąże się z niepełnosprawnością, obniżoną jakością życia, zwiększonymi kosztami zdrowotnymi i jest uważana za główny czynnik ryzyka wielu chorób, w tym zaburzeń sercowo-naczyniowych, metabolicznych i neuropsychiatrycznych3,4. Obecne terapie farmakoterapeutyczne mają ograniczoną skuteczność i wiążą się z wieloma szkodliwymi skutkami ubocznymi5,6. Dlatego kluczowe znaczenie ma lepsze zrozumienie patofizjologii tego zaburzenia wraz z opracowaniem innowacyjnych i ulepszonych metod leczenia. W związku z tym modele zwierzęce są niezbędne do postępu badań w tej dziedzinie.
Istnieje wiele modeli używanych do badania tego zaburzenia (np. test preferencji sacharozy, test zawieszenia ogona), z testem wymuszonego pływania (FST, znanym również jako test Porsolta od nazwiska twórcy tego modelu 7,8) będącym jednym z najczęściej używanych testów 7,9-12.
Podczas FST zwierzę jest umieszczane w pojemniku wypełnionym wodą, z którego nie może uciec. Zwierzę najpierw będzie próbowało uciec, ale w końcu będzie wykazywać bezruch (tj. unoszenie się przy braku jakiegokolwiek ruchu, z wyjątkiem tych, które są niezbędne do utrzymania nosa nad wodą). FST jest bardzo popularnym modelem w badaniach na zwierzętach z wielu powodów. Po pierwsze, wiąże się to z narażeniem zwierząt na stres, który, jak wykazano, odgrywa rolę w tendencji do poważnej depresji 12-14. Co więcej, depresja jest często postrzegana jako brak zdolności do radzenia sobie ze stresem 15-17. Po drugie, wykazano, że leczenie farmakologiczne lekami przeciwdepresyjnymi przed badaniem zmniejsza unieruchomienie w FST 18-23. Dlatego jest często stosowany jako test przesiewowy dla nowych związków o potencjalnych właściwościach przeciwdepresyjnych 15-17,24. Ponadto wykazano, że FST dzieli niektóre czynniki, na które wpływa lub zmienia się depresja u ludzi, takie jak zmiany w spożyciu żywności, zaburzenia snu i anhedonia wywołana odstawieniem leków 15-17,24. Jest to również powód, dla którego ten test jest czasami używany do oceny zachowań podobnych do depresji u zmutowanych myszy, ze wzrostem lub spadkiem podstawowej bezruchu (w porównaniu z myszami "typu dzikiego") 25,26.

<table><tbody><tr><td>Komputer</td><td>Dell</td><td></td><td>Intel&#174; Rdzeń&#153; procesor i3-2120 @ 3,30 GHz, 4 GB pamięci RAM</td></tr><tr><td>Kamera</td><td>VIDO</td><td>AU-CB422</td><td>B/W CCD&nbsp; http://www.vido-europe.com/products_detail.asp?id=33&pcategory=2</td></tr><tr><td>Oprogramowanie do kodowania</td><td>Biobserve</td><td></td><td>FST Analysis http://www.biobserve.com/products/fst/index.html</td></tr><tr><td>Lampa grzewcza</td><td>Ikea</td><td>AA-19025-3</td><td>ESPRESSIVIO 400.504.46&nbsp;- 20W G4 Żarówka&nbsp; http://www.ikea.com/ms/en_US/customer_service/assembly/E/E00050467.pdf</td></tr><tr><td>Ogrzewanie&nbsp; poduszka</td><td>Sachs</td><td>EF-188B</td><td>38*38cm Ogrzewanie&nbsp; poduszka http://www.sachs.co.il/eng/lego_tree.php?instance_id=21&actions=show&id= Okręg wyborczy 604</td></tr></tbody></table> TGL

test wymuszonego pływania jako model zachowania depresyjnego

The Forced Swim Test as a Model of Depressive-like Behavior

Celem niniejszego protokołu jest opisanie testu wymuszonego pływania (FST), który jest jednym z najczęściej używanych testów do badania zachowań depresyjnych u gryzoni. FST opiera się na założeniu, że umieszczając zwierzę w pojemniku wypełnionym wodą, najpierw podejmie ono próby ucieczki, ale ostatecznie wykaże bezruch, który można uznać za odzwierciedlenie miary behawioralnej rozpaczy. Test ten jest szeroko stosowany, ponieważ wiąże się z narażeniem zwierząt na stres, który, jak wykazano, odgrywa rolę w tendencji do poważnej depresji. Ponadto wykazano, że FST dzieli niektóre czynniki, na które wpływa lub zmienia się depresja u ludzi, w tym zmiany w spożyciu żywności, zaburzenia snu i anhedonia wywołana odstawieniem leków. Głównymi zaletami tej procedury jest to, że jest stosunkowo łatwa do wykonania oraz że jej wyniki są łatwo i szybko analizowane. Co więcej, jego wrażliwość na szeroką gamę leków przeciwdepresyjnych, która sprawia, że jest to odpowiedni test przesiewowy, jest jedną z najważniejszych cech prowadzących do jego wysokiej trafności predykcyjnej. Pomimo swojej atrakcyjności model ten ma szereg wad. Po pierwsze, kwestia przewlekłego augmentacji jest problematyczna w tym teście, ponieważ w prawdziwym życiu pacjenci muszą być leczeni przez co najmniej kilka tygodni, zanim doświadczą jakiejkolwiek ulgi w objawach. Wreszcie, ze względu na awersyjność FST, ważne jest, aby wziąć pod uwagę możliwy wpływ, jaki może on mieć na strukturę/funkcję mózgu, jeśli analizy mózgu mają być przeprowadzane zgodnie z tą procedurą.

Poniższe wyniki opierają się na nieopublikowanych danych z naszego laboratorium. W tym eksperymencie dorosłe samice myszy szczepu ICR badano po 3 tygodniach leczenia selektywnym inhibitorem zwrotnego wychwytu serotoniny (SSRI) escitalopramem lub nowym ziołowym preparatem przeciwdepresyjnym i przeciwlękowym (NHT) (dodatkowe informacje na temat leczenia ziołowego znajdują się w 12,27,28). Jednoczynnikowa analiza wariancji (ANOVA) wykazała, że leczenie zredukowało zachowania depresyjne w teście wymuszonego pływan...

Ten protokół opisuje test wymuszonego pływania, który jest używany do badania zachowań depresyjnych u gryzoni. Procedura ta polega na umieszczeniu zwierzęcia w pojemniku wypełnionym wodą, co ostatecznie doprowadzi do wykazania zachowania bezruchu, które uważa się za odzwierciedlenie rozpaczy behawioralnej.

Test wymuszonego pływania jako model zachowania depresyjnego

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like ...

Ogólnym celem niniejszej procedury jest wywołanie zachowań przypominających depresję u gryzoni oraz przetestowanie działania środków terapeutycznych w badaniach nad depresją. W tym celu najpierw przygotowuje się przezroczyste, cylindryczne szklane pojemniki wypełnione wodą do poziomu, przy którym mysz nie może dotknąć dna tylnymi łapami. W drugim kroku każde zwierzę umieszcza się w cylindrycznym pojemniku z wodą i rejestruje zachowanie myszy przez łącznie sześć minut.Ostatnim krokiem jest zakodowanie czasu spędzonego na aktywnej walce i pływaniu przy użyciu oprogramowania do analizy testu wymuszonego pływania. W końcowym rozrachunku test wymuszonego pływania służy do wykazania, że po umieszczeniu zwierzęcia w pojemniku wypełnionym wodą, ostatecznie wykaże ono bezruch. Może to być miarą behawioralnej rozpaczy.Leczenie lekami przeciwdepresyjnymi i przeciwlękowymi może zmienić te zachowania. Główną zaletą tej techniki w porównaniu z istniejącymi metodami, takimi jak test preferencji sacharozy, jest to, że jest ona stosunkowo łatwa w wykonaniu, a wyniki można analizować w prosty i szybki sposób. Powielenie tej techniki może znaleźć zastosowanie w terapii lub diagnostyce depresji.Jego w

the-forced-swim-test-as-a-model-of-depressive-like-behavior

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Test pływania pod przymusem jako model zachowania przypominającego depresję

Test wymuszonego pływania jest uznaną metodą eksperymentalną służącą do oceny potencjalnej skuteczności leków przeciwdepresyjnych u gryzoni. Zwierzęta doświadczalne umieszcza się w zbiorniku z wodą, a następnie kwantyfikuje zachowania ruchowe związane z próbą ucieczki. Opisano powszechnie stosowane procedury dla wersji tego testu wykonywanej na myszach.

Test wymuszonego pływania u myszy

Test zawieszenia za ogon jest walidowaną procedurą eksperymentalną służącą do oceny skuteczności przeciwdepresyjnej leków u myszy. Myszy są zawieszane za ogony na sześć minut, a następnie ocenia się zachowania związane z próbą ucieczki. Opisujemy procedury stosowane podczas przeprowadzania testu zawieszenia za ogon.

Test zawieszenia ogona

Ten film pokazuje metodę wywoływania przewlekłego stresu u myszy poprzez wielokrotne unieruchomienie, prowadzące do uwalniania kortykosteronu i zmniejszonej aktywności receptora glutaminianu w neuronach, co skutkuje zachowaniem podobnym do depresji.

Wywoływanie zachowań podobnych do depresji u myszy poprzez stres związany z unieruchomieniem

Ten protokół opisuje nowy model, dzięki któremu zdrowe szczury mogą nabawić się depresji w danym okresie czasu poprzez zarażenie przez kontakt z chronicznymi nieprzewidywalnymi szczurami zestresowanymi (CUS).

Nowa metoda wywoływania zachowań podobnych do depresji u szczurów

Tutaj prezentujemy protokół wprowadzający szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej (MMPM).

Szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej

Kompleksowy test behawioralny obejmujący umiejętności motoryczne, nastrój - w tym interakcje społeczne, depresję i lęk - oraz funkcje poznawcze jest przeznaczony do wielokrotnej oceny zmian behawioralnych związanych z neurodegeneracją u myszy.

Bateria testów behawioralnych do wielokrotnej oceny zdolności motorycznych, nastroju i funkcji poznawczych u myszy

Ten artykuł dostarcza uproszczony i ustandaryzowany protokół indukcji zachowań depresyjnych u myszy chronicznie unieruchomionych za pomocą ogranicznika. Ponadto wyjaśniono zachowanie i techniki fizjologiczne w celu weryfikacji indukcji depresji.

Protokół przewlekłego stresu unieruchamiającego w celu wywołania zachowań podobnych do depresji u myszy

Mysi model chronicznej rozpaczy (CDM) depresji składa się z powtarzających się wymuszonych sesji pływania i kolejnej opóźnionej fazy pływania jako odczytu. Stanowi odpowiedni model do indukcji przewlekłego stanu podobnego do depresji stabilnego przez co najmniej 4 tygodnie, z możliwością zmiany w celu oceny podprzewlekłych i ostrych interwencji terapeutycznych.

Zwierzęce modele depresji - model chronicznej rozpaczy (CDM)

W artykule przedstawiono protokół indukcji unikalnego szczurzego modelu choroby afektywnej dwubiegunowej, który obejmuje zarówno zachowania podobne do manii, jak i depresyjne.

Opracowanie modelu szczura dla choroby afektywnej dwubiegunowej

Protokół ten opisuje ustanowienie modelu depresji po udarze (PSD) na szczurze poprzez połączenie okluzji tętnicy środkowej (MCAO) z przewlekłym, łagodnym stresem, ograniczaniem zachowań i izolacją oraz ocenę terapeutycznych efektów recepty Yi-nao-jie-yu (YNJYP) za pomocą testów behawioralnych.

Wpływ recepty Yi-nao-jie-yu na depresję po udarze u szczurów stosujących okluzję środkowej tętnicy mózgowej w połączeniu z ograniczeniem behawioralnym

Ten protokół zapewnia ramy do oceny zmian zachowania wywołanych stresem u Drosophila melanogaster. Łączenie uzupełniających się testów umożliwia ilościową ocenę aktywności, eksploracji i podejmowania decyzji dla poszczególnych much. Podejście to jest elastyczne i może być dostosowane do szerokiej gamy badań dotyczących biologii stresu, metabolizmu i funkcji neurobehawioralnych.

Multimodalowe fenotypowanie behawioralne stanów przypominających depresję indukowanych stresem u Drosophila melanogaster

Poznaj test wymuszonego pływania jako model zachowań depresyjnych u gryzoni. Ta metoda pozwala ocenić skuteczność leków przeciwdepresyjnych poprzez analizę bezruchu w wodzie.

Test wymuszonego pływania jako model zachowania depresyjnego

Przeglądaj więcej filmów